pHセンサーラベル化キット AcidSensor Labeling Kit Endocytic Internalization Assay 同仁化学研究所

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pHセンサーラベル化キット AcidSensor Labeling Kit Endocytic Internalization Assay 同仁化学研究所AcidSensor Labeling Kit Endocytic Internalization Assay

04 細胞内蛍光プローブ

AcidSensor Labeling Kit Endocytic Internalization Assay

pHセンサーラベル化キット AcidSensor Labeling Kit Endocytic Internalization Assay 同仁化学研究所

  • 細胞内蛍光プローブ
  • 細胞内蛍光プローブ
  • 蛍光色素
  • 顕微鏡
  • 標識キット

pHセンサーラベル化キット

  • pH感受性蛍光色素をラベル化できる
  • ラベル化に必要なものが同梱されているオールインワンのキット
  • 詳細な標識マニュアル
  • 製品コード
    A558  AcidSensor Labeling Kit Endocytic Internalization Assay
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
3 samples ¥45,000 340-10041
サンプル量 50-200 µg
標識部位 -NH2
検出方法 顕微鏡・FCM
蛍光特性 [Ex:645, Em:666]

・分子量50,000以上のタンパク質が標識できる。

・Filtration Tubeを用いた分離操作により高い回収率で標識体が得られる。

キット内容
3 samples ・NH2-Reactive AcidSensor
・WS Buffer
・Reaction Buffer
・Filtration Tube
3 tubes
4 ml ×1
500 μl×1
3 tubes

  • pHセンサーラベル化キット AcidSensor Labeling Kit Endocytic Internalization Assay 同仁化学研究所
試験成績書

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  • ご購入方法
  • お問い合わせ

マニュアル

  • 取扱説明書 日本語
    pHセンサーラベル化キット AcidSensor Labeling Kit Endocytic Internalization Assay 同仁化学研究所
  • Manual English
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技術情報

初めてでも迷わない実験操作

本キットは、未反応の色素を除くために必要なフィルトレーションチューブを同梱しており、標識から精製操作までを行うことができます。
また、取扱説明書に沿って実験していただくことで、初めての方でも容易に AcidSensor を標識することが可能です。

※ 抗体やタンパク質は含まれません。
※ DMSO と培地は、別途ご準備ください。

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よくある質問

Q

サンプル溶液中の共存物は標識反応に影響しますか。

A

共存物の種類により影響することがあります。
溶液中にどのような物質が含まれるかを確認の上、状況に応じて標識に用いるサンプルの精製を行い、ご使用ください。
標識対象以外の分子量 10,000 以上のアミノ基を有する共存物は標識効率を低下させます。
また、アミノ基を持たない化合物でも、高分子の不純物が多いとフィルターの目詰まりの原因になり、標識・精製操作に支障がでる可能性もあります。
反応に使用する前に別途除去操作を行ってください。

Q

標識体を回収するWS buffer に細胞毒性はありますか?

A

WS buffer 中には、細胞毒性をほとんど示さない量の安定化剤(界面活性剤)を含んでいます。もし細胞への影響が気になる場合は、別途任意のバッファーを用いて標識体を回収してください。

Q

血清含有培地で標識体の取込みや観察ができますか?

A

血清成分がAcidSensor の性能に影響を与えることはありませんが、血清タンパク質によりエンドサイトーシス経路の取り込みが阻害される可能性があります。実験に応じて血清を含めるかどうかご検討ください。

Q

標識率はどのように算出すればよいですか。

A

標識体を WS buffer で5倍希釈して500nm と280 nmの吸光度を測定後、以下の式より標識率を算出してください。

pHセンサーラベル化キット AcidSensor Labeling Kit Endocytic Internalization Assay 同仁化学研究所

A500: 500 nm の吸光度

A280: 280 nm の吸光度

εprotein: タンパク質の280nmでのモル吸光係数、

NH2-Reactive AcidSensor のWS buffer 中における A500 のモル吸光係数が 48400 です。

NH2-Reactive AcidSensor は280nmと500nmに吸収があり、280nm/500nmの比が 0.16です。

標識対象が IgG の場合、はεprotein は216,000 を使用してください。

Q

タンパク質1分子あたりにNH2-Reactive AcidSensor はいくつ標識されますか。

A

Mouse IgG において、1分子あたり平均3つのAcidSensor が標識されることを確認しています。

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取扱条件

取扱条件
保存条件: 冷蔵,遮光 , 取扱条件: 吸湿注意
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抗体・タンパク質標識キット Fluorescein Labeling Kit – NH2 同仁化学研究所

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抗体・タンパク質標識キット Fluorescein Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所Fluorescein Labeling Kit – NH2

08 ラベル化剤

Fluorescein Labeling Kit – NH2

抗体・タンパク質標識キット Fluorescein Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所

  • ラベル化剤
  • 蛍光色素
  • 顕微鏡
  • FCM
  • 標識キット

抗体・タンパク質標識キット

  • 初めて蛍光標識をする
  • 簡単な操作で実験したい
  • 抗原認識部位を妨害しない低分子で標識したい
  • 製品コード
    LK01  Fluorescein Labeling Kit – NH2
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
3 samples ¥26,000 347-90911
サンプル量 50-200 µg
所要時間 2時間
標識部位 -NH2
検出方法 顕微鏡・FCM
蛍光特性 [Ex:500, Em:525]

・分子量50,000以上のタンパク質が標識できる。

・Filtration Tubeを用いた分離操作により高い回収率で標識体が得られる。

・付属の保存溶液でフルオレセイン標識体の保存ができる。

抗体・タンパク質標識キット Fluorescein Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所

キット内容
3 samples ・NH2-Reactive Fluorescein
・WS Buffer
・Reaction Buffer
・Filtration Tube
3 tubes
4 ml x1
500 μl x1
3 tubes

  • 抗体・タンパク質標識キット Fluorescein Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所
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マニュアル

  • 取扱説明書 抗体・タンパク質標識キット Fluorescein Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所 日本語
    抗体・タンパク質標識キット Fluorescein Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所
  • 取扱説明書 抗体・タンパク質標識キット Fluorescein Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所 English
    抗体・タンパク質標識キット Fluorescein Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所

Fluorescein Labeling Kit – NH2の使い方

技術情報

特長

1) 約2時間でフルオレセイン標識体が調製できる。
2) 分子量50,000以上のタンパク質が標識できる。
3) 50~200 μgのタンパク質を標識可能である。
4) Filtration Tubeを用いた分離操作により高い回収率で標識体が得られる。
5) 付属の保存溶液でフルオレセイン標識体の保存ができる。

参考文献

参考文献を表示する

1) M. Hiyoshi, S. Suzu, Y. Yoshidomi, R. Hassan, H. Harada, N. Sakashita, H. Akari, K. Motoyoshi and S. Okada, "Interaction between Hck and HIV-1 Nef Negatively Regulates Cell Surface Expression of M-CSF Receptor", Blood, 2008, 111(1), 243.
2) W. Aung, A. Tsuji, H. Sudo, A. Sugyo, T. Furukawa, Y. Ukai, Y. Kurosawa and T. Saga, "Immunotargeting of Integrin α6β4 for Single-Photon Emission Computed Tomography and Near-Infrared Fluorescence Imaging in a Pancreatic Cancer Model", Molecular Imaging, 2016, 15, 1.
3) A. Shinya, K. Yamamoto, M. Kurata, S. Abe-Suzuki, R. Horii, F. Akiyama and M. Kitagawa, "Targeting MCM2 function as a novel strategy for the treatment of highly malignant breast tumors", Oncotarget., 2015, 6, (33), 34892.
4) K.M. Nishida, T.N. Okada, T. Kawamura, T. Mituyama, Y. Kawamura, S. Inagaki, H. Huang, D. Chen, T. Kodama, H. Siomi and M.C. Siomi, "Functional involvement of Tudor and dPRMT5 in the piRNA processing pathway in Drosophila germlines", EMBO J.., 2009, 28, (24), 3820.
5) P.G. Sreekumar, R. Kannan, M. Kitamura, C. Spee, E. Barron, S.J. Ryan and D.R. Hinton, "αB crystallin is apically secreted within exosomes by polarized human retinal pigment epithelium and provides neuroprotection to adjacent cells", PLoS ONE., 2010, 5, (10), e12578.
6) R. Asano, T. Kumagai, K. Nagai, S. Taki, I. Shimomura, K. Arai, H. Ogata, M. Okada, F. Hayasaka, H. Sanada, T. Nakanishi, T. Karvonen, H. Hayashi, Y. Katayose, M. Unno, T. Kudo, M. Umetsu and I. Kumagai, "Domain order of a bispecific diabody dramatically enhances its antitumor activity beyond structural format conversion: the case of the hEx3 diabody", Protein Eng. Des. Sel.., 2013, 26, (5), 359.
7) R. Asano, I. Shimomura, S. Konno, A. Ito, Y. Masakari, R. Orimo, S. Taki, K. Arai, H. Ogata, M. Okada, S. Furumoto, M. Onitsuka, T. Omasa, H. Hayashi, Y. Katayose, M. Unno, T. Kudo, M. Umetsu and I. Kumagai, "Rearranging the domain order of a diabody-based IgG-like bispecific antibody enhances its antitumor activity and improves its degradation resistance and pharmacokinetics", MAbs., 2014, 6, (5), 1243.
8) R. Asano, K. Ikoma, I. Shimomura, S. Taki, T. Nakanishi, M. Umetsu and I. Kumagai, "Cytotoxic enhancement of a bispecific diabody by format conversion to tandem single-chain variable fragment (taFv): the case of the hEx3 diabody", J. Biol. Chem.., 2011, 286, (3), 1812.
9) T. Toyotome, M. Yamaguchi, A. Iwasaki, A. Watanabe, H. Taguchi, L. Qin, H. Watanabe and K. Kamei, "Fetuin A, a serum component, promotes growth and biofilm formation by Aspergillus fumigatus", Int. J. Med. Microbiol.., 2012, 302, (2), 108.
10) W. Ma, V. Schubert, M. M. Martis, G. Hause, Z. Liu, Y. Shen, U. Conrad, W. Shi, U. Scholz, S. Taudien, Z. Cheng and A. Houben, "The distribution of α-kleisin during meiosis in the holocentromeric plant Luzula elegans", Chromosome Res.., 2016, 24, (3), 393.
11) Y. Yokoi, K. Nakamura, T. Yoneda, M. Kikuchi, R. Sugimoto, Y. Shimizu and T. Ayabe, "Paneth cell granule dynamics on secretory responses to bacterial stimuli in enteroids", Sci. Rep.., 2019, 9, 2710.
12) Y.J. Lee, S.R. Han, N.Y. Kim, S.H. Lee, J.S. Jeong and S.W. Lee, "An RNA aptamer that binds carcinoembryonic antigen inhibits hepatic metastasis of colon cancer cells in mice", Gastroenterology., 2012, 143, (1), 155.
13) C. F.O.Hoya, K. Kushiro, Y. Yamaoka, A. Ryo and M. Takai, 'Rapid multiplex microfiber-based immunoassay for anti-MERS-CoV antibody detection', Sens Biosensing Res., 2019,10.1016/j.sbsr.2019.100304.
14) H. Takeuchi, N Sasaki, S. Yamaga, M. Kuboniwa, M. Matsusaki and A. Amano, "Porphyromonas gingivalis induces penetration of lipopolysaccharide and peptidoglycan through the gingival epithelium via degradation of junctional adhesion molecule 1", PLoS Pathog., 201915, (11), e1008124.
15) Y. Yanase, Y. Matsuo, T. Kawaguchi, K. Ishii, A. Tanaka , K. Iwamoto , S. Takahagi and M.Hide, "Activation of Human Peripheral Basophils in Response to High IgE Antibody Concentrations without Antigens"., Int J Mol Med Sci, 2019, 20, (1), 45.
16) M. Yashiro, M. Ohya, T. Mima, Y. Nakashima, K. Kawakami, T. Sonou, K. Tatsuta, Y. Yamano, S. Negi and T. Shigematsu, "Excessive ADAM17 activation occurs in uremic patients and may contribute to their immunocompromised status.", Immun Inflamm Dis., 2020, 10.1002/iid3.298.
17) H Fujishiro, H Yamamoto, N Otera, N Oka, M Jinno and S. Himeno, "In vitro Evaluation of The Effects of Cadmium on Endocytic Uptakes of Proteins into Cultured Proximal Tubule Epithelial Cells.", Toxics, 2020, 8,10.3390/toxics8020024
18) Y. Liu, Y. Liu, X. Zheng, L. Zhao and X. Zhang, "Recapitulating and Deciphering Tumor Microenvironment by Using 3D Printed Plastic Brick–Like Microfluidic Cell Patterning", Adv Healthc Mater, 20209, (6), 1901713.

よくある質問

Q

Labeling Kitで1次抗体を直接標識する利点を教えてください。

A

はじめて抗体標識をされる方を対象としたプロトコルを作成しております。
カスタマーサポートの視点から直接標識法の利点や実施例等を記載しておりますので、ご参照下さい。

下記リンクよりダウンロード可能です。
「はじめての抗体標識プロトコル ~カスタマーサポートの視点から~」

Q

サンプル溶液中の共存物は反応に影響しますか?

A

共存物の種類により影響することがあります。
溶液中にどのような物質が含まれるかを確認の上、状況に応じてラベル化に用いるサンプルの精製を行い、標識反応にご使用ください。

<高分子:分子量1万以上>
影響する可能性があります。
BSAやゼラチンなどアミノ基をもつ化合物が含まれると、抗体への標識効率が低下します。また、高分子のためFiltration Tubeでも除くことができません。また、アミノ基を持たない化合物でも、高分子の不純物が多いとフィルターの目詰まりの原因になり、標識・精製操作に支障がでる可能性もあります。反応に使用する前に別途精製を行ってください。
*本製品に限らず他のLabeling kit に関しても同様の注意が必要です。

Q

低分子のタンパク質(分子量50,000以下)に標識する場合の方法を教えて下さい。

A

キット付属のフィルトレーションチューブは分画分子量30Kの限外濾過フィルターのため、余裕をもって50,000以上のタンパク質のご使用を推奨しております。

分子量50,000以下のタンパク質を標識される場合は、下記のような分画分子量の小さい限外濾過フィルターに変更して頂くことで、低分子のタンパク質でもラベル化可能でございます。

——————————————
PALL社 ナノセップ  3K 製品No.OD003C33
PALL社 ナノセップ 10K 製品No.OD010C33 
——————————————

キット同梱のフィルターを用いた場合に比べ遠心に時間を要することがございますので遠心時間はご検討下さい。

Q

標識後、フィルトレーションチューブを遠心してもメンブレン上に液が残る。

A

(1)メンブレンを目視で確認した際、メンブレンカップの淵にうっすら液が残る程度であれば、次の操作に進んで下さい。
 メンブレン上に液が残っていたり、メンブレンカップを傾けて回転させたとき、液が垂れてくるようであれば、さらに遠心を8,000g で15分~30分程度行って下さい。

(2)1)の遠心操作後もメンブレン上に液が残る場合は、標識体が凝集していないか確認してください。
 抗体やタンパク質自身の性質によりますが、低分子標識剤を標識することで抗体やタンパク質の疎水性が増し、凝集する場合がございます。
 標識体に凝集が見られる場合は、一度別のマイクロチューブに移し、遠心し上澄みをご使用ください。(抗体・タンパク質の回収量は低下いたします。)

上記でも解決しない場合は、小社カスタマーサポートまでお問い合わせください。

※フィルターの目詰まりが疑われる場合は、メンブレンフィルターを新しいものに交換すると解決する場合がございます。 
代替品: PALL社製 ナノセップ 30K (メーカーコード:OD030C33)

Q

このキットではどのようなものが標識できますか?

A

分子量が「50,000以上」で反応性のアミノ基(NH2)を有している化合物(抗体、蛋白質など)であれば標識できます。
量は「50~200μg」が対象となります。

*キットに添付しているFiltration Tubeのサイズが30Kのため、低分子の化合物は精製できません。

Q

モル吸光係数から標識率を算出する時に [0.22]がかけてありますが、この数値は何でしょうか?

A

Fluorescein は280nmと500nmに吸収があり、280nm/500nmの比が[0.22]です。

Fluoresceinの標識率の式は下記の通りです。

抗体・タンパク質標識キット Fluorescein Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所抗体・タンパク質標識キット Fluorescein Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所

60,000は500nmでのFluoresceinのモル吸光係数で、右辺の分子はFluoresceinのモル数になります。

280nmの吸光度は「タンパク質の吸光度+Fluoresceinの吸光度」となっていますので、500nmの吸光度に0.22を掛けたもの引くことにより、タンパク質のみの吸光度が求まります。
この吸光度をモル吸光係数で割ることで、分母はタンパク質のモル数となります。

抗体・タンパク質標識キット Fluorescein Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所 抗体・タンパク質標識キット Fluorescein Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所

取扱条件

取扱条件
保存条件: 冷蔵 , 取扱条件: 吸湿注意
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抗体・タンパク質標識キット Fluorescein Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所

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抗体・タンパク質標識キット Biotin Labeling Kit – NH2 同仁化学研究所

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抗体・タンパク質標識キット Biotin Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所Biotin Labeling Kit – NH2

08 ラベル化剤

Biotin Labeling Kit – NH2

抗体・タンパク質標識キット Biotin Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所

  • ラベル化剤
  • 細胞機能解析
  • 標識キット

抗体・タンパク質標識キット

  • 初めてビオチン標識をする
  • 感度をあげたい
  • 蛍光色素でうまくいかなかった
  • 製品コード
    LK03  Biotin Labeling Kit – NH2
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
3 samples ¥15,000 347-90891
サンプル量 50-200 µg
所要時間 2時間
標識部位 -NH2
検出方法 顕微鏡・FCM・ウエスタンブロット・プレートリーダー

・NH2-Reactive Biotinと標的タンパク質を混合するだけで、安定な共有結合を形成する。

・Filtraiton Tubeを用いた分離操作により高い回収率で標識体が得られる。

・キット付属の保存溶液でビオチン標識体の保存ができる。

抗体・タンパク質標識キット Biotin Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所

キット内容
3 samples ・NH2-Reactive Biotin
・WS Buffer
・Reaction Buffer
・Filtration Tube
3 tubes
4 ml x1
500 μl x1
3 tubes

  • 抗体・タンパク質標識キット Biotin Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所
試験成績書

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  • ご購入方法
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マニュアル

  • 取扱説明書 抗体・タンパク質標識キット Biotin Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所 日本語
    抗体・タンパク質標識キット Biotin Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所
  • 取扱説明書 抗体・タンパク質標識キット Biotin Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所 English
    抗体・タンパク質標識キット Biotin Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所

Biotin Labeling Kit – NH2の使い方

技術情報

特徴

1) 約2時間でビオチン標識体が調製できる。
2) NH2-Reactive Biotinと標的タンパク質を混合するだけで、安定な共有結合を形成する。
3) 分子量50,000以上のタンパク質が標識できる。
4) 50~200 μgのタンパク質を標識可能である。
5) Filtration Tubeを用いた分離操作により高い回収率で標識体が得られる。
6) キット付属の保存溶液でビオチン標識体の保存ができる。

