Thermo DreamTaq Green PCR 预混液K1082

Thermo DreamTaq Green PCR 预混液

  • 产品型号:  K1082
  • 简单描述
  • Thermo DreamTaq Green PCR 预混液内容与储存包含:•20 x 1.25 mL DreamTaq PCR 预混液 (2X),其中包括 DreamTaq DNA 聚合酶、2X DreamTaq Green 缓冲液、dNTP 和 4 mM MgCl2• 20 x 1.25 mL 无核酸酶水在 -20°C 下储存。
详细介绍

Thermo DreamTaq Green PCR 预混液

Thermo Scientific DreamTaq Green PCR 预混液 (2X) 是一种含 DreamTaq DNA 聚合酶、优化型 DreamTaq Green 缓冲液、MgCl2 和 dNTP 的即用型溶液。该反应混合物保留了DreamTaq DNA聚合酶的所有特性。其能从基因组 DNA 中稳健扩增长达 6 kb 的片段,从病毒DNA中稳健扩增长达 20 kb 的片段与传统的Taq DNA聚合酶相比,其可确保更高的灵敏度、更长的PCR产物和更高的产量。无需全面优化反应条件。

产品优势

• 将 PCR 产物直接上样到凝胶上
• 高产量和高灵敏度 PCR
• 从基因组 DNA 扩增长达 6 kb 长靶标,从病毒 DNA 扩增长达 20 kb 的长靶标
• 可进行稳健扩增,优化较少
• 包含了经过修饰的核苷酸,但未包含 dUTP

应用

• 长达 6 kb 的 DNA 片段的常规扩增
• 基因分型
• 高通量 PCR



Thermo DreamTaq Green PCR 预混液



规格

GC-Rich PCR Performance
聚合酶
DreamTaq Green DNA 聚合酶
反应速度
标准
产品线
DreamTaq™
保真度(相对于 Taq)
1X
热启动
突出端
3'-A
反应形式
SuperMix 或预混液

内容与储存

包含:
•20 x 1.25 mL DreamTaq PCR 预混液 (2X),其中包括 DreamTaq DNA 聚合酶、2X DreamTaq Green 缓冲液、dNTP 和 4 mM MgCl2
• 20 x 1.25 mL 无核酸酶水

在 -20°C 下储存。


Bio-Rad伯乐iQ SYBR Green Supermix超混液 1708882

Bio-Rad伯乐iQ SYBR Green Supermix超混液

  • 产品型号:  1708882
  • 简单描述
  • Bio-Rad伯乐iQ SYBR Green Supermix超混液12.5毫升(10 x 1.25毫升),2x qPCR混合物,含有dNTPs,iTaqTM DNA聚合酶,MgCl2,SYBR® Green I,增强剂,稳定剂,荧光素,用于500 x 50微升反应。
详细介绍

Bio-Rad伯乐iQ SYBR Green Supermix超混液

12.5毫升(10 x 1.25毫升),2x qPCR混合物,含有dNTPs,iTaqTM DNA聚合酶,MgCl2,SYBR® Green I,增强剂,稳定剂,荧光素,用于500 x 50微升反应。

在实时PCR检测系统中使用iQ SYBR® Green Supermix和荧光素,需要被动参考染料来收集井因子。

检测模板的 10 个副本

超过6个数量级的线性检测

抗体介导的热启动iTaq DNA聚合酶用于快速激活(30秒)

含有被动参考染料荧光素

Bio-Rad伯乐iQ SYBR Green Supermix超混液


美国伯乐BIO-RAD薄壁PCR管/管盖(荧光定量PCR八联管)TCS0803/TLS0801/TLS0851

伯乐BIO-RAD低位0.2ML薄壁荧光定量PCR管/管盖PCR核酸扩增

美国伯乐BIO-RAD iQ96孔PCR板2239441  MSB100l PCR反应板封膜

MLP9601

MULTIPLATE低位无裙边96PCR反应板,自然色

MSB100l

PCR反应板封膜

BC1202

O.2mL低位12联薄璧PCR管,带圆盖

TBS0201

O.2mL 8联薄璧PCR管,无盖

TBS1201

0.2mL 12联薄壁PCR管,无盖

TCS0801

0.2mL低位8联薄璧PCR管盖,圆顶

TCS0803

0.2mL低位8联薄壁PCR管盖,平顶

TCS1201

0.2mL低位12联薄壁PCR管盖,圆顶

TFI0201

0.2mL薄壁PCR管,带平盖

TLS0801

0.2mL低位8联薄壁PCR管,无盖,自然色

TLS0851

0.2mL低位8联薄壁PCR管,无盖,白色

TWI0201

0.2mL薄璧PCR管,带圆盖

2239441

iQ 96-WELL PCR PLATES iQ96PCR

伯乐iTaq Universal SYBR Green超混合液 分子生物试剂1725125

伯乐iTaq Universal SYBR Green超混合液 分子生物试剂

  • 产品型号:  1725125
  • 简单描述
  • 伯乐iTaq Universal SYBR Green超混合液iTaq™ universal SYBR® Green超混合液是一种双倍浓缩的现成反应预混液,针对所有实时PCR仪器上基于染料的定量PCR (qPCR)进行了优化。这包含抗体介导热启动iTaq DNA聚合酶、dNTP、MgCl2、SYBR® Green I 染料、强化剂、稳定剂和惰性参比染料混合物(包括 ROX 和荧光素)。
详细介绍

伯乐iTaq Universal SYBR Green超混合液

iTaq™ universal SYBR® Green超混合液是一种双倍浓缩的现成反应预混液,针对所有实时PCR仪器上基于染料的定量PCR (qPCR)进行了优化。这包含抗体介导热启动iTaq DNA聚合酶、dNTP、MgCl2、SYBR® Green I 染料、强化剂、稳定剂和惰性参比染料混合物包括 ROX 和荧光素)。

优势特点

l配方经优化可用于任何定量PCR

l获得可靠且可再现的基因表达分析结果

l扩增遗传 DNA而且实现高效率

l在快速或标准环境下跨实时仪器平台实现一致结果



伯乐iTaq Universal SYBR Green超混合液

技术参数:

–20°C 下存储

在恒温冷冻室中避光可以保存 12 个月(不建议多次解冻)

重复解冻循环

最多 10

4°C 下存储

避光可以保存 1 个月

聚合酶

iTaq DNA 聚合酶

热启动机制

抗体介导的

热启动激活

95°C30

超混合液浓度

双倍

热循环实验方案

标准或快速

仪器兼容性

已在所有的 Bio-Rad 和依赖 ROX Applied Biosystems 实时 PCR 仪器,以及 Roche LightCycler 480QIAGEN Rotor-Gene QEppendorf Mastercycler ep realplex Stratagene Mx 实时 PCR 系统验证

模板兼容性

cDNA、染色体 DNA 和质粒 DNA

检测方法

SYBR®Green

qiagen218073 凯杰miScript SYBR Green PCR Kit

qiagen218073 凯杰miScript SYBR Green PCR Kit

  • 产品型号:  
  • 简单描述
  • qiagen218073 凯杰miScript SYBR Green PCR Kit 配合miScript PCR System,使用real-time PCR方法检测miRNA灵敏并特异性定量检测miRNA利用单一cDNA定量检测多种miRNA利用同一cDNA定量检测miRNA和mRNA包含ROX染料,可用于标准化荧光结果
详细介绍

qiagen218073 凯杰miScript SYBR Green PCR Kit ,qiagen218073 凯杰miScript SYBR Green PCR Kit

miScript SYBR Green PCR Kit是miScript PCR System*的部分,用于定量检测miRNA。该试剂盒基于经验证的QuantiTect SYBR Green Kits技术。miScript II RT Kit得到的cDNA作为模板,配合miScript SYBR Green PCR Kit和PCR芯片(miRNome或Pathway-Focused miScript miRNA PCR Arrays)或适当的检测(用于miRNA或其它非编码RNA的miScript Primer Assays、用于miRNA前体的miScript Precursor Assays或用于mRNA的QuantiTect Primer Assays)进行real-time PCR。

