細胞内カルシウムイオン測定試薬 Fluo 3-AM | CAS 121714-22-5 同仁化学研究所

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細胞内カルシウムイオン測定試薬 Fluo 3-AM | CAS 121714-22-5 同仁化学研究所Fluo 3-AM

04 細胞内蛍光プローブ

Fluo 3-AM

細胞内カルシウムイオン測定試薬 Fluo 3-AM | CAS 121714-22-5 同仁化学研究所

  • 細胞内蛍光プローブ

細胞内カルシウムイオン測定試薬

  • 製品コード
    F023  Fluo 3-AM
  • CAS番号
    121714-22-5
  • 化学名
    1-[2-Amino-5-(2,7-dichloro-6-acetoxymethoxy-3-oxo-9-xanthenyl)phenoxy]-2-(2-amino-5-methylphenoxy)ethane-N,N,N’,N’-tetraacetic acid,tetra(acetoxymethyl)ester
  • 分子式・分子量
    C51H50Cl2N2O23=1129.85
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
1 mg ¥43,300 343-08061
  • 細胞内カルシウムイオン測定試薬 Fluo 3-AM | CAS 121714-22-5 同仁化学研究所
試験成績書

SDSダウンロード

  • ご購入方法
  • お問い合わせ

マニュアル

  • プロトコル 細胞内カルシウムイオン測定試薬 Fluo 3-AM | CAS 121714-22-5 同仁化学研究所 蛍光で細胞内 Ca を測定したい
    細胞内カルシウムイオン測定試薬 Fluo 3-AM | CAS 121714-22-5 同仁化学研究所

技術情報

溶解例

1 mg/0.5 mL(アセトニトリル)、1 mg/mL(ジメチルスルホキシド)

参考文献

参考文献を表示する

1) A. Minta, J. P. Y. Kao and R. Y. Tsien, "Fluorescent Indicators for Cytosolic Calcium Based on Rhodamine and Fluorescein Chromophores", J. Biol. Chem.1989264(14), 8171.
2) J. P. Kao, A. T. Harootunian and R. Y. Tsien, "Photochemically Generated Cytosolic Calcium Pulses and Their Detection by Fluo-3", J. Biol. Chem.1989264, 8179.
3) M. Eberhard and P. Erne, "Kinetics of Calcium Binding to Fluo-3 by Stopped-Flow Fluorescence", Biochem. Biophys. Res. Commun.1989163, 309.
4) A. Hernandez-Cruz, F. Sala and P. R. Adams, "Subcellular Calcium Transients Visualized by Confocal Microscopy in a Voltage-clamped Vertebrate Neuron", Science1990247, 858.
5) A. H. Cornell-Bell, S. M. Finkbeiner, M. S. Cooper and S. J. Smith, "Glutamate Induces Calcium Waves in Cultured Astrocytes: Long-Range Glial Signaling", Science1990247, 470.
6) D. A. Williams, "Quantitative Intracellular Calcium Imaging with Laser-scanning Confocal Microscopy", Cell Calcium199011, 589.
7) D. A. Williams, S. H. Cody, C. A. Gehring, R. W. Parish and P. J. Harris, "Confocal Imaging of Ionised Calcium in Living Plant Cells", Cell Calcium1990, 11, 291.
8) P. A. Vandenberghe and J. L. Ceuppens, "Flow Cytometric Measurement of Cytoplasmic Free Calcium in Human Peripheral Blood T Lymphocytes with Fluo-3, A New Fluorescent Calcium Indicator", J. Immunol. Methods1990127, 197.
9) 河内秀幸, 南川哲寛, 高松哲郎, "高速走査共焦点レーザ顕微鏡による心室筋対細胞間のカルシウム波伝播の解析", 心筋の構造と代謝, 199113, 63.
10) M. Iino, H. Kasai and T. Yamazawa, "Visualization of Neural Control of Intracellular Ca2+ Concentration in Single Vascular Smooth Muscle Cells in situ", EMBO J.199413 (21), 5026.
11) M. E. Dailey and S. J. Smith, "Spontaneous Ca2+ Transients in Developing Hippocampal Pyramidal Cells", J. Neurobiol.199425(3), 243.
12) M. Burnier, G. Centeno, E. Burki and H. R. Brunner, "Confocal Microscopy to Analyze Cytosolic and Nuclear Calcium in Cultured Vascular Cells", Am. J. Physiol.1994266, C1118.
13) E. Donnadieu and L. Y. W. Bourguignon, "Ca2+ Signaling in Endothelial Cells Stimulated by Bradykinin: Ca2+ Measurement in the Mitochondria and the Cytosol by Confocal Microscopy", Cell Calcium199620 (1), 53.
14) M. Ikeda, H. Ariyoshi, J. Kambayashi, K. Fujitani, N. Shinoki, M. Sakon, T. Kawasaki and M. Monden, "Separate Analysis of Nuclear and Cytosolic Ca2+ Concentrations in Human Umbilical Vein Endothelial Cells", J. Cell. Biochem.199663 (1), 23.
15) J. E. Merritt, S. A. McCarthy, M. P. A. Davies and K. E. Moores, "Use of fluo-3 to Measure Cytosolic Ca2+ in Platelets and Neutrophils Loading Cells with the Dye, Calibration of Traces, Measurements in the Presence of Plasma, and Buffering of Cytosolic Ca2+", Biochem. J.1990269, 513.

よくある質問

Q

細胞内カルシウム測定試薬は何種類かありますが、どのように選べばよいのでしょうか?

A

測定機器や測定波長などで選ばれることが多いようです。
製品名の後ろに[-AM]が付いているものは細胞膜透過型になります。
それぞれの試薬の特性は

【Fura 2】
・2励起1蛍光
  励起(λex= Ca:340 nm, Ca free:380 nm)、蛍光:λem=500 nm
・解離定数:224 nmol/L
・蛍光強度比での測定が出来るので、誤差要因の補正を行なうことが出来る。
=>細胞内Ca濃度の計算が行ない易い。
・最も多く使用されている。
・励起フィルターを切替えなくてはいけないので、切替え間のタイムロスがある。
 (機器の性能にもよる)

【Fluo 3】
・1励起1蛍光
  励起:λex=508 nm、蛍光:λem=527 nm
・解離定数:400 nmol/L
・励起波長が長波長側にあるので細胞に与える障害が少ない
 (NADH,NADPHの影響が出ない)
・Arレーザーによる励起装置が使用出来る。
・スライス標本には適さない
 (Fluo3がスライス表面の死んだ細胞に結合するのか、細胞外のカルシウム濃度を測定する)

【Fluo 4】
・1励起1蛍光
  励起:λex=495 nm、蛍光:λem=518 nm
・解離定数:360 nmol/L
・Fluo3よりも蛍光強度が強い。
・励起波長が長波長側にあるので細胞に与える障害が少ない
 (NADH,NADPHの影響が出ない)
・Arレーザーによる励起装置が使用出来る。
・Fluo3よりも細胞毒性がでやすい。

【Indo 1】
・1励起2蛍光
  励起:λex= 330 nm、蛍光(λem= Ca:410 nm, Ca free:485 nm)
・解離定数:250 nmol/L
・励起波長の切替えの必要がないので、非常に早い速度のCa濃度変化や心筋細胞の
 ような動きの試料も測定できる(但し、検出器は2台必要)

【Rhod 2】
・1励起1蛍光
  励起:λex=553 nm、蛍光:λem=576 nm
・解離定数:1.0 μmol/L
・励起波長が長波長側にあるので細胞に与える障害が少ない
 (NADH,NADPHの影響が出ない)
・Arレーザーによる励起装置が使用出来る。

【Quin 2】
・1励起1蛍光
  励起:λex=339 nm、蛍光:λem=492 nm
・解離定数:110 nmol/L
・一番最初に開発されたプローブ

Q

はじめて測定します。Ca2+プローブの原理や測定方法、トラブルシューティング法を分かり易く教えて下さい。

A

はじめて細胞内Ca2+測定をされる方を対象としたプロトコルを作成しております。
原理、Ca2+プローブの特徴、測定方法、トラブルシューティングの方法等を記載しておりますので、ご参照下さい。

下記リンクよりダウンロード可能です。

「はじめて細胞内Ca2+を測定する方へ -カスタマーサポート担当者の視点から-」

Q

Caの変化をフローサイトメトリーで測定したいと思っています。 どの試薬を使えばよいでしょうか?

A

フローサイトメトリーでは、励起波長が固定されておりますので、1波長励起タイプのものが望ましいと思われます。

まず、Indo 1(UV laser, 365 nm)やFluo 3(Ar-laser, 488 nm)をお試しください。
・Indo 1はカルシウムの結合によって蛍光波長が変化するメリットがあります。
・Fluo 3は励起光源としてArレーザーを利用できます。

実際の使用例としては、
[Indo 1]
 P. S. Rabinovitch, et al., Journal of Immunology, 137, 952 (1986).
[Fluo 3]
 S. W. Sherwood and Robert T. Schimke, Methods Cell Biol., 46, 77 (1995).
がございます。ご参照ください。

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取扱条件

規格
性状: 本品は、赤色粉末又は固体で、ジメチルスルホキシド及びアセトニトリルに溶ける。
純度(HPLC): 85.0% 以上
アセトニトリル溶状: 試験適合
蛍光スペクトル: 試験適合
NMRスペクトル: 試験適合
取扱条件
保存条件: 冷凍,遮光
SDSダウンロード
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関連製品

細胞内カルシウムイオン測定試薬 Fura 2-AM special packaging | CAS 108964-32-5 同仁化学研究所

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細胞内カルシウムイオン測定試薬 Fura 2-AM special packaging | CAS 108964-32-5 同仁化学研究所Fura 2-AM special packaging

04 細胞内蛍光プローブ

Fura 2-AM special packaging

  • 細胞内蛍光プローブ

細胞内カルシウムイオン測定試薬

  • 製品コード
    F025  Fura 2-AM special packaging
  • CAS番号
    108964-32-5
  • 化学名
    1-[6-Amino-2-(5-carboxy-2-oxazolyl)-5-benzofuranyloxy]-2-(2-amino-5-methylphenoxy)ethane-N,N,N’,N’-tetraacetic acid, pentaacetoxymethyl ester
  • 分子式・分子量
    C44H47N3O24=1001.85
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
50 μg x 8 ¥24,200 348-05831
試験成績書

SDSダウンロード

  • ご購入方法
  • お問い合わせ

マニュアル

  • プロトコル 細胞内カルシウムイオン測定試薬 Fura 2-AM special packaging | CAS 108964-32-5 同仁化学研究所 蛍光で細胞内 Ca を測定したい
    細胞内カルシウムイオン測定試薬 Fura 2-AM special packaging | CAS 108964-32-5 同仁化学研究所

技術情報

溶液調製法

Fura 2-AM 50 μgに適量のDMSOを加え均一に溶解することで、ご希望の濃度に調製いただけます。
下表に加えるDMSO量とFura 2-AM濃度の関係を示しましたので、ご参照ください。

DMSO (μL) 10 20 30 40 50
濃度 (mmol/L) 5.0 2.5 1.7 1.3 1.0

※DMSOに溶解後は保存できません。使用直前にFura 2-AM溶液を調製し、速やかにご使用ください。

参考文献

参考文献を表示する

1) G. Grynkiewicz, M. Poenie and R. Y. Tsien, "A New Generation of Ca2+ Indicators with Greatly Improved Fluorescence Properties", J. Biol. Chem.1985260, 3440.
2) D. A. Williams, K. E. Fogarty, R. Y. Tsien and F. S. Fay, "Calcium Gradients in Single Smooth Muscle Cells Revealed by the Digital Imaging Microscope Using Fura-2", Nature1985318, 558.
3) R. Y. Tsien, T. J. Rink and M. Poenie, "Measurement of Cytosolic Free Ca2+ in Individual Small Cells Using Fluorescence Microscopy with Dual Excitation Wavelengths", Cell Calcium19856, 145.
4) D. A. Williams and F. S. Fay, "Intracellular Calibration of the Fluorescent Calcium Indicator Fura-2", Cell Calcium199011, 75.
5) W. Almers and E. Neher, "The Ca Signal from Fura-2 Loaded Mast Cells Depends Strongly on the Method of Dye-loading", FEBS Lett.1985192, 13.
6) G. H. R. Rao, J. D. Peller and J. G. White, "Measurement of Ionized Calcium in Blood Platelets with a New Generation Calcium Indicator", Biochem. Biophys. Res. Commun.1985132, 652.
7) H. Ozaki, K. Sato, T. Satoh and H. Karaki, "Simultaneous Recordings of Calcium Signals and Mechanical Activity Using Fluorescent Dye Fura 2 in Isolated Strips of Vascular Smooth Muscle", Jpn. J. Pharmacol.198745, 429.
8) M. Mitsui, A. Abe, M. Tajimi and H. Karaki, "Leakage of the Fluorescent Ca2+ Indicator Fura-2 in Smooth Muscle", Jpn. J. Pharmacol.199361, 165.
9) 宮川厚夫, 牧野徹, 玉川彰, 尾崎一穂, "ビデオ画像処理を用いた蛍光性カルシウム指示薬Fura-2による細胞内遊離カルシウムイオン濃度分布の測定", 分析化学198938, 643.