参考文献

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No. 標識対象 ストレプトアビジン  検出装置    引用(リンク)
1 抗体 POD標識ストレプトアビジン プレートリーダー M. Takahashi, Y. Ishida, D. Iwaki, K. Kanno, T. Suzuki, Y. Endo, Y. Homma and T.  Fujita, "Essential role of Mannose-binding lectin-associated serine protease-1 in activation of the complement factor D", J. Exp. Med.., 2010, 207, (1), 29.
2 ポリクローナル抗体
(anti-human EBI3)
POD標識ストレプトアビジン プレートリーダー R. Nishino, A. Takano, H. Oshita, N. Ishikawa, H. Akiyama, H. Ito, H. Nakayama, Y. Miyagi, E. Tsuchiya, N. Kohno, Y. Nakamura and Y. Daigo, "Identification of Epstein-Barr virus–induced gene 3 as a novel serum and tissue biomarker and a therapeutic target for lung cancer", Clin. Cancer Res.., 2011, 17, (19), 6272.
3 マウスモノクローナル抗体
(MAb 2F4)
POD標識ストレプトアビジン プレートリーダー M. Tahara, S. Ohno, K. Sakai, Y. Ito, H. Fukuhara, K. Komase, M.A. Brindley, P.A. Rota, R.K. Plemper, K. Maenaka and M. Takeda, "The receptor-binding site of the measles virus hemagglutinin protein itself constitutes a conserved neutralizing epitope", J. Virol.., 2013, 87, (6), 3583.
4 抗体
(Anti-Nectin-2 mAbs)
–   –  T. Oshima, S. Sato, J. Kato, Y. Ito, T. Watanabe, I. Tsuji, A. Hori, T. Kurokawa and T. Kokubo, "Nectin-2 is a potential target for antibody therapy of breast and ovarian cancers", Mol. Cancer., 2013, 12, (60), .
5 マウスIgG抗体(MMG-49) POD/R-PE標識ストレプトアビジン ウエスタンブロッティング,
フローサイトメーター
D. Men, T.T. Zhang, L.W. Hou, J. Zhou, Z.P. Zhang, Y.Y. Shi, J.L. Zhang, Z.Q. Cui, J.Y. Deng, D.B. Wang and X.E. Zhang, "Self-Assembly of Ferritin Nanoparticles into an Enzyme Nanocomposite with Tunable Size for Ultrasensitive Immunoassay", ACS Nano., 2015, 9, (11), 10852.
6 IgM抗体
(TR1)
POD/R-PE標識ストレプトアビジン ウエスタンブロッティング,
フローサイトメーター
X. Piao, T. Ozawa, H. Hamana, K. Shitaoka, A. Jin, H. Kishi and A. Muraguchi, "TRAIL-receptor 1 IgM antibodies strongly induce apoptosis in human cancer cells in vitro and in vivo", Oncoimmunology., 2016, 5, (5), e1131380.
7  マウスモノクローナル抗体 (16A11) POD標識ストレプトアビジン プレートリーダー N. Hosen, Y. Matsunaga, K. Hasegawa, H. Matsuno, Y. Nakamura, M. Makita, K. Watanabe, M. Yoshida, K. Satoh, S. Morimoto, F. Fujiki, H. Nakajima, J. Nakata, S. Nishida, A. Tsuboi, Y. Oka, M. Manabe, H. Ichihara, Y. Aoyama, A. Mugitani , T. Nakao, M. Hino, R. Uchibori, K. Ozawa, Y. Baba, S. Terakura, N. Wada, E. Morii, J. Nishimura, K. Takeda, Y. Oji, H. Sugiyama, J. Takagi and A. Kumanogoh, "The activated conformation of integrin β7 is a novel multiple myeloma-specific target for CAR T cell therapy", Nat. Med.., 2017, 23, (12), 1436.
8 レクチン
(Recombinant BC2LCN )
Alexa FluorTM 555標識ストレプトアビジン  蛍光顕微鏡   D. Sugahara, Y. Kobayashi, Y. Akimoto, H. Kawakami, "Mouse intestinal niche cells express a distinct α1,2-fucosylated glycan recognized by a lectin from Burkholderia cenocepacia", Glycobiology., 2017, 27, (3), 246.
9 モノクローナル抗体
(H1 HA)
 T. Hiono, A. Matsuda, T. Wagatsuma, M. Okamatsu, Y. Sakoda and A. Kuno, "Lectin microarray analyses reveal host cell-specific glycan profiles of the hemagglutinins of influenza A viruses", Virology., 2019, 527, 132.
10 抗体
(lysozyme sdAb, Y52A mutant)
プレートリーダー T. Kaya, S. Nagatoishi, K. Nagae, Y. Nakamura and K. Tsumoto, "Highly sensitive biomolecular interaction detection method using optical bound/free separation with grating-coupled surface plasmon field-enhanced fluorescence spectroscopy (GC-SPFS).", PLoS ONE, 2019, 14, (8), DOI:10.1371/journal.pone.0220578.
11 タンパク質(recombinant human IL-12P40) プレートリーダー Y. Morita, T. Imai, S. Bamba, K. Takahashi, O. Inatomi, T. Miyazaki, K. Watanabe, S. Nakamura, A. Yoshida, Y. Endo, N. Ohmiya, T. Tsujikawa and A. Andoh, "Clinical relevance of innovative immunoassays for serum ustekinumab and anti-ustekinumab antibody levels in Crohn's disease.", J Gastroenterol Hepatol Res, 2019, DOI:10.1111/jgh.149628.
12 レクチン
(SeviL was isolated from Mytilisepta virgata)
Y. Fujii, M. Gerdol, S.M.A. Kawsar, I. Hasan, F. Spazzali, T. Yoshida, Y. Ogawa, S. Rajia, K. Kamata, Y. Koide, S. Sugawara, M. Hosono, J.R.H.  Tame, H. Fujita, A. Pallavicini and Y. Ozeki, "A GM1b/asialo-GM1 oligosaccharide-binding R-type lectin from purplish bifurcate mussels Mytilisepta virgata and its effect on MAP kinases.", FEBS J., 2019, DOI: 10.1111/febs.15154..
13 モノクローナル抗体( mAb2H6, mAb10D11)  K. Okada, H. Itoh and M. Ikemotob, "Circulating S100A8/A9 is potentially a biomarker that could reflect the severity of experimental colitis in rats', Heliyon, 2020, 6, (2), e03470.
14 抗体
(CD31)
Y. Yamazaki, M. Shinohara, A. Yamazaki, Y. Ren, Y. W. Asmann, T. Kanekiyo and Guojun Bu, "SApoE (Apolipoprotein E) in Brain Pericytes Regulates Endothelial Function in an Isoform-Dependent Manner by Modulating Basement Membrane Components", Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol., 2020, 40, (1), 128.

よくある質問

Q

Labeling Kitで1次抗体を直接標識する利点を教えてください。

A

はじめて抗体標識をされる方を対象としたプロトコルを作成しております。
カスタマーサポートの視点から直接標識法の利点や実施例等を記載しておりますので、ご参照下さい。

下記リンクよりダウンロード可能です。
「はじめての抗体標識プロトコル ~カスタマーサポートの視点から~」

Q

使用できるIgGの量が少量しかありませんが標識できますか?

A

本キットでは、標識に必要なIgGの量は50~200μgとしています。
この範囲であれば性能に大きな違いはありません。

10μgのIgGでも標識可能ですが、バックグランドの上昇などの問題が生じる可能性があります。

Q

サンプル溶液中の共存物は反応に影響しますか?

A

共存物の種類により影響することがあります。
溶液中にどのような物質が含まれるかを確認の上、状況に応じてラベル化に用いるサンプルの精製を行い、標識反応にご使用ください。

<高分子:分子量1万以上>
影響する可能性があります。
BSAやゼラチンなどアミノ基をもつ化合物が含まれると、抗体への標識効率が低下します。また、高分子のためFiltration Tubeでも除くことができません。また、アミノ基を持たない化合物でも、高分子の不純物が多いとフィルターの目詰まりの原因になり、標識・精製操作に支障がでる可能性もあります。反応に使用する前に別途精製を行ってください。
*本製品に限らず他のLabeling kit に関しても同様の注意が必要です。

Q

低分子のタンパク質(分子量50,000以下)に標識する場合の方法を教えて下さい。

A

キット付属のフィルトレーションチューブは分画分子量30Kの限外濾過フィルターのため、余裕をもって50,000以上のタンパク質のご使用を推奨しております。

分子量50,000以下のタンパク質を標識される場合は、下記のような分画分子量の小さい限外濾過フィルターに変更して頂くことで、低分子のタンパク質でもラベル化可能でございます。

——————————————
PALL社 ナノセップ  3K 製品No.OD003C33
PALL社 ナノセップ 10K 製品No.OD010C33 
——————————————

キット同梱のフィルターを用いた場合に比べ遠心に時間を要することがございますので遠心時間はご検討下さい。

Q

標識後、フィルトレーションチューブを遠心してもメンブレン上に液が残る。

A

(1)メンブレンを目視で確認した際、メンブレンカップの淵にうっすら液が残る程度であれば、次の操作に進んで下さい。

メンブレン上に液が残っていたり、メンブレンカップを傾けて回転させたとき、液が垂れてくるようであれば、さらに遠心を8,000xg で15分~30分程度行って下さい。

(2)1)の遠心操作後もメンブレン上に液が残る場合は、標識体が凝集していないか確認してください。

 抗体やタンパク質自身の性質によりますが、低分子標識剤を標識することで抗体やタンパク質の疎水性が増し、凝集する場合がございます。

標識体に凝集が見られる場合は、一度別のマイクロチューブに移し、遠心し上澄みをご使用ください。(抗体・タンパク質の回収量は低下いたします。)

上記でも解決しない場合は、小社カスタマーサポートまでお問い合わせください。

※フィルターの目詰まりが疑われる場合は、メンブレンフィルターを新しいものに交換すると解決する場合がございます。 
代替品: PALL社製 ナノセップ 30K (メーカーコード:OD030C33)

Q

このキットではどのようなものが標識できますか?

A

分子量が「50,000以上」で反応性のアミノ基(NH2)を有している化合物(抗体、蛋白質など)であれば標識できます。
量は「50~200μg」が対象となります。

*『mg』量の標識をお考えの際には「Biotinylation Kit (Sulfo-OSu);同仁品コード:BK01」もございます。

*キットに添付しているFiltration Tubeのサイズが30Kのため、低分子の化合物は精製できません。

Q

IgG 1分子に対して、どれくらいのBiotinが標識されますか?

A

IgG 1分子に対して平均7~10個のBiotinが標識されます。

抗体・タンパク質標識キット Biotin Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所 抗体・タンパク質標識キット Biotin Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所

取扱条件

取扱条件
保存条件: 冷蔵 , 取扱条件: 吸湿注意
SDSダウンロード
抗体・タンパク質標識キット Biotin Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所

関連製品

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    Biotin Labeling Kit – SH

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抗体・タンパク質標識キット Peroxidase Labeling Kit – SH 同仁化学研究所

上海金畔生物科技有限公司代理日本同仁化学试剂盒全线产品,欢迎访问日本同仁化学dojindo官网了解更多信息。

抗体・タンパク質標識キット Peroxidase Labeling Kit - SH 同仁化学研究所Peroxidase Labeling Kit – SH

08 ラベル化剤

Peroxidase Labeling Kit – SH

抗体・タンパク質標識キット Peroxidase Labeling Kit - SH 同仁化学研究所

  • ラベル化剤
  • 細胞機能解析
  • 標識キット

抗体・タンパク質標識キット

  • アミノ基でうまくいかなかった
  • ELISAを組みたい
  • 製品コード
    LK09  Peroxidase Labeling Kit – SH
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
3 samples ¥21,300 345-90831
サンプル量 50-200 µg
所要時間 3時間
標識部位 -SH
検出方法 顕微鏡・ウエスタンブロット・プレートリーダー
基質 TMB,DAB等

・高分子化合物(MW>50,000)および低分子化合物(MW<5,000)を標識できる。

・SH-Reactive Peroxidaseと混合するだけでPOD標識体を形成する。

・付属の還元剤を用いることで遊離SH基を持たないタンパク質への標識も可能である*。

・Filtration tubeを用いた分離操作により高い回収率で標識体が得られる。

・付属の保存溶液でPOD標識体の保存ができる。

抗体・タンパク質標識キット Peroxidase Labeling Kit - SH 同仁化学研究所

キット内容
3 samples ・SH-Reactive Peroxidase
・Reducing Agent
・Solution A
・Solution B
・Reaction Buffer
・Storage Buffer
・Filtration Tube
3 tubes
3 tubes
4 ml ×1
1 ml ×1
200 μl ×1
4 ml ×1
3 tubes

  • 抗体・タンパク質標識キット Peroxidase Labeling Kit - SH 同仁化学研究所
試験成績書

SDSダウンロード

  • ご購入方法
  • お問い合わせ

マニュアル

  • 取扱説明書 抗体・タンパク質標識キット Peroxidase Labeling Kit - SH 同仁化学研究所 日本語
    抗体・タンパク質標識キット Peroxidase Labeling Kit - SH 同仁化学研究所
  • 取扱説明書 抗体・タンパク質標識キット Peroxidase Labeling Kit - SH 同仁化学研究所 English
    抗体・タンパク質標識キット Peroxidase Labeling Kit - SH 同仁化学研究所

Peroxidase Labeling Kit – SHの使い方

技術情報

特徴

1) 約3時間でPOD標識体が調製できる。
2) 高分子化合物(MW>50,000)および低分子化合物(MW<5,000)を標識できる。
3)50~200 μgのタンパク質を標識可能である。
4) SH-Reactive Peroxidaseと混合するだけでPOD標識体を形成する。
5) 付属の還元剤を用いることで遊離SH基を持たないタンパク質への標識も可能である*。
6) Filtration tubeを用いた分離操作により高い回収率で標識体が得られる。
7) 付属の保存溶液でPOD標識体の保存ができる。

参考文献

参考文献を表示する

1) 広田次郎, 清水眞也, "キットを用いたモノクローナル抗体への迅速・簡便なペルオキシダーゼ標識法", 動物衛生研究所研究報告, 2005111, 37.
2) K. Inoue, A. Sugiyama, P. C. Reid, Y. Ito, K. Miyauchi, S. Mukai, M. Sagara, K. Miyamoto, H. Satoh, I. Kohno, T. Kurata, H. Ota, A. Mantovani, T. Hamakubo, H. Daida and T. Kodama, "Establishment of a High Sensitivity Plasma Assay for Human Pentraxin3 as a Marker for Unstable Angina Pectoris", Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol., 200727, 161.
3) N. Esaki, Y. Ohkawa, N. Hashimoto, Y. Tsuda, Y. Ohmi, R. H. Bhuiyan, N. Kotani, K. Honke, A. Enomoto, M. Takahashi, K. Furukawa, and K. Furukawa, "ASC amino acid transporter 2, defined by enzyme-mediated activation of radical sources, enhances malignancy of GD2-positive small-cell lung cancer.", Cancer Sci.., 2018, 109, (1), 141.
4) G.W.Zhanga, S.J.Lai, Y.Yoshimura, and N.Isobe, "Messenger RNA expression and immunolocalization of psoriasin in the goat mammary gland and its milk concentration after an intramammary infusion of lipopolysaccharide", Vet. J.., 2014, 202, (1), 89.
5) G-W. Zhang, S-J. Lai, Y. Yoshimura, and N. Isobe, "Expression of cathelicidins mRNA in the goat mammary gland and effect of the intramammary infusion of lipopolysaccharide on milk cathelicidin-2 concentration", Vet. Microbiol.., 2014, 170, (1-2), 125.
6) H. Tateno, S. Saito, K. Hiemori, K. Kiyoi, K. Hasehira, M. Toyoda, Y. Onuma, Y. Ito, H. Akutsu, and J. Hirabayashi, "α2–6 sialylation is a marker of the differentiation potential of human mesenchymal stem cells", Glycobiology., 2016, 26, (12), 1328.
7) K. Iizumi, H. Kawasaki, A. Shigenaga, M. Tominaga, A. Otsu, A. Kamo, Y. Kamata, K. Takamori, and F. Yamakura, "Tryptophan nitration of immunoglobulin light chain as a new possible biomarker for atopic dermatitis", J Clin Biochem Nutr., 2018, 63, (3), 197.
8) K. Morioka, K. Fukai, K. Yoshida, R. Yamazoe, H. Onozato, S. Ohashi, T. Tsuda, and K. Sakamoto, "Foot-and-Mouth Disease Virus Antigen Detection Enzyme-Linked Immunosorbent Assay Using Multiserotype-Reactive Monoclonal Antibodies", J. Clin. Microbiol.., 2009, 47, (11), 3663.
9) M. Watanabe, I. Takemasa, N. Kaneko, Y. Yokoyama, E. Matsuo, S. Iwasa, M. Mori, N. Matsuura, M. Monden, and O. Nishimura, "Clinical significance of circulating galectins as colorectal cancer markers", Oncol. Rep.., 2011, 25, (5), 1217.
10) M. Yasunaga, S. Saijou, S. Hanaoka, T. Anzai, R. Tsumura, and Y. Matsumura, "Significant antitumor effect of an antibody against TMEM180, a new colorectal cancer‐specific molecule", Cancer Sci.., 2019, 110, (2), 761.
11) N. Esaki, Y. Ohkawa, N. Hashimoto, Y. Tsuda, Y. Ohmi, R. H. Bhuiyan, N. Kotani, K. Honke, A. Enomoto, M. Takahashi, K. Furukawa, and K. Furukawa, "ASC amino acid transporter 2, defined by enzyme‐mediated activation of radical sources, enhances malignancy of GD2‐positive small‐cell lung cancer", Cancer Sci.., 2018, 109, (1), 141.
12) N. Hashimoto, K. Hamamura, N. Kotani, K. Furukawa, K. Kaneko, K. Honke, and K. Furukawa, 抗体・タンパク質標識キット Peroxidase Labeling Kit - SH 同仁化学研究所"Proteomic analysis of ganglioside‐associated membrane molecules: Substantial basis for molecular clustering", Proteomics., 2012, 12, (21), 3154.
13) N. Kotani, Y. Ida, T. Nakano, I. Sato, R. Kuwahara, A. Yamaguchi, M. Tomita, K. Honke, and T. Murakoshi, "Tumor-dependent secretion of close homolog of L1 results in elevation of its circulating level in mouse model for human lung tumor", Biochem. Biophys. Res. Commun.., 2018, 501, (4), 982.
14) R. Yamashita, N. Kotani, Y. Ishiura, S. Higashiyama, and K. Honke, "Spatiotemporally-regulated interaction between β1 integrin and ErbB4 that is involved in fibronectin-dependent cell migration", J. Biol. Chem.., 2011, 149, (3), 347.
15) T. Noro, E. Oishi, T. Kaneshige, K. Yaguchi, K. Amimoto, and M. Shimizu, "Identification and characterization of haemagglutinin epitopes of Avibacterium paragallinarum serovar C", Vet. Microbiol.., 2008, 131, (3-4), 406.
16) K. Okada, H. Itoh and M. Ikemotob, "Circulating S100A8/A9 is potentially a biomarker that could reflect the severity of experimental colitis in rats', Heliyon, 2020, 6, (2), e03470.

よくある質問

Q

Labeling Kitで1次抗体を直接標識する利点を教えてください。

A

はじめて抗体標識をされる方を対象としたプロトコルを作成しております。
カスタマーサポートの視点から直接標識法の利点や実施例等を記載しておりますので、ご参照下さい。

下記リンクよりダウンロード可能です。
「はじめての抗体標識プロトコル ~カスタマーサポートの視点から~」

Q

サンプル溶液中の共存物は反応に影響しますか?

A

共存物の種類により影響することがあります。
溶液中にどのような物質が含まれるかを確認の上、状況に応じてラベル化に用いるサンプルの精製を行い、標識反応にご使用ください。

<高分子:分子量1万以上>
影響する可能性があります。
高分子でSH基をもつ化合物は、Filtration Tubeでも除くことができません。 そのため標識され、蛍光性不純物として影響します。反応に使用する前に別途精製を行ってください。 一方、SH基を持たない化合物でも、高分子の不純物が多いとフィルターの目詰まりの原因になり、標識・精製操作に支障がでる可能性もあります。
*本製品に限らず他のLabeling kit に関しても同様の注意が必要です。

Q

使用できるIgGの量が少量しかありませんが標識できますか?

A

本キットでは、標識に必要なIgGの量は50~200 μgとしています。
この範囲であれば性能に大きな違いはありません。
10 μgのIgGでも標識可能ですが、バックグランドの上昇などの問題が生じる可能性があります。

Q

サンプルは溶液になっていても問題ないでしょうか?

A

問題ありません。

但し、添付のFilitration tubeの容量に制限がありますので、サンプル溶液の容量は100 μl以下である必要があります。
また、サンプルの濃度が0.5 mg/mL以下(50 μg/100 μL以下)である場合は、Filitration tubeを用いてサンプル量が50~200 μgとなるようにして下さい。
溶液をFilitration tubeにいれて遠心して溶液を除く操作を行って下さい(必要であれば繰り返す)。
フィルター上に残っているサンプルの量が50~200 μgとなればよいので、改めて溶解させる必要はありません。

*注:低分子の阻害物質は最初の段階で除かれますが、高分子(分子量1万以上)の阻害物質(例;BSA、ゼラチン)は除くことが出来ません。使用前に別途除去してください。

Q

低分子のタンパク質(分子量50,000以下)に標識する場合の方法を教えて下さい。

A

キット付属のフィルトレーションチューブは分画分子量30Kの限外濾過フィルターのため、余裕をもって50,000以上のタンパク質のご使用を推奨しております。

分子量50,000以下のタンパク質を標識される場合は、下記のような分画分子量の小さい限外濾過フィルターに変更して頂くことで、低分子のタンパク質でもラベル化可能でございます。

——————————————————————-
PALL社 ナノセップ  3K 製品No.OD003C33
PALL社 ナノセップ 10K 製品No.OD010C33 
——————————————————————-

キット同梱のフィルターを用いた場合に比べ遠心に時間を要することがございますので遠心時間はご検討下さい。

Q

どのようなものが標識できますか?

A

分子量が「50,000以上」で[S-S]もしくは[SH]を有しているもの、分子量が「5,000以下」で[SH]を有している化合物(抗体、蛋白質など)であれば標識できます。

分子量が「5,000以下」、「50,000以上」で操作方法が若干異なりますので、製品に添付の説明書をご覧いただき標識反応を行ってください。

Q

IgG 1分子に対して、どれくらいのPeroxidaseが標識されますか?

A

IgG 1分子に対して平均2~4分子のPeroxidaseが標識されます。

Q

標識率は出せますか?