结直肠癌的miRNA表达。

采用人结肠腺癌总RNA和结肠癌旁组织总RNA制备cDNA。使用Human miRNome miScript miRNA PCR Array进行miRNome谱分析。在腺癌组织中,有56种miRNA出现明显下调,50种明显上调(红线表示±4倍变化)。

订购信息:

Cat No./ID: 218073

miScript SYBR Green PCR Kit (200)

For 200 reactions: QuantiTect SYBR Green PCR Master Mix, miScript Universal Primer

Cat No./ID: 218075

miScript SYBR Green PCR Kit (1000)

For 1000 reactions: QuantiTect SYBR Green PCR Master Mix, miScript Universal Primer

Cat No./ID: 218076

miScript SYBR Green PCR Kit (2000)

For 2000 reactions: QuantiTect SYBR Green PCR Master Mix, miScript Universal Primer

 

qiagen QuantiTect SYBR Green PCR Kit(1000*50ul)204145

qiagen QuantiTect SYBR Green PCR Kit(1000*50ul)

  • 产品型号:  204145
  • 简单描述
  • qiagen QuantiTect SYBR Green PCR Kit(1000*50ul)QuantiTect SYBR Green PCR Kit使用SYBR Green I通过两步法real-time RT-PCR对cDNA目标序列进行高特异性的定量检测。热启动和*的实时定量PCR缓冲液确保了对cDNA目标序列高特异性和灵敏度的real-time定量检测。dNTP混合液含有dUTP,
详细介绍

qiagen QuantiTect SYBR Green PCR Kit(1000*50ul)

使用SYBR Green I进行两步法RT-PCR,用于基因表达分析

  • 整合热启动,PCR特异性高
  • 可靠定量检测低丰度转录本
  • 准确定量检测各种起始量样本
  • 提供含有或不含尿嘧啶DNA糖基化酶(UNG)两种包装
  • 无需优化反应和循环条件

qiagen QuantiTect SYBR Green PCR Kit(1000*50ul)

  • Real-Time PCR酶与试剂盒
  • qPCR16
  • 一步法RT-PCR20
  • 两步法RT-PCR29

QuantiTect SYBR® Green PCR Kits

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 qiagen QuantiTect SYBR Green PCR Kit(1000*50ul)204145

使用SYBR Green I进行两步法RT-PCR,用于基因表达分析

  • 整合热启动,PCR特异性高
  • 可靠定量检测低丰度转录本
  • 准确定量检测各种起始量样本
  • 提供含有或不含尿嘧啶DNA糖基化酶(UNG)两种包装
  • 无需优化反应和循环条件

QuantiTect SYBR Green PCR Kit使用SYBR Green I通过两步法real-time RT-PCR对cDNA目标序列进行高特异性的定量检测。热启动和*的实时定量PCR缓冲液确保了对cDNA目标序列高特异性和灵敏度的real-time定量检测。dNTP混合液含有dUTP,可选择性进行UNG处理。为便于使用,预混液可储存在2–8°C。

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qiagen QuantiTect SYBR Green PCR Kit(1000*50ul)204145

qiagen QuantiTect SYBR Green PCR Kit(1000*50ul)204145

特异性定量检测。

在Rotor-Gene 3000上使用针对人BAX的QuantiTect Primer Assay和的试剂盒分析稀释的人白细胞cDNA。熔解曲线分析中出现单峰,NTC反应呈平直曲线,说明使用QuantiTect Kit和Assay可实现高特异性定量。NTC:无模板对照。Norm. Fluoro.:标准化的荧光。

Performance

QuantiTect SYBR Green PCR Kit在宽泛的范围内符合线性规律,可实现特异性定量检测(参见”Specific quantification over a wide linear range”)。与其他聚合酶相比,HotStarTaq DNA Polymerase具有严格的热启动,进一步提高了PCR反应的特异性。*的PCR缓冲液和HotStarTaq DNA Polymerase,确保低丰度转录本的定量检测,低至5个拷贝的目标序列也可被准确检测(参见”Highly specific amplification”)。QuantiTect SYBR Green PCR Kit与QuantiTect Reverse Transcription Kit和QuantiTect Primer Assays配合使用,可获得灵敏、可靠的结果(参见”Specific and sensitive quantification”)。

QuantiTect SYBR Green PCR +UNG Kit中经特别优化的UNG溶液配合经验证的PCR预混液可有效避免PCR产物中的残留污染,并对靶序列进行可靠的定量检测(参见”High specificity in real-time PCR”)。

Principle

QuantiTect SYBR Green PCR Kit含有优化的即用型预混液,可使用SYBR Green I对cDNA靶序列进行高特异性和灵敏度的real-time定量分析。预混液中的荧光染料SYBR Green I可对很多不同的靶序列进行分析,无需合成靶标特异性标记引物。*的PCR缓冲液含有K+和NH4+,能促使特异性引物退火,获得高PCR特异性和灵敏度(参见”Specific primer annealing”)。此外,HotStarTaq DNA Polymerase具有严格的热启动,可防止非特异性产物的形成。

QuantiTect SYBR Green PCR预混液含有dUTP,可在PCR前使用尿嘧啶DNA糖基化酶 (UNG)预处理,保证之前反应残留的PCR产物会影响后续的PCR反应。

2x QuantiTect SYBR Green PCR Kit的组份
组份 特点 优势
HotStarTaq DNA Polymerase 95ºC孵育15分钟即可活化 室温下即可构建qPCR反应体系
QuantiTect SYBR Green PCR Buffer NH4+和K+的平衡组合 特异性引物退火确保PCR结果可靠
dNTP mix 含有dUTP,会部分替代dTTP,可进行UNG处理 可选择进行UNG处理,以消除之前反应残留的PCR产物
SYBR Green I dye DNA双链结合时,生成强烈的荧光信号 高度灵敏的定量检测
ROX dye 在Applied Biosystems或Agilent的PCR仪上进行荧光信号校准 可在需要ROX染料的PCR仪上进行准确的定量检测。不会干扰其他real-time PCR仪
 

Procedure

QuantiTect SYBR Green PCR Kit无需进行繁琐耗时的反应条件优化。只需简单地将引物、探针和cDNA模板加入到即用型PCR预混液中,即可开始反应(参见”Two-step RT-PCR”)。使用操作手册中的实验方案可在任何real-time PCR仪上得到快速、可靠的结果。如果需要,反应液可用尿嘧啶DNA糖基化酶(UNG)预处理,以去除之前反应残留的PCR产物。

为在两步法real-time RT-PCR中获得理想结果,我们推荐使用QuantiTect Reverse Transcription Kit合成cDNA。此试剂盒可在20分钟内快速合成cDNA,并可去除基因组DNA污染。

QuantiTect SYBR Green PCR Kit配合QuantiTect Primer Assays可在基因表达分析中获得高度特异性的结果。基因组范围、生物信息学验证的引物对覆盖所有人类、小鼠、大鼠和其他各类生物基因。QuantiTect Primer Assays可在GeneGlobe上方便地订购。

QuantiNova SYBR Green RT-PCR Kit (100) 分子生物试剂208152

QuantiNova SYBR Green RT-PCR Kit (100) 分子生物试剂

  • 产品型号:  208152
  • 简单描述
  • QuantiNova SYBR Green RT-PCR Kit (100)基因组学功能研究DNA/RNA的纯化、PCR/qPCR/dPCR、定制LNA寡核苷酸及焦磷酸测序
详细介绍

