RPMI 1640 培养基起初是为了悬浮培养人白血病单层细胞而开发的。Roswell Park Memorial Institute (RPMI) 1640 培养基被发现适用于多种哺乳动物细胞,包括 HeLa 细胞、Jurkat 细胞、 MCF-7 细胞、PC12 细胞、PBMC 细胞、星形胶质细胞和癌细胞。针对广泛的细胞培养应用,我们提供多种组分的 RPMI 1640 改良培养基。使用培养基选择工具查找适合的配方。
RPMI 1640 培养基最初是为了悬浮培养人白血病单层细胞而开发的。Roswell Park Memorial Institute (RPMI) 1640 培养基被发现适用于多种哺乳动物细胞,包括 HeLa 细胞、Jurkat 细胞、 MCF-7 细胞、PC12 细胞、PBMC 细胞、星形胶质细胞和癌细胞。针对广泛的细胞培养应用,我们提供多种组分的 RPMI 1640 改良培养基。使用培养基选择工具查找适合的配方。
sigma现货代理Dispase II D-4693Related CategoriesApplication Index, Biochemicals and Reagents, Cell Biology, Dissociation, Enzymes, Inhibitors, and Substrates,More…activity ≥0.5 units/mg solidsol
详细介绍
sigma现货代理Dispase II D-4693
Description
Analysis Note
The enzyme can be initially dissolved in 50 mM Hepes/KOH pH 7.4, 150 mM NaCl at 10 mg/ml. Further dilutions should be made in the cell culture media most appropriate for the cells being dissociated. Dispase is a metalloproteinase and is activated by divalent cations including Ca2+ , Mg2+, Mn2+ and Fe2+.
Preparation Note
A 50 U/mL stock solution may be prepared by dissolving the powder in a buffer containing 10 mM NaAc (pH 7.5) and 5 mM CaAc. It should be stored at 4 °C.
Unit Definition
One unit will hydrolyze casein to produce color equivalent to 1.0 μmole (181 μg) of tyrosine per min at pH 7.5 at 37 °C (color by Folin-Ciocalteu reagent), unless otherwise indicated.
Physical form
lyophilized powder containing calcium acetate and milk sugar
Application
The enzyme from Sigma has been used in developing a protocol for ex vivoculture of mouse embryonic mammary buds.[5] It has been used in the treatment of rat heart pieces during the isolation of mitochondria from rat heart.[6] It has also been used for the isolation of dental pulp stem cells (DPSCs) by enzymatic hydrolysis. These cells have been compared with DPSCs isolated by explant method to analyse their stem cell and differentiation properties.[1] Dispase II has been used for Fluorescence-Activated Cell Sorting (FACS).[3] It has also been used for separating visceral yolk sac layers.[2]
Biochem/physiol Actions
Dispase II is a neutral protease that hydrolyzes the N-terminal peptide bonds of non-polar amino acid residues. It may be used for separating many tissues and cells grown in vitro. The enzyme is very gentle and does not damage cell membranes. It can also be used to prevent clumping in suspension cultures. This protease cleaves fibronectin and type IV collagen, but not laminin, type V collagen, serum albumin, or transferrin.[4] Dispase II is specific for the cleavage of Leucine-Phenylalanine bonds. Ca2+, Mg2+, Mn2+, Fe2+, Fe3+ and Al3+activate the enzyme. EDTA, EGTA, Hg2+ and other heavy metals inhibit the enzyme activity.[7] The enzyme contains 1g-atom of zinc per g-mol of purified enzyme. If this zinc component is removed by chelating agents such as EDTA or EGTA, an inactive apoenzyme is obtained. The enzyme is not inhibited by serum.
