日度归档：2025年12月30日

GE whatman Autovial 12非针头式滤器PTFE膜0.45umAV125UORG

发表于由

GE whatman Autovial 12非针头式滤器PTFE膜0.45um

简要描述：

GE whatman Autovial 12非针头式滤器PTFE膜0.45um,Autovial 12非针头式滤器，含玻璃纤维预过滤层，0.45μm，PTFE过滤介质.

GE whatman Autovial 12非针头式滤器PTFE膜0.45um

Autovial 12非针头式滤器，含玻璃纤维预过滤层，0.45μm，PTFE过滤介质.

  •     一体化装置省时，不用安装，方便操作
  •     可选过滤介质，应用于不同样品
  •     有害样品的理想选择，一体化设计避免了滤器突然脱离的风险
  •     内置排气设计，zui大化样品回收
  •     可选无菌包装以维持样品完整性
  •     预滤器设计可用于高难度过滤样品（Autovial 5中不含预过滤层，Autovial 12可选预滤器）
  •     可选玻璃纤维或聚丙烯预滤器

GE whatman Autovial 12非针头式滤器PTFE膜0.45um详细介绍：

Autovial 非针头式滤器是一种预装的滤器，用于除去样品中的微粒。它采用简单、一次性的装置代替了注射器和过滤器的组合。

Autovial滤器由2部分组成：一个逐层过滤筒和一个活塞。成熟设计的完整滤器、内置空气活塞和支撑物以保护嵌壁式Slip-luer头。它们的体积容量分别为5 ml和12 ml。

Autovial可根据应用选择滤膜。在实际应用中，样品可以被注入5 ml或12 ml的过滤筒，推动活塞直到过滤筒底部，在活塞和样品之间有一个空气层。将Autovial的头部置于自动 加样器小瓶或容器口，推动活塞。过滤立即开始；而且，直到达到底部时，活塞处于压缩状态，由此过滤膜按zui大样本回收率清除空气。对于直接设备注射，将针头直接放置在Autovial slip-luer出口处。

订购信息：

AV115NPUAQU             AV5 0.45uM PVDF 50/PK

AV115NPUNYL             AV5 0.45uM NYL 50/PK

AV115NPUORG             AV5 0.45uM PTFE 50/PK

AV125EAQU               AV12 0.2uM PVDF 50/PK

AV125ENAO               AV12 0.2uM NYL 50/PK

AV125EORG               AV12 0.2uM PTFE 50/PK 

AV125EPP                AV12 0.2uM PP 50/PK

AV125NPUAQU             AV12 0.45uM PVDF N/PRE 50/PK

AV125NPUPSU             AV12 0.45UM PES N/PRE 50/PK

AV125SAQU               AV12 0.2uM PVDF S 40/PK

AV125SNAO               AV12 0.2uM NYL S 40/PK 

AV125SORG               AV12 0.2uM PTFE S 40/PK

AV125UCA                AV12 0.45uM CA 50/PK 

AV125UGMF               AV12 0.45uM GMF 50/PK

AV125UNAO               AV12 0.45uM NYL 50/PK

AV125UORG               AV12 0.45uM PTFE 50/PK

AV525BGMF               AV12 1.0uM GF/B 1000/PK

AV525UAQU               AV12 0.45uM PVDF 1000/PK

AV525UNAO               AV12 0.45uM NYL 1000/PK 

生体硫黄解析用試薬 -SulfoBiotics- Sodium Polysulfide Set | CAS – 同仁化学研究所

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02 酸化ストレス関連試薬

–SulfoBiotics– Sodium Polysulfide Set

  • 酸化ストレス関連試薬

生体硫黄解析用試薬

  • 製品コード
    SB13　 –SulfoBiotics– Sodium Polysulfide Set
  • CAS番号
    –
容　量 メーカー希望
小売価格		 富士フイルム
和光純薬
1 set ￥14,100 348-91801
セット内容
Sodium disulfide (Na2S2) 100 mg x1  
Sodium trisulfide (Na2S3) 100 mg x1  
Sodium tetrasulfide (Na2S4) 100 mg x1  
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  • 取扱説明書 生体硫黄解析用試薬 -SulfoBiotics- Sodium Polysulfide Set | CAS - 同仁化学研究所 日本語
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  • 取扱説明書 生体硫黄解析用試薬 -SulfoBiotics- Sodium Polysulfide Set | CAS - 同仁化学研究所 English
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  • プロトコル 生体硫黄解析用試薬 -SulfoBiotics- Sodium Polysulfide Set | CAS - 同仁化学研究所 サルフェン硫黄を系の中に加えたい
    生体硫黄解析用試薬 -SulfoBiotics- Sodium Polysulfide Set | CAS - 同仁化学研究所

技術情報

生体内に存在するサルフェン硫黄含有分子種

生体硫黄解析用試薬 -SulfoBiotics- Sodium Polysulfide Set | CAS - 同仁化学研究所

※生体内のサルフェン硫黄含有分子種は、酸化還元および転移によって変化する

参考文献

参考文献を表示する

1) Y. Kimura, Y. Mikami, K. Osumi, M. Tsugane, J. Oka, and H. Kimura, "Polysulfides are possible H2S-derived signaling molecules in rat brain", FASEB J., 2013, 27, 2451.
2) S. Koike, Y. Ogasawara, N. Shibuya, H. Kimura, and K. Ishii, "Polysulfide exerts a protective effect against cytotoxicity caused by t-buthylhydroperoxide through Nrf2 signaling in neuroblastoma cells", FEBS Lett., 2013, 587, 3548
3) E. R. DeLeon, Y. Gao, E. Huang, M. Arif, N. Arora, A. Divietro, S. Patel, and K. R. Olson , "A case of mistaken identity: are reactive oxygen species actually reactive sulfide species?", American Journal of Physiology: Regulatory, Integrative and Comparative Physiology ., 2015, 310, (7), 549.
4) D. Delgermuruna, S. Yamaguchia, O. Ichiib, Y. Konb, S. Itoa, and K. Otsuguroa, "Hydrogen sulfide activates TRPA1 and releases 5-HT from epithelioid cells of the chicken thoracic aorta", Comparative Biochemistry and Physiology Part C: Toxicology & Pharmacology., 2016, 187, 43 .
5) S. Koikea, T. Kayamaa, S. Yamamotoa, D. Kominea, R. Tanakaa, S. Nishimotoa, T. Suzukia, A. Kishidab, and Y. Ogasawaraa, "Polysulfides protect SH-SY5Y cells from methylglyoxal-induced toxicity by suppressing protein carbonylation: A possible physiological scavenger for carbonyl stress in the brain", NeuroToxicology., 2016, 55, 13 .

取扱条件

規格
Sodium disulfide (Na2S2)： 試験適合
Sodium trisulfide (Na2S3)： 試験適合
Sodium tetrasulfide (Na2S4)： 試験適合
取扱条件
保存条件: 冷蔵,遮光 , 取扱条件: 吸湿注意
危険・有害
シンボルマーク 		生体硫黄解析用試薬 -SulfoBiotics- Sodium Polysulfide Set | CAS - 同仁化学研究所
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関連製品

遺伝子導入試薬 HilyMax 同仁化学研究所

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03 分子生物学関連試薬

HilyMax

  • 分子生物学関連試薬

遺伝子導入試薬

  • 製品コード
    H357　 HilyMax
容　量 メーカー希望
小売価格		 富士フイルム
和光純薬
1 ml ￥23,500 342-91103

内容物が微量のため確認しづらい場合があります。
内容物の確認についてはこちら

キット内容
1 ml ・HilyMax Reagent
・lipoform Buffer		 1 tube
1.0 ml×1

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  • 取扱説明書 遺伝子導入試薬 HilyMax 同仁化学研究所 日本語
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  • プロトコル 遺伝子導入試薬 HilyMax 同仁化学研究所 遺伝子を導入したい
    遺伝子導入試薬 HilyMax 同仁化学研究所

技術情報

他社品との比較例

遺伝子導入試薬 HilyMax 同仁化学研究所

参考文献

参考文献を表示する

1) S. Mima, H. Ushijima, H.-J. Hwang, S. Tsutsumi, M. Makise, Y. Yamaguchi, T. Tsuchiya, H. Mizushima and T. Mizushima, "Identification of theTP01gene in Yeast, and its Human Orthologue TETRAN, which Cause Resistance to NSAIDs",FEBS Lett.,2007,581, 1457.
2) T. Namba, T. Ishihara, K. Tanaka, T. Hoshino and T. Mizushima, "Transcriptional Activation of ATF6 by Endoplasmic Reticulum Stressors",Biochem. Biophys. Res. Commun.,2007,355, 543.
3)H. Nakajima, W. Amano, A. Fujita, A. Fukuhara, Y. Azuma, F. Hata, T. Inui and T. Takeuchi, "The Active Site Cysteine of the Proapoptotic Protein Glyceraldehyde-3-phosphate Dehydrogenase Is Essential in Oxidative Stress-induced Aggregation and Cell Death",J. Biol. Chem.,2007,282(36), 26562.
4) A. Endo, D. Sumi and Y. Kumagai, "1,2-Naphthoquinone Disrupts the Function of cAMP Response Element-binding Protein through Covalent Modification",Biochem. Biophys. Res. Commun.,2007,36(1), 243.

よくある質問

Q

遺伝子導入後の培地交換は必ず行う必要はありますか？

A

低い細胞毒性と高い導入効率を望まれる場合は、培地交換をお勧めします。
しかし、細胞(例：CHO細胞など)によっては、培地交換が毒性や導入率に影響しないものもありすので、細胞系にあわせて行ってください。

Q

導入効率が悪かった場合、どのような点を検討すれば良いでしょうか？ (DNA量,HilyMax量,複合体形成比,時間など)

A

＜細胞毒性が低い＞

　導入効率が極端に低い場合は、DNA量を増やすか、DNA(μg):HilyMax(μL)=1:5～1:9にしてみてください。

　高い導入効率を示す場合があります。

＜細胞毒性が高い＞

　DNA量またはHilyMax量を減らしてください。

Q

説明書には、保存条件が『冷蔵』と『冷凍』の2つの記載があります。 どのように保存すればよいのでしょうか？ 最初から『冷凍』したり、ずっと『冷蔵』ではダメですか？

A

未開封・未使用の場合には『冷蔵保存』、試薬を緩衝液と混合し溶解した後は『冷凍保存』してください。
未開封の状態で『冷凍保存』いただいても品質には問題はありませが、使用時に凍結した[Lipoform Buffer]を融解していただく必要があります。

また、溶解後に関しては、2～3週間以内に使い切る場合であれば『冷蔵保存』いただいても性能に影響はありません。数週間を越える使用の場合には、必ず『冷凍保存』してください。

遺伝子導入試薬 HilyMax 同仁化学研究所 遺伝子導入試薬 HilyMax 同仁化学研究所

取扱条件

取扱条件
保存条件: 冷蔵
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関連製品

核染色用色素 -Cellstain®- AO solution | CAS 65-61-2(AO) 同仁化学研究所

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核染色用色素 -Cellstain®- AO solution | CAS 65-61-2(AO) 同仁化学研究所–Cellstain®– AO solution

03 分子生物学関連試薬
05 細胞染色用色素

–Cellstain®– AO solution

核染色用色素 -Cellstain®- AO solution | CAS 65-61-2(AO) 同仁化学研究所

  • 分子生物学関連試薬
  • 細胞染色用色素

核染色用色素

  • 製品コード
    A430　 –Cellstain®– AO solution
  • CAS番号
    65-61-2(AO)
  • 化学名
    3,6-Bis(dimethylamino)acridine, hydrochloride, solution
  • 分子式・分子量
    C17H20ClN3=301.81
容　量 メーカー希望
小売価格		 富士フイルム
和光純薬
1 ml ￥6,600 348-07911
  • 核染色用色素 -Cellstain®- AO solution | CAS 65-61-2(AO) 同仁化学研究所
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  • プロトコル 核染色用色素 -Cellstain®- AO solution | CAS 65-61-2(AO) 同仁化学研究所 細胞を染色したい
    核染色用色素 -Cellstain®- AO solution | CAS 65-61-2(AO) 同仁化学研究所
  • パンフレット 核染色用色素 -Cellstain®- AO solution | CAS 65-61-2(AO) 同仁化学研究所 細胞増殖測定 細胞染色プロトコル
    核染色用色素 -Cellstain®- AO solution | CAS 65-61-2(AO) 同仁化学研究所

参考文献

参考文献を表示する

1) I. W. Taylor and B. K. Milthorpe, "An Evaluation of DNA Fluochromes, Staining Techniques, and Analysis for Flow Cytometry. I. Unperturebed Cellpopulations", J. Histochem. Cytochem., 1980, 28(11), 1224.
2) N. Miyoshi, K. Hara, I. Yokoyama, G. Tomita and M. Fukuda, "Fluorescence Lifetime of Acridine Orange in Sodiu Dodecyl Sulfate Premicellar Solutions", Photochem. Photobiol., 1988, 47(5), 685.
3) A. K. El-Naggar, J. G. Batsakis, K. Teague, L. Garnsey and B. Barlogie, "Single- and Double-stranded RNA Measurements by Flow Cytometry in Solid Neoplasms", Cytometry, 1991, 12, 330.
4) Y. Miyakoshi, H. Yohioka, Y. Toyama, Y. Suzuki and H. Shimizu, "The Frequencies of Micronuclei Induced by Cisplatin in Newborn Rat Astrocytes Are Increased by 50-Hz, 7.5- and 10-mT Electromagnetic Fields", Environ. Health and Prev.ive Med. 2005, 10(3), 138.