QuantiNova SYBR Green RT-PCR Kit (100)

凯杰Qiagen专业化致力于生物分子样品制备和分析研究。凭借其先进性和科学性,可实现各种生物样本内容物的高品质纯化、分析。应用于生命科学研究、检测、制药、和分子诊断等领域。产品组合包括耗材试剂盒、仪器和生物信息学相关产品等。Qiagen凯杰代理

QuantiNova SYBR Green RT-PCR Kit (100)

基因组学功能研究

DNA/RNA的纯化、PCR/qPCR/dPCR、定制LNA寡核苷酸及焦磷酸测序


蛋白组学功能研究

蛋白质纯化、镍珠、HIS标签、外泌体和CTC提取纯化、ISHNorthern印记、表观遗传学以及细胞功能分析。


高通量下一代测序(NGS)技术

DNA测序、RNA测序、单细胞测序、全基因组/转录组扩增、DNA甲基化分析、焦磷酸测序以及GeneReader NGS系统



基于SYBR Green I的一步法qRT-PCR用于基因表达分析    

    du te的两步热启动程序使得体系构建可在室温条件下进行       

    可显色的加样对照,减少加样错误      

    内质控可用于验证RT-PCR是否成功的阳性对照        

    可在几个数量级范围内对模板精确定量       

    超快速,通过实验方案,适用于任何标准或快速PCR仪

BIO-RAD(伯乐)SYBR Green 172-52001725201

BIO-RAD(伯乐)SYBR Green 172-5200

  • 产品型号:  1725201
  • 简单描述
  • BIO-RAD(伯乐)SYBR Green 172-5200英文名:SsoFast™ EvaGreen® Supermix, 500 x 20 µl rxns规格:2*1ml 5*1ml
详细介绍

BIO-RAD(伯乐)SYBR Green 172-5200

英文名:SsoFast™ EvaGreen® Supermix, 500 x 20 µl rxns

Bio-Rad introduces the SsoFast™ EvaGreen® supermix, a member of our next generation of real-time PCR supermixes using our patented Sso7d fusion protein technology, delivering a reagent that provides effective performance in a wide range of qPCR applications. The dsDNA binding protein, Sso7d, stabilizes the polymerase-template complex, increases processivity, and provides greater speed and reduced reaction times compared to conventional DNA polymerases, without affecting PCR sensitivity, efficiency, or reproducibility.

BIO-RAD(伯乐)SYBR Green 172-5200

Key Features and Benefits

  • Fast qPCR results (in less than 30 min) and high performance
  • Minimal inhibition of PCR ensures maximum efficiency, sensitivity, and reproducibility
  • Single copy detection of target genes
  • Robust discrimination and reproducibility

Applications and Uses

  • Dye-based qPCR detection
  • PCR and real-time PCR analysis
  • Nucleic acid amplification and expression profiling
  • Gene expression analysis
  • Genotyping studies
  • Genomics-related applications

 

订购信息:

Packaging Options

  • Catalog #172-5200, pkg of 2 x 1 ml tubes, 200 x 20 µl reactions, 2x real-time PCR mix, contains dNTPs, Sso7d fusion polymerase, MgCl2, EvaGreen dye, stabilizers
  • Catalog #172-5201, pkg of 5 x 1 ml tubes, 500 x 20 µl reactions, 2x real-time PCR mix, contains dNTPs, Sso7d fusion polymerase, MgCl2, EvaGreen dye, stabilizers
  • Catalog #172-5202, pkg of 10 x 1 ml tubes, 1,000 x 20 µl reactions, 2x real-time PCR mix, contains dNTPs, Sso7d fusion polymerase, MgCl2, EvaGreen dye, stabilizers
  • Catalog #172-5203, pkg of 1 x 20 ml bottle, 2,000 x 20 µl reactions, 2x real-time PCR mix, contains dNTPs, Sso7d fusion polymerase, MgCl2, EvaGreen dye, stabilizers

Biotool SYBR Green qPCR试剂盒(LOW ROX)B21704B21703 B21702

Biotool SYBR Green qPCR试剂盒(LOW ROX)B21704

  • 产品型号:  B21703 B21702
  • 简单描述
  • Biotool SYBR Green qPCR试剂盒(LOW ROX)B21704产品优势:检测精确: 包括对于低拷贝靶基因或多样性模板的定量具有高特异性和灵敏度稳定性高: 采用热启动酶的激活机制,可以在室温条件操作, 适用于自动化和高通量体系兼容性强: 对于快速和标准qPCR都具有高效性和很好的兼容性价格优势: 相对于市场价格*
详细介绍

Biotool SYBR Green qPCR试剂盒(LOW ROX)B21704

Biotool 2x SYBR Green qPCR master mix (Low ROX)是使用SYBR Green I嵌合荧光法进行定量PCR的试剂。产品是一种2×预混合试剂,包括一种特殊的热启动Taq DNA Polymerase和qPCR反应的Buffer的体系,可以有效抑制非特异扩增,从而显著提高扩增效率和检测灵敏度。由于采用热启动酶的激活机制,可以在室温条件操作,实验结果精确性高,重复性好,可信度强。此外,本产品预混了低浓度的ROX染料,使用变得更加方便,适用机型如下表所示:

Two premixed versions (High ROX and Low ROX) are provided for the following qPCR instruments:

High ROX (Cat #: B21402, B21403, B21404) Applied Biosystems 5700, 7000, 7300, 7700, 7900, 7900HT, 7900HT Fast; StepOne?, StepOne Plus?.
Low ROX (Cat #: B21702, B21703, B21704) Applied Biosystems 7500, 7500 Fast, ViiA?7; Stratagene MX4000?, MX3005P?, MX3000P?, QuantiStudio? 12K Flex.

产品应用

 基于荧光定量PCR检测
 核酸扩增和基因表达
 自动化和高通量的定量基因分型研究
 基因组学相关应用

Biotool SYBR Green qPCR试剂盒(LOW ROX)B21704

价格对比:

Biotool SYBR Green qPCR试剂盒(LOW ROX)B21704B21703 B21702质量和以上几种品牌相当甚至更稳定!值得信赖!

订购信息:

产品组成

Component Cat#: B21402 Cat#: B21403 Cat#: B21404
Biotool? 2x SYBR Green qPCR Master Mix※(Low ROX) 5 mL
(for 200 reactions with 50 μL/Rxn
for 500 reactions with 20 μL/Rxn
for 1000 reactions with 10 μL/Rxn)
25 mL
(for 1000 reactions with 50 μL/Rxn
for 2500 reactions with 20 μL/Rxn
for 5000 reactions with 10 μL/Rxn)
50 mL
(for 2000 reactions with 50 μL/Rxn
for 5000 reactions with 20 μL/Rxn
for 10000 reactions with 10 μL/Rxn)

Bio-rad iQ SYBR Green Supermix 超混液170-8882

Bio-rad iQ SYBR Green Supermix 超混液

  • 产品型号:  170-8882
  • 简单描述
  • Bio-rad iQ SYBR Green Supermix 超混液规格12.5 ml (10 x 1.25 ml), 2x qPCR mix, contains dNTPs, iTaq™ DNA polymerase, MgCl2, SYBR® Green I, enhancers, stabilizers, fluorescein, for 500 x 50 µl reactions
详细介绍

Bio-rad iQ SYBR Green Supermix 超混液

12.5 ml (10 x 1.25 ml), 2x qPCR mix, contains dNTPs, iTaq? DNA polymerase, MgCl2, SYBR? Green I, enhancers, stabilizers, fluorescein, for 500 x 50 μl reactions

Bio-rad iQ SYBR Green Supermix 超混液

Use iQ SYBR? Green supermix with fluorescein in real-time PCR detection systems requiring a passive reference dye for well factor collection.

