Qiagen 超敏探针RT-PCR试剂盒 分子生物试剂208354

Qiagen 超敏探针RT-PCR试剂盒 分子生物试剂

  • 产品型号:  208354
  • 简单描述
  • Qiagen 超敏探针RT-PCR试剂盒用于快速的cDNA合成和高度可重复性的两步法RT-PCRgDNA Removal Mix可消除gDNA带来的误差内质控可指示cDNA合成的质量高亲和性逆转录酶可实现宽线性范围的cDNA合成
详细介绍

Qiagen 超敏探针RT-PCR试剂盒

du te的QuantiNova Reverse Transcription Kit提供了含有基因组DNA去除方案和内质控的一种快速便捷的cDNA合成方法。gDNA Removal Mix可有效去除RNA样本中的基因组DNA污染,同时内质控RNA可以监测逆转录和扩增反应是否成功。QuantiNova Reverse Transcription Kit提供了快速高效逆转录反应所需的一切。合成的cDNA适用于进行real-time PCR, 可以对任何mRNA区域的靶向序列进行可靠定量。

Performance

du te的gDNA Removal Mix可迅速有效去除RNA样本中的基因组DNA污染。去除基因组DNA污染对于获得精确基因表达结果非常关键,并且在不能设计出RNA特异性的引物时,例如当分析单外显子基因时,也需要去除基因组DNA污染。使用gDNA Removal Buffer可以节省时间和成本,因为不需要在反应中或反应后单独进行DNase消化。 

全新开发的内质控是一种成分明确的转录本(RNA分子),可直接加入您的样本并同时被逆转录为cDNA,可直接反应仪器或相应试剂是否正常,实验构建的体系是否存在错误,以及反应体系中是否存在抑制剂。预期的Cq (CT)范围可以用来确认逆转录和PCR扩增的成功与否,以及实验结果的可重复性。 


Qiagen 超敏探针RT-PCR试剂盒

QuantiNova Reverse Transcriptase的高RNA亲和性确保您可从任何RNA模板获得高产率cDNA。即便是难扩增模板,如高GC含量或含有复杂二级结构的模板,也可被成功进行逆转录反应。Reverse Transcription Mix包含一种特别优化的oligo-dT和随机引物混合物,可以从包括5’区域在内的RNA转录本的任何位置进行cDNA合成。无论扩增靶标位于转录本的哪个位置,该试剂盒均能提供可供real-time PCR分析使用的高产量cDNA。同时对于低表达丰度的基因, 该试剂盒还可提供更高灵敏度的检测能力。 

QuantiNova Reverse Transcription Kit可在较宽的起始量范围内提供精确的结果,在标准的实验方案中起始RNA量可zui高达5 µg,在特殊要求的实验条件下该用量可以加倍。 

Principle

QuantiNova Reverse Transcriptase具有高RNA亲和性,可以在极宽的模板量范围内(10 pg– 5 μg)合成cDNA(见图:5 µg–10 pg起始 RNA的精确定量)。无论扩增靶标位于转录本的哪个位置,该试剂盒可提供用于real-time PCR分析的高产量cDNA。即使难扩增模板,比如高GC含量或含有复杂二级结构的模板,也可被成功进行逆转录反应。QuantiNova RT Buffer经过优化,可兼容real-time PCR缓冲液。

为获得精确的real-time RT-PCR基因表达检测结果,非常重要的一点是保证只有cDNA被扩增和检测到。gDNA Removal Mix可迅速有效的去除基因组DNA干扰(见图:有效去除gDNA污染保证准确定量转录本)。使用gDNA Removal Mix节省了时间和成本,因为不需要在反应中或反应后单独进行DNase消化。同时,也无需设计RNA特异性引物或探针。

检测cDNA合成的差异度可以显示实验结果的可重复性。全新开发的内质控是一种成分明确的转录本(RNA分子),可直接加入您的样本并同时被逆转录为cDNA,可直接反应仪器或相应试剂是否正常,实验构建的体系是否存在错误,以及反应体系中是否存在抑制剂。因为内质控和真实转录本的性质相似,所以它可以在接下来的qPCR实验中用来确认逆转录和PCR扩增的成功与否(见图:内质控可靠检测是否存在抑制剂)。

QuantiNova Reverse Transcription Kit成分  
成分 优势
gDNA Removal Mix 确保在real-time RT-PCR中只检测RNA
Internal Control RNA 确认RT-PCR成功与否
QuantiNova Reverse Transcriptase RNA模板量范围极宽(10 pg – 5 μg RNA)
高灵敏度
QuantiNova RT buffer system 逆转录难扩增模板
RT Primer Mix 从转录本任意区域合成cDNA,包括从5’区

Procedure

使用QuantiNova Reverse Transcription Kit进行基因组DNA去除和cDNA合成仅需20分钟。该试剂盒包含进行快速cDNA合成的所需的一切成分。

纯化后的RNA和gDNA Removal Mix简单孵育即可除去基因组DNA污染。和其它方法不同的是,RNA样本接下来可直接与Reverse Transcription Mix和Reverse Transcription Enzyme的预混液混合,进行逆转录反应。使用QuantiNova Reverse Transcriptase,逆转录反应可以在低温下进行,包括对于复杂的二级结构模板。反应在42°C的温度条件下进行保证了RNA的完整性,并随后在85°C进行酶灭活以终止反应。不需要进行额外的RNA变性或RNase H降解。

Applications

QuantiNova Reverse Transcription Kit可从任何起始材料(包括激光微切割样本或组织活检样本)获得高效及高灵敏度real-time RT-PCR结果。

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