よくある質問

Q

核染色剤に使用される色素の特徴、違いは何でしょうか？

A

ここで紹介している色素は核酸との相互作用により蛍光を発するか、蛍光強度が強くなる特徴があります。

蛍光波長以外の違いとしては下記の点がございます。
【EB】
塩基特異性は無く、全DNA,RNAに結合します。
生細胞の膜透過性がなく、死細胞を染色します。

【PI】
EBと同様に塩基特異性はありません。インターカレーションした時の蛍光強度が
EBより高いため、より広く使用される色素です。
生細胞の膜透過性がなく、死細胞を染色します。

【DAPI】
２重鎖の副溝(minor groove)と結合します。アデニン-チミジンクラスターに高い結合性を持っています。
生細胞の膜透過性がなく、死細胞を染色します。

【AO】
２重鎖にインターカレーションしたときと、単鎖のリン酸に結合した時では蛍光波長が異なることを
利用して、２重鎖と単鎖を区別して検出できます。
生細胞の細胞膜を透過します。

【Hoechst33342､33258】
DNAのアデニン-チミジン部に特異的に結合します。
生細胞の細胞膜を透過し、生細胞のDNAを染色できる色素です。

Q

細胞染色色素の励起と蛍光の波長を教えて下さい

A

核染色用色素 -Cellstain®- AO solution | CAS 65-61-2(AO) 同仁化学研究所

＊AOはフローサイトメトリーなどでは488 nm励起で観察されることもあります

Q

AOの使用方法を教えて下さい。

A

下記に一例を示します。
*細胞の種類、観察条件により濃度や固定の検討が必要です。

○HeLa細胞を用いた細胞染色
①AO 1 mgを純水 1 mLに溶解し、ストック溶液とする。
②ストック溶液10 μLをPBS緩衝液5 mLで希釈する。(AOは約6 μmol/Lとなる）
③HeLa細胞をトリプシン-EDTAなどで回収し、細胞の懸濁液を準備する。
④この細胞懸濁液を遠心分離する。（1000 rpm, 3 min)
上清を除き、PBSを添加し、ピペッティングで十分分散させる。
（この時、細胞数が105～106 cells/mLになるように調整する）
⑤1.5 mlマイクロチューブに④で得た細胞懸濁液30 μLを添加する。
⑥これに②のAO溶液15 μLを添加し、37℃で15分インキュベートする。
⑦カバーガラス上に⑥の溶液10 μLをのせ、上からもう１枚カバーガラスを重ねる。
⑧このカバーガラスを蛍光顕微鏡に置き観察する。
蛍光特性：λex=502 nm, λem=526 nm(dsDNA)、λex=460 nm, λem=650 nm(ssDNA)

○未固定細胞のDNA-RNAの同時染色の例
・Z.Darynkiewicz, Methods Cell Biol.,33,285(1990)より
①Detergent溶液を調整する。保存は4℃以下で行なう。
Triton X-100(100 μL), 1.0 mol/L HCl(8 mL), NaCl(877 mg)を純水に溶解し100 mLとする。
最終濃度はそれぞれ0.1%, 0.08 mol/L, 150 mmol/L となる。

②色素溶液を調整する。保存は4℃以下で行なう。
1)100 mmol/Lクエン酸(37 mL)と200 mmol/L Na2HPO4(63 mL)を混和し、100 mLの溶液を作成する。
2)NaCl(877 mg)を加えて溶解する。
3)EDTA・2Na(34 mg)を加えて溶解する。
4)AO stock solution(1 mg/mL in H2O)600 μLを加える。
＊最終濃度は、AO:20 μmol/L, EDTA・2Na:1 mmol/L, NaCl:150 mmol/L

③検体溶液(2×105 cells/mL以下）200 μLにdetergent溶液400 μLを加え、
氷浴中に15秒静置する。不要な細胞の分解を防ぐ為に、検体倍地中に
血清を10～20％(v/v)含む方が望ましい。

④氷水で冷却した色素溶液1.2mLを加え、その後3～15分の間に測定を行なう。

⑤フローサイトメトリーで測定する。
励起波長は488 nmを使用。蛍光フィルターとして520-580 nm(dsDNA), 620 nm(RNA,ssDNA)
などのバンドパスフィルターを使用する。
蛍光特性：λex=502 nm, λem=526 nm(dsDNA)、λex=460 nm, λem=650 nm(ssDNA)

核染色用色素 -Cellstain®- AO solution | CAS 65-61-2(AO) 同仁化学研究所 核染色用色素 -Cellstain®- AO solution | CAS 65-61-2(AO) 同仁化学研究所

取扱条件

規格
性状： 本品は、黄色～橙色液体の凍結品である。
含量： 試験適合
取扱条件
保存条件: 冷凍,遮光
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核染色用色素 -Cellstain®- AO solution | CAS 65-61-2(AO) 同仁化学研究所

関連製品

死細胞染色色素 -Cellstain®- DAPI | CAS 28718-90-3 同仁化学研究所

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死細胞染色色素 -Cellstain®- DAPI | CAS 28718-90-3 同仁化学研究所–Cellstain®– DAPI

03 分子生物学関連試薬
05 細胞染色用色素

–Cellstain®– DAPI

死細胞染色色素 -Cellstain®- DAPI | CAS 28718-90-3 同仁化学研究所

  • 分子生物学関連試薬
  • 細胞染色用色素

死細胞染色色素

  • 製品コード
    D212　 –Cellstain®– DAPI
  • CAS番号
    28718-90-3
  • 化学名
    4′,6-Diamidino-2-phenylindole, dihydrochloride
  • 分子式・分子量
    C16H17Cl2N5=350.25
容　量 メーカー希望
小売価格		 富士フイルム
和光純薬
1 mg ￥5,700 342-07431

【注意】-Cellstain®– DAPIは、通常、チューブ底面にフィルム状に付着した状態となっております。
稀に、輸送中の振動等により本品がチューブ底面から外れ、チューブ壁面やキャップ裏に付着している場合がございます。内容物を下に落としてから開封をしてご使用ください。
ご不明な点がございましたら、小社カスタマーリレーション部までお問合せください。（Free Dial：0120-489-548）

  • 死細胞染色色素 -Cellstain®- DAPI | CAS 28718-90-3 同仁化学研究所
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  • プロトコル 死細胞染色色素 -Cellstain®- DAPI | CAS 28718-90-3 同仁化学研究所 細胞を染色したい
    死細胞染色色素 -Cellstain®- DAPI | CAS 28718-90-3 同仁化学研究所
  • パンフレット 死細胞染色色素 -Cellstain®- DAPI | CAS 28718-90-3 同仁化学研究所 細胞増殖測定 細胞染色プロトコル
    死細胞染色色素 -Cellstain®- DAPI | CAS 28718-90-3 同仁化学研究所

参考文献

参考文献を表示する

参考文献

1) W. Schnedl, A. V. Mikelsaar, M. Breitenbach and O. Dann, "DIPI and DAPI: Fluorescence Banding with Only Negligible Fading", Hum. Genet., 1977, 36, 167. 
2) I. W. Taylor and B. K. Milthorpe, "An Evaluation of DNA Fluochromes, Staining Techniques, and Analysis for Flow Cytometry. I. Unperturebed Cellpopulations", J. Histochem. Cytochem., 1980, 28(11), 1224. 
3) F. Otto and K. G. Tsou, "A Comparative Study of DAPI, DIPI, and Hoechst 33258 and 33342 as Chromosomal DNA Stains", Stain Technol., 1985, 60, 7. 
4) N. Poulin, A. Harrison and B. Palcic, "Quantitative Precision of an Automated Image Cytometric System for the Measurement of DNA Content and Distribution in Cells Labeled with Fluorescent Nucleic Acid Stains", Cytometry, 1994, 16, 227. 
5)M. Kawai, N. Yamaguchi and M. Nasu,"Rapid Enumeration of Physiologically Active Bacteria in Purified Water Used in the Pharmaceutical Manufacturing Process", J. Appl. Microbiol., 1999, 86 (3), 496.

よくある質問

Q

核染色剤に使用される色素の特徴、違いは何でしょうか？

A

 ここで紹介している色素は核酸との相互作用により蛍光を発するか、蛍光強度が強くなる特徴があります。
蛍光波長以外の違いとしては下記の点がございます。

【EB】
塩基特異性は無く、全DNA,RNAに結合します。
生細胞の膜透過性がなく、死細胞を染色します。

【PI】
EBと同様に塩基特異性はありません。インターカレーションした時の蛍光強度がEBより高いため、より広く使用される色素です。
生細胞の膜透過性がなく、死細胞を染色します。

【DAPI】
２重鎖の副溝(minor groove)と結合します。アデニン-チミジンクラスターに高い結合性を持っています。
生細胞の膜透過性がなく、死細胞を染色します。

【AO】
２重鎖にインターカレーションしたときと、単鎖のリン酸に結合した時では蛍光波長が異なることを利用して、２重鎖と単鎖を区別して検出できます。
生細胞の細胞膜を透過します。

【Hoechst33342､33258】
DNAのアデニン-チミジン部に特異的に結合します。
生細胞の細胞膜を透過し、生細胞のDNAを染色できる色素です。

Q

細胞染色色素の励起と蛍光の波長を教えて下さい。

A

死細胞染色色素 -Cellstain®- DAPI | CAS 28718-90-3 同仁化学研究所

＊AOはフローサイトメトリーなどでは488 nm励起で観察されることもあります

Q

DAPIを核染色に用いたいのですが、どのように使用すればよいのでしょうか？

A

 下記のような使用報告例がございます。 DAPIストック溶液を作成する場合には、水を使用して下さい（PBSには溶解しにくい）。
ただし、水に溶解したものは長期保存には適していません。
長期保存をお考えの際は、溶液の安定性を高めた溶液タイプの製品-Cellstain®– DAPI solution（コード：D523）をご使用下さい。 ご使用の際、ストック溶液を緩衝液もしくは有機溶媒にて目的の濃度に希釈して下さい。

【DAPI を用いた細胞染色の例】
固形腫瘍あるいはcluster を含むsample のDAPI 染色の例（参考文献3）
1) 0.02 ％トリプシン – EDTA 処理し、37 ℃で30 分間 incubate 後、1,500 rpm で５分間遠心分離を行ない、上清をすてる。
2) -20 ℃の50 % methanol （ethanol でも可）にて固定後、1,500 rpm で５分間遠心分離を行ない、上清をすてる。
3) -20 ℃の30 % methanol にて洗浄後、1,500 rpm で５分間遠心分離を行ない、上清をすてる。
4) 0.2 M リン酸緩衝液（pH 7.2）にて洗浄後、1,500 rpm で５分間遠心分離を行ない、上清をすてる。
5) RNase の0.2 M リン酸緩衝液（pH 7.2）溶液 (1 mg/ml ) を細胞106 個あたり0.2 mL を加え、37 ℃にて30 分間 incubate する。
6) 0.2 M リン酸緩衝液（pH 7.2）にて洗浄後、1,500 rpm で５分間遠心分離を行ない、上清をすてる。
7) 1 μg/ml のDAPI 溶液10 ml 加え、4 ℃にて２時間遮光の上染色する。

【DAPI を用いた細胞染色の例】 Vollenweider らはリンフォカイン活性化キラ－（LAK）細胞の細胞増殖アッセイにおいて、
　DAPI 染色を行ない、蛍光プレ－トリ－ダ－を用いて測定している(参考文献 2)。
その時の濃度はストック溶液で0.1 mg/mL の水溶液、使用濃度は1 μg/ml のメタノ－ル溶液を用い、
1 well 当たり 100 μl 使用して蛍光染色している。  

【参考文献】
1) W. Schnedl, A.-V. Mikelsaar, M. Breitenbach, O. Dann, Hum. Genet., 36, 167 – 172 (1977).
2) I. Vollenweider, P. Groscurth, J. Immunol. Methods, 149, 133 (1992)).
3) M. A. Hotz, J. Gong, F. Traganos, Z. Darzynkiwicz, Cytometry, 15, 234 – 244 (1994).
4) N. Poulin, A. Harrison, B. Palcic, Cytometry, 16, 227 – 235 (1994).