A

標識後のサンプル溶液には、未反応のReactive体が含まれるため標識率を算出することはできません。

抗体・タンパク質標識キット Peroxidase Labeling Kit - SH 同仁化学研究所 抗体・タンパク質標識キット Peroxidase Labeling Kit - SH 同仁化学研究所

取扱条件

取扱条件
保存条件: 冷蔵 , 取扱条件: 吸湿注意
SDSダウンロード
抗体・タンパク質標識キット Peroxidase Labeling Kit - SH 同仁化学研究所

関連製品

この製品に関連する研究では、下記の関連製品も使われています。

  • 抗体・タンパク質標識キット Peroxidase Labeling Kit - SH 同仁化学研究所

    抗体・タンパク質標識キット

    Peroxidase Labeling Kit – NH2

  • 抗体・タンパク質標識キット Peroxidase Labeling Kit - SH 同仁化学研究所

    抗体標識キット

    Ab-10 Rapid Peroxidase Labeling Kit

抗体・タンパク質標識キット Biotin Labeling Kit – SH 同仁化学研究所

上海金畔生物科技有限公司代理日本同仁化学试剂盒全线产品,欢迎访问日本同仁化学dojindo官网了解更多信息。

抗体・タンパク質標識キット Biotin Labeling Kit - SH 同仁化学研究所Biotin Labeling Kit – SH

08 ラベル化剤

Biotin Labeling Kit – SH

抗体・タンパク質標識キット Biotin Labeling Kit - SH 同仁化学研究所

  • ラベル化剤
  • 細胞機能解析
  • 標識キット

抗体・タンパク質標識キット

  • アミノ基でうまくいかなかった
  • 感度をあげたい
  • 製品コード
    LK10  Biotin Labeling Kit – SH
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
3 samples ¥15,000 348-90941
サンプル量 50-200 µg
所要時間 3時間
標識部位 -SH
検出方法 顕微鏡・FCM・ウエスタンブロット・プレートリーダー

・SH-Reactive Biotinと混ぜるだけで、安定な共有結合を形成する。

・分子量50,000以上のタンパク質が標識できる。

・付属の還元剤を用いることで遊離SH基を持たないタンパク質への標識も可能である*。

・Filtration tubeを用いた分離操作により高い回収率で標識体が得られる。

・付属の保存溶液でBiotin標識体の保存ができる。

抗体・タンパク質標識キット Biotin Labeling Kit - SH 同仁化学研究所

キット内容
3 samples ・SH-Reactive Biotin
・Reducing Agent
・WS Buffer
・Reaction Buffer
・Filtration Tube
3 tubes
3 tubes
4 ml x 1
1 ml x 1
3 tubes

  • 抗体・タンパク質標識キット Biotin Labeling Kit - SH 同仁化学研究所
試験成績書

SDSダウンロード

  • ご購入方法
  • お問い合わせ

マニュアル

  • 取扱説明書 抗体・タンパク質標識キット Biotin Labeling Kit - SH 同仁化学研究所 日本語
    抗体・タンパク質標識キット Biotin Labeling Kit - SH 同仁化学研究所
  • 取扱説明書 抗体・タンパク質標識キット Biotin Labeling Kit - SH 同仁化学研究所 English
    抗体・タンパク質標識キット Biotin Labeling Kit - SH 同仁化学研究所

Biotin Labeling Kit – SHの使い方

技術情報

特長

1) 約3時間でビオチン標識体が調製できる。
2) SH-Reactive Biotinと混ぜるだけで、安定な共有結合を形成する。
3)分子量50,000以上のタンパク質が標識できる。
4)50~200 μgのタンパク質を標識可能である。
5) 付属の還元剤を用いることで、遊離SH基を持たないタンパク質への標識も可能である*
6) Filtration Tubeを用いた分離操作により高い回収率で標識体が得られる。
7) 付属の保存溶液でBiotin標識体の保存ができる。

参考文献

参考文献を表示する

1) E. Terasaka, K. Yamada, P.H. Wang, K. Hosokawa, R. Yamagiwa, K. Matsumoto, S. Ishii, T. Mori, K. Yagi, H. Sawai, H. Arai, H. Sugimoto, Y. Sugita, Y. Shiro and T. Tosha, "Dynamics of nitric oxide controlled by protein complex in bacterial system", Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A.., 2017, 114, (37), 9888.
2) J. Hiruma, K. Harada, A. Motoyama, Y. Okubo, T. Maeda, M. Yamamoto, M. Miyai, T. Hibino and R. Tsuboi, "Key component of inflammasome, NLRC4, was identified in the lesional epidermis of psoriatic patients", J. Dermatol.., 2018, 45, (8), 971.
3) K. Gonda, M. Watanabe, H. Tada, M. Miyashita, Y. Takahashi-Aoyama, T. Kamei, T. Ishida, S. Usami, H. Hirakawa, Y. Kakugawa, Y. Hamanaka, R. Yoshida, A. Furuta, H. Okada, H. Goda, H. Negishi, K. Takanashi, M. Takahashi, Y. Ozaki, Y. Yoshihara, Y. Nakano and N. Ohuchi, "Quantitative diagnostic imaging of cancer tissues by using phosphor-integrated dots with ultra-high brightness", Sci. Rep.., 2017, 7, (1), 7509.
4) K. Saito, M. Sakaguchi, H. Iioka, M. Matsui, H. Nakanishi, N.H. Huh and E. Kondo, "Coxsackie and adenovirus receptor is a critical regulator for the survival and growth of oral squamous carcinoma cells", Oncogene., 2014, 33, (10), 127401286.
5) K. Yamamoto, H. Murata, E.W. Putranto, K. Kataoka, A. Motoyama, T. Hibino, Y. Inoue, M. Sakaguchi and N.H. Huh, "DOCK7 is a critical regulator of the RAGE-Cdc42 signaling axis that induces formation of dendritic pseudopodia in human cancer cells", Oncol. Rep.., 2013, 29, (3), 1073.
6) M. Sakaguchi, H. Murata, K. Yamamoto, T. Ono, Y. Sakaguchi, A. Motoyama, T. Hibino, K. Kataoka and N.H. Huh, "TIRAP, an Adaptor Protein for TLR2/4, Transduces a Signal from RAGE Phosphorylated upon Ligand Binding", PLoS ONE., 2011, 6, (8), e23132.
7) M. Sakaguchi, H. Murata, Y. Aoyama, T. Hibino, E.W. Putranto, I.M. Ruma, Y. Inoue, Y. Sakaguchi, K. Yamamoto, R. Kinoshita, J. Futami, K. Kataoka, K. Iwatsuki and N.H. Huh, "DNAX-activating Protein 10 (DAP10) Membrane Adaptor Associates with Receptor for Advanced Glycation End Products (RAGE) and Modulates the RAGE-triggered Signaling Pathway in Human Keratinocytes", J. Biol. Chem.., 2014, 289, (34), 23389.
8) N. Kobayashi, K. Odaka, T. Uehara, K. Imanaka-Yoshida, Y. Kato, H. Oyama, H. Tadokoro, H. Akizawa, S. Tanada, M. Hiroe, T. Fukumura, I. Komuro, Y. Arano, T. Yoshida and T. Irie, "Toward in Vivo Imaging of Heart Disease Using a Radiolabeled Single-Chain Fv Fragment Targeting Tenascin-C", Anal. Chem.., 2011, 83, (23), 9123.
9) T. Ikeda, R. Shinohata, M. Murakami, K. Hina, S. Kamikawa, S. Hirohata, S. Kusachi, A. Tamura and S. Usui, "A rapid and precise method for measuring plasma apoE-rich HDL using polyethylene glycol and cation-exchange chromatography: a pilot study on the clinical significance of apoE-rich HDL measurements", Clin. Chim. Acta.,2017, 465, 112.
10) T. Into, M. Inomata, M. Nakashima, K. Shibata, H. Hacker and K. Matsushita, "Regulation of MyD88-Dependent Signaling Events by S Nitrosylation Retards Toll-Like Receptor Signal Transduction and Initiation of Acute-Phase Immune Responses", Mol. Cell. Biol.., 2008, 28, (4), 1338.
11) W. Nakai, T. Yoshida, D. Diez, Y. Miyatake, T. Nishibu, N. Imawaka, K. Naruse, Y. Sadamura and R. Hanayama, "A novel affinity-based method for the isolation of highly purified extracellular vesicles", Sci. Rep.., 2016, 6, 33935.
12) Y. Terasaki, T. Akuta, M. Terasaki, T. Sawa, T. Mori, T. Okamoto, M. Ozaki, M. Takeya and T. Akaike, "Guanine Nitration in Idiopathic Pulmonary Fibrosis and Its Implication for Carcinogenesis", Am. J. Respir. Crit. Care Med.., 2006, 174, (6), 665.
13) I. W. Sumardika, C. Youyi, E. Kondo, Y. Inoue, I. M. W. Ruma, H. Murata, R. Kinoshita, K. Yamamoto, S. Tomida, K. Shien, H. Sato, A. Yamauchi, J. Futami, E. W. Putranto, T. Hibino, S. Toyooka , M. Nishibori and M. Sakaguchi, "β-1,3-Galactosyl-O-Glycosyl-Glycoprotein β-1,6-N-Acetylglucosaminyltransferase 3 Increases MCAM Stability, Which Enhances S100A8/A9-Mediated Cancer Motility.", Oncol. Res., 2018, 26, (3), 431.
14) J. Iwano, D. Shinmi, K. Masuda, T. Murakami and J. Enokizono, "Impact of Different Selectivity between Soluble and Membrane-bound Forms of Carcinoembryonic Antigen (CEA) on the Target-mediated Disposition of Anti-CEA Monoclonal Antibodies.", Drug Metab. Dispos., 2019, 47, (1), 1240.
15) D. S. On, P. Chertchinnapa, Y. Shinkai, T. Kojima and H. Nakano, "Development of a dual monoclonal antibody sandwich enzyme-linked immunosorbent assay for the detection of swine influenza virus using rabbit monoclonal antibody by Ecobody technology.", J. Biosci. Bioeng., 2020, DOI:10.1016/j.jbiosc.2020.03.003.

よくある質問

Q

Labeling Kitで1次抗体を直接標識する利点を教えてください。

A

はじめて抗体標識をされる方を対象としたプロトコルを作成しております。
カスタマーサポートの視点から直接標識法の利点や実施例等を記載しておりますので、ご参照下さい。
下記リンクよりダウンロード可能です。
「はじめての抗体標識プロトコル ~カスタマーサポートの視点から~」

Q

サンプル溶液中の共存物は反応に影響しますか?

A

共存物の種類により影響することがあります。
溶液中にどのような物質が含まれるかを確認の上、状況に応じてラベル化に用いるサンプルの精製を行い、標識反応にご使用ください。

<高分子:分子量1万以上>
影響する可能性があります。
高分子でSH基をもつ化合物は、Filtration Tubeでも除くことができません。 そのため標識され、蛍光性不純物として影響します。反応に使用する前に別途精製を行ってください。 一方、SH基を持たない化合物でも、高分子の不純物が多いとフィルターの目詰まりの原因になり、標識・精製操作に支障がでる可能性もあります。
*本製品に限らず他のLabeling kit に関しても同様の注意が必要です。

Q

低分子のタンパク質(分子量50,000以下)に標識する場合の方法を教えて下さい。

A

キット付属のフィルトレーションチューブは分画分子量30Kの限外濾過フィルターのため、余裕をもって50,000以上のタンパク質のご使用を推奨しております。

分子量50,000以下のタンパク質を標識される場合は、下記のような分画分子量の小さい限外濾過フィルターに変更して頂くことで、低分子のタンパク質でもラベル化可能でございます。

——————————————
PALL社 ナノセップ  3K 製品No.OD003C33
PALL社 ナノセップ 10K 製品No.OD010C33 
——————————————

キット同梱のフィルターを用いた場合に比べ遠心に時間を要することがございますので遠心時間はご検討下さい。

Q

標識後、フィルトレーションチューブを遠心してもメンブレン上に液が残る。

A

(1)メンブレンを目視で確認した際、メンブレンカップの淵にうっすら液が残る程度であれば、次の操作に進んで下さい。
メンブレン上に液が残っていたり、メンブレンカップを傾けて回転させたとき、液が垂れてくるようであれば、さらに遠心を8,000g で15分~30分程度行って下さい。          
(2)1)の遠心操作後もメンブレン上に液が残る場合は、標識体が凝集していないか確認してください。

 抗体やタンパク質自身の性質によりますが、低分子標識剤を標識することで抗体やタンパク質の疎水性が増し、凝集する場合がございます。

標識体に凝集が見られる場合は、一度別のマイクロチューブに移し、遠心し上澄みをご使用ください。(抗体・タンパク質の回収量は低下いたします。)

上記でも解決しない場合は、小社カスタマーサポートまでお問い合わせください。

※フィルターの目詰まりが疑われる場合は、メンブレンフィルターを新しいものに交換すると解決する場合がございます。 
代替品: PALL社製 ナノセップ 30K (メーカーコード:OD030C33)

Q

どのようなものが標識できますか?

A

分子量が「50,000以上」で[S-S]もしくは[SH]を有している化合物(抗体、蛋白質など)であれば標識できます。
量は「50~200 μg」が対象となります。
*キットに添付しているFiltration Tubeのサイズが30Kのため、低分子の化合物は精製できません。

抗体・タンパク質標識キット Biotin Labeling Kit - SH 同仁化学研究所 抗体・タンパク質標識キット Biotin Labeling Kit - SH 同仁化学研究所

取扱条件

取扱条件
保存条件: 冷蔵 , 取扱条件: 吸湿注意
SDSダウンロード
抗体・タンパク質標識キット Biotin Labeling Kit - SH 同仁化学研究所

関連製品

この製品に関連する研究では、下記の関連製品も使われています。

  • 抗体・タンパク質標識キット Biotin Labeling Kit - SH 同仁化学研究所

    抗体・タンパク質標識キット

    Biotin Labeling Kit – NH2

  • 抗体・タンパク質標識キット Biotin Labeling Kit - SH 同仁化学研究所

    抗体標識キット

    Ab-10 Rapid Biotin Labeling Kit

抗体・タンパク質標識キット Peroxidase Labeling Kit – NH2 同仁化学研究所

上海金畔生物科技有限公司代理日本同仁化学试剂盒全线产品,欢迎访问日本同仁化学dojindo官网了解更多信息。

抗体・タンパク質標識キット Peroxidase Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所Peroxidase Labeling Kit – NH2

08 ラベル化剤

Peroxidase Labeling Kit – NH2

抗体・タンパク質標識キット Peroxidase Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所

  • ラベル化剤
  • 標識キット

抗体・タンパク質標識キット

  • 初めてHRP標識をする
  • 簡単な操作で標識したい
  • ELISAを組みたい
  • 製品コード
    LK11  Peroxidase Labeling Kit – NH2
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
3 samples ¥21,300 348-90821
サンプル量 50-200 µg
所要時間 3時間
標識部位 -NH2
検出方法 顕微鏡・ウエスタンブロット・プレートリーダー
基質 TMB, DAB等

・高分子化合物(MW>50,000)および低分子化合物(MW<5,000)を標識できる。

・NH2-Reactive Peroxidaseと混合するだけでPOD標識体を形成する。

・Filtration tubeを用いた分離操作により高い回収率で標識体が得られる。

・付属の保存溶液でPOD標識体の保存ができる。

抗体・タンパク質標識キット Peroxidase Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所

キット内容
3 samples ・NH2-Reactive Peroxidase
・Washing Buffer
・Reaction Buffer
・Storage Buffer
・Filtration Tube
3 tubes
4 ml x1
200 μl x1
4 ml x1
3 tubes

  • 抗体・タンパク質標識キット Peroxidase Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所
試験成績書

SDSダウンロード

  • ご購入方法
  • お問い合わせ

マニュアル

  • 取扱説明書 抗体・タンパク質標識キット Peroxidase Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所 日本語
    抗体・タンパク質標識キット Peroxidase Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所
  • 取扱説明書 抗体・タンパク質標識キット Peroxidase Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所 English
    抗体・タンパク質標識キット Peroxidase Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所

Peroxidase Labeling Kit – NH2の使い方

技術情報

特徴

1) 約3時間以内にPOD標識体が調製できる。
2) 高分子化合物(MW>50,000)および低分子化合物(MW<5,000)を標識できる。
3)50~200 μgのタンパク質を標識可能である。
4) NH2-Reactive Peroxidaseと混合するだけでPOD標識体を形成する。
5) Filtration Tubeを用いた分離操作により高い回収率で標識体が得られる。
6) 付属の保存溶液でPOD標識体の保存ができる。

参考文献

参考文献を表示する

1) 広田次郎, 清水眞也, "キットを用いたモノクローナル抗体への迅速・簡便なペルオキシダーゼ標識法", 動物衛生研究所研究報告, 2005111, 37.
2) A. Miyagawa-Yamaguchi, N. Kotani, and K. Honke, "Expressed Glycosylphosphatidylinositol-Anchored Horseradish Peroxidase Identifies Co-Clustering Molecules in Individual Lipid Raft Domains", PLoS ONE., 2014, 9, (3), e93054.
3) J. Zhang, D. Klufas, K. Manalo, K. Adjepong, J.O. Davidson, G. Wassink, L. Bennet, A.J. Gunn, E.G. Stopa, K. Liu, M. Nishibori, and B.S. Stonestreet, "HMGB1 Translocation After Ischemia in the Ovine Fetal Brain", J. Neuropathol. Exp. Neurol.., 2016, 75, (6), 527.
4) M. Okumura, T. Ozawa, H. Hamana, Y. Norimatsu, R. Tsuda, E. Kobayashi, K. Shinoda, H. Taki, K. Tobe, J. Imura, E. Sugiyama, H. Kishi, and A. Muraguchi, "Autoantibodies reactive to PEP08 are clinically related with morbidity and severity of interstitial lung disease in connective tissue diseases", Eur. J. Immunol.., 2018, 48, (10), 1717.
5) R. Sugisawa, G. Komatsu, E. Hiramoto, N. Takeda, K. Yamamura, S. Arai, and T. Miyazaki, "Independent modes of disease repair by AIM protein distinguished in AIM-felinized mice", Sci. Rep.., 2018, 8, 13157.
6) S. Takatsuka, T. Inukai, S. Kawakubo, T. Umeyama, M. Abe, K. Ueno, Y. Hoshino, Y. Kinjo, Y. Miyazaki, and S. Yamagoe, "Identification of a Novel Variant Form of Aspergillus fumigatus CalC and Generation of Anti-CalC Monoclonal Antibodies", Med Mycol J., 2019, 60, (1), 11.
7) T. Sasaki, K. Liu,T. Agari, T. Yasuhara, J. Morimoto, M. Okazaki, H. Takeuchi, A. Toyoshima, S. Sasada, A. Shinko, A. Kondo, M. Kameda, I. Miyazaki, M. Asanuma, CV. Borlongan, M. Nishibori, and I. Date, "Anti-high mobility group box 1 antibody exerts neuroprotection in a rat model of Parkinson's disease", Exp. Neurol.., 2016, 275, 220.
8) T. Tsumuraya, I. Fujii, M. Inoue, A. Tatami, K. Miyazaki, and M. Hirama, "Production of monoclonal antibodies for sandwich immunoassay detection of ciguatoxin 51-hydroxyCTX3C", Toxicon., 2006, 48, (3), 287.
9) W. Jin, K. Yamada, M. Ikami, N. Kaji, M. Tokeshi, Y. Atsumi, M. Mizutani, A. Murai, A. Okamoto, T. Namikaw, Y. Baba, and M. Ohta, "Application of IgY to sandwich enzyme-linked immunosorbent assays, lateral flow devices, and immunopillar chips for detecting staphylococcal enterotoxins in milk and dairy products", J. Microbiol. Methods., 2013, 92, (3), 323.
10) W.W.P.N. Weerakoon, M. Sakase, N. Kawate, M.A. Hannan, N. Kohama, and H. Tamada, "Plasma IGF-I, INSL3, testosterone, inhibin concentrations and scrotal circumferences surrounding puberty in Japanese Black beef bulls with normal and abnormal semen", Theriogenology., 2018, 114, (1), 54.
11) Y. Watanabe, Y. Kazuki, K. Kazuki, M. Ebiki, M. Nakanishi, K. Nakamura, M. Yoshida Yamakawa,H. Hosokawa, T. Ohbayashi, M. Oshimura, and K. Nakashima, "Use of a Human Artificial Chromosome for Delivering Trophic Factors in a Rodent Model of Amyotrophic Lateral Sclerosis", Mol Ther Nucleic Acids., 2015, 4, (10), e253.
12) Y.S. Kim, D.H. Jung, I.S. Lee, B.J. Pyun and J.S. Kim, "Osteomeles schwerinae extracts inhibits the binding to receptors of advanced glycation end products and TGF-β1 expression in mesangial cells under diabetic conditions", Phytomedicine., 2016, 23, (4), 388.
13) S .Kon, M. Honda, K. Ishikawa, M. Maeda and T. Segawa, "Antibodies against nephronectin ameliorate anti-type II collagen-induced arthritis in mice.', FEBS Open Bio., 2019,10.1002/2211-5463.12758.
14) S. Furutani, K. Nishio, N. Naruishi, Y. A. Ogawa, Y. Hagihara, Y. Yoshida and H. Nagai, "Rapid Enzyme-linked Immunosorbent Assays for Diagnosis of Diabetes in a Compact Disc-shaped Microfluidic Device.', Anal. Sci., 2018, 34, (4), 379.
15) H. Takashima, Y. Koga, R. Tsumura, M. Yasunaga, M. Tsuchiya, T. Inoue, E. Negishi, M. Harada, S. Yoshida and Y. Matsumura, "Reinforcement of antitumor effect of micelles containing anticancer drugs by binding of an anti-tissue factor antibody without direct cytocidal effects.', J Control Release, 2020, 35, (5), e2866.

16) H. Takashima, Y. Koga, R. Tsumura, M. Yasunaga, M. Tsuchiya, T. Inoue, E. Negishi, M. Harada, S. Yoshida and Y. Matsumura, "Reinforcement of antitumor effect of micelles containing anticancer drugs by binding of an anti-tissue factor antibody without direct cytocidal effects.', J Control Release, 2020, 35, (5), e2866.

17) H. Takashima, Y. Koga, R. Tsumura, M. Yasunaga, M. Tsuchiya, T. Inoue, E. Negishi, M. Harada, S. Yoshida and Y. Matsumura, "Reinforcement of antitumor effect of micelles containing anticancer drugs by binding of an anti-tissue factor antibody without direct cytocidal effects.', J Control Release, 2020, 35, (5), e2866.

よくある質問

Q

Labeling Kitで1次抗体を直接標識する利点を教えてください。

A

はじめて抗体標識をされる方を対象としたプロトコルを作成しております。
カスタマーサポートの視点から直接標識法の利点や実施例等を記載しておりますので、ご参照下さい。
下記リンクよりダウンロード可能です。
「はじめての抗体標識プロトコル ~カスタマーサポートの視点から~」

Q

サンプル溶液中の共存物は反応に影響しますか?

A

共存物の種類により影響することがあります。
溶液中にどのような物質が含まれるかを確認の上、状況に応じてラベル化に用いるサンプルの精製を行い、標識反応にご使用ください。

<高分子:分子量1万以上>
影響する可能性があります。
BSAやゼラチンなどアミノ基をもつ化合物が含まれると、抗体への標識効率が低下します。また、高分子のためFiltration Tubeでも除くことができません。また、アミノ基を持たない化合物でも、高分子の不純物が多いとフィルターの目詰まりの原因になり、標識・精製操作に支障がでる可能性もあります。反応に使用する前に別途精製を行ってください。
*本製品に限らず他のLabeling kit に関しても同様の注意が必要です。

Q

使用できるIgGの量が少量しかありませんが標識できますか?