よくある質問

Q

はじめて測定します。Ca2+プローブの原理や測定方法、トラブルシューティング法を分かり易く教えて下さい。

A

はじめて細胞内Ca2+測定をされる方を対象としたプロトコルを作成しております。
原理、Ca2+プローブの特徴、測定方法、トラブルシューティングの方法等を記載しておりますので、ご参照下さい。

下記リンクよりダウンロード可能です。

「はじめて細胞内Ca2+を測定する方へ -カスタマーサポート担当者の視点から-」

細胞内カルシウムイオン測定試薬 Fura 2-AM special packaging | CAS 108964-32-5 同仁化学研究所 細胞内カルシウムイオン測定試薬 Fura 2-AM special packaging | CAS 108964-32-5 同仁化学研究所

取扱条件

規格
性状: 本品は、黄色~橙黄色固体でジメチルスルホキシドに溶ける。
純度(HPLC): 98.0% 以上
蛍光スペクトル: 試験適合
NMRスペクトル: 試験適合
取扱条件
保存条件: 冷凍,遮光
危険・有害
シンボルマーク
細胞内カルシウムイオン測定試薬 Fura 2-AM special packaging | CAS 108964-32-5 同仁化学研究所
SDSダウンロード
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関連製品

細胞内カルシウムイオン測定試薬 Fluo 3-AM special packaging | CAS 121714-22-5 同仁化学研究所

上海金畔生物科技有限公司代理日本同仁化学试剂盒全线产品,欢迎访问日本同仁化学dojindo官网了解更多信息。

細胞内カルシウムイオン測定試薬 Fluo 3-AM special packaging | CAS 121714-22-5 同仁化学研究所Fluo 3-AM special packaging

04 細胞内蛍光プローブ

Fluo 3-AM special packaging

  • 細胞内蛍光プローブ

細胞内カルシウムイオン測定試薬

  • 製品コード
    F026  Fluo 3-AM special packaging
  • CAS番号
    121714-22-5
  • 化学名
    1-[2-Amino-5-(2,7-dichloro-6-acetoxymethoxy-3-oxo-9-xanthenyl)phenoxy]-2-(2-amino-5-methylphenoxy)ethane-N,N,N’,N’-tetraacetic acid, tetra(acetoxymethyl) ester
  • 分子式・分子量
    C51H50Cl2N2O23=1129.85
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
50 μg x 8 ¥31,700 349-06961
試験成績書

SDSダウンロード

  • ご購入方法
  • お問い合わせ

マニュアル

  • プロトコル 細胞内カルシウムイオン測定試薬 Fluo 3-AM special packaging | CAS 121714-22-5 同仁化学研究所 蛍光で細胞内 Ca を測定したい
    細胞内カルシウムイオン測定試薬 Fluo 3-AM special packaging | CAS 121714-22-5 同仁化学研究所

技術情報

溶液調製法

Fluo 3-AM 50 μgに適量のDMSOを加え均一に溶解することで、ご希望の濃度に調製いただけます。
下表に加えるDMSO量とFluo 3-AM濃度の関係を示しましたので、ご参照ください。

DMSO (μL) 10 20 30 40 44 50
濃度 (mmol/L) 4.4 2.2 1.5 1.1 1 0.9

※DMSOに溶解後は保存できません。使用直前にFluo 3-AM溶液を調製し、速やかにご使用ください。

参考文献

参考文献を表示する

1) A. Minta, J. P. Y. Kao and R. Y. Tsien, "Fluorescent Indicators for Cytosolic Calcium Based on Rhodamine and Fluorescein Chromophores", J. Biol. Chem.1989264(14), 8171.
2) J. P. Kao, A. T. Harootunian and R. Y. Tsien, "Photochemically Generated Cytosolic Calcium Pulses and Their Detection by Fluo-3", J. Biol. Chem.1989264, 8179.
3) M. Eberhard and P. Erne, "Kinetics of Calcium Binding to Fluo-3 by Stopped-Flow Fluorescence", Biochem. Biophys. Res. Commun.1989163, 309.
4) A. Hernandez-Cruz, F. Sala and P. R. Adams, "Subcellular Calcium Transients Visualized by Confocal Microscopy in a Voltage-clamped Vertebrate Neuron", Science1990247, 858.
5) A. H. Cornell-Bell, S. M. Finkbeiner, M. S. Cooper and S. J. Smith, "Glutamate Induces Calcium Waves in Cultured Astrocytes: Long-Range Glial Signaling", Science1990247, 470.
6) D. A. Williams, "Quantitative Intracellular Calcium Imaging with Laser-scanning Confocal Microscopy", Cell Calcium199011, 589.
7) D. A. Williams, S. H. Cody, C. A. Gehring, R. W. Parish and P. J. Harris, "Confocal Imaging of Ionised Calcium in Living Plant Cells", Cell Calcium1990, 11, 291.
8) P. A. Vandenberghe and J. L. Ceuppens, "Flow Cytometric Measurement of Cytoplasmic Free Calcium in Human Peripheral Blood T Lymphocytes with Fluo-3, A New Fluorescent Calcium Indicator", J. Immunol. Methods1990127, 197.
9) 河内秀幸, 南川哲寛, 高松哲郎, "高速走査共焦点レーザ顕微鏡による心室筋対細胞間のカルシウム波伝播の解析", 心筋の構造と代謝, 199113, 63.
10) M. Iino, H. Kasai and T. Yamazawa, "Visualization of Neural Control of Intracellular Ca2+ Concentration in Single Vascular Smooth Muscle Cells in situ", EMBO J.199413 (21), 5026.
11) M. E. Dailey and S. J. Smith, "Spontaneous Ca2+ Transients in Developing Hippocampal Pyramidal Cells", J. Neurobiol.199425(3), 243.
12) M. Burnier, G. Centeno, E. Burki and H. R. Brunner, "Confocal Microscopy to Analyze Cytosolic and Nuclear Calcium in Cultured Vascular Cells", Am. J. Physiol.1994266, C1118.
13) E. Donnadieu and L. Y. W. Bourguignon, "Ca2+ Signaling in Endothelial Cells Stimulated by Bradykinin: Ca2+ Measurement in the Mitochondria and the Cytosol by Confocal Microscopy", Cell Calcium199620 (1), 53.
14) M. Ikeda, H. Ariyoshi, J. Kambayashi, K. Fujitani, N. Shinoki, M. Sakon, T. Kawasaki and M. Monden, "Separate Analysis of Nuclear and Cytosolic Ca2+ Concentrations in Human Umbilical Vein Endothelial Cells", J. Cell. Biochem.199663 (1), 23.
15) J. E. Merritt, S. A. McCarthy, M. P. A. Davies and K. E. Moores, "Use of fluo-3 to Measure Cytosolic Ca2+ in Platelets and Neutrophils Loading Cells with the Dye, Calibration of Traces, Measurements in the Presence of Plasma, and Buffering of Cytosolic Ca2+", Biochem. J.1990269, 513.

よくある質問

Q

はじめて測定します。Ca2+プローブの原理や測定方法、トラブルシューティング法を分かり易く教えて下さい。

A

 はじめて細胞内Ca2+測定をされる方を対象としたプロトコルを作成しております。
原理、Ca2+プローブの特徴、測定方法、トラブルシューティングの方法等を記載しておりますので、ご参照下さい。

下記リンクよりダウンロード可能です。

「はじめて細胞内Ca2+を測定する方へ -カスタマーサポート担当者の視点から-」

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取扱条件

規格
性状: 本品は、赤色固体でジメチルスルホキシド、アセトニトリルに溶ける。
純度(HPLC): 85.0% 以上
アセトニトリル溶状: 試験適合
蛍光スペクトル: 試験適合
NMRスペクトル: 試験適合
取扱条件
保存条件: 冷凍,遮光
危険・有害
シンボルマーク
細胞内カルシウムイオン測定試薬 Fluo 3-AM special packaging | CAS 121714-22-5 同仁化学研究所
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細胞内カルシウムイオン測定試薬 Fluo 3-AM special packaging | CAS 121714-22-5 同仁化学研究所

関連製品

細胞内カルシウムイオン測定試薬 Fluo 4-AM | CAS 273221-67-3 同仁化学研究所

上海金畔生物科技有限公司代理日本同仁化学试剂盒全线产品,欢迎访问日本同仁化学dojindo官网了解更多信息。

細胞内カルシウムイオン測定試薬 Fluo 4-AM | CAS 273221-67-3 同仁化学研究所Fluo 4-AM

04 細胞内蛍光プローブ

Fluo 4-AM

細胞内カルシウムイオン測定試薬 Fluo 4-AM | CAS 273221-67-3 同仁化学研究所

  • 細胞内蛍光プローブ

細胞内カルシウムイオン測定試薬

  • 製品コード
    F311  Fluo 4-AM
  • CAS番号
    273221-67-3
  • 化学名
    1-[2-Amino-5-(2,7-difluoro-6-acetoxymethoxy-3-oxo-9-xanthenyl)phenoxy]-2-(2-amino-5-methylphenoxy)ethane-N,N,N’,N’-tetraacetic acid, tetra(acetoxymethyl) ester
  • 分子式・分子量
    C51H50F2N2O23=1096.94
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
1 mg ¥50,800 345-90951

【注意】
本品は、通常、チューブ底面にフィルム状に付着した状態となっております。
稀に、輸送中の振動等により本品がチューブ底面から外れ、チューブ壁面やキャップ裏に付着している場合がございます。
内容物を下に落としてから開封をしてご使用ください。
ご不明な点がございましたら、小社カスタマーリレーション部までお問合せください。(Free Dial:0120-489-548)

  • 細胞内カルシウムイオン測定試薬 Fluo 4-AM | CAS 273221-67-3 同仁化学研究所
試験成績書

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  • ご購入方法
  • お問い合わせ

マニュアル

  • プロトコル 細胞内カルシウムイオン測定試薬 Fluo 4-AM | CAS 273221-67-3 同仁化学研究所 蛍光で細胞内 Ca を測定したい
    細胞内カルシウムイオン測定試薬 Fluo 4-AM | CAS 273221-67-3 同仁化学研究所

技術情報

溶解例

1 mg/0.5 mL(アセトニトリル)、1 mg/mL(ジメチルスルホキシド)

よくある質問

Q

細胞内カルシウム測定試薬は何種類かありますが、どのように選べばよいのでしょうか?

A

測定機器や測定波長などで選ばれることが多いようです。

製品名の後ろに[-AM]が付いているものは細胞膜透過型になります。
それぞれの試薬の特性は

【Fura 2】
・2励起1蛍光
  励起(λex= Ca:340nm, Ca free:380nm)、蛍光:λem=500nm
・解離定数:224nmol/l
・蛍光強度比での測定が出来るので、誤差要因の補正を行なうことが出来る。
=>細胞内Ca濃度の計算が行ない易い。
・最も多く使用されている。
・励起フィルターを切替えなくてはいけないので、切替え間のタイムロスがある。
 (機器の性能にもよる)

【Fluo 3】
・1励起1蛍光
  励起:λex=508nm、蛍光:λem=527nm
・解離定数:400nmol/l
・励起波長が長波長側にあるので細胞に与える障害が少ない
 (NADH,NADPHの影響が出ない)
・Arレーザーによる励起装置が使用出来る。
・スライス標本には適さない
 (Fluo3がスライス表面の死んだ細胞に結合するのか、細胞外のカルシウム濃度を測定する)

【Fluo 4】
・1励起1蛍光
  励起:λex=495nm、蛍光:λem=518nm
・解離定数:345nmol/l
・Fluo 3と比較して、励起極大波長が約10 nm短波長側にシフトしており、アルゴンレーザー励起による蛍光強度が約2倍と高感度である。

【Indo 1】
・1励起2蛍光
  励起:λex= 330nm、蛍光(λem= Ca:410nm, Ca free:485nm)
・解離定数:250nmol/l
・励起波長の切替えの必要がないので、非常に早い速度のCa濃度変化や心筋細胞の
 ような動きの試料も測定できる(但し、検出器は2台必要)

【Rhod 2】
・1励起1蛍光
  励起:λex=553nm、蛍光:λem=576nm
・解離定数:1.0μmol/l
・励起波長が長波長側にあるので細胞に与える障害が少ない
 (NADH,NADPHの影響が出ない)
・Arレーザーによる励起装置が使用出来る。

【Quin 2】
・1励起1蛍光
  励起:λex=339nm、蛍光:λem=492nm
・解離定数:110nmol/l
・一番最初に開発されたプローブ

Q

はじめて測定します。Ca2+プローブの原理や測定方法、トラブルシューティング法を分かり易く教えて下さい。

A

はじめて細胞内Ca2+測定をされる方を対象としたプロトコルを作成しております。
原理、Ca2+プローブの特徴、測定方法、トラブルシューティングの方法等を記載しておりますので、ご参照下さい。

下記リンクよりダウンロード可能です。

「はじめて細胞内Ca2+を測定する方へ -カスタマーサポート担当者の視点から-」

細胞内カルシウムイオン測定試薬 Fluo 4-AM | CAS 273221-67-3 同仁化学研究所 細胞内カルシウムイオン測定試薬 Fluo 4-AM | CAS 273221-67-3 同仁化学研究所

取扱条件

規格
性状: 本品は、赤橙色粉末又は固体である。
純度(HPLC): 98.0% 以上
アセトニトリル溶状: 試験適合
蛍光スペクトル: 試験適合
NMRスペクトル: 試験適合
取扱条件
保存条件: 冷凍,遮光
SDSダウンロード
細胞内カルシウムイオン測定試薬 Fluo 4-AM | CAS 273221-67-3 同仁化学研究所