死細胞染色色素 -Cellstain®- DAPI | CAS 28718-90-3 同仁化学研究所 死細胞染色色素 -Cellstain®- DAPI | CAS 28718-90-3 同仁化学研究所

取扱条件

規格
性状： 本品は、黄色～黄緑褐色粉末又は固体で水及び希塩酸に溶ける。
水溶状： 試験適合
NMRスペクトル： 試験適合
取扱条件
保存条件: 冷凍,遮光
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死細胞染色色素 -Cellstain®- DAPI | CAS 28718-90-3 同仁化学研究所

関連製品

VECTOR EEL生物素大叶黄杨Europaeus凝集素B-11335

发表于由

VECTOR EEL生物素大叶黄杨Europaeus凝集素

  • 产品型号：  B-11335
  • 简单描述
  • VECTOR EEL生物素大叶黄杨Europaeus凝集素Detection of Glycoproteins using Lectins in Histochemistry,ELISA, and Western Blot Applications
详细介绍

 

VECTOR EEL生物素大叶黄杨Europaeus凝集素

The following protocols offer guidelines for assay development using lectin-based detection of glycoproteins
present in tissue sections, adsorbed onto microtiter plates, or transferred from electrophoretic
gels onto nitrocellulose or PVDF membranes.
Histochemistry:
1a. Staining procedure for paraffin sections: Deparaffinize and hydrate tissue sections through
xylenes or other clearing agents and graded alcohol series and rinse for 5 minutes in tap water.
If required, retrieve antigens using the Antigen Unmasking Solution （H-3300 or H-3301）.
1b. Staining procedure for frozen sections: Air dry sections. Immediay before staining, fix
sections with acetone. Transfer slices to buffer. If endogenous enzyme activities are present,
inactivate using appropriate methods.
2. Perform Streptavidin/Biotin blocking if required following kit instructions （SP-2002）. Do not
use SP-2001. Block non-specific binding by incubating section with Carbo-Free™ Blocking
Solution （Cat. No. SP-5040） for 30 minutes at room temperature. Blot excess blocking solution
from the sections.
3. Apply biotinylated lectin at approximay 2-20 μg/ml in PBS （10 mM sodium phosphate, 150
mM NaCl, pH 7.4） to the sections and incubate for 30 minutes at room temperature. Wash with
TPBS （PBS + 0.05% Tween™20）.
4. Prepare VECTASTAIN®
® ABC （peroxidase, Cat. No. PK-6100） or VECTASTAIN® ABC-AP
（alkaline phosphatase, Cat. No. AK-5000） reagents according to the kit instructions. Apply to the
sections and incubate for 30 minutes at room temperature. Wash with TPBS.
5. Apply an appropriate precipitating substrate for the enzyme system used in step 4. For peroxidase,
ImmPACT™ DAB （Cat. No. SK-4105） is recommended; for alkaline phosphatase, Vector® Red
（Cat. No. SK-5100）. Rinse in tap water.
6. Counterstain （optional）, clear and mount. For galactose or GalNAc-specific lectins avoid mounting
in glycerol-based mounting media.
ELISA:
1. Adsorb target protein to microtiter plate by placing 50-200 μl of approximay 3 μg/ml glycoprotein
solution into the desired wells. Some wells may be left untreated as negative controls. Incubate at
37 ºC for 1 hour. Wash wells three times with TPBS （PBS + 0.05% Tween™20）.
2. Block non-specific binding by filling each well to the brim with Carbo-Free™ Blocking Solution
（Cat. No. SP-5040） for 30 minutes at room temperature. Wash wells three times with TPBS.
3. Apply 50-200 μl of approximay 2-20 μg/ml biotinylated lectin in PBS to the wells and incubate
for 30 minutes at room temperature. Wash wells three times with TPBS.

4. Prepare VECTASTAIN®
® ABC （peroxidase, Cat. No. PK-6100） or VECTASTAIN® ABC-AP
（alkaline phosphatase, Cat. No. AK-5000） reagents according to the kit instructions. Apply to the
wells and incubate for 30 minutes at room temperature. Wash wells three times with TPBS.
5. Apply an appropriate non-precipitating substrate for the enzyme system used in step 4. For
peroxidase, ABTS （Cat. No. SK-4500） is recommended; for alkaline phophatase, pNPP （Cat. No.
SK-5900）.
6. Quantify the colored reaction product by spectrophotometry.
Western Blot:
1. Perform electrophoresis and transfer proteins to a membrane according to standard procedures.
2. Block non-specific binding by incubating the membrane in Carbo-Free™ Blocking Solution （Cat.
No. SP-5040） for 30 minutes at room temperature. Use a sufficient volume to compley cover
the membrane.
3. Incubate membrane in PBS containing approximay 2-20 μg/ml biotinylated lectin for 30 minutes
at room temperature. Wash with TPBS （PBS +0.05% Tween™20）.
4. Prepare VECTASTAIN®
® ABC （peroxidase, Cat. No. PK-6100） or VECTASTAIN® ABC-AP
（alkaline phosphatase, Cat. No. AK-5000） reagents according to the kit instructions. Incubate the
membrane in the reagent for 30 minutes at room temperature. Wash with TPBS.
5. Apply an appropriate substrate for the enzyme system used in step 4. For peroxidase, DuoLuX™
Chemiluminescent/Fluorescent Substrate for Peroxidase （Cat. No. SK-6604） or ImmPACT™ DAB
（Cat. No. SK-4105） are recommended; for alkaline phosphatase, Chemiluminescent/Fluorescent
Substrate for Alkaline Phosphatase （Cat. No. SK-6605） or BCIP/NBT （Cat. No. SK-5400） are
recommended.
VECTOR EEL生物素大叶黄杨Europaeus凝集素

Negative Controls
Negative controls should be run in parallel in each of the above described methodologies to validate
binding results. When applying lectins, one of the most appropriate negative controls is to preabsorb
the lectin with a concentration of a defined sugar, with which, the lectin has a known high affinity.
Vector Labs offers a series of sugars that are intended for such a purpose.
The lectin is diluted to a suitable working concentration in a solution containing approximay
200 mM to 500 mM of the sugar. This mixture is left to bind at room temperature for 30 to 60 min.
Following this absorption incubation, the mixture is substituted into the procedure in place of the unabsorbed
lectin and incubated under the same conditions. The subsequent detection procedure is followed
as for the test method. In most cases the vast majority of lectin binding to the tissue section （membrane
blot, etc.） will be eliminated. Some trace binding to the section （blot etc） may still be present under
these conditions and probably indicates presence of secondary or tertiary sugar preferences. These negative
control results should be compared with the test results to determine specificity of binding

 

详细产品信息可和选购

死細胞染色色素 -Cellstain®- DAPI solution | CAS 28718-90-3(DAPI) 同仁化学研究所

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理日本同仁化学试剂盒全线产品，欢迎访问日本同仁化学dojindo官网了解更多信息。

死細胞染色色素 -Cellstain®- DAPI solution | CAS 28718-90-3(DAPI) 同仁化学研究所–Cellstain®– DAPI solution

03 分子生物学関連試薬
05 細胞染色用色素

–Cellstain®– DAPI solution

死細胞染色色素 -Cellstain®- DAPI solution | CAS 28718-90-3(DAPI) 同仁化学研究所

  • 分子生物学関連試薬
  • 細胞染色用色素

死細胞染色色素

  • 製品コード
    D523　 –Cellstain®– DAPI solution
  • CAS番号
    28718-90-3(DAPI)
  • 化学名
    4′,6-Diamidino-2-phenylindole, dihydrochloride, solution
  • 分子式・分子量
    C16H17Cl2N5=350.25
容　量 メーカー希望
小売価格		 富士フイルム
和光純薬
1 ml ￥6,600 340-07971
  • 死細胞染色色素 -Cellstain®- DAPI solution | CAS 28718-90-3(DAPI) 同仁化学研究所
試験成績書

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  • ご購入方法
  • お問い合わせ

マニュアル

  • プロトコル 死細胞染色色素 -Cellstain®- DAPI solution | CAS 28718-90-3(DAPI) 同仁化学研究所 細胞を染色したい
    死細胞染色色素 -Cellstain®- DAPI solution | CAS 28718-90-3(DAPI) 同仁化学研究所
  • パンフレット 死細胞染色色素 -Cellstain®- DAPI solution | CAS 28718-90-3(DAPI) 同仁化学研究所 細胞増殖測定 細胞染色プロトコル
    死細胞染色色素 -Cellstain®- DAPI solution | CAS 28718-90-3(DAPI) 同仁化学研究所

参考文献

参考文献を表示する

参考文献

1) W. Schnedl, A. V. Mikelsaar, M. Breitenbach and O. Dann, "DIPI and DAPI: Fluorescence Banding with Only Negligible Fading", Hum. Genet., 1977, 36, 167. 
2) I. W. Taylor and B. K. Milthorpe, "An Evaluation of DNA Fluochromes, Staining Techniques, and Analysis for Flow Cytometry. I. Unperturebed Cellpopulations", J. Histochem. Cytochem., 1980, 28(11), 1224. 
3) F. Otto and K. G. Tsou, "A Comparative Study of DAPI, DIPI, and Hoechst 33258 and 33342 as Chromosomal DNA Stains", Stain Technol., 1985, 60, 7. 
4) N. Poulin, A. Harrison and B. Palcic, "Quantitative Precision of an Automated Image Cytometric System for the Measurement of DNA Content and Distribution in Cells Labeled with Fluorescent Nucleic Acid Stains", Cytometry, 1994, 16, 227. 
5) M. Kawai, N. Yamaguchi and M. Nasu,"Rapid Enumeration of Physiologically Active Bacteria in Purified Water Used in the Pharmaceutical Manufacturing Process", J. Appl. Microbiol., 1999, 86 (3), 496.
6) Y. Saito, T. Chikenji, T. Matsumura, M. Nakano and M. Fujimiya, "Exercise enhances skeletal muscle regeneration by promoting senescence in fibro-adipogenic progenitors", Nat. Commun., 2020, doi:10.1038/s41467-020-14734-x.