A

本キットでは、標識に必要なIgGの量は50~200 μgとしています。
この範囲であれば性能に大きな違いはありません。

10 μgのIgGでも標識可能ですが、バックグランドの上昇などの問題が生じる可能性があります。

Q

サンプルは溶液になっていても問題ないでしょうか?

A

問題ありません。

但し、添付のFilitration tubeの容量に制限がありますので、サンプル溶液の容量は100 μl以下である必要があります。
また、サンプルの濃度が0.5 mg/mL以下(50 μg/100 μL以下)である場合は、Filitration tubeを用いてサンプル量が50~200 μgとなるようにして下さい。
溶液をFilitration tubeにいれて遠心して溶液を除く操作を行って下さい。(必要であれば繰り返す。)フィルター上に残っているサンプルの量が50~200 μgとなればよいので、改めて溶解させる必要はありません。

*注:低分子の阻害物質は最初の段階で除かれますが、高分子(分子量1万以上)の阻害物質(例;BSA、ゼラチン)は除くことが出来ません。使用前に別途除去してください。

Q

低分子のタンパク質(分子量50,000以下)に標識する場合の方法を教えて下さい。

A

キット付属のフィルトレーションチューブは分画分子量30Kの限外濾過フィルターのため、余裕をもって50,000以上のタンパク質のご使用を推奨しております。

分子量50,000以下のタンパク質を標識される場合は、下記のような分画分子量の小さい限外濾過フィルターに変更して頂くことで、低分子のタンパク質でもラベル化可能でございます。

——————————————————————
PALL社 ナノセップ  3K 製品No.OD003C33
PALL社 ナノセップ 10K 製品No.OD010C33 
——————————————————————

キット同梱のフィルターを用いた場合に比べ遠心に時間を要することがございますので遠心時間はご検討下さい。

Q

どのようなものが標識できますか?

A

分子量が「5,000以下」もしくは「50,000以上」で反応性のアミノ基(NH2)を有している
化合物(抗体、蛋白質など)であれば標識できます。

分子量が「5,000以下」、「50,000以上」で操作方法が若干異なりますので、製品に添付の説明書をご覧いただき標識反応を行ってください。

Q

IgG 1分子に対して、どれくらいのPeroxidaseが標識されますか?

A

IgG 1分子に対して平均1~3分子のPeroxidaseが標識されます。

抗体・タンパク質標識キット Peroxidase Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所 抗体・タンパク質標識キット Peroxidase Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所

取扱条件

取扱条件
保存条件: 冷蔵 , 取扱条件: 吸湿注意
SDSダウンロード
抗体・タンパク質標識キット Peroxidase Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所

関連製品

この製品に関連する研究では、下記の関連製品も使われています。

  • 抗体・タンパク質標識キット Peroxidase Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所

    抗体・タンパク質標識キット

    Peroxidase Labeling Kit – SH

  • 抗体・タンパク質標識キット Peroxidase Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所

    抗体標識キット

    Ab-10 Rapid Peroxidase Labeling Kit

抗体・タンパク質標識キット Alkaline Phosphatase Labeling Kit – NH2 同仁化学研究所

上海金畔生物科技有限公司代理日本同仁化学试剂盒全线产品,欢迎访问日本同仁化学dojindo官网了解更多信息。

抗体・タンパク質標識キット Alkaline Phosphatase Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所Alkaline Phosphatase Labeling Kit – NH2

08 ラベル化剤

Alkaline Phosphatase Labeling Kit – NH2

抗体・タンパク質標識キット Alkaline Phosphatase Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所

  • ラベル化剤
  • 標識キット

抗体・タンパク質標識キット

  • 初めてALP標識する
  • 比較的簡単な操作で実験したい
  • ELISAを組みたい
  • 製品コード
    LK12  Alkaline Phosphatase Labeling Kit – NH2
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
3 samples ¥26,000 343-90871
サンプル量 50-200 µg
所要時間 3時間
標識部位 -NH2
検出方法 顕微鏡・ウエスタンブロット・プレートリーダー
基質 NBT,PNPP等

・高分子化合物(MW>50,000)および低分子化合物(MW<5,000)を標識できる。

・NH2-Reactive ALPと混合するだけでALP標識体を形成する。

・Filtration tubeを用いた分離操作により高い回収率で標識体が得られる。

・付属の保存溶液でALP標識体の保存ができる。

抗体・タンパク質標識キット Alkaline Phosphatase Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所

キット内容
3 samples ・NH2-Reactive Alkaline Phosphatase
・Washing Buffer
・Reaction Buffer
・Storage Buffer
・Filtration Tube
3 tubes
4 ml ×1
200μl ×1
4 ml ×1
3 tubes

  • 抗体・タンパク質標識キット Alkaline Phosphatase Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所
試験成績書

SDSダウンロード

  • ご購入方法
  • お問い合わせ

マニュアル

  • 取扱説明書 抗体・タンパク質標識キット Alkaline Phosphatase Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所 日本語
    抗体・タンパク質標識キット Alkaline Phosphatase Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所
  • 取扱説明書 抗体・タンパク質標識キット Alkaline Phosphatase Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所 English
    抗体・タンパク質標識キット Alkaline Phosphatase Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所

Alkaline Phosphatase Labeling Kit – NH2の使い方

技術情報

特長

1) 約3時間以内にALP標識体が調製できる。
2) 高分子化合物(MW>50,000)および低分子化合物(MW<5,000)を標識できる。
3)50~200 μgのタンパク質を標識可能である。
4) NH2-Reactive ALPと混合するだけでALP標識体を形成する。
5) Filtration Tubeを用いた分離操作により、高い回収率で標識体が得られる。
6) 付属の保存溶液でALP標識体の保存ができる。

参考文献

参考文献を表示する

1) B. Pandey, A.V. Demchenko, K.J. Stine, "Nanoporous gold as a solid support for protein immobilization and development of an electrochemical immunoassay for prostate specific antigen and carcinoembryonic antigen", Microchim Acta., 2012, 179, (1-2), 71.
2) M. Watanabe, I. Takemasa, N. Kaneko, Y. Yokoyama, E. Matsuo, S. Iwasa, M. Mori, N. Matsuura, M. Monden, and O. Nishimura, "Clinical significance of circulating galectins as colorectal cancer markers", Oncol. Rep.., 2011, 25, (5), 1217.
3) Y. Matsumae, Y. Takahashi, H. Shiku and T. Matsue, "Quantitative Real‐Time Monitoring of Antibody‐Induced Internalization of Epidermal Growth Factor Receptor on Single Living Mammalian Cells Using Scanning Electrochemical Microscopy", ChemElectroChem., 2018, 5, (20), 3096.

よくある質問

Q

Labeling Kitで1次抗体を直接標識する利点を教えてください。

A

はじめて抗体標識をされる方を対象としたプロトコルを作成しております。
カスタマーサポートの視点から直接標識法の利点や実施例等を記載しておりますので、ご参照下さい。
下記リンクよりダウンロード可能です。

「はじめての抗体標識プロトコル ~カスタマーサポートの視点から~」

Q

サンプル溶液中の共存物は反応に影響しますか?

A

共存物の種類により影響することがあります。
溶液中にどのような物質が含まれるかを確認の上、状況に応じてラベル化に用いるサンプルの精製を行い、標識反応にご使用ください。

<高分子:分子量1万以上>
影響する可能性があります。
BSAやゼラチンなどアミノ基をもつ化合物が含まれると、抗体への標識効率が低下します。また、高分子のためFiltration Tubeでも除くことができません。また、アミノ基を持たない化合物でも、高分子の不純物が多いとフィルターの目詰まりの原因になり、標識・精製操作に支障がでる可能性もあります。反応に使用する前に別途精製を行ってください。
*本製品に限らず他のLabeling kit に関しても同様の注意が必要です。

Q

NH2-Reactive ALPはbufferに溶解後、保存できますか?

A

溶解後は保存せず、すぐに使用して下さい。
NH2-Reactive ALPは水溶液にすると反応部位が徐々に分解するため、反応効率が低下します。

Q

サンプルが水溶液になっていますが、ラベル化に問題はないでしょうか?

A

問題はありません。

但し、添付のFilitration tubeの容量に制限がありますので、
サンプル溶液の容量は100 μl以下である必要があります。
また、サンプルの濃度が0.5 mg/mL以下(50 μg/100 μl以下)である場合は、
Filitration tubeを用いてサンプル量が50~200 μgとなるようにして下さい。
溶液をFilitration tubeにいれて遠心して溶液を除く操作を行って下さい。(必要であれば繰り返す)
フィルター上に残っているサンプルの量が50~200 μgとなればよいので、改めて溶解させる必要はありません。

*注:低分子の阻害物質は最初の段階で除かれますが、高分子(分子量1万以上)の阻害物質(例;BSA、ゼラチン)は除くことが出来ません。使用前に別途除去して下さい。

Q

低分子のタンパク質(分子量50,000以下)に標識する場合の方法を教えて下さい。

A

キット付属のフィルトレーションチューブは分画分子量30Kの限外濾過フィルターのため、余裕をもって50,000以上のタンパク質のご使用を推奨しております。

分子量50,000以下のタンパク質を標識される場合は、下記のような分画分子量の小さい限外濾過フィルターに変更して頂くことで、低分子のタンパク質でもラベル化可能でございます。

——————————————
PALL社 ナノセップ  3K 製品No.OD003C33
PALL社 ナノセップ 10K 製品No.OD010C33 
——————————————

キット同梱のフィルターを用いた場合に比べ遠心に時間を要することがございますので遠心時間はご検討下さい。

Q

どのようなものが標識できますか?

A

分子量が「5,000以下」もしくは「50,000以上」で反応性のアミノ基(NH2)を有している
化合物(抗体、蛋白質など)であれば標識できます。

分子量が「5,000以下」、「50,000以上」で操作方法が若干異なりますので、製品に添付の説明書をご覧いただき標識反応を行ってください。

Q

IgG 1分子に対して、どれくらいのAlkaline Phosphataseが標識されますか?

A

IgG 1分子に対して平均1~2分子のAlkaline Phosphataseが標識されます。

Q

標識率は出せますか?

A

標識後のサンプル溶液には、未反応のReactive体が含まれるため標識率を算出することはできません。

抗体・タンパク質標識キット Alkaline Phosphatase Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所 抗体・タンパク質標識キット Alkaline Phosphatase Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所

取扱条件

取扱条件
保存条件: 冷蔵 , 取扱条件: 吸湿注意
SDSダウンロード
抗体・タンパク質標識キット Alkaline Phosphatase Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所

関連製品

この製品に関連する研究では、下記の関連製品も使われています。

  • 抗体・タンパク質標識キット Alkaline Phosphatase Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所

    抗体・タンパク質標識キット

    Alkaline Phosphatase Labeling Kit – SH

  • 抗体・タンパク質標識キット Alkaline Phosphatase Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所

    抗体・タンパク質標識キット

    Biotin Labeling Kit – NH2

抗体・タンパク質標識キット Alkaline Phosphatase Labeling Kit – SH 同仁化学研究所

上海金畔生物科技有限公司代理日本同仁化学试剂盒全线产品,欢迎访问日本同仁化学dojindo官网了解更多信息。

抗体・タンパク質標識キット Alkaline Phosphatase Labeling Kit - SH 同仁化学研究所Alkaline Phosphatase Labeling Kit – SH

08 ラベル化剤

Alkaline Phosphatase Labeling Kit – SH

抗体・タンパク質標識キット Alkaline Phosphatase Labeling Kit - SH 同仁化学研究所

  • ラベル化剤
  • 細胞機能解析
  • 標識キット

抗体・タンパク質標識キット

  • アミノ基でうまくいかなかった
  • ELISAを組みたい
  • 製品コード
    LK13  Alkaline Phosphatase Labeling Kit – SH
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
3 samples ¥26,000 346-90861
サンプル量 50-200 µg
所要時間 3時間
標識部位 -SH
検出方法 顕微鏡・ウエスタンブロット・プレートリーダー
基質 NBT,PNPP等

・高分子化合物(MW>50,000)および低分子化合物(MW<5,000)を標識できる。

・SH-Reactive ALPと混合するだけでALP標識体を形成する。

・付属の還元剤を用いることで遊離SH基を持たないタンパク質への標識も可能である*。

・Filtration tubeを用いた分離操作により高い回収率で標識体が得られる。

・付属の保存溶液でALP標識体の保存ができる。

抗体・タンパク質標識キット Alkaline Phosphatase Labeling Kit - SH 同仁化学研究所

キット内容
3 samples ・SH-Reactive Alkaline Phosphatase
・Reducing Agent
・Solution A
・Solution B
・Reaction Buffer
・Storage Buffer
・Filtration Tube
3 tubes
3 tubes
4 ml x1
1 ml x1
200 μl x1
4 ml x1
3 tubes

  • 抗体・タンパク質標識キット Alkaline Phosphatase Labeling Kit - SH 同仁化学研究所
試験成績書

SDSダウンロード

  • ご購入方法
  • お問い合わせ

マニュアル

  • 取扱説明書 抗体・タンパク質標識キット Alkaline Phosphatase Labeling Kit - SH 同仁化学研究所 日本語
    抗体・タンパク質標識キット Alkaline Phosphatase Labeling Kit - SH 同仁化学研究所
  • 取扱説明書 抗体・タンパク質標識キット Alkaline Phosphatase Labeling Kit - SH 同仁化学研究所 English
    抗体・タンパク質標識キット Alkaline Phosphatase Labeling Kit - SH 同仁化学研究所

技術情報

特長

1) 約3時間以内にALP標識体が調製できる。
2) 高分子化合物(MW>50,000)および低分子化合物(MW<5,000)を標識できる。
3)50~200 μgのタンパク質を標識可能である。
4) SH-Reactive ALPと混合するだけでALP標識体を形成する。
5) 付属の還元剤を用いることで遊離SH基を持たないタンパク質への標識も可能である *。
6) Filtration tubeを用いた分離操作により高い回収率で標識体が得られる。
7) 付属の保存溶液でALP標識体の保存ができる。

よくある質問

Q

Labeling Kitで1次抗体を直接標識する利点を教えてください。

A

はじめて抗体標識をされる方を対象としたプロトコルを作成しております。
カスタマーサポートの視点から直接標識法の利点や実施例等を記載しておりますので、ご参照下さい。
下記リンクよりダウンロード可能です。
「はじめての抗体標識プロトコル ~カスタマーサポートの視点から~」

Q

サンプル溶液中の共存物は反応に影響しますか?

A

共存物の種類により影響することがあります。
溶液中にどのような物質が含まれるかを確認の上、状況に応じてラベル化に用いるサンプルの精製を行い、標識反応にご使用ください。

<高分子:分子量1万以上>
影響する可能性があります。
高分子でSH基をもつ化合物は、Filtration Tubeでも除くことができません。 そのため標識され、蛍光性不純物として影響します。反応に使用する前に別途精製を行ってください。 一方、SH基を持たない化合物でも、高分子の不純物が多いとフィルターの目詰まりの原因になり、標識・精製操作に支障がでる可能性もあります。
*本製品に限らず他のLabeling kit に関しても同様の注意が必要です。

Q

SH-Reactive ALPはbufferに溶解後、保存できますか?

A

溶解後は保存せず、すぐに使用して下さい。
SH-Reactive ALPは水溶液にすると反応部位が徐々に分解するため、反応効率が低下します。

Q

サンプルが水溶液になっていますが、ラベル化に問題はないでしょうか?

A

問題はありません。

但し、添付のFilitration tubeの容量に制限がありますので、サンプル溶液の容量は100 μl以下である必要があります。
また、サンプルの濃度が0.5 mg/ml以下(50 μg/100 μl以下)である場合は、Filitration tubeを用いてサンプル量が50~200 μgとなるようにして下さい。
溶液をFilitration tubeにいれて遠心して溶液を除く操作を行って下さい。(必要であれば繰り返す)
フィルター上に残っているサンプルの量が50~200 μgとなればよいので、改めて溶解させる必要はありません。

*注:低分子の阻害物質は最初の段階で除かれますが、高分子(分子量1万以上)の阻害物質(例;BSA、ゼラチン)は除くことが出来ません。使用前に別途除去して下さい。

Q

低分子のタンパク質(分子量50,000 以下)に標識する場合の方法を教えて下さい。

A

キット付属のフィルトレーションチューブは分画分子量30Kの限外濾過フィルターのため、余裕をもって50,000以上のタンパク質のご使用を推奨しております。

分子量50,000以下のタンパク質を標識される場合は、下記のような分画分子量の小さい限外濾過フィルターに変更して頂くことで、低分子のタンパク質でもラベル化可能でございます。

——————————————
PALL社 ナノセップ  3K 製品No.OD003C33
PALL社 ナノセップ 10K 製品No.OD010C33 
——————————————

キット同梱のフィルターを用いた場合に比べ遠心に時間を要することがございますので遠心時間はご検討下さい。

Q

どのようなものが標識できますか?

A

分子量が「50,000 以上」で[S-S]もしくは[SH]を有しているもの、分子量が「5,000 以下」で[SH]を有している化合物(抗体、蛋白質など)であれば標識できます。

分子量が「5,000以下」、「50,000 以上」で操作方法が若干異なりますので、製品に添付の説明書をご覧いただき標識反応を行ってください。

Q

IgG 1分子に対して、どれくらいのAlkaline Phosphataseが標識されますか?

A

還元IgG 1分子に対して平均1~2分子のAlkaline Phosphataseが標識されます。

Q

標識率は出せますか?

A

標識後のサンプル溶液には、未反応のReactive体が含まれるため標識率を算出することはできません。

抗体・タンパク質標識キット Alkaline Phosphatase Labeling Kit - SH 同仁化学研究所 抗体・タンパク質標識キット Alkaline Phosphatase Labeling Kit - SH 同仁化学研究所

取扱条件

取扱条件
保存条件: 冷蔵 , 取扱条件: 吸湿注意
SDSダウンロード
抗体・タンパク質標識キット Alkaline Phosphatase Labeling Kit - SH 同仁化学研究所

関連製品

この製品に関連する研究では、下記の関連製品も使われています。

  • 抗体・タンパク質標識キット Alkaline Phosphatase Labeling Kit - SH 同仁化学研究所

    抗体・タンパク質標識キット

    Alkaline Phosphatase Labeling Kit – NH2

  • 抗体・タンパク質標識キット Alkaline Phosphatase Labeling Kit - SH 同仁化学研究所

    抗体・タンパク質標識キット

    Biotin Labeling Kit – NH2

抗体・タンパク質標識キット Allophycocyanin Labeling Kit – NH2 同仁化学研究所

上海金畔生物科技有限公司代理日本同仁化学试剂盒全线产品,欢迎访问日本同仁化学dojindo官网了解更多信息。

抗体・タンパク質標識キット Allophycocyanin Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所Allophycocyanin Labeling Kit – NH2

08 ラベル化剤

Allophycocyanin Labeling Kit – NH2

抗体・タンパク質標識キット Allophycocyanin Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所

  • ラベル化剤
  • 細胞機能解析
  • FCM
  • 標識キット

抗体・タンパク質標識キット

  • 647 nmで励起したい
  • 簡単な操作で実験したい
  • 蛍光色素より高感度でみたい
  • 製品コード
    LK21  Allophycocyanin Labeling Kit – NH2
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
3 samples ¥53,500 349-90971
サンプル量 50-200 µg
所要時間 2.5時間
標識部位 -NH2
検出方法 顕微鏡・FCM
蛍光特性 [Ex:650, Em:660]

・分子量50,000以上のタンパク質が標識できる。

・Filtration Tubeを用いた分離操作により高い回収率で標識体が得られる。

・付属の保存溶液でAPC標識体の保存が可能である。

抗体・タンパク質標識キット Allophycocyanin Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所

キット内容
3 samples ・NH2-Reactive Allophycocyanin
・WS Buffer
・Reaction Buffer
・Filtration Tube
3 tubes
4 ml x1
200μl x1
3 tubes

  • 抗体・タンパク質標識キット Allophycocyanin Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所
試験成績書

SDSダウンロード

  • ご購入方法
  • お問い合わせ

マニュアル

  • 取扱説明書 抗体・タンパク質標識キット Allophycocyanin Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所 日本語
    抗体・タンパク質標識キット Allophycocyanin Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所
  • 取扱説明書 抗体・タンパク質標識キット Allophycocyanin Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所 English
    抗体・タンパク質標識キット Allophycocyanin Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所

Allophycocyanin Labeling Kit – NH2の使い方

技術情報

特長

1) 約2.5時間でAPC標識体が調製できる。
2) 分子量50,000以上のタンパク質が標識できる。
3) 50~200 μgのタンパク質を標識可能である。
4) Filtration Tubeを用いた分離操作により高い回収率で標識体が得られる。
5) 付属の保存溶液でAPC標識体の保存が可能である。

参考文献

参考文献を表示する

1) H. Shinohara, T. Yasuda, Y. Aiba, H. Sanjo, M. Hamadate, H. Watarai, H. Sakurai and T. Kurosaki, "PKCβ Regulates BCR-mediated IKK Activatioin by Facilitating the Interaction between TAK1 and CARMA1", J. Exp. Med., 2005202(10), 1423.
2) E. Grace Suto, Y. Mabuchi, N. Suzuki, K. Suzuki, Y. Ogata, M. Taguchi, T. Muneta, I. Sekiya and C. Akazawa, "Prospectively isolated mesenchymal stem/stromal cells are enriched in the CD73+ population and exhibit efficacy after transplantation", Sci. Rep.., 2017,(7), 4838.
3) H. Fujii, Y. Ikeuchi, Y. Kurata, N. Ikeda, U. Bahrudin, P. Li, Y. Nakayama, R. Endo, A. Hasegawa, K. Morikawa, J. Miake, A. Yoshida, K. Hidaka, T. Morisaki, H. Ninomiya, Y. Shirayoshi, K. Yamamoto, I. Hisatome, "Electrophysiological properties of prion-positive cardiac progenitors derived from murine embryonic stem cells", Circ. J.., 2012,76, (12), 2875.