  • Optimized buffer for reliable results
  • Contains the passive reference dye fluorescein
  • 10 x 1.25 ml (enough for 500 x 50 μl reactions)
  • Antibody-mediated hot-start iTaq DNA polymerase for rapid activation (30 sec)

Packaging Options

Number of 50 μl Reactions Supermix Volume, ml Catalog Number
   100   2 x 1.25 170-8880
   500 10 x 1.25 170-8882
1,000 20 x 1.25 170-8884
2,000 40 x 1.25 170-8884BUN
2,000   1 x 50 170-8885
1,000   5 x 5 170-8886
2,000 10 x 5 170-8887

Related Products

  • iTaq? universal probes supermix: for qPCR (simplex or duplex) on any instrument, with a blend of passive dyes including ROX
  • iQ? multiplex power mix: up to 5 targets in one real-time PCR reaction, linearity over 6 orders of magnitude of input cDNA

More Information

Learn more about the key features and specifications of the iQ? SYBR? Green supermix.

グルコース取り込み検出キットGreen Glucose Uptake Assay Kit-Green 同仁化学研究所

上海金畔生物科技有限公司代理日本同仁化学试剂盒全线产品,欢迎访问日本同仁化学dojindo官网了解更多信息。

グルコース取り込み検出キットGreen Glucose Uptake Assay Kit-Green 同仁化学研究所Glucose Uptake Assay Kit-Green

01 細胞増殖/細胞毒性測定用試薬

Glucose Uptake Assay Kit-Green

グルコース取り込み検出キットGreen Glucose Uptake Assay Kit-Green 同仁化学研究所

  • 細胞増殖/細胞毒性測定用試薬
  • 細胞機能解析
  • 細胞老化
  • 細胞内代謝
  • 蛍光色素
  • 顕微鏡
  • FCM

グルコース取り込み検出キットGreen

  • グルコース取り込み能力を高感度かつ簡便に測定できる
  • プレートリーダーを用いて測定が可能
  • 取り込まれた色素の漏れ出しを抑制し、再現性の高いデータを取得できる
  • 製品コード
    UP02  Glucose Uptake Assay Kit-Green
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
1 set ¥40,700 347-09821

使用回数の目安
1 set あたり、35 mm dish 12 枚、96-well plate 1 枚

キット内容
1 set Glucose Uptake Probe-Green
WI Solution (50×)
×1
5 ml ×1

  • グルコース取り込み検出キットGreen Glucose Uptake Assay Kit-Green 同仁化学研究所
試験成績書

SDSダウンロード

  • ご購入方法
  • お問い合わせ

マニュアル

  • 取扱説明書 日本語
    グルコース取り込み検出キットGreen Glucose Uptake Assay Kit-Green 同仁化学研究所
  • Manual English
    グルコース取り込み検出キットGreen Glucose Uptake Assay Kit-Green 同仁化学研究所

技術情報

既存法よりココが良い!4つの特徴

高輝度の色素を採用したことにより、既存法(2-NBDG)よりも高感度かつ短時間での測定が可能となりました。

参考文献

参考文献を表示する

 

No. Sample Publication
1) 細胞
(HeLa)
W. Islam, Y. Matsumoto, J. Fang, A. Harada, T. Niidome, K. Ono, H. Tsutsuki, T. Sawa, T. Imamura, K. Sakurai, N. Fukumitsu, H. Yamamoto, H. Maeda., "Polymer-conjugated glucosamine complexed with boric acid shows tumor-selective accumulation and simultaneous inhibition of glycolysis ", Biomaterials., 2021, 269, (-), 120631.
2)
(B. licheniformis; P. stutzeri)
M. Jiang, Q. Li, S. Hu, P. He, Y. Chen, D. Cai, Y. Wu, S. Chen, "Enhanced aerobic denitrification performance with Bacillus licheniformis via secreting lipopeptide biosurfactant lichenysin", 2022, doi:10.1016/j.cej.2022.134686.
3) 細胞
(分化した3T3-L1脂肪細胞)
Y. Liu, Y. Le, M. Xu, W. Wang, H. Chen, Q. Zhang, C. Wang, " Remodeling on adipocytic physiology of organophosphorus esters in mature adipocytes", Environ. Pollut.2022, doi:10.1016/j.envpol.2022.119287.

 

 

よくある質問

Q

Glucose Uptake Probe-Greenはどのグルコーストランスポーターを介して取り込まれるのでしょうか?

A

複数のトランスポーターを介して細胞内へ取り込まれていると推測されますが、各グルコーストランスポーターに対する特異性や親和性に関する詳細なデータはございません。

Q

使用実績のある細胞種を教えてください。

A

下記の細胞においてプローブの使用実績があります。

細胞
ヒト肺胞基底上皮腺癌細胞 A549
ヒト肝癌由来細胞 HepG2
前駆脂肪細胞 preadipocyte(3T3-L1)
脂肪細胞 adipocyte(3T3-L1)
悪性黒色腫 MO5
マウス筋芽細胞(未分化) C2C12
マウス筋管 C2C12
アストロサイト―マ U-251 MG
ヒト子宮頸癌由来細胞 HeLa
ルイス肺がん由来細胞 3LL
T細胞 CD4+ T cell
マウスマクロファージ様株化細胞 J774.1
線虫 N2

 

Q

阻害剤や取り込み能力を変化させる実験の実績を教えて下さい。

A

下記の細胞において阻害剤や取り込み能力を変化させる実験の実績があります。

グルコース取り込み検出キットGreen Glucose Uptake Assay Kit-Green 同仁化学研究所

Q

グルコースでの競合阻害ができない場合の対処法はありますか?

A

細胞ごとのグルコーストランスポーターの発現量や種類により、競合阻害がかからない場合があります。(例:HepG2細胞)

グルコース取り込み検出キットGreen Glucose Uptake Assay Kit-Green 同仁化学研究所

その場合には、2-deoxyglucose(2-DG)による前処理(Pretreatment)を行うことでglucose競合阻害の差が得られる
可能性があります。下記例を参考にご検討ください。

2-DG前処理とグルコースによる競合阻害を組み合わせた Glucose Uptake Probe の取り込み阻害(HepG2 細胞)

1. 細胞をディッシュまたはマイクロプレートに播種し、5% CO2 インキュベーター(37℃)内で一晩培養した。
2. Medium [DMEM (10% FBS, High-glucose) ]を除去した後、50 mmol/l 2-DG/Mediumを添加し、
   5% CO2 インキュベーター(37℃)内で二時間培養した。

3. 加温したDMEM (Glucose-free, serum-free)で2 回洗浄した。
4. 加温したDMEM (Glucose-free, serum-free)を添加し、5% CO2 インキュベーター(37℃)内で15 分間静置した。
5. 上清を除去した後、加温したProbe solutionを添加し、5% CO2 インキュベーター(37℃)内で15 分間静置した。
6. 上清を除去した後、冷却したWI Solution (1x) で2 回洗浄した。
7. 上清を除去した後、冷却したWI Solution (1x) を添加し、室温で5 分間静置した。 
8. 上清を除去した後、冷却したWI Solution (1x) を添加した。
9. 蛍光顕微鏡で観察した。

グルコース取り込み検出キットGreen Glucose Uptake Assay Kit-Green 同仁化学研究所

Q

Glucose Uptake Probe-Greenは細胞内に取り込まれた後、分解・代謝されるのでしょうか?

A

蛍光色素部位は安定な構造を有しているため、実験操作内において分解されることはございません。グルコース部位は、構造上ヘキソキナーゼによるリン酸化を受けることが考えられますが、それ以降の代謝は行われないと考えられます。

Q

Glucose Uptake Probe-Greenを生細胞へ取り込ませた後、固定することは可能でしょうか?