よくある質問

Q

核染色剤に使用される色素の特徴、違いは何でしょうか？

A

 ここで紹介している色素は核酸との相互作用により蛍光を発するか、蛍光強度が強くなる特徴があります。
蛍光波長以外の違いとしては下記の点がございます。
【EB】
塩基特異性は無く、全DNA,RNAに結合します。
生細胞の膜透過性がなく、死細胞を染色します。
【PI】
EBと同様に塩基特異性はありません。インターカレーションした時の蛍光強度が
EBより高いため、より広く使用される色素です。
生細胞の膜透過性がなく、死細胞を染色します。
【DAPI】
２重鎖の副溝(minor groove)と結合します。アデニン-チミジンクラスターに高い結合性を持っています。
生細胞の膜透過性がなく、死細胞を染色します。
【AO】
２重鎖にインターカレーションしたときと、単鎖のリン酸に結合した時では蛍光波長が異なることを
利用して、２重鎖と単鎖を区別して検出できます。
生細胞の細胞膜を透過します。
【Hoechst33342､33258】
DNAのアデニン-チミジン部に特異的に結合します。
生細胞の細胞膜を透過し、生細胞のDNAを染色できる色素です。

Q

細胞染色色素の励起と蛍光の波長を教えて下さい。

A

死細胞染色色素 -Cellstain®- DAPI solution | CAS 28718-90-3(DAPI) 同仁化学研究所
＊AOはフローサイトメトリーなどでは488 nm励起で観察されることもあります

Q

DAPIを核染色に用いたいのですが、どのように使用すればよいのでしょうか？

A

下記のような使用報告例がございます。
【DAPI を用いた細胞染色の例】
固形腫瘍あるいはcluster を含むsample のDAPI 染色の例（参考文献3）
1) 0.02 ％トリプシン – EDTA 処理し、37 ℃で30 分間 incubate 後、
　　1,500 rpm で５分間遠心分離を行ない、上清をすてる。
2) -20 ℃の50 % methanol （ethanol でも可）にて固定後、
　　1,500 rpm で５分間遠心分離を行ない、上清をすてる。
3) -20 ℃の30 % methanol にて洗浄後、1,500 rpm で
　　５分間遠心分離を行ない、上清をすてる。
4) 0.2 M リン酸緩衝液（pH 7.2）にて洗浄後、1,500 rpm で
　　５分間遠心分離を行ない、上清をすてる。
5) RNase の0.2 M リン酸緩衝液（pH 7.2）溶液 (1 mg/ml ) を
　　細胞10^6 個あたり0.2 ml を加え、37 ℃にて30 分間 incubate する。
6) 0.2 M リン酸緩衝液（pH 7.2）にて洗浄後、1,500 rpm で５分間遠心分離を行ない、上清をすてる。
7) 1 μg/mL のDAPI 溶液10 mL 加え、4 ℃にて２時間遮光の上染色する。
【DAPI を用いた細胞染色の例】
Vollenweider らはリンフォカイン活性化キラ－（LAK）細胞の細胞増殖アッセイにおいて、
　DAPI 染色を行ない、蛍光プレ－トリ－ダ－を用いて測定している(参考文献 2)。
その時の濃度はストック溶液で0.1 mg/mL の水溶液、使用濃度は1 μg/ml のメタノ－ル溶液を用い、
1 well 当たり 100μl 使用して蛍光染色している。
 
 
【参考文献】
1) W. Schnedl, A.-V. Mikelsaar, M. Breitenbach, O. Dann, Hum. Genet., 36, 167 – 172 (1977).
2) I. Vollenweider, P. Groscurth, J. Immunol. Methods, 149, 133 (1992).
3) M. A. Hotz, J. Gong, F. Traganos, Z. Darzynkiwicz, Cytometry, 15, 234 – 244 (1994).
4) N. Poulin, A. Harrison, B. Palcic, Cytometry, 16, 227 – 235 (1994).
5) C. Souchier, M. French, M. Benchaib, R. Catallo, P. A. Bryon, Cytometry, 20, 203 – 209 (1995).

死細胞染色色素 -Cellstain®- DAPI solution | CAS 28718-90-3(DAPI) 同仁化学研究所 死細胞染色色素 -Cellstain®- DAPI solution | CAS 28718-90-3(DAPI) 同仁化学研究所

取扱条件

規格
性状： 本品は、微黄色～黄色液体である。
含量： 試験適合
取扱条件
保存条件: 冷蔵,遮光
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死細胞染色色素 -Cellstain®- DAPI solution | CAS 28718-90-3(DAPI) 同仁化学研究所

関連製品

核染色用色素 -Cellstain®- Hoechst 33258 solution | CAS 23491-45-4(Hoechst 33258) 同仁化学研究所

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理日本同仁化学试剂盒全线产品，欢迎访问日本同仁化学dojindo官网了解更多信息。

核染色用色素 -Cellstain®- Hoechst 33258 solution | CAS 23491-45-4(Hoechst 33258) 同仁化学研究所–Cellstain®– Hoechst 33258 solution

03 分子生物学関連試薬
05 細胞染色用色素

–Cellstain®– Hoechst 33258 solution

核染色用色素 -Cellstain®- Hoechst 33258 solution | CAS 23491-45-4(Hoechst 33258) 同仁化学研究所

  • 分子生物学関連試薬
  • 細胞染色用色素

核染色用色素

  • 製品コード
    H341　 –Cellstain®– Hoechst 33258 solution
  • CAS番号
    23491-45-4(Hoechst 33258)
  • 化学名
    2′-(4-Hydroxyphenyl)-5-(4-methyl-1-piperazinyl)-2,5′-bi-1H-benzimidazole, trihydrochloride, solution
  • 分子式・分子量
    C25H27Cl3N6O=533.88
容　量 メーカー希望
小売価格		 富士フイルム
和光純薬
1 ml ￥5,700 343-07961
  • 核染色用色素 -Cellstain®- Hoechst 33258 solution | CAS 23491-45-4(Hoechst 33258) 同仁化学研究所
試験成績書

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  • ご購入方法
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マニュアル

  • プロトコル 核染色用色素 -Cellstain®- Hoechst 33258 solution | CAS 23491-45-4(Hoechst 33258) 同仁化学研究所 細胞を染色したい
    核染色用色素 -Cellstain®- Hoechst 33258 solution | CAS 23491-45-4(Hoechst 33258) 同仁化学研究所
  • パンフレット 核染色用色素 -Cellstain®- Hoechst 33258 solution | CAS 23491-45-4(Hoechst 33258) 同仁化学研究所 細胞増殖測定 細胞染色プロトコル
    核染色用色素 -Cellstain®- Hoechst 33258 solution | CAS 23491-45-4(Hoechst 33258) 同仁化学研究所

参考文献

参考文献を表示する

1) M. J. Lydon, K. D. Keeler and D. B. Thomas, "Vital DNA Staining and Cell Sorting by Flow Microfluorometry", J. Cell Physiol., 1980, 102(2), 175.
2) M. Sriram, van der G. A. Marel, H. L. Roelen, van J. H. Boo and A. H. Wang, "Structural Consequences of a Carcinogenic Alkylation Lesion on DNA: Effect of O6-ethylguanine on the Molecular Structure of the d(CGC[e6G]AATTCGCG)-netropsin Complex", Biochemistry, 1992, 31(47), 11823.
3) T. Ohara and T. Tsuge, "FoSTUA, Encoding a Basic Helix-Loop-Helix Protein, Differentially Regulates Development of Three Kinds of Asexual Spores, Macroconidia, Microconidia, and Chlamydospores, in the Fungal Plant Pathogen Fusarium oxysporum", Eukaryot. Cell, 2004, 3, 1412.

よくある質問

Q

Hoechst 33258 ,Hoechst 33342 solutionの励起波長、蛍光波長とこれらの違いについて教えて下さい。

A

波長は以下の通りです。
Hoechst33342 Ex:350 nm Em:461 nm
Hoechst33258 Ex:352 nm Em:461 nm

基本的な使用方法は両方とも同じです。
弊社の製品は水溶液になっておりますので、
ご希望の濃度の希釈し、添加して下さい。

この二つの違いですが、基本的にはAdenine-Thymidine部に特異的に結合する薬品です。
生細胞の膜も通過し、生細胞のDNAとも結合します。
膜の透過率はHoechst 33342の方が若干高いです。
Hoechst33258はdsDNA selectivのようです。

Q

核染色剤に使用される色素の特徴、違いは何でしょうか？

A

ここで紹介している色素は核酸との相互作用により蛍光を発するか、蛍光強度が強くなる特徴があります。
蛍光波長以外の違いとしては下記の点がございます。
【EB】
塩基特異性は無く、全DNA,RNAに結合します。
生細胞の膜透過性がなく、死細胞を染色します。

【PI】
EBと同様に塩基特異性はありません。インターカレーションした時の蛍光強度が
EBより高いため、より広く使用される色素です。
生細胞の膜透過性がなく、死細胞を染色します。

【DAPI】
２重鎖の副溝(minor groove)と結合します。アデニン-チミジンクラスターに高い結合性を持っています。
生細胞の膜透過性がなく、死細胞を染色します。

【AO】
２重鎖にインターカレーションしたときと、単鎖のリン酸に結合した時では蛍光波長が異なることを
利用して、２重鎖と単鎖を区別して検出できます。
生細胞の細胞膜を透過します。

【Hoechst33342､33258】
DNAのアデニン-チミジン部に特異的に結合します。
生細胞の細胞膜を透過し、生細胞のDNAを染色できる色素です。

Q

細胞染色色素の励起と蛍光の波長を教えて下さい。

A

核染色用色素 -Cellstain®- Hoechst 33258 solution | CAS 23491-45-4(Hoechst 33258) 同仁化学研究所

＊AOはフローサイトメトリーなどでは488 nm励起で観察されることもあります

Q

Hoechst33258の使用方法を教えてください。

A

 色々な使い方がありますが、一例として形態観察の例を示します。
アポトーシス細胞の核変化(クロマチン凝縮、断片化)を手軽に観察する方法として用いられます。

＜試薬＞

・細胞固定液：1％グルタルアルデヒド/PBS(-)

・蛍光染色液：1 mM Hoechst33258/PBS(-)
　　　*同仁の製品は[1 mg/mL]になっています(約1.87 mmol/L)

＜操作方法＞

1．約1X106個の細胞を含む細胞培養液を400 Xg，5 min遠心し、上清を捨てる。

2. 細胞固定液を100 μL加え、ピペッティング等により混和する。

3. 室温で30 min静置する。

4. 400Xg,5 min遠心し、上清を捨てる。

　　PBS(-)を1 mL加え、ピペッティング等により混和した後、400Xg､5 min遠心し上清を捨てる。

　　（＊このときグルタルアルデヒドをよく洗浄除去する。退色の原因になります）

5. PBS(-)を20 μL加え、混和した後、蛍光染色液を4 μL加え混合する。

6. スライドガラス上に(5)の細胞液を1滴落し、カバーガラスをのせ、端を押さえる。

7. 蛍光顕微鏡下で観察する。

＊細胞工学別冊 実験プロトコールシリーズ「アポトーシス実験プロトコール」田沼靖一監修より

核染色用色素 -Cellstain®- Hoechst 33258 solution | CAS 23491-45-4(Hoechst 33258) 同仁化学研究所 核染色用色素 -Cellstain®- Hoechst 33258 solution | CAS 23491-45-4(Hoechst 33258) 同仁化学研究所

取扱条件

規格
性状： 本品は、黄色液体である。
含量： 試験適合
取扱条件
保存条件: 冷蔵,遮光
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関連製品

核染色用色素 | CAS 23491-52-3(Hoechst 33342:free base) 同仁化学研究所

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理日本同仁化学试剂盒全线产品，欢迎访问日本同仁化学dojindo官网了解更多信息。

核染色用色素 | CAS 23491-52-3(Hoechst 33342:free base) 同仁化学研究所–Cellstain®– Hoechst 33342 solution

03 分子生物学関連試薬
05 細胞染色用色素

–Cellstain®– Hoechst 33342 solution

核染色用色素 | CAS 23491-52-3(Hoechst 33342:free base) 同仁化学研究所

  • 分子生物学関連試薬
  • 細胞染色用色素

核染色用色素

  • 製品コード
    H342　 –Cellstain®– Hoechst 33342 solution
  • CAS番号
    23491-52-3(Hoechst 33342:free base)
  • 化学名
    2′-(4-Ethoxyphenyl)-5-(4-methyl-1-piperazinyl)-2,5′-bi-1H-benzimidazole, trihydrochloride, solution
  • 分子式・分子量
    C27H31Cl3N6O=561.93
容　量 メーカー希望
小売価格		 富士フイルム
和光純薬
1 ml ￥5,700 346-07951
  • 核染色用色素 | CAS 23491-52-3(Hoechst 33342:free base) 同仁化学研究所
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マニュアル