よくある質問

Q

Labeling Kitで1次抗体を直接標識する利点を教えてください。

A

はじめて抗体標識をされる方を対象としたプロトコルを作成しております。
カスタマーサポートの視点から直接標識法の利点や実施例等を記載しておりますので、ご参照下さい。
下記リンクよりダウンロード可能です。

「はじめての抗体標識プロトコル ~カスタマーサポートの視点から~」

Q

サンプルは溶液になっていても問題ないでしょうか?

A

溶液になっていること自体は問題ありません。
ただし、下記の点をご確認いただいた上でご使用ください。

-濃度-
サンプル濃度が0.5 mg/mL以下(50 μg/100 μl以下)である場合にはFiltration tubeを用いてサンプル量が50~200μgとなるように遠心して濃縮を行ってください。
フィルター上に残ったサンプルは再溶解させる必要はありません。
そのまま反応にご使用ください。

-溶液量-
Filtration tubeの容量に制限がありますので、溶液の量は100 μl以下でご使用ください。

-共存物-
・不溶性の低分子が含まれる場合は、予め遠心して上清のみを使用してください。
・分子量10,000 以上の物質が含まれる場合には、別途精製を行ってからご使用ください。
 (市販の抗体の中には安定化剤としてBSAやアルブミンを含む場合があります)

Q

サンプル溶液中の共存物は反応に影響しますか?

A

共存物の種類により影響することがあります。
溶液中にどのような物質が含まれるかを確認の上、状況に応じてラベル化に用いるサンプルの精製を行い、標識反応にご使用ください。

<高分子:分子量1万以上>
影響する可能性があります。
BSAやゼラチンなどアミノ基をもつ化合物が含まれると、抗体への標識効率が低下します。また、高分子のためFiltration Tubeでも除くことができません。また、アミノ基を持たない化合物でも、高分子の不純物が多いとフィルターの目詰まりの原因になり、標識・精製操作に支障がでる可能性もあります。反応に使用する前に別途精製を行ってください。
*本製品に限らず他のLabeling kit に関しても同様の注意が必要です。

Q

低分子の蛍光色素と比較して、蛍光タンパク色素を標識するメリットは何でしょうか?

A

以下のような点が挙げられます。

・1分子あたりの蛍光強度が大きいので、IgGに1分子の蛍光タンパクが標識された場合、
 Fluoresceinなどの数倍の蛍光強度が得られます。

・励起スペクトルの吸収域が広いので、極大を外れた波長でも励起できます。
 (幅広い励起フィルターが活用できます)

Q

低分子のタンパク質(分子量50,000 以下)に標識する場合の方法を教えて下さい。

A

キット付属のフィルトレーションチューブは分画分子量30Kの限外濾過フィルターのため、余裕をもって50,000以上のタンパク質のご使用を推奨しております。

分子量50,000以下のタンパク質を標識される場合は、下記のような分画分子量の小さい限外濾過フィルターに変更して頂くことで、低分子のタンパク質でもラベル化可能でございます。
——————————————
PALL社 ナノセップ  3K 製品No.OD003C33
PALL社 ナノセップ 10K 製品No.OD010C33
——————————————
キット同梱のフィルターを用いた場合に比べ遠心に時間を要することがございますので遠心時間はご検討下さい。

Q

蛍光タンパクが3種類ありますが、それぞれの波長特性を教えてください。

A

Allophecocyanin(略:APC) 励起波長:650 nm 蛍光波長:660 nm
B-Phycoerythrin(略:B-PE) 励起波長:564 nm 蛍光波長:575 nm
R-Phycoerythrin(略:R-PE) 励起波長:564 nm 蛍光波長:575 nm

抗体・タンパク質標識キット Allophycocyanin Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所

抗体・タンパク質標識キット Allophycocyanin Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所抗体・タンパク質標識キット Allophycocyanin Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所

Q

標識率は出せますか?

A

標識後のサンプル溶液には、未反応のReactive体が含まれるため標識率を算出することはできません。
 

抗体・タンパク質標識キット Allophycocyanin Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所 抗体・タンパク質標識キット Allophycocyanin Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所

取扱条件

取扱条件
保存条件: 冷蔵 , 取扱条件: 吸湿注意
SDSダウンロード
抗体・タンパク質標識キット Allophycocyanin Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所

関連製品

この製品に関連する研究では、下記の関連製品も使われています。

  • 抗体・タンパク質標識キット Allophycocyanin Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所

    抗体・タンパク質標識キット

    Allophycocyanin Labeling Kit – SH

  • 抗体・タンパク質標識キット Allophycocyanin Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所

    抗体・タンパク質標識キット

    Biotin Labeling Kit – NH2

抗体・タンパク質標識キット R-Phycoerythrin Labeling Kit – NH2 同仁化学研究所

上海金畔生物科技有限公司代理日本同仁化学试剂盒全线产品,欢迎访问日本同仁化学dojindo官网了解更多信息。

抗体・タンパク質標識キット R-Phycoerythrin Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所R-Phycoerythrin Labeling Kit – NH2

08 ラベル化剤

R-Phycoerythrin Labeling Kit – NH2

抗体・タンパク質標識キット R-Phycoerythrin Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所

  • ラベル化剤
  • 細胞機能解析
  • FCM
  • 標識キット

抗体・タンパク質標識キット

  • 簡単な操作で実験したい
  • 488 nmで励起したい
  • 蛍光色素より高感度でみたい
  • 製品コード
    LK23  R-Phycoerythrin Labeling Kit – NH2
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
3 samples ¥53,500 347-91011
サンプル量 50-200 µg
所要時間 2.5時間
標識部位 -NH2
検出方法 顕微鏡・FCM
蛍光特性 [Ex:564, Em:575]

・分子量50,000以上のタンパク質が標識できる。

・Filtration Tubeを用いた分離操作により高い回収率で標識体が得られる。

・付属の保存溶液でR-PE標識体の保存が可能である。

抗体・タンパク質標識キット R-Phycoerythrin Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所

キット内容
3 samples ・NH2-Reactive R-Phycoerythrin
・WS Buffer
・Reaction Buffer
・Filtration Tube
3 tubes
4 ml x1
200 μl x1
3 tubes

  • 抗体・タンパク質標識キット R-Phycoerythrin Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所
試験成績書

SDSダウンロード

  • ご購入方法
  • お問い合わせ

マニュアル

  • 取扱説明書 抗体・タンパク質標識キット R-Phycoerythrin Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所 日本語
    抗体・タンパク質標識キット R-Phycoerythrin Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所
  • 取扱説明書 抗体・タンパク質標識キット R-Phycoerythrin Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所 English
    抗体・タンパク質標識キット R-Phycoerythrin Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所

技術情報

特徴

1) 約2.5時間でR-PE標識体が調製できる。
2) 分子量50,000以上のタンパク質が標識できる。
3) 50~200 μgのタンパク質を標識可能である。
4) Filtration Tubeを用いた分離操作により高い回収率で標識体が得られる。
5) 付属の保存溶液でR-PE標識体の保存が可能である。

参考文献

参考文献を表示する

1) K.R. McCarthy, A. Watanabe, M. Kuraoka, K.T. Do, C.E. McGee, G.D. Sempowski, T.B. Kepler, A.G. Schmidt, G. Kelsoe and S.C. Harrison, "Memory B Cells that Cross-React with Group 1 and Group 2 Influenza A Viruses Are Abundant in Adult Human Repertoires", Immunity., 2018, 48, (1), 174.
2) K.Y Su, A. Watanabe, C.H. Yeh, G. Kelsoe, M. Kuraoka, "Efficient Culture of Human Naive and Memory B Cells for Use as APCs", J. Immunol.., 2016, 197, (10), 4163.
3) T. Tsujikawa, T. Yaguchi, G. Ohmura, S. Ohta, A. Kobayashi, N. Kawamura, T. Fujita, H. Nakano, T. Shimada, T. Takahashi, R. Nakao, A. Yanagisawa, Y. Hisa, Y. Kawakami, "Autocrine and paracrine loops between cancer cells and macrophages promote lymph node metastasis via CCR4/CCL22 in head and neck squamous cell carcinoma", Int. J. Cancer., 2013, 132, (12), 2755.
4) Y. Inaguma, Y. Akahori, Y. Murayama, K. Shiraishi, S. Tsuzuki-Iba, A. Endoh, J. Tsujikawa, A. Demachi-Okamura, K. Hiramatsu, H. Saji, Y. Yamamoto, N. Yamamoto, Y. Nishimura, T. Takahashi, K. Kuzushima, N. Emi, Y. Akatsuka, "Construction and molecular characterization of a T-cell receptor-like antibody and CAR-T cells specific for minor histocompatibility antigen HA-1H", Gene Ther.., 2014, 21, (6), 575.
5) A. Watanabe, K. R. McCarthy, M. Kuraoka, A. G. Schmidt, Y. Adachi, T. Onodera, K. Tonouchi, T. M.Caradonna, G. Bajic, S. Song, C. E. McGee, G. D. Sempowski, F. Feng, P. Urick, T. B. Kepler, Y. Takahashi, S. C. Harrison, and G. Kelsoe, 'Antibodies to a Conserved Influenza Head Interface Epitope Protect by an IgG Subtype-Dependent Mechanism.', Cell.., 2019, 177, (5), 1124.

よくある質問

Q

Labeling Kitで1次抗体を直接標識する利点を教えてください。

A

はじめて抗体標識をされる方を対象としたプロトコルを作成しております。
カスタマーサポートの視点から直接標識法の利点や実施例等を記載しておりますので、ご参照下さい。

下記リンクよりダウンロード可能です。
「はじめての抗体標識プロトコル ~カスタマーサポートの視点から~」

Q

サンプル溶液中の共存物は反応に影響しますか?

A

共存物の種類により影響することがあります。
溶液中にどのような物質が含まれるかを確認の上、状況に応じてラベル化に用いるサンプルの精製を行い、標識反応にご使用ください。

<高分子:分子量1万以上>
影響する可能性があります。
BSAやゼラチンなどアミノ基をもつ化合物が含まれると、抗体への標識効率が低下します。また、高分子のためFiltration Tubeでも除くことができません。また、アミノ基を持たない化合物でも、高分子の不純物が多いとフィルターの目詰まりの原因になり、標識・精製操作に支障がでる可能性もあります。反応に使用する前に別途精製を行ってください。
*本製品に限らず他のLabeling kit に関しても同様の注意が必要です。

Q

サンプルは溶液になっていても問題ないでしょうか?

A

溶液になっていること自体は問題ありません。
ただし、下記の点をご確認いただいた上でご使用ください。
-濃度-
 サンプル濃度が0.5 mg/ml以下(50 μg/100 μl以下)である場合には
 Filtration tubeを用いてサンプル量が50~200 μgとなるように
 遠心して濃縮を行ってください。
 フィルター上に残ったサンプルは再溶解させる必要はありません。
 そのまま反応にご使用ください。

-溶液量-
 Filtration tubeの容量に制限がありますので、溶液の量は100μl以下でご使用ください。

-共存物-
 ・不溶性の低分子が含まれる場合は、予め遠心して上清のみを使用してください。
 ・分子量10,000 以上の物質が含まれる場合には、別途精製を行ってからご使用ください。
  (市販の抗体の中には安定化剤としてBSAやアルブミンを含む場合があります)

Q

低分子の蛍光色素と比較して、蛍光タンパク色素を標識するメリットは何でしょうか?

A

以下のような点が挙げられます。

・1分子あたりの蛍光強度が大きいので、IgGに1分子の蛍光タンパクが標識された場合、
 Fluoresceinなどの数倍の蛍光強度が得られます。

・励起スペクトルの吸収域が広いので、極大を外れた波長でも励起できます。
 (幅広い励起フィルターが活用できます)

Q

低分子のタンパク質(分子量 50,000 以下)に標識する場合の方法を教えて下さい。

A

キット付属のフィルトレーションチューブは分画分子量30Kの限外濾過フィルターのため、余裕をもって50,000 以上のタンパク質のご使用を推奨しています。

分子量50,000 以下のタンパク質を標識される場合は、下記のような分画分子量の小さい限外濾過フィルターに変更して頂くことで、低分子のタンパク質でもラベル化可能でございます。

——————————————
PALL社 ナノセップ  3K 製品No.OD003C33
PALL社 ナノセップ 10K 製品No.OD010C33 
——————————————

キット同梱のフィルターを用いた場合に比べ遠心に時間を要することがございますので遠心時間はご検討下さい。

Q

蛍光タンパクが3種類ありますが、それぞれの波長特性を教えてください。

A

Allophecocyanin(略:APC) 励起波長:650 nm 蛍光波長:660 nm

B-Phycoerythrin(略:B-PE) 励起波長:564 nm 蛍光波長:575 nm

R-Phycoerythrin(略:R-PE) 励起波長:564 nm 蛍光波長:575 nm

抗体・タンパク質標識キット R-Phycoerythrin Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所抗体・タンパク質標識キット R-Phycoerythrin Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所抗体・タンパク質標識キット R-Phycoerythrin Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所

Q

標識率は出せますか?

A

標識後のサンプル溶液には、未反応のReactive体が含まれるため標識率を算出することはできません。

抗体・タンパク質標識キット R-Phycoerythrin Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所 抗体・タンパク質標識キット R-Phycoerythrin Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所

取扱条件

取扱条件
保存条件: 冷蔵 , 取扱条件: 吸湿注意
SDSダウンロード
抗体・タンパク質標識キット R-Phycoerythrin Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所

関連製品

この製品に関連する研究では、下記の関連製品も使われています。

  • 抗体・タンパク質標識キット R-Phycoerythrin Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所

    抗体・タンパク質標識キット

    R-Phycoerythrin Labeling Kit – SH

  • 抗体・タンパク質標識キット R-Phycoerythrin Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所

    抗体標識キット

    Ab-10 Rapid R-Phycoerythrin Labeling Kit

抗体・タンパク質標識キット Allophycocyanin Labeling Kit – SH 同仁化学研究所

上海金畔生物科技有限公司代理日本同仁化学试剂盒全线产品,欢迎访问日本同仁化学dojindo官网了解更多信息。

抗体・タンパク質標識キット Allophycocyanin Labeling Kit - SH 同仁化学研究所Allophycocyanin Labeling Kit – SH

08 ラベル化剤

Allophycocyanin Labeling Kit – SH

抗体・タンパク質標識キット Allophycocyanin Labeling Kit - SH 同仁化学研究所

  • ラベル化剤
  • FCM
  • 標識キット

抗体・タンパク質標識キット

  • アミノ基でうまくいかなかった
  • 蛍光色素より高感度でみたい
  • 製品コード
    LK24  Allophycocyanin Labeling Kit – SH
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
3 samples ¥50,400 346-90981
サンプル量 50-200 µg
所要時間 2.5時間
標識部位 -SH
検出方法 顕微鏡・FCM
蛍光特性 [Ex:650, Em:660]

・分子量50,000以上のタンパク質が標識できる。

・Filtration Tubeを用いた分離操作により高い回収率で標識体が得られる。

・付属の還元剤を用いることで遊離SH基を持たないタンパク質への標識も可能である *。

・付属の保存溶液でAPC標識体の保存が可能である。

抗体・タンパク質標識キット Allophycocyanin Labeling Kit - SH 同仁化学研究所

キット内容
3 samples ・SH-Reactive Allophycocyanin  
・Reducing Agent          
・WS Buffer             
・RA Solution            
・Reaction Buffer         
・Filtration Tube           
3 tubes
3 tubes
4 ml×1
1 ml×1
200μl×1
3 tubes

  • 抗体・タンパク質標識キット Allophycocyanin Labeling Kit - SH 同仁化学研究所
試験成績書

SDSダウンロード

  • ご購入方法
  • お問い合わせ

マニュアル

  • 取扱説明書 抗体・タンパク質標識キット Allophycocyanin Labeling Kit - SH 同仁化学研究所 日本語
    抗体・タンパク質標識キット Allophycocyanin Labeling Kit - SH 同仁化学研究所
  • 取扱説明書 抗体・タンパク質標識キット Allophycocyanin Labeling Kit - SH 同仁化学研究所 English
    抗体・タンパク質標識キット Allophycocyanin Labeling Kit - SH 同仁化学研究所

Allophycocyanin Labeling Kit – SHの使い方

技術情報

特徴

1) 約2.5時間でAPC標識体が調製できる。
2) 分子量50,000以上のタンパク質が標識できる。
3) 50~200 μgのタンパク質を標識可能である。
4) Filtration Tubeを用いた分離操作により高い回収率で標識体が得られる。
5) 付属の還元剤を用いることで遊離SH基を持たないタンパク質への標識も可能である *
6) 付属の保存溶液でAPC標識体の保存が可能である。

よくある質問

Q

Labeling Kitで1次抗体を直接標識する利点を教えてください。

A

はじめて抗体標識をされる方を対象としたプロトコルを作成しております。 
カスタマーサポートの視点から直接標識法の利点や実施例等を記載しておりますので、ご参照下さい。 

下記リンクよりダウンロード可能です。

「はじめての抗体標識プロトコル ~カスタマーサポートの視点から~」
 

Q

サンプル溶液中の共存物は反応に影響しますか?

A

共存物の種類により影響することがあります。
溶液中にどのような物質が含まれるかを確認の上、状況に応じてラベル化に用いるサンプルの精製を行い、標識反応にご使用ください。

<高分子:分子量1万以上>
影響する可能性があります。
高分子でSH基をもつ化合物は、Filtration Tubeでも除くことができません。 そのため標識され、蛍光性不純物として影響します。反応に使用する前に別途精製を行ってください。 一方、SH基を持たない化合物でも、高分子の不純物が多いとフィルターの目詰まりの原因になり、標識・精製操作に支障がでる可能性もあります。
*本製品に限らず他のLabeling kit に関しても同様の注意が必要です。

Q

サンプルは溶液になっていても問題ないでしょうか?

A

溶液になっていること自体は問題ありません。
ただし、下記の点をご確認いただいた上でご使用ください。
-濃度-
 サンプル濃度が0.5 mg/ml以下(50 μg/100 μl以下)である場合には
 Filtration tubeを用いてサンプル量が50~200 μgとなるように
 遠心して濃縮を行ってください。
 フィルター上に残ったサンプルは再溶解させる必要はありません。
 そのまま反応にご使用ください。

-溶液量-
 Filtration tubeの容量に制限がありますので、溶液の量は100 μl以下でご使用ください。

-共存物-
 ・不溶性の低分子が含まれる場合は、予め遠心して上清のみを使用してください。
 ・分子量10,000以上の物質が含まれる場合には、別途精製を行ってからご使用ください。
  (市販の抗体の中には安定化剤としてBSAやアルブミンを含む場合があります)

Q

低分子の蛍光色素と比較して、蛍光タンパク色素を標識するメリットは何でしょうか?

A

以下のような点が挙げられます。

・1分子あたりの蛍光強度が大きいので、IgGに1分子の蛍光タンパクが標識された場合、
 Fluoresceinなどの数倍の蛍光強度が得られます。

・励起スペクトルの吸収域が広いので、極大を外れた波長でも励起できます。
 (幅広い励起フィルターが活用できます)

Q

低分子のタンパク質(分子量50,000以下)に標識する場合の方法を教えて下さい。

A

キット付属のフィルトレーションチューブは分画分子量30Kの限外濾過フィルターのため、

余裕をもって50,000以上のタンパク質のご使用を推奨しております。

分子量50,000以下のタンパク質を標識される場合は、

下記のような分画分子量の小さい限外濾過フィルターに変更して

頂くことで、低分子のタンパク質でもラベル化可能でございます。

——————————————
PALL社 ナノセップ  3K 製品No.OD003C33
PALL社 ナノセップ 10K 製品No.OD010C33 
——————————————

キット同梱のフィルターを用いた場合に比べ遠心に時間を要することが

ございますので遠心時間はご検討下さい。

Q

蛍光タンパクが3種類ありますが、それぞれの波長特性を教えてください。

A

Allophecocyanin(略:APC) 励起波長:650nm 蛍光波長:660nm

B-Phycoerythrin(略:B-PE) 励起波長:564nm 蛍光波長:575nm

R-Phycoerythrin(略:R-PE) 励起波長:564nm 蛍光波長:575nm

抗体・タンパク質標識キット Allophycocyanin Labeling Kit - SH 同仁化学研究所 抗体・タンパク質標識キット Allophycocyanin Labeling Kit - SH 同仁化学研究所 抗体・タンパク質標識キット Allophycocyanin Labeling Kit - SH 同仁化学研究所
Q

標識率は出せますか?