関連製品

細胞内カルシウムイオン測定試薬 Fluo 4-AM special packaging | CAS 273221-67-3 同仁化学研究所

上海金畔生物科技有限公司代理日本同仁化学试剂盒全线产品,欢迎访问日本同仁化学dojindo官网了解更多信息。

細胞内カルシウムイオン測定試薬 Fluo 4-AM special packaging | CAS 273221-67-3 同仁化学研究所Fluo 4-AM special packaging

04 細胞内蛍光プローブ

Fluo 4-AM special packaging

  • 細胞内蛍光プローブ

細胞内カルシウムイオン測定試薬

  • 製品コード
    F312  Fluo 4-AM special packaging
  • CAS番号
    273221-67-3
  • 化学名
    1-[2-Amino-5-(2,7-difluoro-6-acetoxymethoxy-3-oxo-9-xanthenyl)phenoxy]-2-(2-amino-5-methylphenoxy)ethane-N,N,N’,N’-tetraacetic acid, tetra(acetoxymethyl) ester
  • 分子式・分子量
    C51H50F2N2O23=1096.94
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
50 μg x 8 ¥37,000 342-90961
試験成績書

SDSダウンロード

  • ご購入方法
  • お問い合わせ

マニュアル

  • 取扱説明書 細胞内カルシウムイオン測定試薬 Fluo 4-AM special packaging | CAS 273221-67-3 同仁化学研究所 日本語
    細胞内カルシウムイオン測定試薬 Fluo 4-AM special packaging | CAS 273221-67-3 同仁化学研究所
  • プロトコル 細胞内カルシウムイオン測定試薬 Fluo 4-AM special packaging | CAS 273221-67-3 同仁化学研究所 蛍光で細胞内Caを測定したい
    細胞内カルシウムイオン測定試薬 Fluo 4-AM special packaging | CAS 273221-67-3 同仁化学研究所

技術情報

溶解例

1 mg/0.5 mL(アセトニトリル)、1 mg/mL(ジメチルスルホキシド)

よくある質問

Q

細胞内カルシウム測定試薬は何種類かありますが、どのように選べばよいのでしょうか?

A

測定機器や測定波長などで選ばれることが多いようです。
製品名の後ろに[-AM]が付いているものは細胞膜透過型になります。
それぞれの試薬の特性は

【Fura 2】
・2励起1蛍光
  励起(λex= Ca:340 nm, Ca free:380 nm)、蛍光:λem=500 nm
・解離定数:224 nmol/L
・蛍光強度比での測定が出来るので、誤差要因の補正を行なうことが出来る。
=>細胞内Ca濃度の計算が行ない易い。
・最も多く使用されている。
・励起フィルターを切替えなくてはいけないので、切替え間のタイムロスがある。
 (機器の性能にもよる)

【Fluo 3】
・1励起1蛍光
  励起:λex=508 nm、蛍光:λem=527 nm
・解離定数:400 nmol/L
・励起波長が長波長側にあるので細胞に与える障害が少ない
 (NADH, NADPHの影響が出ない)
・Arレーザーによる励起装置が使用出来る。
・スライス標本には適さない
 (Fluo 3がスライス表面の死んだ細胞に結合するのか、細胞外のカルシウム濃度を測定する)
【Fluo 4】
・1励起1蛍光
  励起:λex=495 nm、蛍光:λem=518 nm
・解離定数:360 nmol/L
・Fluo 3よりも蛍光強度が強い。
・励起波長が長波長側にあるので細胞に与える障害が少ない
 (NADH, NADPHの影響が出ない)
・Arレーザーによる励起装置が使用出来る。
・Fluo 3よりも細胞毒性がでやすい。

【Indo 1】
・1励起2蛍光
  励起:λex= 330 nm、蛍光(λem= Ca:410 nm, Ca free:485 nm)
・解離定数:250 nmol/L
・励起波長の切替えの必要がないので、非常に早い速度のCa濃度変化や心筋細胞の
 ような動きの試料も測定できる(但し、検出器は2台必要)

【Rhod 2】
・1励起1蛍光
  励起:λex=553 nm、蛍光:λem=576 nm
・解離定数:1.0 μmol/L
・励起波長が長波長側にあるので細胞に与える障害が少ない
 (NADH, NADPHの影響が出ない)
・Arレーザーによる励起装置が使用出来る。

【Quin 2】
・1励起1蛍光
  励起:λex=339 nm、蛍光:λem=492 nm
・解離定数:110 nmol/L
・一番最初に開発されたプローブ2009/05/15

Q

はじめて測定します。Ca2+プローブの原理や測定方法、トラブルシューティング法を分かり易く教えて下さい。

A

はじめて細胞内Ca2+測定をされる方を対象としたプロトコルを作成しております。
原理、Ca2+プローブの特徴、測定方法、トラブルシューティングの方法等を記載しておりますので、ご参照下さい。

下記リンクよりダウンロード可能です。

「はじめて細胞内Ca2+を測定する方へ -カスタマーサポート担当者の視点から-」

細胞内カルシウムイオン測定試薬 Fluo 4-AM special packaging | CAS 273221-67-3 同仁化学研究所 細胞内カルシウムイオン測定試薬 Fluo 4-AM special packaging | CAS 273221-67-3 同仁化学研究所

取扱条件

規格
性状: 本品は、赤橙色粉末又は固体である。
純度(HPLC): 98.0% 以上
NMRスペクトル: 試験適合
蛍光スペクトル: 試験適合
アセトニトリル溶状: 試験適合
取扱条件
保存条件: 冷凍,遮光
危険・有害
シンボルマーク
細胞内カルシウムイオン測定試薬 Fluo 4-AM special packaging | CAS 273221-67-3 同仁化学研究所
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細胞内カルシウムイオン測定試薬 Fluo 4-AM special packaging | CAS 273221-67-3 同仁化学研究所

関連製品

カルシウムイオン測定試薬 Quin 2 | CAS 73630-23-6 同仁化学研究所

上海金畔生物科技有限公司代理日本同仁化学试剂盒全线产品,欢迎访问日本同仁化学dojindo官网了解更多信息。

カルシウムイオン測定試薬 Quin 2 | CAS 73630-23-6 同仁化学研究所Quin 2

04 細胞内蛍光プローブ

Quin 2

カルシウムイオン測定試薬 Quin 2 | CAS 73630-23-6 同仁化学研究所

  • 細胞内蛍光プローブ

カルシウムイオン測定試薬

  • 製品コード
    Q001  Quin 2
  • CAS番号
    73630-23-6
  • 化学名
    8-Amino-2-[(2-amino-5-methylphenoxy)methyl]-6-methoxyquinoline-N,N,N’,N’-tetraacetic acid, tetrapotassium salt
  • 分子式・分子量
    C26H23K4N3O10=693.87
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
50 mg ¥34,100 340-04713
  • カルシウムイオン測定試薬 Quin 2 | CAS 73630-23-6 同仁化学研究所
試験成績書

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マニュアル

  • プロトコル カルシウムイオン測定試薬 Quin 2 | CAS 73630-23-6 同仁化学研究所 蛍光で細胞内 Ca を測定したい
    カルシウムイオン測定試薬 Quin 2 | CAS 73630-23-6 同仁化学研究所

技術情報

溶解例

84 mg/100 mL(水)

参考文献

参考文献を表示する

1) R. Y. Tsien, "New Calcium Indicators and Buffers with High Selectivity against Magnesium and Protons: Design, Synthesis, and Properties of Prototype Structures", Biochemistry, 1980, 19 (11), 2396.
2) R. Y. Tsien, T. Pozzan and T. J. Rink, "Calcium Homeostasis in Intact Lymphocytes: Cytoplasmic Free Calcium Monitored with a New, Intracellularly Trapped Fluorescent Indicator", J. Cell Biol., 1982, 94, 325.
3) 和田弘子, 渥美博充, 中川元吉, 高濃度食塩溶液中の微量カルシウムの蛍光検出フローインジェクション定量, Chem. Express., 1989, 4, 381.
4) M. B. Feinstein, J. J. Egan, R. I. Sha'afi and J. White, "The Cytoplasmic Concentration of Free Calcium Inplatelets Is Controlled by Stimulators of Cyclic AMP Production (PGD2, PGE1, FORSKOLIN)", Biochem. Biophys. Res. Commun., 1983, 113, 598.
5) N. Miyoshi, K. Hara, S. Kimura, K. Nakanishi and M. Fukuda, "A New Method of Determining Intracellular Free Ca2+ Concentration Using Quin 2-fluorescence", Photochem. Photobiol., 1991, 53 (3), 415.

よくある質問

Q

細胞内カルシウム測定試薬は何種類かありますが、どのように選べばよいのでしょうか?

A

測定機器や測定波長などで選ばれることが多いようです。
製品名の後ろに[-AM]が付いているものは細胞膜透過型になります。
それぞれの試薬の特性は

【Fura 2】
・2励起1蛍光
  励起(λex= Ca:340 nm, Ca free:380 nm)、蛍光:λem=500 nm
・解離定数:224 nmol/L
・蛍光強度比での測定が出来るので、誤差要因の補正を行なうことが出来る。
=>細胞内Ca濃度の計算が行ない易い。
・最も多く使用されている。
・励起フィルターを切替えなくてはいけないので、切替え間のタイムロスがある。
 (機器の性能にもよる)

【Fluo 3】
・1励起1蛍光
  励起:λex=508 nm、蛍光:λem=527 nm
・解離定数:400 nmol/L
・励起波長が長波長側にあるので細胞に与える障害が少ない
 (NADH,NADPHの影響が出ない)
・Arレーザーによる励起装置が使用出来る。
・スライス標本には適さない
 (Fluo3がスライス表面の死んだ細胞に結合するのか、細胞外のカルシウム濃度を測定する)

【Fluo 4】
・1励起1蛍光
  励起:λex=495 nm、蛍光:λem=518 nm
・解離定数:360 nmol/L
・Fluo3よりも蛍光強度が強い。
・励起波長が長波長側にあるので細胞に与える障害が少ない
 (NADH,NADPHの影響が出ない)
・Arレーザーによる励起装置が使用出来る。
・Fluo3よりも細胞毒性がでやすい。

【Indo 1】
・1励起2蛍光
  励起:λex= 330 nm、蛍光(λem= Ca:410 nm, Ca free:485 nm)
・解離定数:250 nmol/L
・励起波長の切替えの必要がないので、非常に早い速度のCa濃度変化や心筋細胞の
 ような動きの試料も測定できる(但し、検出器は2台必要)

【Rhod 2】
・1励起1蛍光
  励起:λex=553 nm、蛍光:λem=576 nm
・解離定数:1.0 μmol/L
・励起波長が長波長側にあるので細胞に与える障害が少ない
 (NADH,NADPHの影響が出ない)
・Arレーザーによる励起装置が使用出来る。

【Quin 2】
・1励起1蛍光
  励起:λex=339 nm、蛍光:λem=492 nm
・解離定数:110 nmol/L
・一番最初に開発されたプローブ

Q

はじめて測定します。Ca2+プローブの原理や測定方法、トラブルシューティング法を分かり易く教えて下さい。

A

はじめて細胞内Ca2+測定をされる方を対象としたプロトコルを作成しております。
原理、Ca2+プローブの特徴、測定方法、トラブルシューティングの方法等を記載しておりますので、ご参照下さい。

下記リンクよりダウンロード可能です。

「はじめて細胞内Ca2+を測定する方へ -カスタマーサポート担当者の視点から-」

カルシウムイオン測定試薬 Quin 2 | CAS 73630-23-6 同仁化学研究所 カルシウムイオン測定試薬 Quin 2 | CAS 73630-23-6 同仁化学研究所

取扱条件

規格
性状: 本品は、淡黄色粉末で水に溶ける。
純度(HPLC): 95.0% 以上
水溶状: 試験適合
モル吸光係数: 34,000 以上(240 nm付近)
取扱条件
保存条件: 遮光
SDSダウンロード
カルシウムイオン測定試薬 Quin 2 | CAS 73630-23-6 同仁化学研究所

関連製品

Whatman111710Nuclepore径迹蚀刻膜 NUC PC 90MM 1.0um 25/PK

【简单介绍】

Whatman给实验者提供了多种材质的滤膜,先进的技术规范使得今天很多的应用都更愿意选择Whatman
产品。滤膜的孔径精确、韧性好,保证了再现性和一致性。Whatman滤膜孔径范围很广,从0.2µm-12µm,并有很多选择的膜过滤容器。
无菌和消毒包装可用于特殊应用中,也有着色网格类型可供选择。

【简单介绍】

Whatman给实验者提供了多种材质的滤膜,先进的技术规范使得今天很多的应用都更愿意选择Whatman
产品。滤膜的孔径精确、韧性好,保证了再现性和一致性。Whatman滤膜孔径范围很广,从0.2µm-12µm,并有很多选择的膜过滤容器。
无菌和消毒包装可用于特殊应用中,也有着色网格类型可供选择。

【详细说明】

原装进口英国Whatman111710Nuclepore径迹蚀刻膜 NUC PC 90MM 1.0um 25/PK

英国Whatman111710Nuclepore径迹蚀刻膜 NUC PC 90MM 1.0um 25/PK

产品介绍:

Whatman给实验者提供了多种材质的滤膜,先进的技术规范使得今天很多的应用都更愿意选择Whatman
产品。滤膜的孔径精确、韧性好,保证了再现性和一致性。Whatman滤膜孔径范围很广,从0.2μm-12μm,并有很多选择的膜过滤容器。
无菌和消毒包装可用于特殊应用中,也有着色网格类型可供选择。

产品特点:

Nuclepore聚碳酸径迹蚀刻膜由高质量的聚碳酸薄膜制成,具有孔径精确、流速快等特点,并且有着极好的耐化学性和耐热性,这类膜表面光滑而平整,对提取物几乎没有吸附。这种膜还有黑色膜,背景反差大,用于荧光和其它显微镜法。

Track-Etched Polycarbonate and Polyester Membranes

径迹蚀刻聚碳酸酯膜和聚脂膜

Nuclepore Track-Etched Membranes聚碳酸酯膜

Nuclepore聚碳酸酯径迹蚀刻膜是由高品质的聚碳酸酯薄膜制成,具有孔径精确、流速快等特点。并且有着极好的耐化学性和耐热性。这类膜表面光滑而平整,对提取物几乎没有吸附。

特性

不吸附蛋白和提取物,对样品无污染

良好的耐化学性和热稳定性,适用于大多数样品

低灰分、低皮重

膜表面光滑而平整,便于对截留物粒子进行观察

可提供黑色膜,用于荧光和其他纤维镜法,背景反差大

应用

荧光显微镜、生物分析、环境分析、寄生生物学、细胞培养、空气分析、EPA检验、

水体微生物学、燃烧检测。

技术参数-Nuclepore聚碳酸酯膜

产品名

聚碳酸酯

厚度

6-11μm

爆裂强度

>10 psi

净重

0.6-1mg/ cm2

原料比重

1.20g/ cm2

热封范围

230-275

最高可耐高温

140

易燃性

Slow burn

灰度

0.92μg/ cm2

孔率

<15%

计算孔径

0.05-12.0μm

计算孔密度

10*5-6×10*8pore/ cm2

表面质地

平滑

透明度

半透明

折射率

1.584-1.625(双折射)

疏水

纤维释放

高温蒸汽灭菌

121

订货信息-Nuclepore聚碳酸酯膜

直径(mm

孔径(um

货号

直径(mm

孔径(um

货号

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0.015

111101

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1

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90

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0.4

112107**

47

1

111110

142

0.6

112108**

47

2

111111

142

1

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3

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0.2

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0.4

112807**

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10

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2

112811**

47

12

111116

8×10

0.03

113502**

47*

0.4

111137

19×42

5

113313

47***

0.4

111130

25×80**

8

155846

*AOX―适用于AOXAdsorbable Organic Halogens)分析

**不含PVP疏水 ****Good Coated PC *50/

***AERO **25/

***10/

上海金畔生物科技有限公司

文章号19696676-19696676

カルシウムイオン測定試薬 Rhod 2-AM | CAS 145037-81-6 同仁化学研究所

上海金畔生物科技有限公司代理日本同仁化学试剂盒全线产品,欢迎访问日本同仁化学dojindo官网了解更多信息。

カルシウムイオン測定試薬 Rhod 2-AM | CAS 145037-81-6 同仁化学研究所Rhod 2-AM

04 細胞内蛍光プローブ

Rhod 2-AM

カルシウムイオン測定試薬 Rhod 2-AM | CAS 145037-81-6 同仁化学研究所

  • 細胞内蛍光プローブ

カルシウムイオン測定試薬

  • 製品コード
    R002  Rhod 2-AM
  • CAS番号
    145037-81-6
  • 化学名
    1-[2-Amino-5-(3-dimethylamino-6-dimethylammonio-9-xanthenyl)phenoxy]-2-(2-amino-5-methylphenoxy)ethane-N,N,N’,N’-tetraacetic acid, tetraacetoxymethyl ester, bromide
  • 分子式・分子量
    C52H59BrN4O19=1123.94
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
1 mg ¥62,300 341-05821
  • カルシウムイオン測定試薬 Rhod 2-AM | CAS 145037-81-6 同仁化学研究所
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マニュアル

  • プロトコル カルシウムイオン測定試薬 Rhod 2-AM | CAS 145037-81-6 同仁化学研究所 蛍光で細胞内 Ca を測定したい
    カルシウムイオン測定試薬 Rhod 2-AM | CAS 145037-81-6 同仁化学研究所

技術情報

溶解例

1 mg/mL(DMSO), 50 mg/mL(クロロホルム)

参考文献

参考文献を表示する

参考文献

1) M. Burnier, G. Centeno, E. Burki and H. R. Brunner, "Confocal Microscopy to Analyze Cytosolic and Nuclear Calcium in Cultured Vascular Cells", Am. J. Physiol.1994266, C1118. 
2) J. Vergara, M. Difranco, D. Compagnon and B. A. Suarez-Isla, "Imaging of Calcium Transients in Skeletal Muscle Fibers", Biophys. J.199159, 12. 
3) T. Meyer, T. Wensel and L. Stryer, "Kinetics of Calcium Channel Opening by Inositol 1,4,5-Trisphosphate", Biochemistry, 199029, 32. 
4) A. Minta, J. P. Y. Kao and R. Y. Tsien, "Fluorescent Indicators for Cytosolic Calcium Based on Rhodamine and Fluorescein Chromophores", J. Biol. Chem., 1989264(14), 8171. 
5) D. R. Trollinger, W. E. Cascio and J. J. Lemasters, "Selective Loading of Rhod 2 into Mitochondria Shows Mitochondrial Ca2+ Transients during the Contractile Cycle in Adult Rabbit Cardiac Myocytes", Biochem. Biophys. Res. Commun.,> 1997236, 738.

よくある質問

Q

細胞内カルシウム測定試薬は何種類かありますが、どのように選べばよいのでしょうか?

A

測定機器や測定波長などで選ばれることが多いようです。
製品名の後ろに[-AM]が付いているものは細胞膜透過型になります。
それぞれの試薬の特性は

【Fura 2】
・2励起1蛍光
  励起(λex= Ca:340 nm, Ca free:380 nm)、蛍光:λem=500 nm
・解離定数:224 nmol/L
・蛍光強度比での測定が出来るので、誤差要因の補正を行なうことが出来る。
=>細胞内Ca濃度の計算が行ない易い。
・最も多く使用されている。
・励起フィルターを切替えなくてはいけないので、切替え間のタイムロスがある。
 (機器の性能にもよる)

【Fluo 3】
・1励起1蛍光
  励起:λex=508 nm、蛍光:λem=527 nm
・解離定数:400 nmol/L
・励起波長が長波長側にあるので細胞に与える障害が少ない
 (NADH,NADPHの影響が出ない)
・Arレーザーによる励起装置が使用出来る。
・スライス標本には適さない
 (Fluo 3がスライス表面の死んだ細胞に結合するのか、細胞外のカルシウム濃度を測定する)

【Fluo 4】
・1励起1蛍光
  励起:λex=495 nm、蛍光:λem=518 nm
・解離定数:360 nmol/L
・Fluo3よりも蛍光強度が強い。
・励起波長が長波長側にあるので細胞に与える障害が少ない
 (NADH,NADPHの影響が出ない)
・Arレーザーによる励起装置が使用出来る。
・Fluo 3よりも細胞毒性がでやすい。

【Indo 1】
・1励起2蛍光
  励起:λex= 330 nm、蛍光(λem= Ca:410 nm, Ca free:485 nm)
・解離定数:250 nmol/L
・励起波長の切替えの必要がないので、非常に早い速度のCa濃度変化や心筋細胞の
 ような動きの試料も測定できる(但し、検出器は2台必要)

【Rhod 2】
・1励起1蛍光
  励起:λex=553 nm、蛍光:λem=576 nm
・解離定数:1.0 μmol/L
・励起波長が長波長側にあるので細胞に与える障害が少ない
 (NADH,NADPHの影響が出ない)
・Arレーザーによる励起装置が使用出来る。

【Quin 2】
・1励起1蛍光
  励起:λex=339 nm、蛍光:λem=492 nm
・解離定数:110 nmol/L
・一番最初に開発されたプローブ


Q

はじめて測定します。Ca2+プローブの原理や測定方法、トラブルシューティング法を分かり易く教えて下さい。

A

はじめて細胞内Ca2+測定をされる方を対象としたプロトコルを作成しています。
原理、Ca2+プローブの特徴、測定方法、トラブルシューティングの方法等を記載しておりますので、ご参照下さい。

下記リンクよりダウンロード可能です。

「はじめて細胞内Ca2+を測定する方へ -カスタマーサポート担当者の視点から-」

カルシウムイオン測定試薬 Rhod 2-AM | CAS 145037-81-6 同仁化学研究所 カルシウムイオン測定試薬 Rhod 2-AM | CAS 145037-81-6 同仁化学研究所

取扱条件

規格
性状: 本品は、暗紫色固体でクロロホルムに溶ける。
蛍光スペクトル: 試験適合
NMRスペクトル: 試験適合
取扱条件
保存条件: 冷凍,遮光
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カルシウムイオン測定試薬 Rhod 2-AM | CAS 145037-81-6 同仁化学研究所

関連製品

細胞内pH測定試薬 BCECF | CAS 85138-49-4 同仁化学研究所

上海金畔生物科技有限公司代理日本同仁化学试剂盒全线产品,欢迎访问日本同仁化学dojindo官网了解更多信息。

細胞内pH測定試薬 BCECF | CAS 85138-49-4 同仁化学研究所BCECF

04 細胞内蛍光プローブ

BCECF

細胞内pH測定試薬 BCECF | CAS 85138-49-4 同仁化学研究所

  • 細胞内蛍光プローブ
  • 細胞内蛍光プローブ

細胞内pH測定試薬

  • 製品コード
    B031  BCECF
  • CAS番号
    85138-49-4
  • 化学名
    2′,7′-Bis(carboxyethyl)-4 or 5-carboxyfluorescein
  • 分子式・分子量
    C27H20O11=520.44
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
5 mg ¥16,100 345-05184
  • 細胞内pH測定試薬 BCECF | CAS 85138-49-4 同仁化学研究所
試験成績書

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  • ご購入方法
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    細胞内pH測定試薬 BCECF | CAS 85138-49-4 同仁化学研究所

技術情報

注意事項

・本製品を粉末の状態で取り出し使用する場合、性状の性質上、静電気等の要因で容器内に付着し、取り出しにくい場合があります。
・容器内に付着し、取り出せなかった粉末に関しては、使用する溶媒を容器に入れ、溶かし出して使用してください。

参考文献

参考文献を表示する

1) R. A. Steinhardt and D. Mazia, "Development of K+-conductance and Membrane Potentials in Unfertilized Sea Urchin Eggs After Exposure to NH4OH", Nature, 1973, 241, 400.
2) T. J. Rink, R. Y. Tsien and T. Pozzan, "Cytoplasmic pH and Free Mg2+ in Lymphocytes", J. Cell Biol., 1982, 95, 189.
3) A. M. Paradiso, R. Y. Tsien and T. E. Machen, "Na+ -H+ Exchange in Gastric Glands as Measured with a Cytoplasmic-trapped, Fluorescent pH Indicator", Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1984, 81, 7436.
4) S. Grinstein, B. Elder and W. Furuya, "Phorbol Ester-induces Changes of Cytoplasmic pH in Neutrophils: Role of Exocytosis in Na+ – H+ Exchange", Am. J. Physiol., 1985, 248, C379.
5) G. B. Zavoico, E. J. Cragoe and M. B. Feinstein, "Regulation of Intracellular pH in Human Platelets", J. Biol. Chem., 1986, 261(28), 13160.
6) G. R. Bright, W. Fisher, J. Rogowska and L. Taylor, "Fluorescence Ratio Imaging Microscopy: Temporal and Spatial Measurements of Cytoplasmic pH", J. Cell Biol., 1987, 104, 1019.
7) C. Aalkjaer and E. J. Gragoe Jr, "Intracellular pH Regulation in Resting and Contracting Segments of Rat Mesenteric Resistance Vessels", J. Physiol., 1988, 402, 391.
8) K. Tsujimoto, M. Semadeni, M. Huflejt and L. Packer, "Intracellular pH of Halobacteria Can Be Determined by the Fluorescent Dye 2',7'-bis(carboxyethyl)-5(6)-carboxyfluorescein", Biochem. Biophys. Res. Commun., 1988, 155, 123.
9) M. A. Kolber, R. R. Quinones, R. E. Gress and P. A. Henkart, "Measurament of Cytotoxicity by Target Cell Release and Retention of the Fluorescent Dye Bis-carboxyethyl-carboxyfluorescein(BCECF)", J. Immunol. Methods, 1988, 108, 255.
10) H. Harada, Y. Kanai, M. Anzai and Y. Suketa, "cAMP Activates Cl/HCO3 Exchange for Regulation of Intracellular pH in Renal Epithelial Cells", Biochim. Biophys. Acta, 1991, 1092, 404.
11) C. C. Freudenrich, E. Murphy, L. A. Levy, R. E. London and M. Lieberman, "Intracellular pH Modulates Cytosolic Free Magnesium in Cultured Chicken Heart Cells", Am. J. Physiol., 1992, 262(4), C1024.
12) K. Khodakhah and D. Ogden, "Functional Heterogeneity of Calcium Release by Inositol Triphosphate in Single Purkinje Neurones, Cultured Cerebellar Astorocytes, and Peripheral Tissues", Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1993, 90, 4976.
13) G. Boyarsky, C. Hanssen and L. A. Clyne, "Superiority of in vitro Over in vivo Calibrations of BCECF in Vascular Smooth Muscle Cells", FASEB J., 1996, 10, 1205.
14) S. A. Weston and C. R. Parish, "New Fluorescent Dyes for Lymphocyte Migration Studies Analysis by Flow Cytometry and Fluorescent Microscopy", J. Immunol. Methods, 1990, 133, 87.
15) L. S. D. Clerck, C. H. Bridts, A. M. Mertens, M. M. Moens and W. J. Stevens, "Use of Fluorescent Dyes in the Determination of Adherence of Human Leucocytes to Endothelial Cells and the Effects of Fluorochromes on Cellular Function", J. Immunol. Methods, 1994, 172, 115.