  • プロトコル 核染色用色素 | CAS 23491-52-3(Hoechst 33342:free base) 同仁化学研究所 細胞を染色したい
    核染色用色素 | CAS 23491-52-3(Hoechst 33342:free base) 同仁化学研究所
  • パンフレット 核染色用色素 | CAS 23491-52-3(Hoechst 33342:free base) 同仁化学研究所 細胞増殖測定細胞染色プロトコル
    核染色用色素 | CAS 23491-52-3(Hoechst 33342:free base) 同仁化学研究所

参考文献

参考文献を表示する

1) M. J. Lydon, K. D. Keeler and D. B. Thomas, "Vital DNA Staining and Cell Sorting by Flow Microfluorometry", J. Cell Physiol., 1980, 102(2), 175.
2) M. Sriram, van der G. A. Marel, H. L. Roelen, van J. H. Boo and A. H. Wang, "Structural Consequences of a Carcinogenic Alkylation Lesion on DNA: Effect of O6-ethylguanine on the Molecular Structure of the d(CGC[e6G]AATTCGCG)-netropsin Complex", Biochemistry, 1992, 31(47), 11823.
3) Y. Tadokoro, K. Yomogida, Y. Yagura, S. Yamada, M. Okabe and Y. Nishimune, "Characterization of Histone H2A.X Expression in Testis and Specific Labeling of Germ Cells at the Commitment Stage of Meiosis with Histone H2A.X Promoter-Enhanced Green Fluorescent Protein Transgene", Biol. Reprod., 2003, 69, 1325.
4) F. Wada, A. Ogawa, Y. Hanai, A. Nakamura, M. Maki and K. Hitomi, "Analyses of Expression and Localization of Two Mammalian-Type Transglutaminases in Physarum polycephalum, an Acellular Slime Mold", J. Biochem.(Tokyo), 2004, 136, 665.
5) M. Oka, N. Kobayashi, K. Matsumura, M. Nishio and K. Saeki, "Exogenous Cytokine-Free Differentiation of Human Pluripotent Stem Cells into Classical Brown Adipocytes", Cells., 2019, 8, (4), 373
6) T. Yamazaki, H. Suzuki, S. Yamada, K. Ohshio, M. Sugamata, T. Yamada and Y. Morita, "Lactobacillus paracasei KW3110 Suppresses Inflammatory Stress-Induced Premature Cellular Senescence of Human Retinal Pigment Epithelium Cells and Reduces Ocular Disorders in Healthy Humans”, Int J Mol Sci, 2020, 21(14), 5091

よくある質問

Q

Hoechst 33258 ,Hoechst 33342 solutionの波長とこの２つの違いについて教えて下さい。

A

波長は以下の通りです。
Hoechst33342 Ex:350 nm Em:461 nm
Hoechst33258 Ex:352 nm Em:461 nm

基本的な使用方法は両方とも同じです。
弊社の製品は水溶液になっておりますので、
ご希望の濃度の希釈し、添加して下さい。

この二つの違いですが、基本的にはAdenine-Thymidine部に特異的に結合する薬品です。
生細胞の膜も通過し、生細胞のDNAとも結合します。
膜の透過率はHoechst 33342の方が若干上です。
Hoechst33258はdsDNA selectiveのようです。

Q

核染色剤に使用される色素の特徴、違いは何でしょうか？

A

ここで紹介している色素は核酸との相互作用により蛍光を発するか、蛍光強度が強くなる特徴があります。
蛍光波長以外の違いとしては下記の点がございます。

【EB】
塩基特異性は無く、全DNA,RNAに結合します。
生細胞の膜透過性がなく、死細胞を染色します。

【PI】
EBと同様に塩基特異性はありません。インターカレーションした時の蛍光強度がEBより高いため、より広く使用される色素です。
生細胞の膜透過性がなく、死細胞を染色します。

【DAPI】
２重鎖の副溝(minor groove)と結合します。アデニン-チミジンクラスターに高い結合性を持っています。
生細胞の膜透過性がなく、死細胞を染色します。

【AO】
２重鎖にインターカレーションしたときと、単鎖のリン酸に結合した時では蛍光波長が異なることを利用して、２重鎖と単鎖を区別して検出できます。
生細胞の細胞膜を透過します。

【Hoechst33342､33258】
DNAのアデニン-チミジン部に特異的に結合します。
生細胞の細胞膜を透過し、生細胞のDNAを染色できる色素です。

Q

細胞染色色素の励起と蛍光の波長を教えて下さい。

A

核染色用色素 | CAS 23491-52-3(Hoechst 33342:free base) 同仁化学研究所

＊AOはフローサイトメトリーなどでは488nm励起で観察されることもあります

Q

Hoechst33342の使用方法を教えてください。

A

一例として下記に示します。
・フローサイトメトリーによる培養株化細胞あるいは固形腫瘍の例
 

【試薬】

Hoechst33324 solution (1 mg/mL, 1.78 mmol/L)

【操作】

1)培養株化細胞あるいは固形腫瘍を0.25％トリプシンにて分離、浮遊細胞を用意する。

2)培養液で10 μmol/L Hoechst33342溶液とする。

3)細胞浮遊液105個あたり、10 μmol/L Hoechst33342溶液を1 mL加える。

4)37℃,60分インキュベートする。

5)この染色液をフローサイトメトリーで測定する。

励起波長：352 nm、蛍光波長：461 nm

核染色用色素 | CAS 23491-52-3(Hoechst 33342:free base) 同仁化学研究所 核染色用色素 | CAS 23491-52-3(Hoechst 33342:free base) 同仁化学研究所

取扱条件

規格
性状： 本品は、黄色液体である。
含量： 試験適合
取扱条件
保存条件: 冷蔵,遮光
SDSダウンロード
核染色用色素 | CAS 23491-52-3(Hoechst 33342:free base) 同仁化学研究所

関連製品

死細胞染色色素 -Cellstain®- PI | CAS 25535-16-4 同仁化学研究所

发表于由

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死細胞染色色素 -Cellstain®- PI | CAS 25535-16-4 同仁化学研究所–Cellstain®– PI

03 分子生物学関連試薬
05 細胞染色用色素

–Cellstain®– PI

死細胞染色色素 -Cellstain®- PI | CAS 25535-16-4 同仁化学研究所

  • 分子生物学関連試薬
  • 細胞染色用色素

死細胞染色色素

  • 製品コード
    P346　 –Cellstain®– PI
  • CAS番号
    25535-16-4
  • 化学名
    3,8-Diamino-5-[3-(diethylmethylammonio)propyl]-6-phenylphenanthridinium diiodide
  • 分子式・分子量
    C27H34I2N4=668.39
容　量 メーカー希望
小売価格		 富士フイルム
和光純薬
1 mg ￥5,500 343-07461

【注意】
–Cellstain®– PIは、通常、チューブ底面にフィルム状に付着した状態となっております。
稀に、輸送中の振動等により本品がチューブ底面から外れ、チューブ壁面やキャップ裏に付着している場合がございます。
内容物を下に落としてから開封をしてご使用ください。
ご不明な点がございましたら、小社カスタマーリレーション部までお問合せください。（Free Dial：0120-489-548）

死細胞染色色素 -Cellstain®- PI | CAS 25535-16-4 同仁化学研究所

  • 死細胞染色色素 -Cellstain®- PI | CAS 25535-16-4 同仁化学研究所
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マニュアル

  • プロトコル 死細胞染色色素 -Cellstain®- PI | CAS 25535-16-4 同仁化学研究所 細胞を染色したい
    死細胞染色色素 -Cellstain®- PI | CAS 25535-16-4 同仁化学研究所
  • パンフレット 死細胞染色色素 -Cellstain®- PI | CAS 25535-16-4 同仁化学研究所 細胞増殖測定 細胞染色プロトコル
    死細胞染色色素 -Cellstain®- PI | CAS 25535-16-4 同仁化学研究所

参考文献

参考文献を表示する

1) I. W. Taylor and B. K. Milthorpe, "An Evaluation of DNA Fluochromes, Staining Techniques, and Analysis for Flow Cytometry. I. Unperturebed Cellpopulations", J. Histochem. Cytochem., 1980, 28(11), 1224.
2) W. M. J. Vuist, F. V. Buitenen, M. A. De Rie, A. Hekman, P. Ruemke and C. J. M. Melief, "Potentiation by Interleukin 2 of Burkitt's Lymphoma Therapy with Anti-Pan B (Anti-CD19) Monoclonal Antibodies in a Mouse Xenotransplantation Model", Cancer Res., 1989, 49, 3783.
3) A. K. El-Naggar, J. G. Batsakis, K. Teague, L. Garnsey and B. Barlogie, "Single- and Double-stranded RNA Measurements by Flow Cytometry in Solid Neoplasms", Cytometry, 1991, 12, 330.
4) C. Souchier, M. Ffrench, M. Benchaib, R. Catallo and P. A. Bryon, "Methods for Cell Proloferation Analysis by Fluorescent Image Cytometry", Cytometry, 1995, 20, 203.
5) T. Irino, T. Kitoh, K. Koami, T. Kashima, K. Mukai, E. Takeuchi, T. Hongo, T. Nakahata, S. M. Schuster and M. Osaka, "Establishment of Real-Time Polymerase Chain Reaction Method for Quantitative Analysis of Asparagine Synthetase Expression", Mol. Diagn., 2004, 6, 217.

よくある質問

Q

核染色剤に使用される色素の特徴、違いは何でしょうか？

A

ここで紹介している色素は核酸との相互作用により蛍光を発するか、蛍光強度が強くなる特徴があります。
蛍光波長以外の違いとしては下記の点がございます。

【EB】
塩基特異性は無く、全DNA,RNAに結合します。
生細胞の膜透過性がなく、死細胞を染色します。

【PI】
EBと同様に塩基特異性はありません。インターカレーションした時の蛍光強度が
EBより高いため、より広く使用される色素です。
生細胞の膜透過性がなく、死細胞を染色します。

【DAPI】
２重鎖の副溝(minor groove)と結合します。アデニン-チミジンクラスターに高い結合性を持っています。
生細胞の膜透過性がなく、死細胞を染色します。

【AO】
２重鎖にインターカレーションしたときと、単鎖のリン酸に結合した時では蛍光波長が異なることを
利用して、２重鎖と単鎖を区別して検出できます。
生細胞の細胞膜を透過します。

【Hoechst33342､33258】
DNAのアデニン-チミジン部に特異的に結合します。
生細胞の細胞膜を透過し、生細胞のDNAを染色できる色素です。

Q

細胞染色色素の励起と蛍光の波長を教えて下さい。

A

死細胞染色色素 -Cellstain®- PI | CAS 25535-16-4 同仁化学研究所

＊AOはフローサイトメトリーなどでは488 nm励起で観察されることもあります

Q

PIの使用方法を教えてください。

A

下記に例を示します。細胞の種類、観察条件により細胞の固定や試薬濃度を検討してください。

【使用例①】

Vollenweiderらはリンフォカイン活性化キラー(LAK)細胞の増殖アッセイにおいて、PI染色を行い、蛍光プレートリーダーを用いて測定している。
その時の濃度はストック溶液で 0.5 mg/mL PBS(-) 。使用濃度は 5 μg/mL クエン酸ナトリウム溶液を用い、1well当たり100 μL使用して蛍光染色している。
・I.Vollenweider, P.Groscurth, J.Immunol.Methods, 149, 133(1992).