A

標識後のサンプル溶液には、未反応のReactive体が含まれるため標識率を算出することはできません。

抗体・タンパク質標識キット Allophycocyanin Labeling Kit - SH 同仁化学研究所 抗体・タンパク質標識キット Allophycocyanin Labeling Kit - SH 同仁化学研究所

取扱条件

取扱条件
保存条件: 冷蔵 , 取扱条件: 吸湿注意
SDSダウンロード
抗体・タンパク質標識キット Allophycocyanin Labeling Kit - SH 同仁化学研究所

関連製品

この製品に関連する研究では、下記の関連製品も使われています。

  • 抗体・タンパク質標識キット Allophycocyanin Labeling Kit - SH 同仁化学研究所

    抗体・タンパク質標識キット

    Allophycocyanin Labeling Kit – NH2

  • 抗体・タンパク質標識キット Allophycocyanin Labeling Kit - SH 同仁化学研究所

    抗体・タンパク質標識キット

    Biotin Labeling Kit – SH

抗体・タンパク質標識キット R-Phycoerythrin Labeling Kit – SH 同仁化学研究所

上海金畔生物科技有限公司代理日本同仁化学试剂盒全线产品,欢迎访问日本同仁化学dojindo官网了解更多信息。

抗体・タンパク質標識キット R-Phycoerythrin Labeling Kit - SH 同仁化学研究所R-Phycoerythrin Labeling Kit – SH

08 ラベル化剤

R-Phycoerythrin Labeling Kit – SH

抗体・タンパク質標識キット R-Phycoerythrin Labeling Kit - SH 同仁化学研究所

  • ラベル化剤
  • 細胞機能解析
  • FCM
  • 標識キット

抗体・タンパク質標識キット

  • アミノ基でうまくいかなかった
  • 蛍光色素より高感度でみたい
  • 製品コード
    LK26  R-Phycoerythrin Labeling Kit – SH
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
3 samples ¥50,400 344-91021
サンプル量 50-200 µg
所要時間 3時間
標識部位 -SH
検出方法 顕微鏡・FCM
蛍光特性 [Ex:564, Em:575]

・分子量50,000以上のタンパク質が標識できる。

・Filtration Tubeを用いた分離操作により高い回収率で標識体が得られる。

・付属の還元剤を用いることで遊離SH基を持たないタンパク質への標識も可能である *。

・付属の保存溶液でR-PE標識体の保存が可能である。

抗体・タンパク質標識キット R-Phycoerythrin Labeling Kit - SH 同仁化学研究所

キット内容
3 samples ・SH-Reactive R-Phycoerythrin  
・Reducing Agent           
・WS Buffer               
・RA Solution              
・Reaction Buffer          
・Filtration Tube            
3 tubes
3 tubes
4 ml x 1
1 ml x 1
200μl x 1
3 tubes

  • 抗体・タンパク質標識キット R-Phycoerythrin Labeling Kit - SH 同仁化学研究所
試験成績書

SDSダウンロード

  • ご購入方法
  • お問い合わせ

マニュアル

  • 取扱説明書 抗体・タンパク質標識キット R-Phycoerythrin Labeling Kit - SH 同仁化学研究所 日本語
    抗体・タンパク質標識キット R-Phycoerythrin Labeling Kit - SH 同仁化学研究所
  • 取扱説明書 抗体・タンパク質標識キット R-Phycoerythrin Labeling Kit - SH 同仁化学研究所 English
    抗体・タンパク質標識キット R-Phycoerythrin Labeling Kit - SH 同仁化学研究所

技術情報

特長

1) 約2.5時間でR-PE標識体が調製できる。
2) 分子量50,000以上のタンパク質が標識できる。
3) 50~200 μgのタンパク質を標識可能である。
4) Filtration Tubeを用いた分離操作により高い回収率で標識体が得られる。
5) 付属の還元剤を用いることで遊離SH基を持たないタンパク質への標識も可能である 。
6) 付属の保存溶液でR-PE標識体の保存が可能である。

参考文献

参考文献を表示する

1) M. Hikida, S. Casola, N. Takahashi, T. Kaji, T. Takemori, K. Rajewsky and T. Kurosaki, "PLC-γ2 is essential for formation and maintenance of memory B cells", J. Exp. Med.., 2009, 206, (3), 681.
2) M. Segawa, S. Fukada, Y. Yamamoto, H. Yahagi, M. Kanematsu, M. Sato, T. Ito, A. Uezumi, S. Hayashi, Y. Miyagoe-Suzuki, S. Takeda, K. Tsujikawa and H. Yamamoto, "Suppression of macrophage functions impairs skeletal muscle regeneration with severe fibrosis", Exp. Cell Res.., 2008, 314, (17), 3232.
3) M. Yasunaga, S. Saijou, S. Hanaoka, T. Anzai, R. Tsumura, Y. Matsumura, "Significant antitumor effect of an antibody against TMEM180, a new colorectal cancer‐specific molecule", Cancer Sci.., 2019, 110, (2), 761.

よくある質問

Q

Labeling Kitで1次抗体を直接標識する利点を教えてください。

A

はじめて抗体標識をされる方を対象としたプロトコルを作成しております。
カスタマーサポートの視点から直接標識法の利点や実施例等を記載しておりますので、ご参照下さい。

下記リンクよりダウンロード可能です。

「はじめての抗体標識プロトコル ~カスタマーサポートの視点から~」

Q

サンプル溶液中の共存物は反応に影響しますか?

A

共存物の種類により影響することがあります。
溶液中にどのような物質が含まれるかを確認の上、状況に応じてラベル化に用いるサンプルの精製を行い、標識反応にご使用ください。

<高分子:分子量1万以上>
影響する可能性があります。
高分子でSH基をもつ化合物は、Filtration Tubeでも除くことができません。 そのため標識され、蛍光性不純物として影響します。反応に使用する前に別途精製を行ってください。 一方、SH基を持たない化合物でも、高分子の不純物が多いとフィルターの目詰まりの原因になり、標識・精製操作に支障がでる可能性もあります。
*本製品に限らず他のLabeling kit に関しても同様の注意が必要です。

Q

サンプルは溶液になっていても問題ないでしょうか?

A

溶液になっていること自体は問題ありません。
ただし、下記の点をご確認いただいた上でご使用ください。
-濃度-
サンプル濃度が0.5 mg/ml以下(50 μg/100 μl以下)である場合にはFiltration tubeを用いてサンプル量が50~200 μgとなるように遠心して濃縮を行ってください。
フィルター上に残ったサンプルは再溶解させる必要はありません。そのまま反応にご使用ください。

-溶液量-
Filtration tubeの容量に制限がありますので、溶液の量は100 μl以下でご使用ください。

-共存物-
・不溶性の低分子が含まれる場合は、予め遠心して上清のみを使用してください。
・分子量10,000以上の物質が含まれる場合には、別途精製を行ってからご使用ください。
 (市販の抗体の中には安定化剤としてBSAやアルブミンを含む場合があります)

Q

低分子の蛍光色素と比較して、蛍光タンパク色素を標識するメリットは何でしょうか?

A

以下のような点が挙げられます。

・1分子あたりの蛍光強度が大きいので、IgGに1分子の蛍光タンパクが標識された場合、Fluoresceinなどの数倍の蛍光強度が得られます。

・励起スペクトルの吸収域が広いので、極大を外れた波長でも励起できます。(幅広い励起フィルターが活用できます)

Q

低分子のタンパク質(分子量50,000以下)に標識する場合の方法を教えて下さい。

A

キット付属のフィルトレーションチューブは分画分子量30Kの限外濾過フィルターのため、余裕をもって50,000以上のタンパク質のご使用を推奨しております。
分子量50,000以下のタンパク質を標識される場合は、下記のような分画分子量の小さい限外濾過フィルターに変更して頂くことで、低分子のタンパク質でもラベル化可能でございます。

——————————————
PALL社 ナノセップ  3K 製品No.OD003C33
PALL社 ナノセップ 10K 製品No.OD010C33 
——————————————

キット同梱のフィルターを用いた場合に比べ遠心に時間を要することがございますので遠心時間はご検討下さい。

Q

蛍光タンパクが3種類ありますが、それぞれの波長特性を教えてください。

A

Allophecocyanin(略:APC) 励起波長:650 nm 蛍光波長:660 nm

B-Phycoerythrin(略:B-PE) 励起波長:564 nm 蛍光波長:575 nm

R-Phycoerythrin(略:R-PE) 励起波長:564 nm 蛍光波長:575 nm

抗体・タンパク質標識キット R-Phycoerythrin Labeling Kit - SH 同仁化学研究所抗体・タンパク質標識キット R-Phycoerythrin Labeling Kit - SH 同仁化学研究所抗体・タンパク質標識キット R-Phycoerythrin Labeling Kit - SH 同仁化学研究所

Q

標識率は出せますか?

A

標識後のサンプル溶液には、未反応のReactive体が含まれるため標識率を算出することはできません。

抗体・タンパク質標識キット R-Phycoerythrin Labeling Kit - SH 同仁化学研究所 抗体・タンパク質標識キット R-Phycoerythrin Labeling Kit - SH 同仁化学研究所

取扱条件

取扱条件
保存条件: 冷蔵 , 取扱条件: 吸湿注意
SDSダウンロード
抗体・タンパク質標識キット R-Phycoerythrin Labeling Kit - SH 同仁化学研究所

関連製品

この製品に関連する研究では、下記の関連製品も使われています。

  • 抗体・タンパク質標識キット R-Phycoerythrin Labeling Kit - SH 同仁化学研究所

    抗体・タンパク質標識キット

    R-Phycoerythrin Labeling Kit – NH2

  • 抗体・タンパク質標識キット R-Phycoerythrin Labeling Kit - SH 同仁化学研究所

    抗体標識キット

    Ab-10 Rapid R-Phycoerythrin Labeling Kit

抗体・タンパク質標識キット ICG Labeling Kit – NH2 | CAS – 同仁化学研究所

上海金畔生物科技有限公司代理日本同仁化学试剂盒全线产品,欢迎访问日本同仁化学dojindo官网了解更多信息。

抗体・タンパク質標識キット ICG Labeling Kit - NH2 | CAS - 同仁化学研究所ICG Labeling Kit – NH2

08 ラベル化剤

ICG Labeling Kit – NH2

抗体・タンパク質標識キット ICG Labeling Kit - NH2 | CAS - 同仁化学研究所

  • ラベル化剤
  • 蛍光色素
  • 標識キット

抗体・タンパク質標識キット

  • 簡単な操作で実験したい
  • 抗原認識部位を妨害しない低分子で標識したい
  • in vivo イメージングで見たい
  • 製品コード
    LK31  ICG Labeling Kit – NH2
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
3 samples ¥55,900 345-91431
サンプル量 50-200 µg
所要時間 2時間
標識部位 -NH2
検出方法 顕微鏡・FCM
蛍光特性 [Ex:774, Em:805]

・分子量50,000以上のタンパク質が標識できる。

・Filtration Tubeを用いた分離操作により抗体の場合は高い回収率で標識体が得られる。

・付属の保存溶液でICG標識体の保存ができる。

抗体・タンパク質標識キット ICG Labeling Kit - NH2 | CAS - 同仁化学研究所

キット内容
3 samples ・NH2-Reactive ICG
・WS Buffer
・Reaction Buffer
・Filtration Tube
3 tubes
4 ml x1
500 μl x1
3 tubes

  • 抗体・タンパク質標識キット ICG Labeling Kit - NH2 | CAS - 同仁化学研究所
試験成績書

SDSダウンロード

  • ご購入方法
  • お問い合わせ

マニュアル

  • 取扱説明書 抗体・タンパク質標識キット ICG Labeling Kit - NH2 | CAS - 同仁化学研究所 日本語
    抗体・タンパク質標識キット ICG Labeling Kit - NH2 | CAS - 同仁化学研究所
  • 取扱説明書 抗体・タンパク質標識キット ICG Labeling Kit - NH2 | CAS - 同仁化学研究所 English
    抗体・タンパク質標識キット ICG Labeling Kit - NH2 | CAS - 同仁化学研究所

技術情報

特長

1) 約2時間で標識体が調製できる。
2) 分子量50,000以上のタンパク質に標識できる。
3) 50~200 μgのタンパク質に標識可能である。
4) Filtration Tubeを用いた分離操作により高い回収率で標識体が得られる。
5) 付属の保存溶液で標識体の保存ができる。

参考文献

参考文献を表示する

1) M. Ogawa, C. A. S. Regino, J. Seidel, M. V. Green, W. Xi, M. Williams, N. Kosaka, P. L. Choyke and H. Kobayashi, "Dual-Modality Molecular Imaging Using Antibodies Labeled with Activatable Fluorescence and a Radionuclide for Specific and Quantitative Targeted Cancer Detection", Bioconjugate Chem., 2009, 20(11), 2177.
2) M. Ogawa, N. Kosaka, P. L. Choyke and H. Kobayashi, "In vivo Molecular Imaging of Cancer with a Quenching Near-Infrared Fluorescent Probe Using Conjuates of Monoclonal Antibodies and Indocyanine Green", Cancer Res., 2009, 69(4), 1268.
3) N. Kosaka, M. Ogawa, P. L. Choyke and H. Kobayashi, "Clinical implications of near-infrared fluorescence imaging in cancer", Future Oncology, 2009, 5(9), 1501.
4) 伊藤進, 六車直樹, 林重仁, 日下至弘, 多田津昌也, 多田津陽子, 岡本耕一, 井本佳孝, 稲山久美, 坂東輝美, 田岡聡子, 高川真由子, 矢野充保, 伊井邦雄, 長尾善光, 佐野茂樹, 芝村誠一, 島田典昭, 石田和彦, 中村一成, "赤外線蛍光内視鏡の原理と臨床応用”, Biomedical THERMOLOGY, 2003, 23(2), 77.
5) S. Ito, N.Muguruma, S. Hayashi, S. Taoka, T. Bando, K. Inayama, M. Sogabe, T. Okahisa, S. Okamura, H. Shibata, T. Irimura, K. Takesako and S. Shibamura, "Development of Agents for Reinforcement of Fluorescence on Near-infrared Ray Excitation for Immunohistological Staining", Bioorg. Med. Chem., 1998, 6, 613.
6) S. Ito, N. Muguruma, Y. Kakehashi, S. Hayashi, S. Okamura, H. Shibata, T. Okahisa, M. Kanamori, S. Shibamura, K. Takesako, M. Nozawa, K. Ishida and M. Shiga, "Development of Fluorescence-Emitting Antibody Labeling Substance by Near-Infrared Ray Excitation", Bioorg. Med. Chem. Lett., 1995, 5, 2689.
7) K. Inayama, S. Ito, N. Muguruma, Y. Kusaka, T. Bando, Y. Tadatsu, M. Tadatsu, K. Ii, S. Shibamura and K. Takesako, "Basic Study of an Agent for Reinforcement of Near-infrared Fluorescence on Tumor Tissue", Digestive and Liver Disease, 2003, 35, 88.
8) S. Ito, N. Muguruma, S. Hayashi, S. Taoka, T. Bando, Y. Kusaka, M. Yano, S. Ichikawa, A. Hiasa, T. Omoya, H. Honda, I. Shimizu, K. Ii, K. Nakamura, K. Takesako, Y. Goto and S. Shibamura, "Visualization of Human Gastric Cancer with a Novel Infrared Fluorescent Labeling Marker of Anti-carcinoembryonic Antigen Antibody in vitro", Dig. Endosc., 2000, 12, 33.
9) S. Taoka, S. Ito, N. Muguruma, S. Hayashi, Y. Kusaka, K. Ii, K. Nakamura, K. Imaizumi, K. Takesako and S. Shibamura, "Reflected Illumination-type Imaging System for the Development of Infrared Fluorescence Endoscopy", Dig. Endosc.,1999, 11(4), 321.
10) S. Ito, N. Muguruma, S. Hayashi, S. Taoka, A. Tsutsui, T. Fukuda, T. Okahisa, Y. Ohkita, H. Matsunaga, I. Shimizu, K. Nakamura, K. Imaizumi, K. Takesako and S. Shibamura,"Development of an Imaging System Using Fluorescent Labeling Substances Excited by Infrared Rays", Dig. Endosc., 1997, 9, 278.
11) S. Ito, N. Muguruma, Y. Kusaka, M. Tadatsu, K. Inayama, Y. Musashi, M. Yano, T. Bando, H. Honda, I. Shimizu, K. Ii, K. Takesako, H. Takeuchi and S. Shibamura, "Detection of Human Ganstric Cancer of Resected Specimens Using a Novel Infrared Fluorescent Anti-Human Carcinoembryonic Antigen Antibody with an Infrared Fluorescence Endoscope in Vitro", Endoscopy, 2001, 33(10), 849.
12) N. Muguruma, S. Ito, T. Bando, S. Taoka, Y. Kusaka, S. Hayashi, S. Ichikawa, Y. Matsunaga, Y. Tada, S. Okamura, K. Ii, K. Imaizumi, K. Nakamura, K. Takesako and S. Shibamura, "Labeled Carcinoembryonic Antigen Antibodies Excitable by Infrared Rays: a Novel Diagnostic Method for Micro Cancers in the Digestive Tract", Internal Medicine, 1999, 38(7), 537.
13) T. Bando, N. Muguruma, S. Ito, Y. Musashi, K. Inayama, Y. Kusaka, M. Tadatsu, K. Ii, T. Irimura, S. Shibamura and K. Takesako, "Basic Study on a Labeled anti-mucin Antibody Detectable by Infrared-fluorescence Endoscopy", J. Gastroenterol., 2002, 37, 260.
14) N. Muguruma, S. Ito, S. Hayashi, S. Taoka, H. Kakehashi, K. Ii, S. Shibamura and K. Takesako, "Antibodies Labeled with Fluorescence-agent Excitable by Infrared Rays", J. Gastroenterol., 1998, 33, 467.
15) 伊藤進, 六車直樹,“不可視情報の画像化-新しい内視鏡診断学の展望 (5)赤外蛍光を用いた微小癌診断”, 臨牀消化器内科, 1999, 14(8), 1205.
16) W. Aung, A. Tsuji, H. Sudo, A. Sugyo, T. Furukawa, Y. Ukai, Y. Kurosawa and T. Saga, "Immunotargeting of Integrin α6β4 for Single-Photon Emission Computed Tomography and Near-Infrared Fluorescence Imaging in a Pancreatic Cancer Model", Molecular Imaging, 2016, 15, 1.

よくある質問

Q

Labeling Kitで1次抗体を直接標識する利点を教えてください。

A

はじめて抗体標識をされる方を対象としたプロトコルを作成しております。
カスタマーサポートの視点から直接標識法の利点や実施例等を記載しておりますので、ご参照下さい。

下記リンクよりダウンロード可能です。
「はじめての抗体標識プロトコル ~カスタマーサポートの視点から~」

Q

サンプル溶液中の共存物は反応に影響しますか?

A

共存物の種類により影響することがあります。
溶液中にどのような物質が含まれるかを確認の上、状況に応じてラベル化に用いるサンプルの精製を行い、標識反応にご使用ください。

<高分子:分子量1万以上>
影響する可能性があります。
BSAやゼラチンなどアミノ基をもつ化合物が含まれると、抗体への標識効率が低下します。また、高分子のためFiltration Tubeでも除くことができません。また、アミノ基を持たない化合物でも、高分子の不純物が多いとフィルターの目詰まりの原因になり、標識・精製操作に支障がでる可能性もあります。反応に使用する前に別途精製を行ってください。
*本製品に限らず他のLabeling kit に関しても同様の注意が必要です。

Q

低分子のタンパク質(分子量50,000以下)に標識する場合の方法を教えて下さい。

A

キット付属のフィルトレーションチューブは分画分子量30Kの限外濾過フィルターのため、余裕をもって50,000以上のタンパク質のご使用を推奨しております。

分子量50,000以下のタンパク質を標識される場合は、下記のような分画分子量の小さい限外濾過フィルターに変更して頂くことで、低分子のタンパク質でもラベル化可能でございます。

——————————————
PALL社 ナノセップ  3K 製品No.OD003C33
PALL社 ナノセップ 10K 製品No.OD010C33 
——————————————

キット同梱のフィルターを用いた場合に比べ遠心に時間を要することがございますので遠心時間はご検討下さい。

抗体・タンパク質標識キット ICG Labeling Kit - NH2 | CAS - 同仁化学研究所 抗体・タンパク質標識キット ICG Labeling Kit - NH2 | CAS - 同仁化学研究所

取扱条件

取扱条件
保存条件: 冷蔵 , 取扱条件: 吸湿注意
SDSダウンロード
抗体・タンパク質標識キット ICG Labeling Kit - NH2 | CAS - 同仁化学研究所

関連製品

この製品に関連する研究では、下記の関連製品も使われています。

  • 抗体・タンパク質標識キット ICG Labeling Kit - NH2 | CAS - 同仁化学研究所

    抗体・タンパク質標識キット

    Biotin Labeling Kit – NH2

  • 抗体・タンパク質標識キット ICG Labeling Kit - NH2 | CAS - 同仁化学研究所

    抗体・タンパク質標識キット

    HiLyte Fluor™ 555 Labeling Kit – NH2

抗体・タンパク質標識キット Peroxidase Labeling Kit – NH2 (for 1mg) 同仁化学研究所

上海金畔生物科技有限公司代理日本同仁化学试剂盒全线产品,欢迎访问日本同仁化学dojindo官网了解更多信息。

抗体・タンパク質標識キット Peroxidase Labeling Kit - NH2 (for 1mg) 同仁化学研究所Peroxidase Labeling Kit – NH2 (for 1mg)

08 ラベル化剤

Peroxidase Labeling Kit – NH2 (for 1mg)

抗体・タンパク質標識キット Peroxidase Labeling Kit - NH2 (for 1mg) 同仁化学研究所

  • ラベル化剤
  • 細胞機能解析
  • 標識キット

抗体・タンパク質標識キット

  • 大容量のサンプルをラベル化したい
  • 簡単な操作で実験したい
  • ELISAを組みたい
  • 製品コード
    LK51  Peroxidase Labeling Kit – NH2 (for 1mg)
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
1 sample ¥37,200 340-91121
サンプル量 1 mg
所要時間 3.5時間
標識部位 -NH2
検出方法 顕微鏡・ウエスタンブロット・プレートリーダー
基質 TMB,DAB等

・高分子化合物(MW>50,000)および低分子化合物(MW<5,000)を標識できる。

・NH2-Reactive Peroxidaseと混合するだけでPOD標識体を形成する。

・Filtration tubeを用いた分離操作により高い回収率で標識体が得られる。

抗体・タンパク質標識キット Peroxidase Labeling Kit - NH2 (for 1mg) 同仁化学研究所

キット内容
1 sample ・NH2-Reactive Peroxidase 
・Washing Buffer
・Reaction Buffer
・Storage Buffer
・Filtration Tube
・15 ml Tube (for counterbalance)
1 tube
10 ml x1
1.2 ml x1
10 ml x1
1 tube
1 tube

  • 抗体・タンパク質標識キット Peroxidase Labeling Kit - NH2 (for 1mg) 同仁化学研究所
試験成績書

SDSダウンロード

  • ご購入方法
  • お問い合わせ

マニュアル

  • 取扱説明書 抗体・タンパク質標識キット Peroxidase Labeling Kit - NH2 (for 1mg) 同仁化学研究所 日本語
    抗体・タンパク質標識キット Peroxidase Labeling Kit - NH2 (for 1mg) 同仁化学研究所
  • 取扱説明書 抗体・タンパク質標識キット Peroxidase Labeling Kit - NH2 (for 1mg) 同仁化学研究所 English
    抗体・タンパク質標識キット Peroxidase Labeling Kit - NH2 (for 1mg) 同仁化学研究所

技術情報

特長

1) 1 mgのタンパク質を標識可能である。
2) 高分子化合物(MW>50,000)および低分子化合物(MW<5,000)を標識できる。
3)NH2-Reactive Peroxidaseと混合するだけでPOD標識体を形成する。
4) Filtration Tubeを用いた分離操作により高い回収率で標識体が得られる。

参考文献

参考文献を表示する

1) 広田次郎, 清水眞也, "キットを用いたモノクローナル抗体への迅速・簡便なペルオキシダーゼ標識法", 動物衛生研究所研究報告, 2005, 111, 37.