取扱条件

規格
性状: 本品は、橙色~赤茶褐色粉末でメチルアルコールに溶ける。
純度(HPLC): 85.0% 以上
メチルアルコール溶状: 試験適合
蛍光スペクトル: 試験適合
IRスペクトル: 試験適合
NMRスペクトル: 試験適合
取扱条件
保存条件: 遮光
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04 細胞内蛍光プローブ

BCECF-AM special packaging

  • 細胞内蛍光プローブ

細胞内pH測定試薬

  • 製品コード
    B221  BCECF-AM special packaging
  • CAS番号
    117464-70-7
  • 化学名
    3′-O-Acetyl-2′,7′-bis(carboxyethyl)-4 or 5-carboxyfluorescein, diacetoxymethyl ester
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和光純薬
50 μg x 8 ¥19,600 349-08161
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  • 取扱説明書 細胞内pH測定試薬 BCECF-AM special packaging | CAS 117464-70-7 同仁化学研究所 日本語
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参考文献

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1) R. A. Steinhardt and D. Mazia, "Development of K+-conductance and Membrane Potentials in Unfertilized Sea Urchin Eggs After Exposure to NH4OH", Nature, 1973, 241, 400.
2) T. J. Rink, R. Y. Tsien and T. Pozzan, "Cytoplasmic pH and Free Mg2+ in Lymphocytes", J. Cell Biol., 1982, 95, 189.
3) A. M. Paradiso, R. Y. Tsien and T. E. Machen, "Na+ -H+ Exchange in Gastric Glands as Measured with a Cytoplasmic-trapped, Fluorescent pH Indicator", Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1984, 81, 7436.
4) S. Grinstein, B. Elder and W. Furuya, "Phorbol Ester-induces Changes of Cytoplasmic pH in Neutrophils: Role of Exocytosis in Na+ – H+ Exchange", Am. J. Physiol., 1985, 248, C379.
5) G. B. Zavoico, E. J. Cragoe and M. B. Feinstein, "Regulation of Intracellular pH in Human Platelets", J. Biol. Chem., 1986, 261(28), 13160.
6) G. R. Bright, W. Fisher, J. Rogowska and L. Taylor, "Fluorescence Ratio Imaging Microscopy: Temporal and Spatial Measurements of Cytoplasmic pH", J. Cell Biol., 1987, 104, 1019.
7) C. Aalkjaer and E. J. Gragoe Jr, "Intracellular pH Regulation in Resting and Contracting Segments of Rat Mesenteric Resistance Vessels", J. Physiol., 1988, 402, 391.
8) K. Tsujimoto, M. Semadeni, M. Huflejt and L. Packer, "Intracellular pH of Halobacteria Can Be Determined by the Fluorescent Dye 2',7'-bis(carboxyethyl)-5(6)-carboxyfluorescein", Biochem. Biophys. Res. Commun., 1988, 155, 123.
9) M. A. Kolber, R. R. Quinones, R. E. Gress and P. A. Henkart, "Measurament of Cytotoxicity by Target Cell Release and Retention of the Fluorescent Dye Bis-carboxyethyl-carboxyfluorescein(BCECF)", J. Immunol. Methods, 1988, 108, 255.
10) H. Harada, Y. Kanai, M. Anzai and Y. Suketa, "cAMP Activates Cl/HCO3 Exchange for Regulation of Intracellular pH in Renal Epithelial Cells", Biochim. Biophys. Acta, 1991, 1092, 404.
11) C. C. Freudenrich, E. Murphy, L. A. Levy, R. E. London and M. Lieberman, "Intracellular pH Modulates Cytosolic Free Magnesium in Cultured Chicken Heart Cells", Am. J. Physiol., 1992, 262(4), C1024.
12) K. Khodakhah and D. Ogden, "Functional Heterogeneity of Calcium Release by Inositol Triphosphate in Single Purkinje Neurones, Cultured Cerebellar Astorocytes, and Peripheral Tissues", Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1993, 90, 4976.
13) G. Boyarsky, C. Hanssen and L. A. Clyne, "Superiority of in vitro Over in vivo Calibrations of BCECF in Vascular Smooth Muscle Cells", FASEB J., 1996, 10, 1205.
14) S. A. Weston and C. R. Parish, "New Fluorescent Dyes for Lymphocyte Migration Studies Analysis by Flow Cytometry and Fluorescent Microscopy", J. Immunol. Methods, 1990, 133, 87.
15) L. S. D. Clerck, C. H. Bridts, A. M. Mertens, M. M. Moens and W. J. Stevens, "Use of Fluorescent Dyes in the Determination of Adherence of Human Leucocytes to Endothelial Cells and the Effects of Fluorochromes on Cellular Function", J. Immunol. Methods, 1994, 172, 115.

取扱条件

規格
性状: 本品は、白色~微黄色固体でジメチルスルホキシド及びアセトニトリルに溶ける。
純度(HPLC): 90.0% 以上
蛍光スペクトル: 試験適合
NMRスペクトル: 試験適合
取扱条件
保存条件: 冷凍,遮光
危険・有害
シンボルマーク
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BCECF-AM

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  • 細胞内蛍光プローブ

細胞内pH測定試薬

  • 製品コード
    B262  BCECF-AM
  • CAS番号
    117464-70-7
  • 化学名
    3′-O-Acetyl-2′,7′-bis(carboxyethyl)-4 or 5-carboxyfluorescein, diacetoxymethyl ester
  • 分子式・分子量
    C35H28O15=688.59
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
1 mg ¥38,300 342-08411

本品は、通常、チューブ底面にフィルム状に付着した状態となっております。
稀に、輸送中の振動等により本品がチューブ底面から外れ、チューブ壁面やキャップ裏に付着している場合がございます。
内容物を下に落としてから開封をしてご使用ください。
ご不明な点がございましたら、小社カスタマーリレーション部までお問合せください。(Free Dial:0120-489-548)

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参考文献

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1) R. A. Steinhardt and D. Mazia, "Development of K+-conductance and Membrane Potentials in Unfertilized Sea Urchin Eggs After Exposure to NH4OH", Nature, 1973, 241, 400.
2) T. J. Rink, R. Y. Tsien and T. Pozzan, "Cytoplasmic pH and Free Mg2+ in Lymphocytes", J. Cell Biol., 1982, 95, 189.
3) A. M. Paradiso, R. Y. Tsien and T. E. Machen, "Na+ -H+ Exchange in Gastric Glands as Measured with a Cytoplasmic-trapped, Fluorescent pH Indicator", Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1984, 81, 7436.
4) S. Grinstein, B. Elder and W. Furuya, "Phorbol Ester-induces Changes of Cytoplasmic pH in Neutrophils: Role of Exocytosis in Na+ – H+ Exchange", Am. J. Physiol., 1985, 248, C379.
5) G. B. Zavoico, E. J. Cragoe and M. B. Feinstein, "Regulation of Intracellular pH in Human Platelets", J. Biol. Chem., 1986, 261(28), 13160.
6) G. R. Bright, W. Fisher, J. Rogowska and L. Taylor, "Fluorescence Ratio Imaging Microscopy: Temporal and Spatial Measurements of Cytoplasmic pH", J. Cell Biol., 1987, 104, 1019.
7) C. Aalkjaer and E. J. Gragoe Jr, "Intracellular pH Regulation in Resting and Contracting Segments of Rat Mesenteric Resistance Vessels", J. Physiol., 1988, 402, 391.
8) K. Tsujimoto, M. Semadeni, M. Huflejt and L. Packer, "Intracellular pH of Halobacteria Can Be Determined by the Fluorescent Dye 2',7'-bis(carboxyethyl)-5(6)-carboxyfluorescein", Biochem. Biophys. Res. Commun., 1988, 155, 123.
9) M. A. Kolber, R. R. Quinones, R. E. Gress and P. A. Henkart, "Measurament of Cytotoxicity by Target Cell Release and Retention of the Fluorescent Dye Bis-carboxyethyl-carboxyfluorescein(BCECF)", J. Immunol. Methods, 1988, 108, 255.
10) H. Harada, Y. Kanai, M. Anzai and Y. Suketa, "cAMP Activates Cl/HCO3 Exchange for Regulation of Intracellular pH in Renal Epithelial Cells", Biochim. Biophys. Acta, 1991, 1092, 404.
11) C. C. Freudenrich, E. Murphy, L. A. Levy, R. E. London and M. Lieberman, "Intracellular pH Modulates Cytosolic Free Magnesium in Cultured Chicken Heart Cells", Am. J. Physiol., 1992, 262(4), C1024.
12) K. Khodakhah and D. Ogden, "Functional Heterogeneity of Calcium Release by Inositol Triphosphate in Single Purkinje Neurones, Cultured Cerebellar Astorocytes, and Peripheral Tissues", Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1993, 90, 4976.
13) G. Boyarsky, C. Hanssen and L. A. Clyne, "Superiority of in vitro Over in vivo Calibrations of BCECF in Vascular Smooth Muscle Cells", FASEB J., 1996, 10, 1205.
14) S. A. Weston and C. R. Parish, "New Fluorescent Dyes for Lymphocyte Migration Studies Analysis by Flow Cytometry and Fluorescent Microscopy", J. Immunol. Methods, 1990, 133, 87.
15) L. S. D. Clerck, C. H. Bridts, A. M. Mertens, M. M. Moens and W. J. Stevens, "Use of Fluorescent Dyes in the Determination of Adherence of Human Leucocytes to Endothelial Cells and the Effects of Fluorochromes on Cellular Function", J. Immunol. Methods, 1994, 172, 115.
16)M. Hashimoto, S. Kimura, C. Kanno, Y. Yanagawa, T. Watanabe, J. Okabe, E. Takahashi, M. Nagano and H. Kitamura, "Macrophage ubiquitin‑specific protease 2 contributes to motility, hyperactivation, capacitation, and in vitro fertilization activity of mouse sperm”, Cellular and Molecular Life Sciences, 2020, doi: 10.1007/s00018-020-03683-9

取扱条件

規格
性状: 本品は、淡橙色~淡橙褐色粉末または固体で、DMSOおよびアセトニトリルに溶ける。
純度(HPLC): 90.0% 以上
蛍光スペクトル: 試験適合
NMRスペクトル: 試験適合
取扱条件
保存条件: 冷凍,遮光 , 取扱条件: 吸湿注意
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関連製品

細胞内鉄イオン測定試薬 FerroOrange | CAS – 同仁化学研究所

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細胞内鉄イオン測定試薬 FerroOrange | CAS - 同仁化学研究所FerroOrange

04 細胞内蛍光プローブ

FerroOrange

細胞内鉄イオン測定試薬 FerroOrange | CAS - 同仁化学研究所

  • 細胞内蛍光プローブ

細胞内鉄イオン測定試薬

  • 製品コード
    F374  FerroOrange
  • CAS番号
容 量 メーカー希望
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和光純薬
1 tube ¥16,100 342-09533
3 tubes ¥36,300 346-09531

※ 1 tube当たり24 μgのFerroOrangeが含まれます。

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技術情報

鉄検出試薬の選択

鉄検出時の実験方法および測定機器に応じて試薬を選択頂けます。

  FerroOrange Mito-FerroGreen
細胞内の局在 細胞内 ミトコンドリア
蛍光特性 λex : 543 nm、λem : 580 nm λex : 505 nm、λem : 535 nm
対応装置
(フィルター)
蛍光顕微鏡、プレートリーダー (Cy3) 蛍光顕微鏡 (FITC、GFP)
測定対象 生細胞 生細胞
染色回数 24 μgで35 mm dish 17枚分染色可能
(終濃度 1 μmol/l使用時)
50 μgで35 mm dish 5枚分染色可能
(終濃度 5 μmol/l使用時)

技術や使用製品に関する補足

【注目の研究・トピック】

 

Dojin News No.162

地球上の生命体の活動や疾患における鉄の重要性の再認識 (名古屋大学 豊國 伸哉 先生)

 

Dojin News No.172

二重機能性蛍光色素(H-V)を用いたフェロトーシスの解明

 

 

▶Dojin News(4回/年)バックナンバー、

配信のご登録はこちら

 

高感度だから内在性の鉄も検出できる

HeLa細胞を用いて、細胞内に内在するFe2+および鉄キレート試薬Bpy(2,2‘-bipyridine、終濃度:100 μmol/l)と鉄(硫酸アンモニウム鉄(II) 、終濃度:100 μmol/l)の添加有無により、細胞内のFe2+の変化をFerroOrangeにより確認しました。