A

プローブが細胞内から漏出するため、染色後の細胞を固定することはできません。

Q

プレートリーダーで測定する場合、どのプレートを使用すればよいでしょうか?

A

蛍光検出のため細胞培養用のブラックマイクロプレートをご使用ください。

Q

Probe working solutionは保存可能でしょうか?

A

Probe working solutionは保存できません。Probe stock solutionは冷凍保存が一か月間可能です。

Q

蛍光シグナルの変化が観察されない場合、どうすればいいですか?

A

初期検討としてプローブ濃度(x250~x1,000)や染色時間(15分~1時間程度)をご検討下さい。

Q

バックグラウンドが高い場合、どうすればいいですか?

A

細胞に取り込まれなかったプローブが残存している可能性があります。マニュアルの洗浄操作6-7を繰り返してください。

Q

Glucose Uptake Probe-Greenに細胞毒性はありますか?

A

弊社製品のCell Counting Kit-8 (CK04)を用いてA549細胞におけるプローブの細胞毒性を調査した結果、細胞毒性は確認されませんでした。

Q

WI solutionを用いて洗浄した後、プローブはどのくらいの時間細胞内に保持されますか?

A

室温で約1時間程度は細胞内に保持されます。ただし、細胞の種類によって異なることが考えられます。

Q

グルコースの定量はできますか?

A

本製品を用いてグルコースを定量することはできません。

培地中のグルコース消費量や細胞内のグルコース量を定量したい場合は、弊社 グルコース代謝測定キット Glucose Assay Kit-WST (G264) をご使用下さい。

Q

取り込まれた色素の定量はできますか?

A

取り込まれた色素の定量を行う事はできません。本色素は、グルコース取り込み能力の増減を確認するための色素となります。

グルコース取り込み検出キットGreen Glucose Uptake Assay Kit-Green 同仁化学研究所 グルコース取り込み検出キットGreen Glucose Uptake Assay Kit-Green 同仁化学研究所

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    トータルROS検出キット

    ROS Assay Kit -Highly Sensitive DCFH-DA-

ミトコンドリア染色用色素 Green MitoBright LT Green 同仁化学研究所

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05 細胞染色用色素

MitoBright LT Green

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ミトコンドリア染色用色素 Green

  • 長時間 細胞に滞留する
  • 血清培地中で染色できる
  • 蛍光顕微鏡・フローサイトメーターに対応
  • 製品コード
    MT10  MitoBright LT Green
容 量 メーカー希望
小売価格
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和光純薬
400 μl ¥12,800 346-92061
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技術情報

MitoBright LT は、他とココが違う

長時間 細胞に滞留する

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染色後4日間継続培養したミトコンドリア

血清培地中で染色できる

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血清入り培地中で染色したミトコンドリア

蛍光顕微鏡・フローサイトメーターに対応

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各装置毎のプロトコルをご用意しています

参考文献

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文献No. 対象サンプル 装置 引用(リンク)
1 細胞 (U251) 蛍光顕微鏡 Y, Shinoda, K. Kujirai, K. Aoki, M. Morita, M. Masuda, L. Zhang, Z. Kaixin, A. Nomoto, T. Takahashi, Y. Tsuneoka, J. Akimoto, H. Kataoka, R. Rachi, A. Narumi, T. Yoshimura, S. Yano and Y. Fujiwara, ”Novel Photosensitizer β-Mannose-Conjugated Chlorin e6 as a Potent Anticancer Agent for Human Glioblastoma U251 Cells.", Pharmaceuticals., 2020, 13(10), 316.
2 酵母 (Lipomyces starkeyi) 蛍光顕微鏡 L. Duan and K. Okamoto, "Mitochondrial dynamics and degradation in the oleaginous yeast Lipomyces starkeyi", Genes Cells., 2021, 10.1111/gtc.12875 .
3 細胞 (HeLa) Plate Reader W. Islam, Y. Matsumoto, J. Fang, A. Harada, T. Niidome, K. Ono, H. Tsutsuki, T. Sawa, T. Imamura, K. Sakurai, N. Fukumitsu, H. Yamamoto, H. Maeda., "Polymer-conjugated glucosamine complexed with boric acid shows tumor-selective accumulation and simultaneous inhibition of glycolysis ", Biomaterials., 2021, 269, (-), 120631.
4 細胞 (Naive CD4+ T cells) 蛍光顕微鏡 T. Kanno, T. Nakajima, Y. Kawashima, S. Yokoyama, H. K. Asou, S. Sasamoto, K. Hayashizaki, Y. Kinjo, O. Ohara, T. Nakayama and Y. Endo, "Acsbg1-dependent mitochondrial fitness is a metabolic checkpoint for tissue Treg cell homeostasis", 2021, doi:10.1016/j.celrep.2021.109921.
5 細胞 (CT26) Flow Cytometer L. Sun, K. Morikawa, Y. Sogo and Y. Suiura, "MHY1485 enhances X-irradiation-induced apoptosis and senescence in tumor cells", 2021, doi:10.1093/jrr/rrab057.
6 細胞 (C2C12) 蛍光顕微鏡 C. Lin, P. Wu, K. Liu, Y. Fan and J. Yu, "An Environmental Friendly Tapioca Starch-Alginate Cultured Scaffold as Biomimetic Muscle Tissue", 2021, doi:10.3390/polym13172882.
7 細胞 (BMM) 蛍光顕微鏡/
Flow Cytometer
W. Ling, K. Krager, K. K. Richardson, A. D. Warren, F. Ponte, N. Aykin-Burns, S. C. Manolagas, M. Almeida and H. Kim, "Mitochondrial Sirt3 contributes to the bone loss caused by aging or estrogen deficiency", 2021, doi:10.1172/jci.insight.146728.
8 細胞 (mouse erythrocytes) 蛍光顕微鏡 M. Niikura, T. Fukutomi, J. Mitobe and F. Kobayashi, "Roles and Cellular Localization of GBP2 and NAB2 During the Blood Stage of Malaria Parasites", 2021, doi:10.3389/fcimb.2021.737457.

 

 

よくある質問

Q

MitoBright LT は DMSO溶液ですが、凍結融解を繰り返しても劣化しないのでしょうか?

A

小社では凍結融解を30回繰り返した溶液を用いて、染色が可能であったことを確認しております。

Q

MitoBright LTとMitoBrightの違いを教えてください。

A

MitoBright LTはMitoBrightの細胞内滞留性を高めた製品です。また、MitoBright LTはDMSOに溶解した製品であり、染色溶液を調製する手間がなくすぐにお使い頂けます。その他の性能の違いは下記表をご参照ください。

ミトコンドリア染色用色素 Green MitoBright LT Green 同仁化学研究所

Q

MitoBright LTシリーズで染色した後に脱分極すると、染色度合いに影響はありますか?