【使用例②】

(1) 固形腫瘍あるいはcluster を含むサンプルについては、0.02% tripsin EDTAにて処理。

     37℃にて30分間インキュベート後、1500rpmで5分間行い、上清を捨てる。

(2) -20℃の50% メタノールにて固定後、1500rpmで5分間行い、上清を捨てる。

(3) -20℃の30% メタノールにて洗浄後、1500rpmで5分間行い、上清を捨てる。

(4) 0.2 mol/L phosphate buffer(pH7.2)にて洗浄後、1500rpmで5分間行い、上清を捨てる。

(5) RNaseの0.2 mol/L phosphate buffer(pH7.2)溶液(1mg/mL)を細胞106個あたり

     0.2 mL加え、37℃にて30分間インキュベートする。

(6) 0.2 mol/L phosphate にて洗浄後、1500rpmで5分間行い、上清を捨てる。

(7) PI溶液(50 μg/mL)を10mL加え、4℃にて2時間、遮光の上染色を行う。

・”フローサイトメトリー入門”より、医学書院発行

Q

EBやPIを使用した際の廃棄物があります。処理はどのようにすればよいですか？

A

＊施設によりガイドラインが定められている場合があります。ガイドラインがある場合にはそれに従って下さい。

廃液は排水処理設備がある場合には、排水として流してください。処理設備がない場合、排水は貯めておいて処理業者に依頼してください。

染色したゲルなどは乾燥して、焼却処分してください。

蛍光性物質を分解する場合には下記のような方法もあります。
・UV照射や日光にさらし分解する。
・次亜塩素酸ナトリウムにより酸化分解後、中和処理する。

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取扱条件

規格
性状： 本品は、赤褐色粉末又は固体で水及び希塩酸に溶ける。
水溶状： 試験適合
NMRスペクトル： 試験適合
取扱条件
保存条件: 冷蔵,遮光
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美国Millipore密理博 硝酸纤维素膜（NC膜系列）Hi-Flow Plus 180HF18002S20

发表于由

美国Millipore密理博 硝酸纤维素膜（NC膜系列）Hi-Flow Plus 180

简要描述：

美国Millipore密理博 硝酸纤维素膜（NC膜系列）Hi-Flow Plus 180,货号：HF18002S20；宽2.0cm，长：100m，Millipore 180硝酸纤维素膜

详情：

描述
产品编号 HF18002S20
品牌 Hi-Flow Plus
描述 Hi-Flow Plus 180 4mil Backing Master Roll slit width 2.0cm
概述 Full Master roll (30.5cm wide) of Hi-Flow Plus Cellulose Ester membranes with nominal capillary flow time of 180 seconds/4 cm slit to stated width
应用 Lateral Flow, Assay Development, lateral flow immunoassays, lateral flow assay device, Immunoassay IVDs
宽度 2.0cm
长度 100 m (328 ft.)

 

死細胞染色色素 -Cellstain®- PI solution | CAS 25535-16-4(PI) 同仁化学研究所

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03 分子生物学関連試薬
05 細胞染色用色素

–Cellstain®– PI solution

死細胞染色色素 -Cellstain®- PI solution | CAS 25535-16-4(PI) 同仁化学研究所

  • 分子生物学関連試薬
  • 細胞染色用色素

死細胞染色色素

  • 製品コード
    P378　 –Cellstain®– PI solution
  • CAS番号
    25535-16-4(PI)
  • 化学名
    3,8-Diamino-5-[3-(diethylmethylammonio)propyl]-6-phenylphenanthridinium diiodide, solution
  • 分子式・分子量
    C27H34I2N4=668.39
容　量 メーカー希望
小売価格		 富士フイルム
和光純薬
1 ml ￥6,600 341-07881

死細胞染色色素 -Cellstain®- PI solution | CAS 25535-16-4(PI) 同仁化学研究所

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  • プロトコル 死細胞染色色素 -Cellstain®- PI solution | CAS 25535-16-4(PI) 同仁化学研究所 細胞を染色したい
    死細胞染色色素 -Cellstain®- PI solution | CAS 25535-16-4(PI) 同仁化学研究所
  • パンフレット 死細胞染色色素 -Cellstain®- PI solution | CAS 25535-16-4(PI) 同仁化学研究所 細胞増殖測定 細胞染色プロトコル
    死細胞染色色素 -Cellstain®- PI solution | CAS 25535-16-4(PI) 同仁化学研究所

参考文献

参考文献を表示する

1) I. W. Taylor and B. K. Milthorpe, "An Evaluation of DNA Fluochromes, Staining Techniques, and Analysis for Flow Cytometry. I. Unperturebed Cellpopulations", J. Histochem. Cytochem., 1980, 28(11), 1224.
2) W. M. J. Vuist, F. V. Buitenen, M. A. De Rie, A. Hekman, P. Ruemke and C. J. M. Melief, "Potentiation by Interleukin 2 of Burkitt's Lymphoma Therapy with Anti-Pan B (Anti-CD19) Monoclonal Antibodies in a Mouse Xenotransplantation Model", Cancer Res., 1989, 49, 3783.
3) A. K. El-Naggar, J. G. Batsakis, K. Teague, L. Garnsey and B. Barlogie, "Single- and Double-stranded RNA Measurements by Flow Cytometry in Solid Neoplasms", Cytometry, 1991, 12, 330.
4) C. Souchier, M. Ffrench, M. Benchaib, R. Catallo and P. A. Bryon, "Methods for Cell Proloferation Analysis by Fluorescent Image Cytometry", Cytometry, 1995, 20, 203.
5)T. Yamazaki, H. Suzuki, S. Yamada, K. Ohshio, M. Sugamata, T. Yamada and Y. Morita, "Lactobacillus paracasei KW3110 Suppresses Inflammatory Stress-Induced Premature Cellular Senescence of Human Retinal Pigment Epithelium Cells and Reduces Ocular Disorders in Healthy Humans”, Int J Mol Sci, 2020, 21(14), 5091

よくある質問

Q

核染色剤に使用される色素の特徴、違いは何でしょうか？

A

ここで紹介している色素は核酸との相互作用により蛍光を発するか、蛍光強度が強くなる特徴があります。
蛍光波長以外の違いとしては下記の点がございます。

【EB】
塩基特異性は無く、全DNA,RNAに結合します。
生細胞の膜透過性がなく、死細胞を染色します。

【PI】
EBと同様に塩基特異性はありません。インターカレーションした時の蛍光強度が
EBより高いため、より広く使用される色素です。
生細胞の膜透過性がなく、死細胞を染色します。

【DAPI】
２重鎖の副溝(minor groove)と結合します。アデニン-チミジンクラスターに高い結合性を持っています。
生細胞の膜透過性がなく、死細胞を染色します。

【AO】
２重鎖にインターカレーションしたときと、単鎖のリン酸に結合した時では蛍光波長が異なることを
利用して、２重鎖と単鎖を区別して検出できます。
生細胞の細胞膜を透過します。

【Hoechst33342､33258】
DNAのアデニン-チミジン部に特異的に結合します。
生細胞の細胞膜を透過し、生細胞のDNAを染色できる色素です。

Q

細胞染色色素の励起と蛍光の波長を教えて下さい。

A

死細胞染色色素 -Cellstain®- PI solution | CAS 25535-16-4(PI) 同仁化学研究所

＊AOはフローサイトメトリーなどでは488 nm励起で観察されることもあります

Q

固定化後に染色すると、核が染まらないのですが何か対策はありますか？

A

固定化および膜透過処理の条件によっては核が染まらないことがあります。
その際は、処理条件をご検討頂く必要があります。

なお、PFA（パラホルムアルデヒド）固定化処理を長時間することで、核が染まらない事例がございます。
下記、弊社での事例を参考に固定化および膜透過処理の条件をご検討ください。

○PIで核を染色できた処理条件
使用細胞 ： HeLa細胞
固定化処理：4% PFA/PBSにて5分間インキュベート
膜透過処理：1% Triton X-100/PBSにて20分間インキュベート

上記処理後に、PI solution 30 μg/mLにて染色して観察

○PI染色後、核が染まらない結果となった条件
使用細胞 ： HeLa細胞
固定化処理：2% PFA/PBSにて60分間インキュベート
膜透過処理：1% NP-40/PBSにて60分間インキュベート

上記処理後に、PI solution 30 μg/mLにて染色して観察

Q

PIの使用方法を教えてください。

A

下記に例を示します。細胞の種類、観察条件により細胞の固定や試薬濃度を検討してください。

【使用例①】

Vollenweiderらはリンフォカイン活性化キラー(LAK)細胞の増殖アッセイにおいて、PI染色を行い、蛍光プレートリーダーを用いて測定している。
その時の濃度はストック溶液で 0.5 mg/mL PBS(-) 。使用濃度は 5 μg/mL クエン酸ナトリウム溶液を用い、1well当たり100μL使用して蛍光染色している。
・I.Vollenweider, P.Groscurth, J.Immunol.Methods, 149, 133(1992).

【使用例②】

(1) 固形腫瘍あるいはcluster を含むサンプルについては、0.02% tripsin EDTAにて処理。

     37℃にて30分間インキュベート後、1500rpmで5分間行い、上清を捨てる。

(2) -20℃の50% メタノールにて固定後、1500rpmで5分間行い、上清を捨てる。

(3) -20℃の30% メタノールにて洗浄後、1500rpmで5分間行い、上清を捨てる。

(4) 0.2 mol/L phosphate buffer(pH7.2)にて洗浄後、1500rpmで5分間行い、上清を捨てる。

(5) RNaseの0.2 mol/L phosphate buffer(pH7.2)溶液(1 mg/mL)を細胞106個あたり

     0.2 mL加え、37℃にて30分間インキュベートする。

(6) 0.2 mol/L phosphate にて洗浄後、1500rpmで5分間行い、上清を捨てる。

(7) PI溶液(50 μg/mL)を10mL加え、4℃にて2時間、遮光の上染色を行う。

・”フローサイトメトリー入門”より、医学書院発行

Q

EBやPIを使用した際の廃棄物があります。処理はどのようにすればよいですか？

A

＊施設によりガイドラインが定められている場合があります。ガイドラインがある場合にはそれに従って下さい。

廃液は排水処理設備がある場合には、排水として流してください。下記方法により分解して、廃水処理すればより安全です。

・UV照射や日光にさらし分解する。
・次亜塩素酸ナトリウム等により酸化分解する。

処理設備がない場合、分解し、廃水を貯めておいて処理業者に依頼してください。

染色したゲルなどは乾燥して、焼却処分してください。

死細胞染色色素 -Cellstain®- PI solution | CAS 25535-16-4(PI) 同仁化学研究所 死細胞染色色素 -Cellstain®- PI solution | CAS 25535-16-4(PI) 同仁化学研究所

取扱条件

規格
性状： 本品は、橙色～赤色液体の凍結品である。
含量： 試験適合
取扱条件
保存条件: 冷凍,遮光
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死細胞染色色素 -Cellstain®- PI solution | CAS 25535-16-4(PI) 同仁化学研究所

関連製品

分子生物学関連試薬-Agarose Agarose-I | CAS 9012-36-6 同仁化学研究所

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分子生物学関連試薬-Agarose Agarose-I | CAS 9012-36-6 同仁化学研究所Agarose-I

03 分子生物学関連試薬
05 細胞染色用色素
14 キレート試薬

Agarose-I

  • 分子生物学関連試薬
  • 細胞染色用色素
  • 細胞染色用色素
  • キレート試薬
  • キレート試薬

分子生物学関連試薬-Agarose

  • 製品コード
    A003　 Agarose-I
  • CAS番号
    9012-36-6
  • 化学名
    Agarose
容　量 メーカー希望
小売価格		 富士フイルム
和光純薬
25 g ￥9,500 346-00072
100 g ￥26,600 344-00073
試験成績書

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マニュアル

  • プロトコル 分子生物学関連試薬-Agarose Agarose-I | CAS 9012-36-6 同仁化学研究所 核酸を検出したい
    分子生物学関連試薬-Agarose Agarose-I | CAS 9012-36-6 同仁化学研究所

取扱条件

規格
性状： 本品は、白色～灰黄白色粉末である。
水溶状： 試験適合
強熱残分(硫酸塩)： 1.0％ 以下
硫黄含量： 0.30％ 以下
ゲル強度： 800 g/cm2 以上
取扱条件
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分子生物学関連試薬-Agarose Agarose-I | CAS 9012-36-6 同仁化学研究所

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分子生物学関連試薬-Agarose Agarose 900 | CAS 9012-36-6 同仁化学研究所Agarose 900