蛍光顕微鏡によるイメージング
鉄キレート試薬を添加することで無刺激の細胞に比べ蛍光強度が低下したことから、細胞内には内在性のFe2+が存在することが確認できました。

細胞内鉄イオン測定試薬 FerroOrange | CAS - 同仁化学研究所

<検出条件> Ex: 561 nm、Em: 570-620 nm      スケールバー:20 μm

 

プレートアッセイにより簡便に数値化
鉄キレート試薬および鉄の添加による細胞内のFe2+量の変化を数値データとして確認できました。

細胞内鉄イオン測定試薬 FerroOrange | CAS - 同仁化学研究所

<検出条件> Ex: 543 nm、Em: 580 nm

*操作の詳細は よくある質問「プレートリーダーでの測定方法を教えてください。」をご参照ください。

技術や使用製品に関する補足

ーフェロトーシス研究ー

 

実験例 : アミノ酸トランスポーター(xCT)阻害 

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【関連試薬

・過酸化脂質検出試薬

(Liperfluo)

 

・グルタミン酸測定キット

(Glutamate Assay Kit-WST)

 

・グルタチオン測定キット

(GSSG/GSH Quantification Kit)

参考文献

参考文献を表示する

 

文献No. 対象サンプル 装置    引用(リンク)
1) 細胞
(HeLa)
蛍光顕微鏡 K. Tomita, M. Fukumoto, K. Itoh, Y. Kuwahara, K. Igarashi, T. Nagasawa, M. Suzuki, A. Kurimasa and T. Sato, "MiR-7-5p is a key factor that controls radioresistance via intracellular Fe2+ content in clinically relevant radioresistant cells.", Biochem Biophys Res Commun.., 2019,doi: 10.1016/j.bbrc.2019.08.117.
2) 細胞
(ヒト内皮細胞株)
蛍光顕微鏡 Y. Wang and M. Tang, "PM2.5 induces ferroptosis in human endothelial cells through iron overload and redox imbalance", Environ. Pollut.2019, 264, doi: 10.1016/j.envpol.2019.07.105.
3) 細胞
(MCF7-ADR)
蛍光顕微鏡 S Guo, X Yao, Q Jiang, K Wang, Y Zhang, H. Peng, J. Tang and W. Yang , "Dihydroartemisinin-Loaded Magnetic Nanoparticles for Enhanced Chemodynamic Therapy", Front Pharmacol 2020, 11, 226.
4) 細胞
(293T)
蛍光顕微鏡 R. A. Weber, F. S. Yen, S.P.V. Nicholson, H. Alwaaseem, E.C. Bayraktar,M. Alam, R. C. Timson, K. La, M. Abu-Remaileh, H. Molina and K. Birsoy, "Maintaining Iron Homeostasis Is the Key Role of Lysosomal Acidity for Cell Proliferation", Mol. Cell2020, 77, 1-11.
5) 細胞
(SK-HEP-1)
蛍光顕微鏡
(解析ソフトを使用し数値化)
X. Li, T. Wang, X. Huang, Y. Li, T. Sun, S. Zang, K. Guan, Y. Xiong, J. Liu and H. Yuan , "Targeting ferroptosis alleviates methionine‐choline deficient (MCD)‐diet induced NASH by suppressing liver lipotoxicity", Liver Int., 2020,  doi:10.1111/liv.14428.
6) 細胞
(HepG2)

蛍光顕微鏡
マイクロプレートリーダー
イメージングサイトメーター

T. Hirayama, M. Niwa, S. Hirosawa and H. Nagasawa, "High-Throughput Screening for the Discovery of Iron Homeostasis Modulators Using an Extremely Sensitive Fluorescent Probe", ACS Sens., 2020,doi: 10.1021/acssensors.0c01445.
※論文で「RhoNox-4」と記載されている化合物が「FerroOrange」となります。

7) 細胞、組織
(BV-2細胞、海馬(脳))
蛍光顕微鏡 T. Wu, X. Wang, J. Cheng, X. Liang, Y. Li, M. Chen, L. Kong and M. Tang, "Nitrogen‑doped graphene quantum dots induce ferroptosis through disrupting calcium homeostasis in microglia", Part. Fibre Toxicol.2022, doi:10.1186/s12989-022-00464-z.
8) 細胞、組織
(HeLa細胞、子宮頸冷凍スライス)
蛍光顕微鏡 T. Wang, M. Gong, Y. Cao, C. Zhao, Y. Lu, Y. Zhou, S. Yao, J. Chen, C. Zhao and R. Ju, "Persistent ferroptosis promotes cervical squamous intraepithelial lesion development and oncogenesis by regulating KRAS expression in patients with high risk-HPV infection", Cell Death Discovery2022, doi:10.1038/s41420-022-01013-5.

よくある質問

Q

FerroOrangeで染色する時の注意点を教えて下さい。

A

染色時は下記の点に注意の上、使用してください。

①FerroOrange染色後の培地交換
培地交換によりFerroOrangeが細胞外へ漏れ出てしまうため、染色後はそのまま観察してください。

②コントロール実験
鉄検出の実験条件を確認するため、鉄キレート試薬Bpy(2,2‘-bipyridine)または鉄(硫酸アンモニウム鉄(II) )を添加したサンプルを準備し、FerroOrangeの蛍光強度の変化をみられることをお勧めします。

③細胞が染色されにくい(感度が低い)時の対応
細胞種によって染色度合いに差がみられる場合があります。
FerroOrange working solution濃度を推奨の1 μmol/lより高くして染色を行ってください。1-5 μmol/lの範囲での染色をお勧めします。

Q

プレートリーダーでの測定方法を教えてください。

A

下記の実験例を参考に測定ください。

<測定サンプル>
サンプルA:添加剤なし(HeLa細胞のみ)
サンプルB:鉄キレート試薬 2,2'-bipyridyl (Bpy) を添加したHeLa細胞
サンプルC:鉄(硫酸アンモニウム鉄)を添加したHeLa細胞

<測定操作>
1. 96ウェルマイクロブラックプレート(透明底)にHeLa細胞懸濁液100 μlを 10,000 cells/wellになるよう播種し、37℃インキュベータ(5% CO2)で一晩培養した。
2. サンプルCの細胞をMEM(FBS不含) 100 μlで3回洗浄した。
3. サンプルCのウェルに硫酸アンモニウム鉄(II)/MEM(FBS不含)溶液 100 μL(終濃度:100 μmol/l)を添加し、37℃インキュベーター(5% CO2)中で30分間静置した。
4. 全てのウェルの細胞をHBSS 100 μlで3回洗浄した。
5. サンプルAおよびCのウェルに1 μmol/l FerroOrange working solution 100 μlを添加し、サンプルBのウェルにFerroOrange (終濃度:1 μmol/l)及び Bpy (終濃度:100 μmol/l)を含むHBSS溶液 100 μlを添加し、37℃インキュベータ(5% CO2)で30分間インキュベートした。
6. プレートリーダーにて各サンプルの蛍光強度(Ex: 543 nm、Em: 580 nm)を検出した。

 

<測定データ>
細胞内鉄イオン測定試薬 FerroOrange | CAS - 同仁化学研究所

Q

推奨のフィルターを教えてください。

A

検出時の推奨フィルターは下記の通りです。
励起フィルター: 530-565 nm
蛍光フィルター: 570-620 nm

Q

フローサイトメーターによる解析は可能ですか?

A

可能です。但し、以下の理由より実験条件の最適化を行う必要があります。

 ・細胞密度や細胞の種類によっては、FerroOrangeの染色強度に影響を与える場合があります。
 ・培地交換や洗浄により、色素が細胞外に漏れる場合があります。

(参考)
HeLa細胞を用いた実験例をご紹介致します。

細胞内鉄イオン測定試薬 FerroOrange | CAS - 同仁化学研究所

<操作>
1. MEM(10% FBS、1% penicillin-streptomyci)培地に懸濁したHeLa細胞を6ウェルプレートに播種し(1 x105 cells/well)、37℃、5%CO2インキュベーター中で一晩培養した。
2. 細胞を無血清培地(2 ml)で3回洗浄し、無血清培地(1 ml)を細胞に添加した。
3. 10 mmol/l 硫酸鉄(II)アンモニウム(10 μl)をウェルに添加した(終濃度:100 μmol/l)。
4. 硫酸鉄アンモニウムと無血清培地を混合するため、ウェル内の溶液全量を一度マイクロピペットで吸い上げ、再び同じウェルにゆっくり戻した。
5. 37℃、5% CO2インキュベーター中で20分間インキュベートし、HBSS(1 ml)で3回細胞を洗浄した。
6. トリプシン処理(250 µl)後、血清培地(1 ml)で反応を停止し、細胞懸濁液 1.25 mlを遠心管に移した。
7.  細胞懸濁液を1,500 rpm、3分間遠心分離した。
8. 上清を除去し、HBSS(1 ml)を遠心管に加え、ピペッティングにより懸濁した。
9.  細胞懸濁液を1,500 rpmで3分間遠心し、上清を除去した。
10. 無血清培地で希釈した1 μmol/l FerroOrangeを300 μl細胞に添加した。
11. 37℃、5% CO2インキュベーター中で15-30分間インキュベートした。
12. 細胞をセルストレーナーに通し、フローサイトメーターを用いて解析した。

 

<注意点>

1. 染色後の洗浄によりFerroOrangeが細胞外に漏出するため、染色後洗浄をせずに測定してください。

(染色後の洗浄有無による蛍光強度の差)
  細胞内鉄イオン測定試薬 FerroOrange | CAS - 同仁化学研究所

 

2.  色素溶液の量に依存して蛍光強度が変化することがあるので、等量の色素溶液を添加してください。

 (色素溶液量による蛍光強度の差)
   細胞内鉄イオン測定試薬 FerroOrange | CAS - 同仁化学研究所

3. 鉄(II)を検出する実験条件を確認するために、硫酸鉄(II)アンモニウムを含む試料を調製し、
  FerroOrangeの蛍光強度の変化を確認することを推奨します。
 

細胞内鉄イオン測定試薬 FerroOrange | CAS - 同仁化学研究所 細胞内鉄イオン測定試薬 FerroOrange | CAS - 同仁化学研究所

取扱条件

規格
性状: 本品はアセトニトリル、メタノール、ジメチルスルホキシドに溶解する。
純度(HPLC): 92.0% 以上
蛍光スペクトル: 試験適合
取扱条件
保存条件: 冷蔵,遮光
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細胞内鉄イオン測定試薬 FerroOrange | CAS - 同仁化学研究所

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    Mito-FerroGreen

  • 細胞内鉄イオン測定試薬 FerroOrange | CAS - 同仁化学研究所

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    Liperfluo

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    脂質過酸化検出試薬

    Lipid Peroxidation Probe -BDP 581/591 C11-

塩化物イオン測定試薬 MQAE | CAS 124505-60-8 同仁化学研究所

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塩化物イオン測定試薬 MQAE | CAS 124505-60-8 同仁化学研究所MQAE

04 細胞内蛍光プローブ

MQAE

塩化物イオン測定試薬 MQAE | CAS 124505-60-8 同仁化学研究所

  • 細胞内蛍光プローブ

塩化物イオン測定試薬

  • 製品コード
    M024  MQAE
  • CAS番号
    124505-60-8
  • 化学名
    N-Ethoxycarbonylmethyl-6-methoxyquinolinium bromide
  • 分子式・分子量
    C14H16BrNO3=326.19
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
50 mg ¥19,400 348-06051
  • 塩化物イオン測定試薬 MQAE | CAS 124505-60-8 同仁化学研究所
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技術情報

溶解例

3 mg/mL(水:アセトニトリル=1:1)

参考文献

参考文献を表示する

1) A. S. Verkman, M. C. Sellers, A. C. Chao, T. Leung and R. Ketcham, "Synthesis and Characterization of Improved Chloride-sensitive Fluorescent Indicators for Biological Applications", Anal. Biochem.1989178, 355. 
2) M. Inoue, M. Hara, X.-T. Zeng, T. Hirose, S. Ohnishi, T. Yasukura, T. Uriu, K. Omori, A. Minato and C. Inagaki, "An ATP-driven Cl Pump Regulates Cl Concentrations in Rathippocampal Neurons", Neurosci. Lett.1991134, 75. 
3) T. Nakamura, H. Kaneko and N. Nishida, "Direct Measurement of Chloride Concentration in Newt Olfactory Receptors with the Fluorescent Probe", Neurosci. Lett.1997237, 5.

