QIAGEN Proteinase K (10 ml)蛋白酶K 分子生物试剂19133

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QIAGEN Proteinase K (10 ml)蛋白酶K 分子生物试剂

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  • QIAGEN Proteinase K (10 ml)蛋白酶KQIAGEN蛋白酶K用于DNA和RNA制备过程中的蛋白酶消化QIAGEN蛋白酶和QIAGEN蛋白酶K在广泛的反应条件下具有高活性的广泛底物特异性
详细介绍

QIAGEN Proteinase K (10 ml)蛋白酶K

QIAGEN蛋白酶K

用于DNA和RNA制备过程中的蛋白酶消化

QIAGEN蛋白酶和QIAGEN蛋白酶K在广泛的反应条件下具有高活性的广泛底物特异性。两种蛋白酶均在大多数DNA和RNA分离程序中常用的缓冲液中提供高活性，并且由QIAGEN保证质量。

QIAGEN蛋白酶是一种从重组芽孢杆菌菌株中分离的silu suan蛋白酶，是蛋白酶K的经济替代品，可从多种来源分离天然DNA和RNA。QIAGEN蛋白酶*不含DNase和RNase活性。

QIAGEN蛋白酶K是一种枯草杆菌蛋白酶型蛋白酶，从腐生真菌Tritirachium album中分离出来，特别适用于短消化时间。它具有很高的比活性，可以在很宽的温度和pH值范围内保持稳定，而在较高温度下的活性大大提高。可溶性钙对于酶活性不是必需的。这意味着用于抑制Mg 2 +依赖性酶（如核酸酶）的EDTA 不会抑制蛋白酶K的活性。


QIAGEN Proteinase K (10 ml)蛋白酶K

性能

QIAGEN Protease和QIAGEN Proteinase K在大部分DNA和RNA纯化流程使用的缓冲液以及宽范围的盐、变性剂、洗涤剂、pH和温度条件下都有高活性（见表“常用缓冲液中的蛋白酶活性”）。

常用缓冲液中的蛋白酶活性*
缓冲液 活性(%)
QIAGEN

Protease

 QIAGEN

Proteinase K
30 mM Tris·Cl 100 100
30 mM Tris·Cl; 30 mM EDTA; 5% Tween 20; 0.5% Triton X-100; 800 mM GuHCl† 210 313
36 mM Tris·Cl; 36 mM EDTA; 5% Tween 20; 0.36% Triton X-100; 735 mM GuHCl‡ 205 301
10 mM Tris·Cl; 25 mM EDTA; 100 mM NaCl; 0.5% SDS 78 128
10 mM Tris·Cl; 100 mM EDTA; 20 mM NaCl; 1% Sarkosyl 101 74
10 mM Tris·Cl; 50 mM KCl; 1.5 mM MgCl2; 0.45% Tween 20; 0.5% Triton X-100 159 106
10 mM Tris·Cl; 100 mM EDTA; 0.5% SDS 98 120
30 mM Tris·Cl; 10 mM EDTA; 1% SDS 38 203
* pH 8.0, 50°C, 1.25 µg/ml蛋白酶，孵育15 min。
†  QIAGEN Genomic-tip操作流程中使用的Buffer G2，用于从血液、细胞培养基和组织中纯化DNA。
‡ 用于细菌DNA纯化的QIAGEN Genomic-tip实验方案中推荐的蛋白酶消化缓冲液条件（Buffers B1+ B2）。
原理
技术规格
QIAGEN Protease QIAGEN Proteinase K
规格 冻干粉 即用型溶液
量 7.5 AU或4 x 7.5 AU 2 ml或10 ml (20 mg/ml)
活性 45 mAU/mg蛋白 >600 mAU/ml
单位定义 一个mAU是指每分钟1 molluo an suan释放的斐林阳性的氨基酸和肽的活性

QIAGEN Proteinase K是从腐生菌Tritirachium album中提取的一种枯草杆菌蛋白酶，非常适合短时间消化。其特异性活性高，在很大的温度和pH 值范围内可保持稳定，并在高温时具有更高活性。可溶性钙在酶反应中不是必须的。所以用于抑制核酸酶等Mg2+依赖性酶的EDTA将不会抑制Proteinase K的活性。以下QIAGEN试剂盒中包含有Proteinase K：

    QIAGEN Protease是从重组Bacillus菌株中提取的一种蛋白酶，可替代Proteinase K从多种样本中提取DNA和RNA，且价格较低。QIAGEN Protease没有DNase 和RNase活性。以下QIAGEN试剂盒中包含有QIAGEN Protease：

    • 注意：使用手动QIAamp DNA Blood Kit和QIAGEN Blood & Cell Culture DNA Kit的用户应该用7 ml蒸馏水重悬每个瓶中的QIAGEN Protease。

  • 注意：使用QIAamp DNA Blood BioRobot 9604 Kit的用户应该用10 ml蒸馏水重悬每个瓶中的QIAGEN Protease。

  • 注意：QIAGEN蛋白酶不可与DNeasy Tissue、DNeasy 96 Tissue及QIAamp DNA Mini Kit中的ATL缓冲液同时使用。在SDS浓度大于0.5%、肌氨酰浓度大于1%、或有高浓度的其他去污剂时，EDTA的浓度必须小于8 mM，这样才能在延长的孵育时间内达到an quan活性。

操作流程

QIAGEN Protease或QIAGEN Proteinase K的使用指南在相应的试剂盒手册中提供。

应用

QIAGEN Protease和QIAGEN Proteinase K用于DNA和RNA制备过程中蛋白酶的消化。在设计蛋白酶消化时，应考虑两种酶之间的细微差异。