A

脱分極条件や細胞種などにより影響は確認されます。また、MitoBright LTの各色素で影響の度合は異なります。
参考として小社ではHeLa細胞を各MitoBright LTで染色し、下記条件にて脱分極処理を行って蛍光染色の変化を観察しました。 

ミトコンドリア染色用色素 Green MitoBright LT Green 同仁化学研究所

<染色条件>
HeLa細胞をMitoBright LT (100 μmol/l、30分インキュベーション)にて染色しHBSSにて洗浄後
FCCP処理(100μmol/l 、60分インキュベーション)しHBSSにて2回洗浄後観察した。

 

    <検出条件>
     MitoBright LT Green       :Ex 488 nm/Em 500–560 nm
     MitoBright LT Red          :Ex 561 nm/Em 560–620 nm
     MitoBright LT Deep Red  :Ex 640 nm/Em 650–700 nm

 

 

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取扱条件

規格
性状: 本品は、黄色液体である。
吸光度: 0.600~0.800(490 nm付近)
取扱条件
保存条件: 冷凍
危険・有害
シンボルマーク
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    Mito-FerroGreen

  • ミトコンドリア染色用色素 Green MitoBright LT Green 同仁化学研究所

    ミトコンドリア脂溶性過酸化物検出試薬

    MitoPeDPP

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    ミトコンドリア膜電位検出キット

    JC-1 MitoMP Detection Kit

核小体蛍光染色 Nucleolus Bright Green 同仁化学研究所

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05 細胞染色用色素

Nucleolus Bright Green

核小体蛍光染色 Nucleolus Bright Green 同仁化学研究所

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  • 細胞老化

核小体蛍光染色

  • 添加するだけで核小体をイメージング
  • 製品コード
    N511  Nucleolus Bright Green
容 量 メーカー希望
小売価格
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和光純薬
60 nmol ¥31,000 341-09341

<使用回数の目安> 35 mm dish 30枚分(色素濃度 1 μmol/lで使用した場合)

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技術情報

核小体を特定する検出原理

核小体は膜を持たない核内構造体であり、リボソーム生合成の起点となる場所です。核小体にはリボソームを構成するリボソームRNA (rRNA) が多く存在し、rRNA の転写やプロセシングなどが行われます。
また、核小体の変化は多くの細胞内イベントに関わっていると考えられており、以前よりがんの病理診断の指標として知られていましたが、近年では核小体ストレスを含め核小体とDNA 損傷、ウイルス感染、オートファジー及び細胞老化との関連性が報告されており、様々な研究分野で注目されています。

核小体蛍光染色 Nucleolus Bright Green 同仁化学研究所

 

よくある質問

Q

生細胞への染色は可能ですか?

A

本試薬は固定化細胞での染色を推奨しており、生細胞での染色はお勧めしておりません。
生細胞にて染色をご希望の方は、小社カスタマーサポートまでお問い合わせください。

核小体蛍光染色 Nucleolus Bright Green 同仁化学研究所 核小体蛍光染色 Nucleolus Bright Green 同仁化学研究所

取扱条件

規格
性状: 本品は橙赤色固体である。
純度(HPLC): 90.0% 以上
取扱条件
保存条件: 遮光
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核小体蛍光染色 Nucleolus Bright Green 同仁化学研究所

関連製品

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    Cellstain®– DAPI solution

  • 核小体蛍光染色 Nucleolus Bright Green 同仁化学研究所

    老化細胞検出キット

    Cellular Senescence Detection Kit – SPiDER-βGal

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    老化細胞検出キット(マイクロプレート用)

    Cellular Senescence Plate Assay Kit – SPiDER-βGal

脂肪滴染色蛍光色素 Lipi-Green 同仁化学研究所

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脂肪滴染色蛍光色素

  • 製品コード
    LD02  Lipi-Green
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
10 nmol ¥19,900 342-09371
本製品の測定原理と使用例を示した論文を公開!!

※ 35 mm dish: 10 ~ 50 枚分 

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技術情報

脂肪滴とその機能

脂肪滴は、トリアシルグリセロールやコレステロールエステルなどの中性脂肪が単分層のリン脂質一重膜によって取り囲まれた構造体です。脂肪滴は脂肪細胞のみに存在するわけではなく、すべての細胞に普遍的に存在しています。最近の研究から、脂肪滴はその表面に種々のタンパク質が結合し、体内の脂質代謝制御において重要な役割を担っていることが明らかになってきています1)。近年、脂肪滴とオートファジー2)、細胞老化3) といった細胞内現象との関連性も示唆されており、脂肪滴の形成・成長・融合・分解のメカニズムをより詳細に解明するツールが待ち望まれています。

脂肪滴染色蛍光色素 Lipi-Green 同仁化学研究所
1) T. Fujimoto et al., “Lipid droplets: a classic organelle with new outfits.” Histochem Cell Biol.2008130(2), 263.
2) R. Singh et al., “Autophagy regulates lipid metabolism.” Nature2009458(7242), 1131.
3) M. Yokoyama et al., “Inhibition of endothelial p53 improves metabolic abnormalities related to dietary obesity.” Cell Reports20147(5), 1691.

参考文献

参考文献を表示する

1) Y. Tatenaka, H. Kato, M. Ishiyama, K. Sasamoto, M. Shiga, H. Nishitoh and Y. Ueno, "Monitoring Lipid Droplet Dynamics in Living Cells by Using Fluorescent Probes", Biochemistry., 2019, DOI: 10.1021/acs.biochem.8b01071 .
2) M. Oka, N. Kobayashi, K. Matsumura, M. Nishio and K. Saeki, "Exogenous Cytokine-Free Differentiation of Human Pluripotent Stem Cells into Classical Brown Adipocytes", Cells., 2019, 8, (4), 373.
3) A. Matsuda, I Mitsui, Y. Shimizu, T. Kanda, A. Ohnishi, M. Miyabe and Y. Itoh, "Establishment and characterization of a canine sebaceous epithelial cell line derived from an eyelid mass", J. Vet. Med. Sci., 2020, DOI: 10.1292/jvms.20-0179.

よくある質問

Q

オレイン酸溶液の調製方法と細胞への導入方法を教えてください。

A

小社では以下の手順でオレイン酸溶液を調製して使用しました。

<オレイン酸ストック溶液>
必要な試薬
 ・BSA (ウシ血清アルブミン)
 ・オレイン酸
 ・0.1 mol/L Tris-HCl (pH 8.0)

調製手順
1) 0.1 mol/L Tris-HCl (pH 8.0)にBSAを添加し溶解する(BSA: 濃度 0.14 g/mL)。
2) 容器(ディスポーザブルの遠沈管など)にオレイン酸を入れた後、1)のBSA溶液を加えて回転振盪器を用いて混合する(オレイン酸濃度: 4 mmol/L)。*1
3) 2)の混合溶液を、ポアサイズが0.22 µmのシリンジフィルター(PTFE製)でろ過する。
4) 冷蔵保存して、都度、使用する。*2
  *1オレイン酸とBSA溶液を混合すると液体中に曇りを生じる場合がありますが、振盪を続けるとオレイン酸 とBSAの複合体が形成され曇りが消失します。
*2実験で用いる培地にオレイン酸ストック溶液を必要量を添加して、細胞へのオレイン酸導入に使用してください。
   
<細胞への導入方法>
1) 細胞を 5% CO2インキュベーター(37℃)内で、24時間培養する。
2) オレイン酸ストック溶液を添加した培地(オレイン酸の終濃度 200 μmol/L)に置換して、更に、24時間培養する。
3) その後、取扱説明書に従って、脂肪滴を蛍光染色して観察する。
Q

共染色時の推奨フィルターを教えてください。

A

ご使用の色素と励起波長に応じて、下記表を参照のうえ共染色に適したフィルターを選択ください。

励起波長
(共染色色素)
405 nm
(Hoechst, DAPI etc.)
488 nm
(FITC, GFP etc.)
561 nm
(Cy3, Rhodamine, RFP etc.)
633 nm
(Cy5, mCherry etc.)
Lipi-Blue Lipi-Blueの蛍光観察 Lipi-Blueは488 nm, 561 nmおよび633 nmでは励起されません。
そのため何れの蛍光フィルターでもご使用いただけます。
Lipi-Green Lipi-Greenは405 nmで若干励起されます。
Lipi-Greenの蛍光漏れ込みを抑えるため、400-500 nmの範囲内の蛍光フィルターをお勧めします。
Lipi-Greenの蛍光観察 Lipi-Greenは561 nmおよび633 nmでは励起されません。
そのため、何れの蛍光フィルターでもご使用いただけます。
Lipi-Red Lipi-Redは405 nmで若干励起されます。
Lipi-Redの蛍光漏れ込みを抑えるため、400-500 nmの範囲内の蛍光フィルターをお勧めします。
Lipi-Redは488 nmで若干励起されます。
Lipi-Redの蛍光漏れ込みを抑えるため、500-550 nmの範囲内の蛍光フィルターをお勧めします。
Lipi-Redの蛍光観察 Lipi-Redは633 nmで若干励起されます。
Lipi-Redの蛍光漏れ込みを抑えるため、650-700 nmの範囲内の蛍光フィルターをお勧めします。
Lipi-Deep Red Lipi-Deep Redは、405および488 nmでは励起されません。
そのため何れの蛍光フィルターでもご使用いただけます。
Lipi-Deep Redは561 nmで若干励起されます。
Lipi-Deep Red由来の蛍光漏れ込みを抑えるため、560-610 nmの範囲内の蛍光フィルターをお勧めします。
Lipi-Deep Redの蛍光観察
 
Q

蛍光が確認できない場合の対処法は?