取扱条件

規格
性状: 本品は、微黄色~黄色粉末である。
純度(HPLC): 95.0% 以上
IRスペクトル: 試験適合
取扱条件
保存条件: 冷蔵
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塩化物イオン測定試薬 MQAE | CAS 124505-60-8 同仁化学研究所

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VECTOR 生物素苋尾状凝集素(ACL,ACA) BIOTIN-ACLB-1255

VECTOR 生物素苋尾状凝集素(ACL,ACA) BIOTIN-ACL

  • 产品型号:  B-1255
  • 简单描述
  • VECTOR 生物素苋尾状凝集素(ACL,ACA) BIOTIN-ACLBiotinylated Amaranthus Caudatus Lectin (ACL, ACA)Detection of Glycoproteins using Lectins in Histochemistry,ELISA, and Western Blot Applications
详细介绍

VECTOR 生物素苋尾状凝集素(ACL,ACA) BIOTIN-ACL

The following protocols offer guidelines for assay development using lectin-based detection of glycoproteins
present in tissue sections, adsorbed onto microtiter plates, or transferred from electrophoretic
gels onto nitrocellulose or PVDF membranes.
Histochemistry:
1a. Staining procedure for paraffin sections: Deparaffinize and hydrate tissue sections through
xylenes or other clearing agents and graded alcohol series and rinse for 5 minutes in tap water.
If required, retrieve antigens using the Antigen Unmasking Solution (H-3300 or H-3301).
1b. Staining procedure for frozen sections: Air dry sections. Immediay before staining, fix
sections with acetone. Transfer slices to buffer. If endogenous enzyme activities are present,
inactivate using appropriate methods.
2. Perform Streptavidin/Biotin blocking if required following kit instructions (SP-2002). Do not
use SP-2001. Block non-specific binding by incubating section with Carbo-Free™ Blocking
Solution (Cat. No. SP-5040) for 30 minutes at room temperature. Blot excess blocking solution
from the sections.
3. Apply biotinylated lectin at approximay 2-20 μg/ml in PBS (10 mM sodium phosphate, 150
mM NaCl, pH 7.4) to the sections and incubate for 30 minutes at room temperature. Wash with
TPBS (PBS + 0.05% Tween™20).
4. Prepare VECTASTAIN®
® ABC (peroxidase, Cat. No. PK-6100) or VECTASTAIN® ABC-AP
(alkaline phosphatase, Cat. No. AK-5000) reagents according to the kit instructions. Apply to the
sections and incubate for 30 minutes at room temperature. Wash with TPBS.
5. Apply an appropriate precipitating substrate for the enzyme system used in step 4. For peroxidase,
ImmPACT™ DAB (Cat. No. SK-4105) is recommended; for alkaline phosphatase, Vector® Red
(Cat. No. SK-5100). Rinse in tap water.
6. Counterstain (optional), clear and mount. For galactose or GalNAc-specific lectins avoid mounting
in glycerol-based mounting media.
VECTOR 生物素苋尾状凝集素(ACL,ACA) BIOTIN-ACL

ELISA:
1. Adsorb target protein to microtiter plate by placing 50-200 μl of approximay 3 μg/ml glycoprotein
solution into the desired wells. Some wells may be left untreated as negative controls. Incubate at
37 ºC for 1 hour. Wash wells three times with TPBS (PBS + 0.05% Tween™20).
2. Block non-specific binding by filling each well to the brim with Carbo-Free™ Blocking Solution
(Cat. No. SP-5040) for 30 minutes at room temperature. Wash wells three times with TPBS.
3. Apply 50-200 μl of approximay 2-20 μg/ml biotinylated lectin in PBS to the wells and incubate
for 30 minutes at room temperature. Wash wells three times with TPBS.

4. Prepare VECTASTAIN®
® ABC (peroxidase, Cat. No. PK-6100) or VECTASTAIN® ABC-AP
(alkaline phosphatase, Cat. No. AK-5000) reagents according to the kit instructions. Apply to the
wells and incubate for 30 minutes at room temperature. Wash wells three times with TPBS.
5. Apply an appropriate non-precipitating substrate for the enzyme system used in step 4. For
peroxidase, ABTS (Cat. No. SK-4500) is recommended; for alkaline phophatase, pNPP (Cat. No.
SK-5900).
6. Quantify the colored reaction product by spectrophotometry.
Western Blot:
1. Perform electrophoresis and transfer proteins to a membrane according to standard procedures.
2. Block non-specific binding by incubating the membrane in Carbo-Free™ Blocking Solution (Cat.
No. SP-5040) for 30 minutes at room temperature. Use a sufficient volume to compley cover
the membrane.
3. Incubate membrane in PBS containing approximay 2-20 μg/ml biotinylated lectin for 30 minutes
at room temperature. Wash with TPBS (PBS +0.05% Tween™20).
4. Prepare VECTASTAIN®
® ABC (peroxidase, Cat. No. PK-6100) or VECTASTAIN® ABC-AP
(alkaline phosphatase, Cat. No. AK-5000) reagents according to the kit instructions. Incubate the
membrane in the reagent for 30 minutes at room temperature. Wash with TPBS.
5. Apply an appropriate substrate for the enzyme system used in step 4. For peroxidase, DuoLuX™
Chemiluminescent/Fluorescent Substrate for Peroxidase (Cat. No. SK-6604) or ImmPACT™ DAB
(Cat. No. SK-4105) are recommended; for alkaline phosphatase, Chemiluminescent/Fluorescent
Substrate for Alkaline Phosphatase (Cat. No. SK-6605) or BCIP/NBT (Cat. No. SK-5400) are
recommended.
Negative Controls
Negative controls should be run in parallel in each of the above described methodologies to validate
binding results. When applying lectins, one of the most appropriate negative controls is to preabsorb
the lectin with a concentration of a defined sugar, with which, the lectin has a known high affinity.
Vector Labs offers a series of sugars that are intended for such a purpose.
The lectin is diluted to a suitable working concentration in a solution containing approximay
200 mM to 500 mM of the sugar. This mixture is left to bind at room temperature for 30 to 60 min.
Following this absorption incubation, the mixture is substituted into the procedure in place of the unabsorbed
lectin and incubated under the same conditions. The subsequent detection procedure is followed
as for the test method. In most cases the vast majority of lectin binding to the tissue section (membrane
blot, etc.) will be eliminated. Some trace binding to the section (blot etc) may still be present under
these conditions and probably indicates presence of secondary or tertiary sugar preferences. These negative
control results should be compared with the test results to determine specificity of binding

 

ミトコンドリア内鉄イオン検出試薬 Mito-FerroGreen | CAS – 同仁化学研究所

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ミトコンドリア内鉄イオン検出試薬 Mito-FerroGreen | CAS - 同仁化学研究所Mito-FerroGreen

04 細胞内蛍光プローブ

Mito-FerroGreen

ミトコンドリア内鉄イオン検出試薬 Mito-FerroGreen | CAS - 同仁化学研究所

  • 細胞内蛍光プローブ
  • 細胞機能解析
  • ミトコンドリア関連

ミトコンドリア内鉄イオン検出試薬

  • 製品コード
    M489  Mito-FerroGreen
  • CAS番号
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
50 μg x 2 ¥28,400 344-09211
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  • 取扱説明書 日本語
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技術情報

測定原理

ミトコンドリア内鉄イオン検出試薬 Mito-FerroGreen | CAS - 同仁化学研究所

参考文献

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参考文献

1) T. Hirayama,  S. Kadota, M. Niwa  and  H. Nagasawa, "A mitochondria-targeted fluorescent probe for selective detection of mitochondrial labile Fe(II)", Metallomics., 2018, DOI: 10.1039/C8MT00049B, ※論文中では「Mito-FerroGreen」を「Ac-MtFluNox」で表記。.
2) T. Issitt, E. Bosseboeuf, N. Winter, N. Dufton, G. Gestri, V. Senatore, A. Chikh, A. Randi, C. Raimondi, "Neuropilin-1 controls endothelial homeostasis by regulating mitochondrial function and iron-dependent oxidative stress via ABCB8", iScience., 2018,DOI: 10.1016/j.isci.2018.12.005 .
3) E. E. Mon, F. Y. Wei, R. N. R. Ahmad, T. Yamamoto, T. Moroishi and K. Tomizawa, "Regulation of mitochondrial iron homeostasis by siderofexin 2 ", J Physiol Sci., 2018,doi:10.1007/s12576-018-0652-2.
4) M. Fujimaki, N. Furuya, S. Saiki, T. Amo, Y. Imamichi and N. Hattori, "Iron supply via NCOA4-mediated ferritin degradation maintains mitochondrial functions", Mol. Cell. Biol.., 2019,doi: 10.1128/MCB.00010-19.
5) K. Tomita, M. Fukumoto, K. Itoh, Y. Kuwahara, K. Igarashi, T. Nagasawa, M. Suzuki, A. Kurimasa and T. Sato, "MiR-7-5p is a key factor that controls radioresistance via intracellular Fe2+ content in clinically relevant radioresistant cells.", Biochem Biophys Res Commun.., 2019,doi: 10.1016/j.bbrc.2019.08.117.
6) Y. Wang and M. Tang, "PM2.5 induces ferroptosis in human endothelial cells through iron overload and redox imbalance", Environ. Pollut., 2019, 264, doi: 10.1016/j.envpol.2019.07.105.
7) KF. Yambire, C. Rostosky, T. Watanabe, D. Pacheu-Grau, S. Torres-Odio,A. Sanchez-Guerrero,O. Senderovich, EG. Meyron-Holtz,I.Milosevic, J. Frahm, AP. West and N. Raimundo, "Impaired lysosomal acidification triggers iron deficiency and inflammation in vivo.", Elife, 20193, (8), doi:10.7554/eLife.51031. 
8) H. Nishizawa, M. Matsumoto, T. Shindo, D. Saigusa, H. Kato, K. Suzuki, M. Sato, Y. Ishii, H. Shimokawa and K. Igarashi, "Ferroptosis is controlled by the coordinated transcriptional regulation of glutathione and labile iron metabolism by the transcription factor BACH1",  J. Biol. Chem.,  2019,doi: 10.1074/jbc.RA119.009548.
9)Y. akashima, A. Hayano and B. Yamanaka, Metabolome analysis reveals excessive glycolysis via PI3K/AKT/mTOR and RAS/MAPK signaling in methotrexate-resistant primary CNS lymphoma-derived cells.", Clin. Cancer Res., 2020, DOI:10.1158/1078-0432.

よくある質問

Q

推奨フィルターを教えてください。

A

検出時の推奨フィルターは下記の通りです。

励起フィルター: 450~500 nm
蛍光フィルター: 515~550 nm

ミトコンドリア内鉄イオン検出試薬 Mito-FerroGreen | CAS - 同仁化学研究所 ミトコンドリア内鉄イオン検出試薬 Mito-FerroGreen | CAS - 同仁化学研究所

取扱条件

規格
性状: 本品はアセトニトリル、メタノール、ジメチルスルホキシドに溶解する。
純度(HPLC): 90.0% 以上
蛍光スペクトル: 試験適合
取扱条件
保存条件: 冷凍,遮光 , 取扱条件: 窒素置換,吸湿注意
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    GSSG/GSH Quantification Kit

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pHセンサーラベル化キット AcidSensor Labeling Kit Endocytic Internalization Assay 同仁化学研究所

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pHセンサーラベル化キット AcidSensor Labeling Kit Endocytic Internalization Assay 同仁化学研究所AcidSensor Labeling Kit Endocytic Internalization Assay

04 細胞内蛍光プローブ

AcidSensor Labeling Kit Endocytic Internalization Assay

pHセンサーラベル化キット AcidSensor Labeling Kit Endocytic Internalization Assay 同仁化学研究所

  • 細胞内蛍光プローブ
  • 細胞内蛍光プローブ
  • 蛍光色素
  • 顕微鏡
  • 標識キット

pHセンサーラベル化キット

  • pH感受性蛍光色素をラベル化できる
  • ラベル化に必要なものが同梱されているオールインワンのキット
  • 詳細な標識マニュアル
  • 製品コード
    A558  AcidSensor Labeling Kit Endocytic Internalization Assay
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
3 samples ¥45,000 340-10041
サンプル量 50-200 µg
標識部位 -NH2
検出方法 顕微鏡・FCM
蛍光特性 [Ex:645, Em:666]

・分子量50,000以上のタンパク質が標識できる。

・Filtration Tubeを用いた分離操作により高い回収率で標識体が得られる。

キット内容
3 samples ・NH2-Reactive AcidSensor
・WS Buffer
・Reaction Buffer
・Filtration Tube
3 tubes
4 ml ×1
500 μl×1
3 tubes

  • pHセンサーラベル化キット AcidSensor Labeling Kit Endocytic Internalization Assay 同仁化学研究所
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    pHセンサーラベル化キット AcidSensor Labeling Kit Endocytic Internalization Assay 同仁化学研究所
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技術情報

初めてでも迷わない実験操作

本キットは、未反応の色素を除くために必要なフィルトレーションチューブを同梱しており、標識から精製操作までを行うことができます。
また、取扱説明書に沿って実験していただくことで、初めての方でも容易に AcidSensor を標識することが可能です。

※ 抗体やタンパク質は含まれません。
※ DMSO と培地は、別途ご準備ください。

pHセンサーラベル化キット AcidSensor Labeling Kit Endocytic Internalization Assay 同仁化学研究所

よくある質問

Q

サンプル溶液中の共存物は標識反応に影響しますか。

A

共存物の種類により影響することがあります。
溶液中にどのような物質が含まれるかを確認の上、状況に応じて標識に用いるサンプルの精製を行い、ご使用ください。
標識対象以外の分子量 10,000 以上のアミノ基を有する共存物は標識効率を低下させます。
また、アミノ基を持たない化合物でも、高分子の不純物が多いとフィルターの目詰まりの原因になり、標識・精製操作に支障がでる可能性もあります。
反応に使用する前に別途除去操作を行ってください。

Q

標識体を回収するWS buffer に細胞毒性はありますか?

A

WS buffer 中には、細胞毒性をほとんど示さない量の安定化剤(界面活性剤)を含んでいます。もし細胞への影響が気になる場合は、別途任意のバッファーを用いて標識体を回収してください。

Q

血清含有培地で標識体の取込みや観察ができますか?