QIAexpress Ni-NTA Protein Purification System基于获得的Ni-NTA(氨基三乙酸镍)树脂,对含有6个或以上组氨酸残基(连续或交替)亲合标签的蛋白选择能力强。该技术可在天然或变性条件下,从所有表达体系中一步纯化几乎所有的His-tagged蛋白。NTA含有四个镍离子螯合位点,与镍的结合能力比其他仅有三个金属螯合位点的金属螯合纯化方法的结合能力强。多出的一个螯合位点可防止镍离子脱落,因此具有更强的结合能力,蛋白纯度比金属螯合纯化方法的蛋白纯度高。QIAexpress技术可用于从杆状病毒、哺乳动物细胞、酵母和细菌等各种表达体系中纯化His-tagged蛋白。
Procedure
His-tagged蛋白的纯化包括四个步骤:裂解、结合、洗涤和洗脱(参见Protein purification with the Ni-NTA protein purification system)。使用QIAexpress 技术纯化重组蛋白无需依赖于蛋白的三维结构或6xHis标签。因此可实现在天然或变性条件下,从稀释溶液或细胞裂解液中一步纯化蛋白。可使用强变性剂和洗涤剂高效溶解和纯化受体、膜蛋白和形成包涵体的蛋白。洗涤缓冲液中可包含有能高效去除非特异性结合产物的试剂(见表)。在温和条件下加入100–250 mM咪唑作为竞争性洗脱试剂或降低pH值,可洗脱得到纯化蛋白。
QIAamp DNA Blood Kits根据样本存储条件和新鲜程度不同,可纯化获得大小为200 bp–50 kb的DNA(参见”Apoptotic banding in stored blood”)。纯化的DNA适用于长片段PCR扩增(参见”Long-range PCR”)和RFLP分析等等,如亲子鉴定(参见”Paternity testing by RFLP analysis”)。
Principle
无需苯酚-绿仿抽提。DNA特异性结合到QIAamp硅胶膜上,污染物流走。PCR抑制剂,如:二价阳离子和蛋白,可通过两步有效的洗涤被*去除,结合在离心柱上的纯核酸可用水或试剂盒中的缓冲液洗脱。QIAamp DNA Blood技术从血液或相关体液纯化得到的基因组、线粒体或病毒DNA,可即用于PCR和印迹实验中。
Procedure
QIAamp DNA Blood Mini Kit采用快速离心柱或真空操作简化了从血液或相关体液中分离DNA的流程(参见”procedure”)。该试剂盒可处理带有EDTA、柠檬酸盐和肝素等常规抗凝剂的新鲜或冷冻的全血样本。 QIAamp DNA Blood Mini Kit可处理多达200 µl的样本,制备时间20–40分钟。200 µl健康全血可获得4–12 µg DNA,洗脱体积50–200 µl。QIAamp DNA Blood Mini Kit的操作可自动化(参见”QIAcube”)。
QIAamp样本制备技术是*经过验证的。
真空处理
使用QIAamp DNA Blood Mini Kit,血液样本可用真空处理而无需离心,可更快速、更方便地纯化DNA。使用VacValves和VacConnectors装置,QIAamp Mini离心柱可配合QIAvac 24 manifold真空底座使用。在样本流速显著不同时,需使用VacValves以确保*的真空条件。一次性的VacConnectors用于避免交叉污染。配合VacConnectors,也可使QIAamp离心操作在带有QIAvac Luer Adapters的QIAvac 6S上进行。
Applications
QIAamp DNA Blood Mini Kit使用经验证的QIAamp技术,采用带有2.0 ml收集管的Mini离心柱从不同来源的样本中纯化DNA。样本来源包括:
新鲜和冷冻的全血或白膜层
血浆或血清
骨髓
淋巴细胞
血小板
体液
订购信息:
Cat No./ID: 51104
QIAamp DNA Blood Mini Kit (50)
Log in
For 50 DNA minipreps: 50 QIAamp Mini Spin Columns, QIAGEN Protease, Reagents, Buffers, Collection Tubes (2 ml)
Cat No./ID: 51106
QIAamp DNA Blood Mini Kit (250)
Log in
For 250 DNA minipreps: 250 QIAamp Mini Spin Columns, QIAGEN Protease, Reagents, Buffers, Collection Tubes (2 ml)
qiagen血液DNA提取/纯化试剂盒51106 51104QIAamp DNA Blood Mini Kit应用硅胶膜技术,从多达200 μl新鲜或冷冻的人全血样本中纯化DNA。QIAamp Mini离心柱可在离心机或真空装置上使用。QIAamp DNA Blood Mini Kit可在QIAcube全自动核酸纯化仪自动纯化DNA。
详细介绍
qiagen血液DNA提取/纯化试剂盒51106 51104
从血液和相关体液中纯化基因组DNA、线粒体DNA或病毒DNA,zui高可达12 μg
快速纯化高品质、即用型DNA
无需有机提取或乙醇沉淀
重复性好,产量高
*去除污染物和抑制剂
qiagen血液DNA提取/纯化试剂盒51106 51104
Applications
QIAamp DNA Blood Mini Kit使用经验证的QIAamp技术,采用带有2.0 ml收集管的Mini离心柱从不同来源的样本中纯化DNA。样本来源包括:
新鲜和冷冻的全血或白膜层
血浆或血清
骨髓
淋巴细胞
血小板
体液
Principle
无需苯酚-lv仿抽提。DNA特异性结合到QIAamp硅胶膜上,污染物流走。PCR抑制剂,如:二价阳离子和蛋白,可通过两步有效的洗涤被*去除,结合在离心柱上的纯核酸可用水或试剂盒中的缓冲液洗脱。QIAamp DNA Blood技术从血液或相关体液纯化得到的基因组、线粒体或病毒DNA,可即用于PCR和印迹实验中。
Procedure
QIAamp DNA Blood Mini Kit采用快速离心柱或真空操作简化了从血液或相关体液中分离DNA的流程(参见”procedure”)。该试剂盒可处理带有EDTA、柠檬酸盐和肝素等常规抗凝剂的新鲜或冷冻的全血样本。 QIAamp DNA Blood Mini Kit可处理多达200 µl的样本,制备时间20–40分钟。200 µl健康全血可获得4–12 µg DNA,洗脱体积50–200 µl。QIAamp DNA Blood Mini Kit的操作可自动化(参见”QIAcube”)。
QIAamp样本制备技术是*经过验证的。
真空处理
使用QIAamp DNA Blood Mini Kit,血液样本可用真空处理而无需离心,可更快速、更方便地纯化DNA。使用VacValves和VacConnectors装置,QIAamp Mini离心柱可配合QIAvac 24 manifold真空底座使用。在样本流速显著不同时,需使用VacValves以确保*的真空条件。一次性的VacConnectors用于避免交叉污染。配合VacConnectors,也可使QIAamp离心操作在带有QIAvac Luer Adapters的QIAvac 6S上进行。