A

蛍光が検出されない場合、幾つか要因が考えられます。
下記に示した項目を確認し、状況によっては最適化条件をご検討ください。

①励起・蛍光波長が色素の蛍光特性と合致していない。
製品HPに掲載の色素の蛍光スペクトルとお使いのフィルターを確認し、励起・蛍光波長が
合致しているかご確認ください。

②染色条件が最適ではない。
[試薬濃度]
– working solutionの濃度を下記の範囲で検討する。
Lipi-Blue, Lipi-Green:0.1-0.5 μmol/L
Lipi-Red:1-5 μmol/L

※上記条件でも蛍光が検出されない場合、更に高濃度で染色する。
Lipi-Blue, Lipi-Green:1-2 μmol/L
Lipi-Red:10-20 μmol/L

[インキュベーション時間]
– 通常は30分ですが、試薬添加後に1-2時間インキュベートする。

③固定化の条件が適していない。
細胞によっては染色前後の固定化操作により、染色されない又は感度が弱くなる場合があります。
その際は、「Q:固定化細胞への染色は可能ですか?」をご参照ください。

④脂肪滴が小さくて確認が困難。
細胞によっては脂肪滴が小さく、確認が困難な場合があります。
その際は、高倍率の顕微鏡での確認、又はオレイン酸処理した細胞によるポジティブコントロールを
評価されることをお勧めします。

Q

固定化細胞への染色は可能ですか?

A

固定化した細胞でも染色は可能です。固定化細胞の染色手順は、下記を参照ください。
※固定化処理にはパラホルムアルデヒド(PFA)をご使用ください。メタノール等のアルコール固定は、脂肪滴の構造に影響を及ぼす可能性があるため、お勧めしません。
※細胞によっては、染色前後の固定化操作により、染色されない又は感度が弱くなる場合があります。その際は、固定化条件を検討頂く必要があります。

○染色後に細胞を固定化した例 <実績細胞 : HepG2細胞>
①培地を除去し、PBSで二回洗浄した。
②プロトコル記載のWorking solution(in PBS)を細胞に入れ、37℃で15分インキュベートした。
③上清を除去し、PBSで二回洗浄した。
④4% PFA (in PBS)で5分間室温でインキュベートした。
⑤上清を除去し、PBSで洗浄後、観察。

○染色前に細胞を固定化した例 <実績細胞 : HeLa細胞>
①培地を除去し、PBSで二回洗浄した。
②4% PFA (in PBS)で5分間室温でインキュベートした。
③上清を除去し、PBSで二回洗浄した。
④プロトコル記載のWorking solution(in PBS)を細胞に入れ、37℃で30分インキュベートした。
⑤上清を除去し、PBSで洗浄後、観察。

Q

Lipi-Greenはフローサイトメーターでも使用できますか?

A

Lipi-Greenではフローサイトでは使用できませんが、Lipi-BlueやLipi-Deep Redでは測定可能です。
数値化に便利な下記のキットもご用意いたしております。

品名                                                製品コード
Lipid Droplet Assay Kit – Blue            LD05
Lipid Droplet Assay Kit – Deep Red    LD06
 

脂肪滴染色蛍光色素 Lipi-Green 同仁化学研究所 脂肪滴染色蛍光色素 Lipi-Green 同仁化学研究所

取扱条件

規格
性状: 本品は、黄橙色~橙色固体である。
純度(HPLC): 85.0% 以上
取扱条件
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脂肪滴染色蛍光色素 Lipi-Green 同仁化学研究所

関連製品

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    Liperfluo

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    脂肪滴測定キット

    Lipid Droplet Assay Kit – Blue

  • 脂肪滴染色蛍光色素 Lipi-Green 同仁化学研究所

    オートファジー(オートファゴソーム)の検出試薬

    DAPGreen – Autophagy Detection

  • 脂肪滴染色蛍光色素 Lipi-Green 同仁化学研究所

    老化細胞検出キット

    Cellular Senescence Detection Kit – SPiDER-βGal

  • 脂肪滴染色蛍光色素 Lipi-Green 同仁化学研究所

    乳酸測定キット

    Lactate Assay Kit-WST

細胞膜染色試薬 Green PlasMem Bright Green 同仁化学研究所

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細胞膜染色試薬 Green PlasMem Bright Green 同仁化学研究所PlasMem Bright Green

05 細胞染色用色素

PlasMem Bright Green

細胞膜染色試薬 Green PlasMem Bright Green 同仁化学研究所

  • 細胞染色用色素

細胞膜染色試薬 Green

  • 生細胞で使用できる、染色後に固定化できる
  • 低毒性で試薬の滞留性が高い
  • 培地に試薬を加えるだけ
  • 製品コード
    P504  PlasMem Bright Green
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
100 μl ¥26,800 349-09761

<使用回数の目安> 100 μl あたり、35 mm dish 10 枚、μ-Slide 8 well 10 枚

  • 細胞膜染色試薬 Green PlasMem Bright Green 同仁化学研究所
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    細胞膜染色試薬 Green PlasMem Bright Green 同仁化学研究所
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    細胞膜染色試薬 Green PlasMem Bright Green 同仁化学研究所

技術情報

技術情報の目次    

  • 他社製品との比較
  • 細胞膜への長期滞留性
  • 実験例:ES細胞コロニー内部の細胞膜染色
  • 実験例:神経細胞の形態と軸索内のミトコンドリア局在観察
  • 実験例:神経芽細胞(SH-SY5Y)中のミトコンドリア検出
  • 実験例:脳由来マウス神経芽細胞腫のタイムラプスイメージング
  • 実験例:エクソソームとの共染色
  • 関連製品

参考文献

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文献No. 対象サンプル 装置    引用(リンク)
1) 細胞
CML Cell (慢性骨髄性白血病)
蛍光顕微鏡 T. Hoshiko, Y. Kubota, R. Onodera, T. Higashi, M. Ykoo, K. Motoyama and S. Kimura, "Folic Acid-Appended Hydroxypropyl- -Cyclodextrin Exhibits Potent Antitumor Activity in Chronic Myeloid Leukemia Cells via Autophagic Cell Death", Cancers2021, doi:10.3390/cancers13215413.
2) 細胞
HCT116 Cell (ヒト結腸腺癌)
蛍光顕微鏡 Z. Liu, Y. Li, Y. Zhu, N. Li, W. Li, C. Shang, G. Song, S. Li, J. Cong, T. Li, Z. Xiu, J. Lu, C. Ge, X. Yang, Y. Li, L. Sun, X. Li and N. Jin, "Apoptin induces pyroptosis of colorectal cancer cells via the GSDME-dependent pathway", Int. J. Biol. Sci.2022, doi:10.7150/ijbs.64350.