03 分子生物学関連試薬

Agarose 900

  • 分子生物学関連試薬

分子生物学関連試薬-Agarose

  • 製品コード
    A426　 Agarose 900
  • CAS番号
    9012-36-6
  • 化学名
    Agarose
容　量 メーカー希望
小売価格		 富士フイルム
和光純薬
25 g ￥9,500 341-07842
試験成績書

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マニュアル

  • プロトコル 分子生物学関連試薬-Agarose Agarose 900 | CAS 9012-36-6 同仁化学研究所 電気泳動で核酸を分離したい
    分子生物学関連試薬-Agarose Agarose 900 | CAS 9012-36-6 同仁化学研究所

取扱条件

規格
性状： 本品は、白色～灰黄白色粉末である。
水溶状： 試験適合
強熱残分(硫酸塩)： 1.0％ 以下
乾燥減量(80℃)： 22.0％ 以下
硫黄含量： 0.30％ 以下
ゲル強度： 800 g/cm2 以上
凝固温度： 35～40℃
融解温度： 87～91℃
DNase活性： 不検出
RNase活性： 不検出
バックグラウンド試験： 試験適合
取扱条件
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分子生物学関連試薬-Agarose Agarose 900 | CAS 9012-36-6 同仁化学研究所

関連製品

分子生物学関連試薬-Agarose Agarose 1500 | CAS 9012-36-6 同仁化学研究所

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分子生物学関連試薬-Agarose Agarose 1500 | CAS 9012-36-6 同仁化学研究所Agarose 1500

03 分子生物学関連試薬

Agarose 1500

  • 分子生物学関連試薬

分子生物学関連試薬-Agarose

  • 製品コード
    A427　 Agarose 1500
  • CAS番号
    9012-36-6
  • 化学名
    Agarose
容　量 メーカー希望
小売価格		 富士フイルム
和光純薬
100 g ￥26,600 346-07831
試験成績書

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マニュアル

  • プロトコル 分子生物学関連試薬-Agarose Agarose 1500 | CAS 9012-36-6 同仁化学研究所 電気泳動で核酸を分離したい
    分子生物学関連試薬-Agarose Agarose 1500 | CAS 9012-36-6 同仁化学研究所

取扱条件

規格
性状： 本品は、白色～灰黄白色粉末である。
水溶状： 試験適合
強熱残分(硫酸塩)： 1.0％ 以下
乾燥減量(80℃)： 20.0％ 以下
硫黄含量： 0.30％ 以下
ゲル強度： 1400 g/cm2 以上
凝固温度： 35～40℃
融解温度： 91～95℃
DNase活性： 不検出
RNase活性： 不検出
バックグラウンド試験： 試験適合
取扱条件
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分子生物学関連試薬-Agarose Agarose 1500 | CAS 9012-36-6 同仁化学研究所

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生体高分子機能解析用試薬 FeBABE | CAS 186136-50-5 同仁化学研究所

发表于由

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生体高分子機能解析用試薬 FeBABE | CAS 186136-50-5 同仁化学研究所FeBABE

03 分子生物学関連試薬
09 二価性試薬

FeBABE

生体高分子機能解析用試薬 FeBABE | CAS 186136-50-5 同仁化学研究所

  • 分子生物学関連試薬
  • 二価性試薬

生体高分子機能解析用試薬

  • 製品コード
    F279　 FeBABE
  • CAS番号
    186136-50-5
  • 化学名
    1-(p-Bromoacetamidobenzyl)ethylenediamine-N,N,N’,N’-tetraacetic acid, iron(III)
  • 分子式・分子量
    C19H21BrFeN3O9=571.13
容　量 メーカー希望
小売価格		 富士フイルム
和光純薬
1 mg ￥18,300 345-08641
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溶解例

緩衝溶液、DMSOに可溶

参考文献

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1) L. H. DeRiemer, C. F. Meares, D. A. Goodwin and C. I. Diamanti, "BLEDTA II: Synthesis of a New Tumer-Visualizing Derivative of Co(III)-bleomycin", J. Labelled Compd. Radiopharm., 1981, 18, 1517.
2) T. M. Rana and C. F. Meares, "Specific Cleavage of a Protein by an Attached Iron Chelate", J. Am. Chem. Soc., 1990, 112, 2457. 
3) T. M. Rana and C. F. Meares, "Transfer of Oxigen from an artificial protease to peptide carbon during proteolysis", Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1991, 88, 10578. 
4) D. P. Greiner, R. Miyake, J. K. Moran, A. D. Jones, T. Negishi, A. Ishihama and C. F. Meares, "Synthesis of the Protein Cutting Reagent Iron (S)-1-(p-Bromoacetamidobenzyl)ethylebediaminetetraacetate and Conjuation to cysteine Sie Cahins", Bioconjugate Chem., 1997, 8, 44. 
5) E. Platis, M. R. Ermacora and R. O. Fox, "Oxidative Polypeptide Cleavage Mediated by EDTA-Fe Covalently Linked to Cysteine Residue", Biochemistry, 1993, 32, 12761.
6) S. L. Traviglia, S. A. Datwyler, D. Yan, A. Ishihama and C. F. Meares, "Targeted Protein Footprinting: Where Different Transcription Factors bind to RNA Polymerase", Biochemistry, 1999, 38, 4259.
7) J. B. Ghaim, D. P. Greiner, C. F. Meares and R. B. Gennis, "Proximity Mapping the suface of Membrane Protein Using an Artificial Protease: Demonstration That the Quinone-Binding Domain of Subunit I Is near the N-Terminal Region of Subunit II of Cytochrome bd", Biochemistry, 1995, 34, 11311.
8) R. Miyake, K. Murakami, J. T. Owens, D. P. Greiner, O. N. Ozoline, A. Ishihama and C. F. Meares, "Dimeric Association of Escherichia coli RNA Polymerase alfa subunits, studied by Cleavage of Single-Cysteine alfa Sununits Conjugated to Iron-(S)-1-(p-(Bromoacetamido)benzyl)ethylenediaminetetraacetate", Biochemistry, 1998, 37, 1344.
9) J. T. Owens, R. Miyake, K. Murakami, A. J. Chmura, N. Fujita, A. Ishihama and C. F. Meares, "Mapping the sigma70 subunits contact sites on Escherichia coli RNA polymerase with a sigma70-conjugated chemical protease", Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1998, 95, 6021.
10) J. A. Bown, J. T. Owens, C. F. Meares, N. Fujita, A. Ishihama, S. J. Busby and S. D. Minchin, "Organization of open complexes at Escherichia coli promoters. Location of promoter DNA sites close to region 2.5 of the sigma70 subunit of RNA polymerase", J. Biol. Chem., 1999, 274, 2263.
11) F. Colland, N. Fujita, D. Kotlarz, J. A. Bown, C. F. Meares, A. Ishihama and A. Kolb, "Positioning of sigma(S), the stationary phase sigma factor, in Escherichia coli RNA polymerase-promoter open complexes", EMBO J., 1999, 18, 4049.
12) G. M. Heilek, R. Marusak, C. F. Meares and H. F. Noller, "Directed hydroxyl radical probing of 16S rRNA using Fe(II) tethered to ribosomal protein S4", Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1995, 92, 1113.
13) G. M. Heilek and H. F. Noller, "Site-directed hydroxyl radical probing of the rRNA neighborhood of ribosomal protein S5", Science, 1996, 272, 1659.
14) K. R. Lieberman and H. F. Noller, "Ribosomal protein L15 as a probe of 50 S ribosomal subunit structure.", J. Mol. Biol., 1998, 284, 1367.

取扱条件

規格
性状： 本品は、黄褐色粉末である。
純度(HPLC)： 95.0％ 以上
水溶状： 試験適合
取扱条件
保存条件: 冷凍 , 取扱条件: 吸湿注意
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β-galactosidaseの検出試薬 SPiDER-βGal | CAS 1824699-57-1 同仁化学研究所

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03 分子生物学関連試薬

SPiDER-βGal

β-galactosidaseの検出試薬 SPiDER-βGal | CAS 1824699-57-1 同仁化学研究所

  • 分子生物学関連試薬
  • 細胞機能解析
  • 細胞老化

β-galactosidaseの検出試薬

  • 製品コード
    SG02　 SPiDER-βGal
  • CAS番号
    1824699-57-1
  • 化学名
    (2S,3R,4S,5R,6R)-2-{[3′-(Diethylamino)-5′-(fluoromethyl)-3H-spiro(isobenzofuran-1,9′-xanthen)-6′-yl]oxy}-6-(hydroxymethyl)tetrahydro-2H-pyran-3,4,5-triol
  • 分子式・分子量
    C31H34FNO8=567.60
容　量 メーカー希望
小売価格		 富士フイルム
和光純薬
20 μg x 3 ￥49,100 343-09161
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マニュアル

  • 取扱説明書 日本語
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  • Manual English
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  • アプリケーション β-ガラクトシダーゼ検出試薬（基質）の選択ガイド – 発生学 –
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  • 試薬選択ガイド β-ガラクトシダーゼ検出試薬（基質）の選択ガイド
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  • 試薬選択ガイド β-ガラクトシダーゼ検出試薬の比較データ
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技術情報

原理

β-galactosidaseの検出試薬 SPiDER-βGal | CAS 1824699-57-1 同仁化学研究所

図1 SPiDER-βGalの細胞染色原理
SPiDER-βGal は生細胞膜を透過した後、細胞中のβ-galactosidaseによる酵素反応を受け、その中間体はタンパク質中の求核性基と共有結合を形成することで細胞内に滞留する。
 