よくある質問

Q

Labeling Kitで1次抗体を直接標識する利点を教えてください。

A

はじめて抗体標識をされる方を対象としたプロトコルを作成しております。
カスタマーサポートの視点から直接標識法の利点や実施例等を記載しておりますので、ご参照下さい。

下記リンクよりダウンロード可能です。

「はじめての抗体標識プロトコル ~カスタマーサポートの視点から~」

Q

サンプル溶液中の共存物は反応に影響しますか?

A

共存物の種類により影響することがあります。
溶液中にどのような物質が含まれるかを確認の上、状況に応じてラベル化に用いるサンプルの精製を行い、標識反応にご使用ください。

<高分子:分子量1万以上>
影響する可能性があります。
BSAやゼラチンなどアミノ基をもつ化合物が含まれると、抗体への標識効率が低下します。また、高分子のためFiltration Tubeでも除くことができません。また、アミノ基を持たない化合物でも、高分子の不純物が多いとフィルターの目詰まりの原因になり、標識・精製操作に支障がでる可能性もあります。反応に使用する前に別途精製を行ってください。
*本製品に限らず他のLabeling kit に関しても同様の注意が必要です。

抗体・タンパク質標識キット Peroxidase Labeling Kit - NH2 (for 1mg) 同仁化学研究所 抗体・タンパク質標識キット Peroxidase Labeling Kit - NH2 (for 1mg) 同仁化学研究所

取扱条件

取扱条件
保存条件: 冷蔵 , 取扱条件: 吸湿注意
SDSダウンロード
抗体・タンパク質標識キット Peroxidase Labeling Kit - NH2 (for 1mg) 同仁化学研究所

関連製品

この製品に関連する研究では、下記の関連製品も使われています。

  • 抗体・タンパク質標識キット Peroxidase Labeling Kit - NH2 (for 1mg) 同仁化学研究所

    抗体・タンパク質標識キット

    Peroxidase Labeling Kit – SH

  • 抗体・タンパク質標識キット Peroxidase Labeling Kit - NH2 (for 1mg) 同仁化学研究所

    抗体標識キット

    Ab-10 Rapid Peroxidase Labeling Kit

タンパク質標識キット Biotin Labeling Kit – NH2 (for 1mg) 同仁化学研究所

上海金畔生物科技有限公司代理日本同仁化学试剂盒全线产品,欢迎访问日本同仁化学dojindo官网了解更多信息。

タンパク質標識キット Biotin Labeling Kit - NH2 (for 1mg) 同仁化学研究所Biotin Labeling Kit – NH2 (for 1mg)

08 ラベル化剤

Biotin Labeling Kit – NH2 (for 1mg)

タンパク質標識キット Biotin Labeling Kit - NH2 (for 1mg) 同仁化学研究所

  • ラベル化剤
  • 細胞機能解析
  • 標識キット

タンパク質標識キット

  • 大容量のサンプルをラベル化したい
  • 感度をあげたい
  • 蛍光色素でうまくいかなかった
  • 製品コード
    LK55  Biotin Labeling Kit – NH2 (for 1mg)
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
1 sample ¥26,200 344-91141
サンプル量 1 mg
所要時間 2時間
標識部位 -NH2
検出方法 顕微鏡・FCM・ウエスタンブロット・プレートリーダー

・高分子化合物(MW>50,000)に標識できる。

・NH2-Reactive Biotinと混合するだけで標識体を形成する。

・Filtration Tubeを用いた分離操作により高い回収率で標識体が得られる。

タンパク質標識キット Biotin Labeling Kit - NH2 (for 1mg) 同仁化学研究所

キット内容
1 sample ・NH2-Reactive Biotin
・WS Buffer
・Reaction Buffer
・Filtration Tube
・15 ml Tube (for counterbalance)
1 tube
13 ml x 1
1.2 ml x 1
1 tube
1 tube

  • タンパク質標識キット Biotin Labeling Kit - NH2 (for 1mg) 同仁化学研究所
試験成績書

SDSダウンロード

  • ご購入方法
  • お問い合わせ

マニュアル

  • 取扱説明書 タンパク質標識キット Biotin Labeling Kit - NH2 (for 1mg) 同仁化学研究所 日本語
    タンパク質標識キット Biotin Labeling Kit - NH2 (for 1mg) 同仁化学研究所
  • 取扱説明書 タンパク質標識キット Biotin Labeling Kit - NH2 (for 1mg) 同仁化学研究所 English
    タンパク質標識キット Biotin Labeling Kit - NH2 (for 1mg) 同仁化学研究所

技術情報

特徴

1)1 mgのタンパク質を標識可能である。
2)高分子化合物(MW>50,000)に標識できる。
3)NH2-Reactive Biotinと混合するだけで標識体を形成する。
4)Filtration Tubeを用いた分離操作により高い回収率で標識体が得られる。

よくある質問

Q

サンプル溶液中の共存物は反応に影響しますか?

A

共存物の種類により影響することがあります。
溶液中にどのような物質が含まれるかを確認の上、状況に応じてラベル化に用いるサンプルの精製を行い、標識反応にご使用ください。

<高分子:分子量1万以上>
影響する可能性があります。
BSAやゼラチンなどアミノ基をもつ化合物が含まれると、抗体への標識効率が低下します。また、高分子のためFiltration Tubeでも除くことができません。また、アミノ基を持たない化合物でも、高分子の不純物が多いとフィルターの目詰まりの原因になり、標識・精製操作に支障がでる可能性もあります。反応に使用する前に別途精製を行ってください。
*本製品に限らず他のLabeling kit に関しても同様の注意が必要です。

タンパク質標識キット Biotin Labeling Kit - NH2 (for 1mg) 同仁化学研究所 タンパク質標識キット Biotin Labeling Kit - NH2 (for 1mg) 同仁化学研究所

取扱条件

取扱条件
保存条件: 冷蔵 , 取扱条件: 吸湿注意
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タンパク質標識キット Biotin Labeling Kit - NH2 (for 1mg) 同仁化学研究所

関連製品

この製品に関連する研究では、下記の関連製品も使われています。

  • タンパク質標識キット Biotin Labeling Kit - NH2 (for 1mg) 同仁化学研究所

    抗体・タンパク質標識キット

    Biotin Labeling Kit – SH

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    抗体標識キット

    Ab-10 Rapid Biotin Labeling Kit

エクソソーム 膜蛍光染色キット Green ExoSparkler Exosome Membrane Labeling Kit-Green 同仁化学研究所

上海金畔生物科技有限公司代理日本同仁化学试剂盒全线产品,欢迎访问日本同仁化学dojindo官网了解更多信息。

エクソソーム 膜蛍光染色キット Green ExoSparkler Exosome Membrane Labeling Kit-Green 同仁化学研究所ExoSparkler Exosome Membrane Labeling Kit-Green

08 ラベル化剤

ExoSparkler Exosome Membrane Labeling Kit-Green

エクソソーム 膜蛍光染色キット Green ExoSparkler Exosome Membrane Labeling Kit-Green 同仁化学研究所

  • ラベル化剤

エクソソーム 膜蛍光染色キット Green

  • 細胞外で凝集せず、より正確な動態を観察できる
  • 本キットだけで蛍光標識から精製まで可能
  • 製品コード
    EX01  ExoSparkler Exosome Membrane Labeling Kit-Green
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
5 samples ¥26,800 343-09661

精製済エクソソームを染色することができます。

精製法をお探しの場合は、ExoIsolator Exosome Isolation Kitもご参考ください。
キット内容
5 samples ・Mem Dye-Green
・Filtration tube
×1
×5

  • エクソソーム 膜蛍光染色キット Green ExoSparkler Exosome Membrane Labeling Kit-Green 同仁化学研究所
試験成績書

SDSダウンロード

  • ご購入方法
  • お問い合わせ

マニュアル

  • 取扱説明書 日本語
    エクソソーム 膜蛍光染色キット Green ExoSparkler Exosome Membrane Labeling Kit-Green 同仁化学研究所
  • Manual English
    エクソソーム 膜蛍光染色キット Green ExoSparkler Exosome Membrane Labeling Kit-Green 同仁化学研究所

技術情報

より正確にエクソソームの動態を観察する

エクソソームの膜を染色するためによく用いられている膜染色色素(S 社 製品P)には、色素自体が凝集を起こし、エクソソームに由来しない蛍光起点が生じたり、エクソソームの性質変化やバックグラウンドの上昇などを招く課題が挙げられています1), 2)
ExoSparkler シリーズで用いている色素(Mem Dye-Green, Red, Deep Red)は凝集を起こさず、エクソソームの性質にもほとんど影響を及ぼさないため、より正確にエクソソームの動態を観察することが可能です。

参考文献
1) Mehdi Dehghani et al., “Exosome labeling by lipophilic dye PKH26 results in significant increase in vesicle size”.bioRxiv., 2019, doi:10.1101/532028.
2) Pužar Dominkuš P et al., “PKH26 labeling of extracellular vesicles: Characterization and cellular internalization of contaminating PKH26 nanoparticles.” Biochim Biophys Acta Biomembr., 2018, doi: 10.1016/j.bbamem.2018.03.013.

技術や使用製品に関する補足

技術情報のデータは京都大学大学院工学研究科高分子化学専攻 秋吉一成先生のご支援のもと取得いたしました。

  • エクソソーム 膜蛍光染色キット Green ExoSparkler Exosome Membrane Labeling Kit-Green 同仁化学研究所

    細胞外小胞、エクソソームの特性と機能
    小社季刊冊子「DojinNews vol.169」に執筆いただいた記事を掲載しています。

参考文献

参考文献を表示する

 

文献No. 対象サンプル 装置    引用(リンク)
1) GMSC由来
マクロファージ取り込み
蛍光顕微鏡 R.Kawata, S.Oda, Y. Koya, H.Kajiyama, T. Yokoi, "Macrophage-derived extracellular vesicles regulate concanavalin A-induced hepatitis by suppressing macrophage cytokine production", Toxicology, 2020, doi:10.1016/j.tox.2020.152544.
2) HEK293s由来
HeLa取り込み
蛍光顕微鏡 Y. Nakao, T. Fukuda, Q. Zhang, T. Sanui, T. Shinjo, X. Kou, C. Chen, D. Liu, Y. Watanabe, C. Hayashi, H. Yamato, K. Yotsumoto, U. Tanaka, T. Taketomi, T. Uchiumi, A. D. Le, S. Shi, F. Nishiura, "Exosomes from TNF-α-treated human gingiva-derived MSCs enhance M2 macrophage polarization and inhibit periodontal bone loss", Acta Biomater., 2020, doi:10.1016/j.actbio.2020.12.046.
3) HEK293.2sus由来
磁性ナノゲルと融合
フローサイトメーター R. Mizuta, Y. Sasaki, k. Katagiri, S. Sawada and K. Akiyoshi, "Reversible conjugation of biomembrane vesicles with magnetic nanoparticles using a self-assembled nanogel interface: single particle analysis using imaging flow cytometry", Nanoscale Adv.2022, doi:10.1039/d1na00834j.
4) マウス T細胞由来
マウス肝臓、腎臓、足細胞取り込み
蛍光顕微鏡 H. Chuang, M. Chen, Y. Chen, Y. Ciou, C. Hsueh, C. Tsai and T. Tan, "Induction of Interferon-γ and Tissue Inflammation by Overexpression of Eosinophil Cationic Protein in T Cells and Exosomes", Arthritis Rheumatol.2021, doi:10.1002/art.41920.
5) HeLa; MSC(mesenchymal stem cells)細胞由来 蛍光顕微鏡 N. Kamei, H. Nishimura, A. Matsumoto, R. Asano, K. Muranaka, M. Fujita, M. Takeda, H. Hashimoto, M. Takeda-Morishita, "Comparative study of commercial protocols for high recovery of high-purity mesenchymal stem cell-derived extracellular vesicle isolation and their efficient labeling with fluorescent dyes,", 2021, doi:10.1016/j.nano.2021.102396.
6) Lck-BPI Tg T cells-由来 蛍光顕微鏡 H. Chuang, M. Chen, Y. Chen, H. Yang, Y. Ciou, C. Hsueh, C. Tsai, T. Tan, "BPI overexpression suppresses Treg differentiation and induces exosome-mediated inflammation in systemic lupus erythematosus", 2021, doi:10.7150/thno.63743.
7) Colorectal Cancer細胞由来 蛍光顕微鏡 H. Takakura, T. Nakao, T. Narita, M. Horinaka, Y. Nakao-Ise, T. Yamamoto, Y. Iizumi, M. Watanabe, Y. Sowa, K. Oda, N. Mori, T. Sakai, and M. Mutoh, "Citrus limon L.-Derived Nanovesicles Show an Inhibitory Effect on Cell Growth in p53-Inactivated Colorectal Cancer Cells via the Macropinocytosis Pathway ", 2022, doi:10.3390/biomedicines10061352.

よくある質問

Q

推奨されるエクソソームの精製法はありますか?

A

超遠心法での精製を推奨しておりますが、免疫沈降法や磁気ビーズで精製したエクソソームの染色実績もございます。
また、超遠心法と同等の回収実績のある、ExoIsolator Exosome Isolation Kit(EX10)もご利用いただけます。

なお、ポリマー沈殿法で精製したエクソソームは下記の理由により、残存するポリマーの影響を受けるため、本キットでの染色はできません。

1)未反応色素の精製工程で使用するフィルトレーションチューブにポリマーがつまり、精製できなくなる可能性がございます。

2)ポリマーがエクソソームと相互作用し、エクソソームの膜電位が変わる可能性がございます。膜電位が変わると、細胞取り込みアッセイに標識エクソソームを使用する場合、細胞内動態が変化する恐れがございます。

Q

標識後の精製操作でフィルターは着色していますが、未反応の色素は分離できていますか?

A

未反応の色素はフィルターに保持されるために着色が見られますが、小社では以下の実験でフィルター上の回収物に未反応色素が含まれないことを確認しております。

 

<実験条件>
超遠心法で精製した ①エクソソーム(タンパク質量として10µg)のバッファー溶液 または ②バッファーのみ を各キットのプロトコルに従って染色操作したのち、得られた回収物をHeLa細胞(1.25×104 cells)に添加して、4時間後の蛍光画像を観察しました。

結果として、バッファーのみで得られた回収物は細胞へ添加しても蛍光輝点が観察されず、回収物に未反応の色素が残っていないことを確認しました。

エクソソーム 膜蛍光染色キット Green ExoSparkler Exosome Membrane Labeling Kit-Green 同仁化学研究所

 

①エクソソーム+バッファーをキットで処理した場合

エクソソーム 膜蛍光染色キット Green ExoSparkler Exosome Membrane Labeling Kit-Green 同仁化学研究所

                  細胞へ添加後(4h)の蛍光画像

 

②バッファーのみをキットで処理した場合

エクソソーム 膜蛍光染色キット Green ExoSparkler Exosome Membrane Labeling Kit-Green 同仁化学研究所

                   細胞へ添加後(4h)の蛍光画像

 検出条件

Green:Ex 488 nm / Em 490 – 540 nm
Red    :Ex 561 nm / Em 570 – 640 nm
Deep Red:Ex 640 nm / Em 640 – 760 nm

Q

染色後のエクソソームは保存できますか?

A

染色後のエクソソームの保存は推奨しておりません。
エクソソームの染色後はできるだけ早く実験にご使用ください。

Q

エクソソームの取込実験で使用実績のある培地を教えてください。

A

小社では染色後のエクソソームを用いた細胞への取り込み実験において、
MEM(Minimum Essential Medium)ならびにDMEM(Dulbecco's Modified Eagle's Medium)での実績がございます。

なお、ExoSparklerシリーズは血清含有培地中での取込実験に最適化しているため、
無血清培地中で使用することはお勧めできません。

Q

1sampleあたりの染色できるエクソソーム量(タンパク質量、粒子数)を教えてください。

A

1sampleあたりのエクソソーム量(タンパク質量、粒子数)は以下の通りです。
精製済エクソソーム(超遠心法)として、タンパク質:1-10 μg/sample, 粒子数 10-100x 108 個/sample  
 

Q

エクソソーム以外に夾雑物が含まれる場合、夾雑物も染色されますか?

A

はい。エクソソームにタンパク質やポリマー*等の夾雑物が含まれると、夾雑物も染色されてしまいます。
そのため、精製したエクソソームをご準備ください。
  *精製方法によっては、ポリマーが残存する場合があります。

精製方法については、「推奨されるエクソソームの精製法はありますか?」をご参照ください。
 

エクソソーム 膜蛍光染色キット Green ExoSparkler Exosome Membrane Labeling Kit-Green 同仁化学研究所 エクソソーム 膜蛍光染色キット Green ExoSparkler Exosome Membrane Labeling Kit-Green 同仁化学研究所

取扱条件

取扱条件
保存条件: 冷蔵,遮光
SDSダウンロード
エクソソーム 膜蛍光染色キット Green ExoSparkler Exosome Membrane Labeling Kit-Green 同仁化学研究所

関連製品

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    ExoSparkler Exosome Protein Labeling Kit-Green

  • エクソソーム 膜蛍光染色キット Green ExoSparkler Exosome Membrane Labeling Kit-Green 同仁化学研究所

    エクソソーム 膜蛍光染色キット Red

    ExoSparkler Exosome Membrane Labeling Kit-Red

エクソソーム 膜蛍光染色キット Red ExoSparkler Exosome Membrane Labeling Kit-Red 同仁化学研究所

上海金畔生物科技有限公司代理日本同仁化学试剂盒全线产品,欢迎访问日本同仁化学dojindo官网了解更多信息。

エクソソーム 膜蛍光染色キット Red ExoSparkler Exosome Membrane Labeling Kit-Red 同仁化学研究所ExoSparkler Exosome Membrane Labeling Kit-Red

08 ラベル化剤

ExoSparkler Exosome Membrane Labeling Kit-Red

エクソソーム 膜蛍光染色キット Red ExoSparkler Exosome Membrane Labeling Kit-Red 同仁化学研究所

  • ラベル化剤

エクソソーム 膜蛍光染色キット Red

  • 細胞外で凝集せず、より正確な動態を観察できる
  • 本キットだけで蛍光標識から精製まで可能
  • 製品コード
    EX02  ExoSparkler Exosome Membrane Labeling Kit-Red
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
5 samples ¥26,800 340-09671

精製済エクソソームを染色することができます。

精製法をお探しの場合は、ExoIsolator Exosome Isolation Kitもご参考ください。
キット内容
5 samples ・Mem Dye-Red
・Filtration tube
×1
×5

  • エクソソーム 膜蛍光染色キット Red ExoSparkler Exosome Membrane Labeling Kit-Red 同仁化学研究所
試験成績書

SDSダウンロード

  • ご購入方法
  • お問い合わせ

マニュアル

  • 取扱説明書 日本語
    エクソソーム 膜蛍光染色キット Red ExoSparkler Exosome Membrane Labeling Kit-Red 同仁化学研究所
  • Manual English
    エクソソーム 膜蛍光染色キット Red ExoSparkler Exosome Membrane Labeling Kit-Red 同仁化学研究所

技術情報

より正確にエクソソームの動態を観察する

エクソソームの膜を染色するためによく用いられている膜染色色素(S 社 製品P)には、色素自体が凝集を起こし、エクソソームに由来しない蛍光起点が生じたり、エクソソームの性質変化やバックグラウンドの上昇などを招く課題が挙げられています1), 2)
ExoSparkler シリーズで用いている色素(Mem Dye-Green, Red, Deep Red)は凝集を起こさず、エクソソームの性質にもほとんど影響を及ぼさないため、より正確にエクソソームの動態を観察することが可能です。

参考文献
1) Mehdi Dehghani et al., “Exosome labeling by lipophilic dye PKH26 results in significant increase in vesicle size”.bioRxiv., 2019, doi:10.1101/532028.
2) Pužar Dominkuš P et al., “PKH26 labeling of extracellular vesicles: Characterization and cellular internalization of contaminating PKH26 nanoparticles.” Biochim Biophys Acta Biomembr., 2018, doi: 10.1016/j.bbamem.2018.03.013.