A

血清成分がAcidSensor の性能に影響を与えることはありませんが、血清タンパク質によりエンドサイトーシス経路の取り込みが阻害される可能性があります。実験に応じて血清を含めるかどうかご検討ください。

Q

標識率はどのように算出すればよいですか。

A

標識体を WS buffer で5倍希釈して500nm と280 nmの吸光度を測定後、以下の式より標識率を算出してください。

pHセンサーラベル化キット AcidSensor Labeling Kit Endocytic Internalization Assay 同仁化学研究所

A500: 500 nm の吸光度

A280: 280 nm の吸光度

εprotein: タンパク質の280nmでのモル吸光係数、

NH2-Reactive AcidSensor のWS buffer 中における A500 のモル吸光係数が 48400 です。

NH2-Reactive AcidSensor は280nmと500nmに吸収があり、280nm/500nmの比が 0.16です。

標識対象が IgG の場合、はεprotein は216,000 を使用してください。

Q

タンパク質1分子あたりにNH2-Reactive AcidSensor はいくつ標識されますか。

A

Mouse IgG において、1分子あたり平均3つのAcidSensor が標識されることを確認しています。

pHセンサーラベル化キット AcidSensor Labeling Kit Endocytic Internalization Assay 同仁化学研究所 pHセンサーラベル化キット AcidSensor Labeling Kit Endocytic Internalization Assay 同仁化学研究所

取扱条件

取扱条件
保存条件: 冷蔵,遮光 , 取扱条件: 吸湿注意
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pHセンサーラベル化キット AcidSensor Labeling Kit Endocytic Internalization Assay 同仁化学研究所

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whatman Cyclopore聚碳酸酯膜 蚀刻膜 透明7091-4710

whatman Cyclopore聚碳酸酯膜 蚀刻膜 透明

简要描述:

whatman Cyclopore聚碳酸酯膜 蚀刻膜 透明,由高品质的聚碳酸酯制成,化学抗性。无任何添加剂,具有较低的皮重,Z小吸水量,不吸附蛋白,确保样品洁净度。聚碳酸酯膜耐受盐酸和硝酸、醇、醚、环己烷等,广泛化学兼容性非常适于检测许多腐蚀性及有机液体中的颗粒物。

whatman Cyclopore聚碳酸酯膜 蚀刻膜 透明

Cyclepore聚碳酸酯膜-薄透明型,圆片,1.0um孔径,47mm,100pk。

  • 不粘附染色剂,光学反差大,有利于用显微镜观察
  • 真正的表面截留,更易进行样品测定并缩短分析时间
  • 供应完全透明的聚碳酸酯膜
  • 不吸潮,滤液吸附zui小
  • 皮重极低
  • 无颗粒脱落物,确保滤液洁净度
  • 生物学惰性

whatman Cyclopore聚碳酸酯膜 蚀刻膜 透明Whatman Cyclepore膜圆柱形孔贯穿膜基体,能够精确截留,膜表面光滑平整,方便显微镜表面观察。Cyclepore膜运用的Whatman技术生产,膜孔径精确、流速快。

膜由高品质的聚碳酸酯制成,化学抗性。无任何添加剂,具有较低的皮重,zui小吸水量,不吸附蛋白,确保样品洁净度。聚碳酸酯膜耐受盐酸和硝酸、醇、醚、环己烷等,广泛化学兼容性非常适于检测许多腐蚀性及有机液体中的颗粒物。

2008年,英国实验室设备制造商Whatman加入*的通用电气(GE) 公司生命科学部,Whatman公司是一家在享有盛誉的过滤产品和技术提供商,其过滤和膜类产品广泛应用于实验室、研究所、生命科学及医疗技术应用等领域,堪称滤纸行业的“巨无霸”
Whatman为科学家和实验人员提供了种类众多的优质微孔滤膜,微孔滤膜研发和生产居世界领xian水平。 Whatman滤膜的显著特点是孔径精确、韧性好和环境友好,保证了再现性和*性过滤;孔径范围宽,从15纳米到12微米,有无菌包装,以及各种颜色和网格, Whatman还提供兼容的膜过滤系统装置和配件,使之适应了更广泛而更严格的需求。

whatman Cyclopore聚碳酸酯膜径迹蚀刻膜 全透明滤膜 7091-4710订购信息:

 

キレート試薬 BAPTA | CAS 85233-19-8(free acid) 同仁化学研究所

上海金畔生物科技有限公司代理日本同仁化学试剂盒全线产品,欢迎访问日本同仁化学dojindo官网了解更多信息。

キレート試薬 BAPTA | CAS 85233-19-8(free acid) 同仁化学研究所BAPTA

04 細胞内蛍光プローブ
14 キレート試薬

BAPTA

キレート試薬 BAPTA | CAS 85233-19-8(free acid) 同仁化学研究所

  • 細胞内蛍光プローブ
  • キレート試薬

キレート試薬

  • 製品コード
    B019  BAPTA
  • CAS番号
    85233-19-8(free acid)
  • 化学名
    O,O‘-Bis(2-aminophenyl)ethyleneglycol-N,N,N‘,N‘-tetraacetic acid, tetrapotassium salt, hydrate
  • 分子式・分子量
    C22H20K4N2O10(分子量は無水物として計算)=628.79
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
100 mg ¥5,100 341-05061
500 mg ¥17,400 347-05063
  • キレート試薬 BAPTA | CAS 85233-19-8(free acid) 同仁化学研究所
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  • プロトコル キレート試薬 BAPTA | CAS 85233-19-8(free acid) 同仁化学研究所 蛍光で細胞内 Ca を測定したい
    キレート試薬 BAPTA | CAS 85233-19-8(free acid) 同仁化学研究所

技術情報

溶解例

1.8 g/50 mL(水)

取扱条件

規格
性状: 本品は、白色粉末又は結晶性粉末で水に溶ける。
純度(滴定,乾燥物換算): 95.0%以上
水溶状: 試験適合
pH(25℃): 8.0~9.5
水分: 3.5~14.0%以上
強熱残分(硫酸塩): 46.0~53.0%以上
IRスペクトル: 試験適合
取扱条件
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キレート試薬 BAPTA | CAS 85233-19-8(free acid) 同仁化学研究所

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細胞内カルシウムのキレート試薬 BAPTA-AM solution | CAS 126150-97-8(BAPTA-AM) 同仁化学研究所

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04 細胞内蛍光プローブ

BAPTA-AM solution

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  • 細胞内蛍光プローブ

細胞内カルシウムのキレート試薬

  • 製品コード
    B035  BAPTA-AM solution
  • CAS番号
    126150-97-8(BAPTA-AM)
  • 化学名
    O,O‘-Bis(2-aminophenyl)ethyleneglycol-N,N,N’,N’-tetraacetic acid, tetraacetoxymethyl ester, DMSO solution
  • 分子式・分子量
    C34H40N2O18=764.68
容 量 メーカー希望
小売価格
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和光純薬
1 ml ¥27,900 348-05451
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参考文献

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1) R. Y. Tsien, "New Calcium Indicators and Buffers with High Selectivity against Magnesium and Protons: Design, Synthesis, and Properties of Prototype Structures", Biochemistry, 1980, 19 (11), 2396.
2) R. Y. Tsien, "A Non-disruptive Technique for Loading Calcium Buffers and Indicators into Cells", Nature, 1981, 290, 527.
3) J. I. Korenbrot, D. L. Ochs, J. A. Williams, D. L. Miller and J. E. Brown, "The Use of Tetracarboxylate Fluorescent Indicators in the Measurement and Control of Intracellular Free Calcium Ions", Soc. Gen. Physiol. Ser., 1986, 40, 347.
4) S. M. Harrison and D. M. Bers, "The Effect of Temperature and Ionic Strength on the Apparent Ca-affinity of EGTA and the Analogous Ca-chelators BAPTA and Dibromo-BAPTA", Biochim. Biophys. Acta, 1987, 925, 133.
5) E. W. Gelfand and R. K. Cheung, "Dissociation of Unidirectional Influx of External Ca2+ and Release from Internal Stores in Activated Human T Lymphocytes", Eur. J. Immunol., 1990, 20, 1237.
6) J. P. Kao, J. M. Alderton, R. Y. Tsien and R. A. Steinhardt, "Active Involvement of Ca2+ in Mitotic Progression of Swiss 3T3 Fibroblasts", J. Cell Biol., 1990, 111, 183.
7) M. L. Schubert and J. Hightower, "Functionally Distinct Muscarinic Receptors on Gastric Somatostatin Cells", Am. J. Physiol., 1990, 258, G982.
8) Y. Tojyo and Y. Matsumoto, "Inhibitory Effects of Loading with the Calcium-chelator 1, 2-Bis(o-aminophenoxy)ethane-N,N,N',N'-tetraacetic acid (BAPTA) on Amylase Release and Cellular ATP Level in Rat Parotid Cells", Biochem. Pharmacol., 1990, 39(11), 1775.

取扱条件

規格
性状: 本品は、無色液体である。
純度(HPLC): 98.0% 以上
取扱条件
保存条件: 冷凍,遮光
危険・有害
シンボルマーク
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ケージド試薬: ATP Caged ATP | CAS 67030-27-7(free acid) 同仁化学研究所

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ケージド試薬: ATP Caged ATP | CAS 67030-27-7(free acid) 同仁化学研究所Caged ATP

04 細胞内蛍光プローブ

Caged ATP

ケージド試薬: ATP Caged ATP | CAS 67030-27-7(free acid) 同仁化学研究所

  • 細胞内蛍光プローブ

ケージド試薬: ATP

  • 製品コード
    CC01  Caged ATP
  • CAS番号
    67030-27-7(free acid)
  • 化学名
    P3-[1-(2-Nitrophenyl)ethyl]adenosine-5′-triphosphate,trisodium salt
  • 分子式・分子量
    C18H20N6Na3O15P3=722.27
容 量 メーカー希望
小売価格
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和光純薬
1 mg ¥23,800 345-05503
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マニュアル

  • プロトコル ケージド試薬: ATP Caged ATP | CAS 67030-27-7(free acid) 同仁化学研究所 細胞内目的部位にATP を局部添加したい
    ケージド試薬: ATP Caged ATP | CAS 67030-27-7(free acid) 同仁化学研究所

参考文献

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1) J. H. Kaplan, B. F. Iii and J. F. Hoffman, "Rapid Photolytic Release of Adenosine 5'-triphosphate from a Protected Analogue: Utilization by the Na: K Pump of Human Red Blood Cell Ghosts", Biochemistry, 197817, 1929. 
2) E. Ohtsuka, H. Uemura, T. Doi, T. Miyake, S. Nishikawa and M. Ikehara, "A New Method for 3'Labelling of Polyribonucleotides by Phosphorylation with RNA Ligase and Its Application to the 3'-Modification for Joining Reactions", Nucleic Acids Res.19796, 443. 
3) J. A. McCray, L. Herbette, T. Kihara and D. R. Trentham, "A New Approach to Time-resolved Studies of ATP-requiring Biological Systems: Laser Flash Photolysis Caged ATP", Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 198077, 7237. 
4) Y. E. Goldman, M. G. Hibberd, J. A. McCray and D. R. Trentham, "Relaxation of Muscle Fibres by Photolysis of Caged ATP", Nature, 1982300, 701. 
5) D. H. Pierce, A. Scarpa, M. R. Topp and J. K. Blasie, "Kinetics of Calcium Uptake by Isolated Sarcoplasmic Reticulum Vesicles Using Flash Photolysis of Caged Adenosine 5'-Triphoshate", Biochemistry, 198322, 5254. 
6) 杉晴夫, "アクチンとミオシンの構造と両者間の相互作用", 生体の科学, 198334, 334. 
7) B. F. Iii, "Na+ Movement in a Single Turnover of the Na Pump", Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 198481, 5310. 
8) Y. E. Goldman, "Laser Pulsed Release of ATP and Other Optical Methods in the Study of Muscle Contraction", Soc. Gen. Physiol. Ser., 198640, 397. 
9) J. W. Walker, G. P. Reid, J. A. McCray and D. R. Trentham, "Photolabile 1-(2-Nitrophenyl)ethyl Phosphate Esters of Adenine Nucleotide Analogues. Synthesis and Mechanism of Photolysis", J. Am. Chem. Soc.1988110, 7170. 
10) J. W. Walker, G. P. Reid and D. R. Trentham, "[16] Synthesis and Properties of Caged Nucleotides", Methods in Enzymol.1989172, 288. 
11) K. Horiuti, T. Sakoda, M. Takei and K. Yamada, "Effects of Ethylene Glycol on the Kinetics of Contraction on Flash Photolysis of Caged ATP in Rat Psoas Muscle Fibres", J. Muscle. Res. and Cell Motility, 199213, 199. 
12) Z. Lu, R. L. Moss and J. W. Walker, "Tension Transients Initiated by Photogenerations of MgADP in Skinned Skeletal Muscle Fibers", J. Gen. Physiol.1993101, 867.

取扱条件

規格
性状: 本品は、白色粉末で水に溶ける。
純度(HPLC): 98.0% 以上
ATP含量(HPLC): 0.1% 以下
NMRスペクトル: 試験適合
取扱条件
保存条件: 冷凍,遮光
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ケージド試薬: ATP Caged ATP | CAS 67030-27-7(free acid) 同仁化学研究所

関連製品