参考文献

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文献No. 対象サンプル 装置 引用(リンク)
1 細胞・組織
(腸管幹細胞・幼虫の翼盤)		 蛍光顕微鏡 T. Doura, M. Kamiya, F. Obata, Y. Yamaguchi, T. Y. Hiyama, T. Matsuda, A. Fukamizu, M. Noda, M. Miura, Y. Urano, "Detection of LacZ-Positive Cells in Living Tissue with Single-Cell Resolution.", Angew Chem Int Ed Engl., 2016, doi: 10.1002/anie.201603328.
2 細胞
(内分泌細胞)		 蛍光顕微鏡 H. Omori, S. Ogaki, D. Sakano, M. Sato, K. Umeda, N. Takeda, N. Nakagata, S. Kume, "Changes in expression of C2cd4c in pancreatic endocrine cells during pancreatic development.", FEBS Lett., 2016, doi: 10.1002/1873-3468.12271.
3 細胞
(SHIN3; SKOV3; OVCAR3)		 蛍光顕微鏡/フローサイトメーター Y. Nakamura, A. Mochida, T. Nagaya, S. Okuyama, F. Ogata, P. L. Choyke, H. Kobayashi, "A topically-sprayable, activatable fluorescent and retaining probe, SPiDER-βGal for detecting cancer; Advantages of anchoring to cellular proteins after activation", Oncotarget., 2017, doi: 10.18632/oncotarget.17080.
4 組織
(マウス腎臓)		 蛍光顕微鏡 S. Lu, S. Liu, A. Wietelmann, B. Kojonazarov, A. Atzberger, C. Tang, R. T. Schermuly, H. J. Gröne, S. Offermanns, "Developmental vascular remodeling defects and postnatal kidney failure in mice lacking Gpr116 (Adgrf5) and Eltd1 (Adgrl4)", PLoS ONE., 2017, 10.1371/journal.pone.0183166.
5 組織
(マウス脂肪組織)		 蛍光顕微鏡 T. Sugizaki, S. Zhu, G. Guo, A. Matsumoto, J. Zhao, M. Endo, H. Horiguchi, J. Morinaga, Z. Tian, T. Kadomatsu, K. Miyata, H. Itoh & Y. Oike, "Treatment of diabetic mice with the SGLT2 inhibitor TA-1887 antagonizes diabetic cachexia and decreases mortality", NPJ Aging Mech Dis., 2017, DOI:10.1038/s41514-017-0012-0.
6 細胞
(VZ/SVZ)		 フローサイトメーター Y. Nakatani, H. Kiyonari and T. Kondo, "Ecrg4 deficiency results in extended replicative capacity of neural stem cells in a Foxg1-dependent manner", Development., 2019, doi: 10.1242/dev.168120.
7 細胞
(アフリカツメガエル; 卵母細胞)		 蛍光顕微鏡 A. A.Tokmakov AA　and K. I. Sato, "Activity and intracellular localization of senescence-associated β-galactosidase in aging Xenopus oocytes and eggs.", Exp. Gerontol.., 2019, 119, 157.
8 細胞
(マウス初代平滑筋細胞)		 蛍光顕微鏡/フローサイトメーター Y. Han, T. Bedarida, Ye Ding, Q. Wang, P. Song, and M. H. Zou, "β-Hydroxybutyrate Prevents Vascular Senescence through hnRNP A1-Mediated Upregulation of Oct4", Molecular Cell., 2019, 71, 1064–1078.
9 細胞
(内皮細胞)		 蛍光顕微鏡 A. J. Barinda, K. Ikeda, D. B. Nugroho, D. A. Wardhana, N. Sasaki, S. Honda, R. Urata, S. Matoba, K. Hirata and N. Emoto, "Endothelial progeria induces adipose tissue senescence and impairs insulin sensitivity through senescence associated secretory phenotype", Nat. Commun., 2020, 11, 481.
10 組織
(マウス筋組織)		 蛍光顕微鏡 Y. Saito, T. Chikenji, T. Matsumura, M. Nakano, and M. Fujimiya, "Exercise enhances skeletal muscle regeneration by promoting senescence in fibro-adipogenic progenitors", Nat. Commun., 2020, doi:10.1038/s41467-020-14734-x.
11 細胞
(ヒト臍帯静脈内皮細胞)		 フローサイトメーター M. Suda, I. Shimizu, G. Katsuumi, Y. Yoshida, Y. Hayashi, R. Ikegami, N. Matsumoto, Y. Yoshida, R. Mikawa, A. Katayama, J. Wada, M. Seki, Y. Suzuki, A. Iwama, H. Nakagami, A. Nagasawa, R. Morishita, M. Sugimoto, S. Okuda, M. Tsuchida, K. Ozaki, M. Nakanishi-Matsui and T. Minamino, "Senolytic vaccination improves normal and pathological age-related phenotypes and increases lifespan in progeroid mice", Nature Aging, 2021, doi:10.1038/s43587-021-00151-2.
12 細胞
(MG63 cells)		 蛍光顕微鏡 H. Nakashima, M. Yasunaga, M. Yoshida, M. Yamaguchi, S. Takahashi, H. Kajiya, S. Tamaoki, and J. Ohno, "Low Concentration of Etoposide Induces Enhanced Osteogenesis in MG63 Cells via Pin1 Activation", J. Hard Tissue Biol., 2021, doi:10.2485/jhtb.30.175.
13 細胞
(マウス筋肉細胞)		 蛍光顕微鏡 V. Moiseeva, A. Cisneros, V. Sica, O. Deryagin, Y. Lai, S. Jung, E. Andres, J. An, J. Segales, L. Ortet, V. Lukesova, G. Volple, A. Benguria, A. Dopazo, S. Aznar-Benitah, Y. Urano, A. d. Sol, M. A. Esteban, Y. Ohkawa, A. L. Serrano, E. Perdiguer & P. Munoz-Canoves, "Senescence atlas reveals an aged-like inflamed niche that blunts muscle regeneration", Nature, 2022, doi:10.1038/s41586-022-05535-x.

 

 

 

よくある質問

Q

既存法に対する利点を教えてください。また、既存法との相関性はありますか？

A

①生細胞に適用できます。同様に生細胞に適用できるGFP融合タンパク質発現細胞を用いて相関性があることを確認しました。
②GFP法と比べて固定化後も蛍光観察ができます。
③既存の低分子β-ガラクトシダーゼ蛍光検出試薬と比較して、「細胞膜透過性」及び「細胞内滞留性」が優れるため、β-ガラクトシダーゼ発現細胞のみを一細胞レベルで染色できます。

Q

Working solutionは、Hanks’ HEPES以外でも調製できますか？

A

PBS, HBSSなどが使用できます。

Q

Working solutionは、どのくらい安定ですか？

A

保存できません。調整した日のうちに使用してください。

Q

フローサイトメーターで使用可能ですか？

A

使用できます。β-ガラクトシダーゼ発現および未発現のHEK細胞の混合試料をフローサイトメーターで測定して、測り分けすることができました。取扱説明書に手順と条件を記載しています。

Q

固定後、試料の染色はできますか？

A

可能です。 4%パラホルムアルデヒドやメタノールで固定化しても蛍光観察ができます。固定化によりβ-ガラクトシダーゼ活性は低下しますので、固定化条件の検討を行ってください。

Q

推奨フィルターを教えてください。

A

以下のフィルターを推奨します。
・蛍光顕微鏡：　励起（500-540 nm）, 蛍光（500-540 nm）
・フローサイトメーター：　励起（488 nm）, 蛍光（500-540 nm）

取扱説明書の「励起/蛍光スペクトル」及び「上記フィルターを用いた蛍光顕微鏡測定例」もご参考ください。

Q

染色後、試料の固定はできますか？

A

可能です。 4%パラホルムアルデヒドやメタノールで固定化しても蛍光観察ができます。

Q

組織染色は可能ですか？

A

可能です。細胞染色と比べてWorking solution濃度を高くして染色条件をご検討ください（10-20 μmol/Lを目安）。

β-galactosidaseの検出試薬 SPiDER-βGal | CAS 1824699-57-1 同仁化学研究所 β-galactosidaseの検出試薬 SPiDER-βGal | CAS 1824699-57-1 同仁化学研究所

取扱条件

規格
性状： 本品は赤色～赤紫色固体でアセトニトリル及びジメチルスルホキシドに溶ける。
純度(HPLC)： 85.0％ 以上
NMRスペクトル： 試験適合
蛍光スペクトル： 試験適合
取扱条件
保存条件: 冷蔵
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    Mitophagy Detection Kit

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    細胞毒性測定キット

    Cytotoxicity LDH Assay Kit-WST

生化学用緩衝剤: pH 6.8 – 8.2 HEPES 分子生物学用 | CAS 7365-45-9 同仁化学研究所

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生化学用緩衝剤: pH 6.8 - 8.2 HEPES 分子生物学用 | CAS 7365-45-9 同仁化学研究所HEPES 分子生物学用

03 分子生物学関連試薬
13 生化学用緩衝剤

HEPES 分子生物学用

生化学用緩衝剤: pH 6.8 - 8.2 HEPES 分子生物学用 | CAS 7365-45-9 同仁化学研究所

  • 分子生物学関連試薬
  • 生化学用緩衝剤

生化学用緩衝剤: pH 6.8 – 8.2

  • 製品コード
    GB70　 HEPES 分子生物学用
  • CAS番号
    7365-45-9
  • 化学名
    2-[4-(2-Hydroxyethyl)-1-piperazinyl]ethanesulfonic acid
  • 分子式・分子量
    C8H18N2O4S=238.31
容　量 メーカー希望
小売価格		 富士フイルム
和光純薬
20 g ￥2,900 340-08233
100 g ￥11,200 344-08231
500 g ￥40,300 346-08235

【別名】
2-[4-(2-ヒドロキシエチル)-1-ピペラジニル]エタンスルホン酸、N-(2-ヒドロキシエチル)ピペラジン-N′-(2-エタンスルホン酸)、4-(2-ヒドロキシエチル)ピペラジン-1-エタンスルホン酸

生化学用緩衝剤: pH 6.8 - 8.2 HEPES 分子生物学用 | CAS 7365-45-9 同仁化学研究所

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溶解例

11.92 g/50 ml（水）

よくある質問

Q

試薬が容器内で固まっていますが、品質に影響はありますか？

A

品質に問題はございません。保存期間中に吸湿等の要因で固まる場合がありますので、金属製の薬さじ等を用いて固まりを崩してご使用ください。
なお、容器を振って固まりを崩すと、固まりで容器の内側が削られて、水に溶解した際に不溶物として混入する可能性がありますので、ご注意ください。

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取扱条件

規格
性状： 本品は、白色結晶性粉末で水に溶ける。
純度(滴定)： 99.7％ 以上
水溶状： 試験適合 0.025 以下(320 nm)
乾燥減量(110℃)： 0.20％ 以下
強熱残分(硫酸塩)： 0.10％ 以下
重金属(Pbとして)： 0.0005％ 以下
鉄(Fe)： 0.0005％ 以下
RNase： 不検出
DNase： 不検出
エンドトキシン： 試験適合
IRスペクトル： 試験適合
取扱条件
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美国Merck Millipore密理博Durapore

简要描述：

美国Merck Millipore密理博Durapore PVDF过滤膜 聚偏氟乙烯过滤膜，Durapore 表面滤膜，PVDF，亲水，0.22 µm，293 mm，白色，光面

描述
产品目录编号 GVWP2932A
商名
  • Durapore®
描述 Durapore 表面滤膜，PVDF，亲水，0.22 µm，293 mm，白色，光面

 

产品信息
过滤器代码 GVWP
过滤器颜色 白色
zui高工作温度 85 °C
过滤器类型 表面滤膜

 

应用
应用 除菌过滤生物溶液

 

生物信息
媒质 Durapore®
可湿润性 亲水

 

理化信息
折射系数 1.42
孔径 0.22 µm
23°C时的泡点 ≥3.45
重量分析的提取物（%） 0.5%
孔隙率% 70%
水流量
  • 6.7 mL/min x cm²

 

尺寸
过滤器表面 光面
过滤器直径 (⌀) 293 mm

 

材料信息
化学
  • Hydrophilic PVDF

 

包装信息
数量 25

生化学用緩衝剤: pH 6.5 – 7.9 MOPS 分子生物学用 | CAS 1132-61-2 同仁化学研究所

发表于由

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生化学用緩衝剤: pH 6.5 - 7.9 MOPS 分子生物学用 | CAS 1132-61-2 同仁化学研究所MOPS 分子生物学用

03 分子生物学関連試薬
13 生化学用緩衝剤

MOPS 分子生物学用

生化学用緩衝剤: pH 6.5 - 7.9 MOPS 分子生物学用 | CAS 1132-61-2 同仁化学研究所

  • 分子生物学関連試薬
  • 生化学用緩衝剤

生化学用緩衝剤: pH 6.5 – 7.9

  • 製品コード
    GB71　 MOPS 分子生物学用
  • CAS番号
    1132-61-2
  • 化学名
    3-Morpholinopropanesulfonic acid
  • 分子式・分子量
    C7H15NO4S=209.26
容　量 メーカー希望
小売価格		 富士フイルム
和光純薬
20 g ￥3,300 347-08243
100 g ￥11,200 341-08241
500 g ￥40,700 343-08245

【別名】
3-モルホリノプロパン-1-スルホン酸、4-モルホリンプロパンスルホン酸、3-(N-モルホリノ)プロパンスルホン酸

生化学用緩衝剤: pH 6.5 - 7.9 MOPS 分子生物学用 | CAS 1132-61-2 同仁化学研究所

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溶解例

10.46 g/50 ml（水）

よくある質問

Q

試薬が容器内で固まっていますが、品質に影響はありますか？

A

品質に問題はございません。保存期間中に吸湿等の要因で固まる場合がありますので、金属製の薬さじ等を用いて固まりを崩してご使用ください。
なお、容器を振って固まりを崩すと、固まりで容器の内側が削られて、水に溶解した際に不溶物として混入する可能性がありますので、ご注意ください。

生化学用緩衝剤: pH 6.5 - 7.9 MOPS 分子生物学用 | CAS 1132-61-2 同仁化学研究所 生化学用緩衝剤: pH 6.5 - 7.9 MOPS 分子生物学用 | CAS 1132-61-2 同仁化学研究所

取扱条件

規格
性状： 本品は、白色結晶性粉末で水に溶ける。
純度(滴定)： 99.5％ 以上
水溶状： 試験適合 0.020 以下(300 nm)
乾燥減量(110℃)： 0.30％ 以下
強熱残分(硫酸塩)： 0.10％ 以下
重金属(Pbとして)： 0.0005％ 以下
鉄(Fe)： 0.0005％ 以下
RNase： 不検出
DNase： 不検出
エンドトキシン： 試験適合
IRスペクトル： 試験適合
取扱条件
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