技術や使用製品に関する補足

技術情報のデータは京都大学大学院工学研究科高分子化学専攻 秋吉一成先生のご支援のもと取得いたしました。

  • エクソソーム 膜蛍光染色キット Red ExoSparkler Exosome Membrane Labeling Kit-Red 同仁化学研究所

    細胞外小胞、エクソソームの特性と機能
    小社季刊冊子「DojinNews vol.169」に執筆いただいた記事を掲載しています。

参考文献

参考文献を表示する

 

文献No. 対象サンプル 装置    引用 (リンク)
1) 細胞
(RAW264.7)
蛍光顕微鏡 1) R.Kawata, S.Oda, Y. Koya, H.Kajiyama, T. Yokoi, "Macrophage-derived extracellular vesicles regulate concanavalin A-induced hepatitis by suppressing macrophage cytokine production", Toxicology, 2020, https://doi.org/10.1016/j.tox.2020.152544.
2) 細胞
(ADSCs)
蛍光顕微鏡 A. Shimoda R. Miura, H. Tateno, N. Seo, H. Shiku, S. Sawada, Y. Sasaki and K. Akiyoshi, "Assessment of Surface Glycan Diversity on Extracellular Vesicles by Lectin Microarray and Glycoengineering Strategies for Drug Delivery Applications", Small Methods2021, doi:10.1002/smtd.202100785.
3) HEK293T細胞由来 蛍光顕微鏡 Y. Matsuki, T. Yanagawa, H. Sumiyoshi, J. Yasuda, S. Nakao, M. Goto, T. Shibata-Seki, T. Akaike, Y. Inagaki, "Modification of exosomes with carbonate apatite and a glycan polymer improves transduction efficiency and target cell selectivity", 2021, doi:10.1016/j.bbrc.2021.10.063.
4) Colorectal Cancer細胞由来 蛍光顕微鏡 H. Takakura, T. Nakao, T. Narita, M. Horinaka, Y. Nakao-Ise, T. Yamamoto, Y. Iizumi, M. Watanabe, Y. Sowa, K. Oda, N. Mori, T. Sakai, and M. Mutoh, "Citrus limon L.-Derived Nanovesicles Show an Inhibitory Effect on Cell Growth in p53-Inactivated Colorectal Cancer Cells via the Macropinocytosis Pathway ", 2022, doi:10.3390/biomedicines10061352.

よくある質問

Q

推奨されるエクソソームの精製法はありますか?

A

超遠心法での精製を推奨しておりますが、免疫沈降法や磁気ビーズで精製したエクソソームの染色実績もございます。
また、超遠心法と同等の回収実績のある、ExoIsolator Exosome Isolation Kit(EX10)もご利用いただけます。

なお、ポリマー沈殿法で精製したエクソソームは下記の理由により、残存するポリマーの影響を受けるため、本キットでの染色はできません。

1)未反応色素の精製工程で使用するフィルトレーションチューブにポリマーがつまり、精製できなくなる可能性がございます。

2)ポリマーがエクソソームと相互作用し、エクソソームの膜電位が変わる可能性がございます。膜電位が変わると、細胞取り込みアッセイに標識エクソソームを使用する場合、細胞内動態が変化する恐れがございます。

Q

標識後の精製操作でフィルターは着色していますが、未反応の色素は分離できていますか?

A

未反応の色素はフィルターに保持されるために着色が見られますが、小社では以下の実験でフィルター上の回収物に未反応色素が含まれないことを確認しております。

 

<実験条件>
超遠心法で精製した ①エクソソーム(タンパク質量として10µg)のバッファー溶液 または ②バッファーのみ を各キットのプロトコルに従って染色操作したのち、得られた回収物をHeLa細胞(1.25×104 cells)に添加して、4時間後の蛍光画像を観察しました。

結果として、バッファーのみで得られた回収物は細胞へ添加しても蛍光輝点が観察されず、回収物に未反応の色素が残っていないことを確認しました。

エクソソーム 膜蛍光染色キット Red ExoSparkler Exosome Membrane Labeling Kit-Red 同仁化学研究所

①エクソソーム+バッファーをキットで処理した場合

エクソソーム 膜蛍光染色キット Red ExoSparkler Exosome Membrane Labeling Kit-Red 同仁化学研究所

               細胞へ添加後(4h)の蛍光画像

 

②バッファーのみをキットで処理した場合

エクソソーム 膜蛍光染色キット Red ExoSparkler Exosome Membrane Labeling Kit-Red 同仁化学研究所

               細胞へ添加後(4h)の蛍光画像

■ 検出条件

Green:Ex 488 nm / Em 490 – 540 nm
Red    :Ex 561 nm / Em 570 – 640 nm
Deep Red:Ex 640 nm / Em 640 – 760 nm

Q

染色後のエクソソームは保存できますか?

A

染色後のエクソソームの保存は推奨しておりません。
エクソソームの染色後はできるだけ早く実験にご使用ください。

Q

エクソソームの取込実験で使用実績のある培地を教えてください。

A

小社では染色後のエクソソームを用いた細胞への取り込み実験において、
MEM(Minimum Essential Medium)ならびにDMEM(Dulbecco's Modified Eagle's Medium)での実績がございます。

なお、ExoSparklerシリーズは血清含有培地中での取込実験に最適化しているため、
無血清培地中で使用することはお勧めできません。

Q

1sampleあたりの染色できるエクソソーム量(タンパク質量、粒子数)を教えてください。

A

1sampleあたりのエクソソーム量(タンパク質量、粒子数)は以下の通りです。
精製済エクソソーム(超遠心法)として、タンパク質:1-10 μg/sample, 粒子数 10-100x 108 個/sample  

Q

エクソソーム以外に夾雑物が含まれる場合、夾雑物も染色されますか?

A

はい。エクソソームにタンパク質やポリマー*等の夾雑物が含まれると、夾雑物も染色されてしまいます。
そのため、精製したエクソソームをご準備ください。
  *精製方法によっては、ポリマーが残存する場合があります。

精製方法については「推奨されるエクソソームの精製法はありますか?」をご参照ください。

エクソソーム 膜蛍光染色キット Red ExoSparkler Exosome Membrane Labeling Kit-Red 同仁化学研究所 エクソソーム 膜蛍光染色キット Red ExoSparkler Exosome Membrane Labeling Kit-Red 同仁化学研究所

取扱条件

取扱条件
保存条件: 冷蔵,遮光 , 取扱条件: 吸湿注意
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関連製品

この製品に関連する研究では、下記の関連製品も使われています。

  • エクソソーム 膜蛍光染色キット Red ExoSparkler Exosome Membrane Labeling Kit-Red 同仁化学研究所

    エクソソーム タンパク質蛍光染色キット Green

    ExoSparkler Exosome Protein Labeling Kit-Green

  • エクソソーム 膜蛍光染色キット Red ExoSparkler Exosome Membrane Labeling Kit-Red 同仁化学研究所

    エクソソーム 膜蛍光染色キット Green

    ExoSparkler Exosome Membrane Labeling Kit-Green

エクソソーム タンパク質蛍光染色キット Green ExoSparkler Exosome Protein Labeling Kit-Green 同仁化学研究所

上海金畔生物科技有限公司代理日本同仁化学试剂盒全线产品,欢迎访问日本同仁化学dojindo官网了解更多信息。

エクソソーム タンパク質蛍光染色キット Green ExoSparkler Exosome Protein Labeling Kit-Green 同仁化学研究所ExoSparkler Exosome Protein Labeling Kit-Green

08 ラベル化剤

ExoSparkler Exosome Protein Labeling Kit-Green

エクソソーム タンパク質蛍光染色キット Green ExoSparkler Exosome Protein Labeling Kit-Green 同仁化学研究所

  • ラベル化剤

エクソソーム タンパク質蛍光染色キット Green

  • 細胞外で凝集せず、より正確な動態を観察できる
  • 本キットだけで蛍光標識から精製まで可能
  • 製品コード
    EX04  ExoSparkler Exosome Protein Labeling Kit-Green
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
5 samples ¥21,400 344-09691

精製済エクソソームを染色することができます。

精製法をお探しの場合は、ExoIsolator Exosome Isolation Kitもご参考ください。
キット内容
5 samples ・Protein Dye-Green
・Filtration tube
×1
×5

  • エクソソーム タンパク質蛍光染色キット Green ExoSparkler Exosome Protein Labeling Kit-Green 同仁化学研究所
試験成績書

SDSダウンロード

  • ご購入方法
  • お問い合わせ

マニュアル

  • 取扱説明書 日本語
    エクソソーム タンパク質蛍光染色キット Green ExoSparkler Exosome Protein Labeling Kit-Green 同仁化学研究所
  • Manual English
    エクソソーム タンパク質蛍光染色キット Green ExoSparkler Exosome Protein Labeling Kit-Green 同仁化学研究所

技術情報

このキットだけで蛍光標識から精製まで

ExoSparkler シリーズは、エクソソームの標識に最適化したプロトコルに加え、蛍光標識後の未反応色素を除去できるフィルトレーションチューブを同梱しているため、簡単な操作で蛍光標識エクソソームを調製できます。

エクソソーム タンパク質蛍光染色キット Green ExoSparkler Exosome Protein Labeling Kit-Green 同仁化学研究所

 

精製手法(未反応色素の除去)の比較

ExoSparklarシリーズで未反応色素の除去に使用しているフィルトレーションチューブは、同用途で従来から用いられているゲルろ過法と比較して、高い回収率でエクソソームを精製することが可能です。

  回収率
フィルトレーションチューブ(本キット) 50% 程度
ゲルろ過法 10% 程度
※ 小社での実施例:精製前後のエクソソーム粒子数をNTA(ナノ粒子トラッキング解析)で比較

フィルトレーションチューブを用いた精製の有効性確認の蛍光画像をよくある質問:標識後の精製操作でフィルターは着色していますが、未反応の色素は分離できていますか?に掲載しています。

技術や使用製品に関する補足

技術情報のデータは京都大学大学院工学研究科高分子化学専攻 秋吉一成先生のご支援のもと取得いたしました。

  • エクソソーム タンパク質蛍光染色キット Green ExoSparkler Exosome Protein Labeling Kit-Green 同仁化学研究所

    細胞外小胞、エクソソームの特性と機能
    小社季刊冊子「DojinNews vol.169」に執筆いただいた記事を掲載しています。

よくある質問

Q

推奨されるエクソソームの精製法はありますか?

A

超遠心法での精製を推奨しておりますが、免疫沈降法や磁気ビーズで精製したエクソソームの染色実績もございます。
また、超遠心法と同等の回収実績のある、ExoIsolator Exosome Isolation Kit(EX10)もご利用いただけます。

なお、ポリマー沈殿法で精製したエクソソームは下記の理由により、残存するポリマーの影響を受けるため、本キットでの染色はできません。

1)未反応色素の精製工程で使用するフィルトレーションチューブにポリマーがつまり、精製できなくなる可能性がございます。

2)ポリマーがエクソソームと相互作用し、エクソソームの膜電位が変わる可能性がございます。膜電位が変わると、細胞取り込みアッセイに標識エクソソームを使用する場合、細胞内動態が変化する恐れがございます。

Q

標識後の精製操作でフィルターは着色していますが、未反応の色素は分離できていますか?

A

未反応の色素はフィルターに保持されるために着色が見られますが、小社では以下の実験でフィルター上の回収物に未反応色素が含まれないことを確認しております。

<実験条件>
超遠心法で精製した ①エクソソーム(タンパク質量として10 µg)のバッファー溶液 または ②バッファーのみ を各キットのプロトコルに従って染色操作したのち、得られた回収物をHeLa細胞(1.25×104 cells)に添加して、4時間後の蛍光画像を観察しました。

結果として、バッファーのみで得られた回収物は細胞へ添加しても蛍光輝点が観察されず、回収物に未反応の色素が残っていないことを確認しました。
エクソソーム タンパク質蛍光染色キット Green ExoSparkler Exosome Protein Labeling Kit-Green 同仁化学研究所

 

①エクソソーム+バッファーをキットで処理した場合

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             細胞へ添加後(4h)の蛍光画像

 

②バッファーのみをキットで処理した場合

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             細胞へ添加後(4h)の蛍光画像

■ 検出条件
 Green:Ex 488 nm / Em 490 – 540 nm
 Red    :Ex 561 nm / Em 570 – 640 nm
 Deep Red:Ex 640 nm / Em 640 – 760 nm

Q

染色後のエクソソームは保存できますか。

A

染色後のエクソソームの保存は推奨しておりません。
エクソソームの染色後はできるだけ早く実験にご使用ください。

Q

エクソソームの取込実験で使用実績のある培地を教えてください。

A

小社では染色後のエクソソームを用いた細胞への取り込み実験において、
MEM(Minimum Essential Medium)ならびにDMEM(Dulbecco's Modified Eagle's Medium)での実績がございます。

なお、ExoSparklerシリーズは血清含有培地中での取込実験に最適化しているため、
無血清培地中で使用することはお勧めできません。

Q

1sampleあたりの染色できるエクソソーム量(タンパク質量、粒子数)を教えてください。

A

1sampleあたりのエクソソーム量(タンパク質量、粒子数)は以下の通りです。
精製済エクソソーム(超遠心法)として、タンパク質:1-10 μg/sample, 粒子数 10-100x 108 個/sample  

Q

エクソソーム以外に夾雑物が含まれる場合、夾雑物も染色されますか?

A

はい。エクソソーム以外のタンパク質等の夾雑物が含まれると、夾雑物も染色されてしまいます。
そのため、精製したエクソソームをご準備ください。
精製方法については、「推奨されるエクソソームの精製法はありますか?」をご参照ください。

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取扱条件

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保存条件: 冷蔵
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関連製品

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    エクソソーム精製キット

    ExoIsolator Exosome Isolation Kit

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    免疫染色用青色蛍光基質

    CLAMP F405-Signal Boosting

エクソソーム タンパク質蛍光染色キット Red ExoSparkler Exosome Protein Labeling Kit-Red 同仁化学研究所

上海金畔生物科技有限公司代理日本同仁化学试剂盒全线产品,欢迎访问日本同仁化学dojindo官网了解更多信息。

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08 ラベル化剤

ExoSparkler Exosome Protein Labeling Kit-Red

エクソソーム タンパク質蛍光染色キット Red ExoSparkler Exosome Protein Labeling Kit-Red 同仁化学研究所

  • ラベル化剤

エクソソーム タンパク質蛍光染色キット Red

  • 細胞外で凝集せず、より正確な動態を観察できる
  • 本キットだけで蛍光標識から精製まで可能
  • 製品コード
    EX05  ExoSparkler Exosome Protein Labeling Kit-Red
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
5 samples ¥21,400 347-09701

精製済エクソソームを染色することができます。

精製法をお探しの場合は、ExoIsolator Exosome Isolation Kitもご参考ください。
キット内容
5 samples ・Protein Dye-Red
・Filtration tube
×1
×5

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試験成績書

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マニュアル

  • 取扱説明書 日本語
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  • Manual English
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技術情報

このキットだけで蛍光標識から精製まで

ExoSparkler シリーズは、エクソソームの標識に最適化したプロトコルに加え、蛍光標識後の未反応色素を除去できるフィルトレーションチューブを同梱しているため、簡単な操作で蛍光標識エクソソームを調製できます。

エクソソーム タンパク質蛍光染色キット Red ExoSparkler Exosome Protein Labeling Kit-Red 同仁化学研究所

 

精製手法(未反応色素の除去)の比較

ExoSparklarシリーズで未反応色素の除去に使用しているフィルトレーションチューブは、同用途で従来から用いられているゲルろ過法と比較して、高い回収率でエクソソームを精製することが可能です。

  回収率
フィルトレーションチューブ(本キット) 50% 程度
ゲルろ過法 10% 程度
※ 小社での実施例:精製前後のエクソソーム粒子数をNTA(ナノ粒子トラッキング解析)で比較

フィルトレーションチューブを用いた精製の有効性確認の蛍光画像をよくある質問:標識後の精製操作でフィルターは着色していますが、未反応の色素は分離できていますか?に掲載しています。

技術や使用製品に関する補足

技術情報のデータは京都大学大学院工学研究科高分子化学専攻 秋吉一成先生のご支援のもと取得いたしました。

  • エクソソーム タンパク質蛍光染色キット Red ExoSparkler Exosome Protein Labeling Kit-Red 同仁化学研究所

    細胞外小胞、エクソソームの特性と機能
    小社季刊冊子「DojinNews vol.169」に執筆いただいた記事を掲載しています。

よくある質問

Q

推奨されるエクソソームの精製法はありますか?

A

超遠心法での精製を推奨しておりますが、免疫沈降法や磁気ビーズで精製したエクソソームの染色実績もございます。
また、超遠心法と同等の回収実績のある、ExoIsolator Exosome Isolation Kit(EX10)もご利用いただけます。

なお、ポリマー沈殿法で精製したエクソソームは下記の理由により、残存するポリマーの影響を受けるため、本キットでの染色はできません。

1)未反応色素の精製工程で使用するフィルトレーションチューブにポリマーがつまり、精製できなくなる可能性がございます。

2)ポリマーがエクソソームと相互作用し、エクソソームの膜電位が変わる可能性がございます。膜電位が変わると、細胞取り込みアッセイに標識エクソソームを使用する場合、細胞内動態が変化する恐れがございます。

Q

標識後の精製操作でフィルターは着色していますが、未反応の色素は分離できていますか?

A

未反応の色素はフィルターに保持されるために着色が見られますが、小社では以下の実験でフィルター上の回収物に未反応色素が含まれないことを確認しております。

<実験条件>
超遠心法で精製した ①エクソソーム(タンパク質量として10 µg)のバッファー溶液 または ②バッファーのみ を各キットのプロトコルに従って染色操作したのち、得られた回収物をHeLa細胞(1.25×104 cells)に添加して、4時間後の蛍光画像を観察しました。

結果として、バッファーのみで得られた回収物は細胞へ添加しても蛍光輝点が観察されず、回収物に未反応の色素が残っていないことを確認しました。

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①エクソソーム+バッファーをキットで処理した場合

エクソソーム タンパク質蛍光染色キット Red ExoSparkler Exosome Protein Labeling Kit-Red 同仁化学研究所

             細胞へ添加後(4h)の蛍光画像

 

②バッファーのみをキットで処理した場合

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             細胞へ添加後(4h)の蛍光画像

■ 検出条件
 Green:Ex 488 nm / Em 490 – 540 nm
 Red    :Ex 561 nm / Em 570 – 640 nm
 Deep Red:Ex 640 nm / Em 640 – 760 nm
 

Q

染色後のエクソソームは保存できますか。

A

染色後のエクソソームの保存は推奨しておりません。
エクソソームの染色後はできるだけ早く実験にご使用ください。

Q

エクソソームの取込実験で使用実績のある培地を教えてください。

A

小社では染色後のエクソソームを用いた細胞への取り込み実験において、
MEM(Minimum Essential Medium)ならびにDMEM(Dulbecco's Modified Eagle's Medium)での実績がございます。

なお、ExoSparklerシリーズは血清含有培地中での取込実験に最適化しているため、
無血清培地中で使用することはお勧めできません。

Q

1sampleあたりの染色できるエクソソーム量(タンパク質量、粒子数)を教えてください。

A

1sampleあたりのエクソソーム量(タンパク質量、粒子数)は以下の通りです。
精製済エクソソーム(超遠心法)として、タンパク質:1-10 μg/sample, 粒子数 10-100x 108 個/sample 

Q

エクソソーム以外に夾雑物が含まれる場合、夾雑物も染色されますか?

A

はい。エクソソーム以外のタンパク質等の夾雑物が含まれると、夾雑物も染色されてしまいます。
そのため、精製したエクソソームをご準備ください。
精製方法については、「推奨されるエクソソームの精製法はありますか?」をご参照ください。

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取扱条件

取扱条件
保存条件: 冷蔵 , 取扱条件: 吸湿注意
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関連製品

この製品に関連する研究では、下記の関連製品も使われています。

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    エクソソーム タンパク質蛍光染色キット Green

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    エクソソーム 膜蛍光染色キット Deep Red

    ExoSparkler Exosome Membrane Labeling Kit-Deep Red

  • エクソソーム タンパク質蛍光染色キット Red ExoSparkler Exosome Protein Labeling Kit-Red 同仁化学研究所

    エクソソーム精製キット

    ExoIsolator Exosome Isolation Kit

  • エクソソーム タンパク質蛍光染色キット Red ExoSparkler Exosome Protein Labeling Kit-Red 同仁化学研究所

    免疫染色用青色蛍光基質

    CLAMP F405-Signal Boosting

BcaBEST™ Labeling Kit酶试剂盒Takara


BcaBEST Labeling Kit
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 6046 BcaBEST Labeling Kit 40 Rxns ¥701 BcaBEST&trade; Labeling Kit BcaBEST&trade; Labeling Kit BcaBEST&trade; Labeling Kit
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■ 制品内容 (40 次量) BcaBEST&trade; Labeling Kit
Random Primer (9 mer) 80 μl
10 × Buffer 100 μl
dNTP Mixture 100 μl
(dGTP,dATP,dTTP) (各0.2 mM)  
BcaBEST DNA Polymerase (2 U/μl) 40 μl
Control DNA (λ-Hind Ⅲ Fragment) (25 ng/μl) 10 μl
   
 
■ 制品说明
BcaBEST Labeling Kit是一种在DNA上标记[α-32P]、[3H] dCTP后,可在短时间内合成DNA 探针的试剂盒。本试剂盒的设计以A.P.Feinberg和B.Vogelstion 法为基础并对其进行了改良,操作十分简便,合成后的探针比活性高。目前我们经常使用的Klenow fragment 存在反应时间长、对GC 含量高的DNA 模板或具有高级结构的DNA 摄入效率低等缺点。Bacillus caldotenax 来源的BcaBEST DNA Polymerase是一种耐热性的、高延伸性的DNA 聚合酶。BcaBEST DNA Polymerase 和随机引物 (9 mer) 在50℃~ 55℃条件下反应10 分钟,即可对具有高级结构的DNA 模板进行标记。
BcaBEST DNA Polymerase 具有优良的延伸性,与Klenow fragment相比,可以合成更长的探针,同时因BcaBEST DNA Polymerase不具备exonuclease活性,反应时间长也不会导致摄入效率下降。
 
表1. 与Random Primer DNA Labeling Kit Ver.2比较
     BcaBEST Labeling Kit  Random Primer DNA Labeling Kit Ver.2
反应时间 10分钟 10分钟
探针的比放射活性 109 dpm/μg 109 dpm/μg
模板DNA 不受高级结构、GC含量的影响  高级结构或GC含量高时可导致摄入效率下降
注:两种试剂盒使用300 bp以下的DNA模板时,可导致摄入效率下降。
 
利用随机引物进行DNA标记的原理
BcaBEST&trade; Labeling Kit
 
 

页面更新:2021-04-19 10:48:57