よくある質問

Q

細胞の固定化はできますか?

A

4% PFAでの固定化が可能です。
ただし、蛍光が消失する原因となりますので膜透過処理を行わないでください。
 

Q

タイムラプスイメージングは可能ですか?

A

可能です。

注意点として、励起光を最低限に抑え、検出感度を上げてください。細胞への断続的な励起光の照射は、細胞へのダメージと色素の分解を引き起こす可能性がございますので、インターバルの時間などもご検討ください。

Q

Working solutionを調製する際、血清無しの培地やバッファーで希釈することは可能ですか?

A

血清無しの培地やバッファーでの希釈も可能です。

Q

染色後の細胞の洗浄にはどのようなものが使用できますか?

A

無血清培地もしくはPBS, HBSSの様なバッファーがご利用いただけます。

Q

Working solution添加後、すぐに観察が可能ですか?

A

添加直後から観察は可能です。なお、小社プロトコルでは試薬を添加して5分間インキュベートした後に観察することを推奨しています。

Q

細胞膜以外にも染まっている箇所があります。どのような理由が考えられますか?

A

細胞膜以外が染まっているように見える理由として以下の2点が考えられます。

細胞膜に滞留している試薬の一部は、時間経過とともにエンドサイトーシスによって細胞内に取り込まれます。
本製品ページ内「技術情報:細胞膜への長期滞留性」にあります、小社製品の染色後24時間後の図をご参照ください。
撮像時の焦点が底面(細胞底部の接着面)にあっていると下図Aのように観察される場合があります。
撮像時のZ軸の高さを下図Bのように調製してください。

細胞膜染色試薬 Green PlasMem Bright Green 同仁化学研究所

細胞膜染色試薬 Green PlasMem Bright Green 同仁化学研究所

Q

PlasMem Bright Greenで染色した細胞とPlasMem Bright Redで染色した細胞を共培養し、細胞を染め分けることはできますか?

A

細胞同士が接触すると色素がもう一方の細胞へ移動するため、染め分けることはできません。

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取扱条件

規格
性状: 橙色液体
含量: 試験適合
取扱条件
保存条件: 冷凍
危険・有害
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関連製品

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    ExoSparkler Exosome Membrane Labeling Kit-Deep Red

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    エンドサイトーシス検出試薬

    ECGreen-Endocytosis Detection

  • 細胞膜染色試薬 Green PlasMem Bright Green 同仁化学研究所

    ミトコンドリア染色用色素 Red

    MitoBright LT Red

  • 細胞膜染色試薬 Green PlasMem Bright Green 同仁化学研究所

    オートファジー(オートファゴソーム)の検出試薬

    DAPRed – Autophagy Detection

リソソーム染色色素 Green LysoPrime Green – High Specificity and pH Resistance 同仁化学研究所

上海金畔生物科技有限公司代理日本同仁化学试剂盒全线产品,欢迎访问日本同仁化学dojindo官网了解更多信息。

リソソーム染色色素 Green LysoPrime Green - High Specificity and pH Resistance 同仁化学研究所LysoPrime Green – High Specificity and pH Resistance

05 細胞染色用色素

LysoPrime Green – High Specificity and pH Resistance

リソソーム染色色素 Green LysoPrime Green - High Specificity and pH Resistance 同仁化学研究所

  • 細胞染色用色素
  • 細胞機能解析
  • 顕微鏡
  • FCM

リソソーム染色色素 Green

  • リソソームへの特異性が高い
  • リソソームのpH変化の影響を受けにくい
  • リソソームを一晩染色できる
  • 製品コード
    L261  LysoPrime Green – High Specificity and pH Resistance
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
10 μl ¥13,900 345-09903
10 μl x 3 ¥28,900 349-09901

<使用回数の目安> 10 μl あたり、35 mm dish 10 枚、μ-Slide 8 well 10 枚

<保存上の注意>
・長期間の保存は、-80℃以下または液体窒素中での保存が望ましい。
・本製品は冷凍(-20℃)条件下でも経時的に劣化する。
 -80℃以下での保存が難しい場合は、できるだけ早く使用すること。
・凍結・解凍の繰り返しは、劣化を促すので避けること。

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    リソソーム染色色素 Green LysoPrime Green - High Specificity and pH Resistance 同仁化学研究所
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    リソソーム染色色素 Green LysoPrime Green - High Specificity and pH Resistance 同仁化学研究所

技術情報

リソソームへの特異性が高い

既存色素とLysoPrime Greenのリソソーム局在性をリソソームマーカータンパク LAMP1-RFP発現HeLa細胞を用いて比較しました。 既存色素による染色ではリソソーム以外にも分散してバックグラウンドが高くなったのに対し、LysoPrime Greenではバックグラウンドが抑えられる結果が得られました(蛍光画像 Merged)。また、蛍光画像の範囲において蛍光強度を測定した結果、LysoPrime Greenは既存色素と比較してリソソームへの局在性が高いことが判りました(右図)。

リソソーム染色色素 Green LysoPrime Green - High Specificity and pH Resistance 同仁化学研究所

<検出条件>
Green: Ex= 488 nm, Em= 500-570 nm
Red   : Ex= 561 nm, Em= 560-620 nm
スケールバー: 20 µm

参考文献

参考文献を表示する
文献No. 対象サンプル 装置 引用(リンク)
1) 細胞
CHO Cells
共焦点顕微鏡 M. Houser, S. Mitchell, P. Sinha, B. Lundin, O. Berezovska, M. Maesako, "Endosome and Lysosome Membrane Properties Functionally Link to γ-Secretase in Live/Intact Cells", Sensors2023, doi:10.3390/s23052651.

よくある質問

Q

輸送温度と保存温度(-80℃)が異なっていたのですが性能は問題ないのでしょうか。

A

本品は冷凍(-20℃)で輸送されますが、輸送に想定される期間で製品性能に影響を与える劣化や分解はございません。お手元に届き次第、-80℃にて保存して下さい。
なお、小社では本品を室温(25℃)で一ヶ月間保存した場合でも、リソソームの染色性能に影響がないことを確認しています。

リソソーム染色色素 Green LysoPrime Green - High Specificity and pH Resistance 同仁化学研究所

※-80℃保存の純度を100%とした場合のHPLC純度推移

リソソーム染色色素 Green LysoPrime Green - High Specificity and pH Resistance 同仁化学研究所

スケールバー:10 µm

Q

染色後にリソソーム以外が染まっているように見えるのですが。

A

LysoPrime Greenがリソソーム以外の核やその他オルガネラに非特異的吸着を起こした可能性が考えられます。LysoPrime Greenの最適な濃度は細胞種や細胞密度に影響するため、Working solutionの希釈倍率について1,000-4,000 倍の範囲を目安に最適濃度の検討を行ってください。参考として、HeLa細胞を用いてWorking solutionを各希釈倍率で染色した際の蛍光染色画像を掲載します(1,000 倍希釈時に非特異的吸着が観察されました)。

リソソーム染色色素 Green LysoPrime Green - High Specificity and pH Resistance 同仁化学研究所

※スケールバー:10 µm

Q

血清含有培地で染色できますか。

A

染色できません。LysoPrime Greenは血清の影響を受けるため必ずHBSSや無血清培地等の血清を含まない溶液でworking solutionを作成してください。

Q

リソソームpHに影響を与える薬剤刺激を考えています。LysoPrime Greenの染色は、薬剤添加の前と後どちらで行えばいいですか。

A

染色後の刺激を推奨しております。LysoPrime GreenはpH依存的にリソソームに集積しますが、集積後にpHが変化してもリソソームに滞留し続けます。一方で、あらかじめ薬剤刺激等によりpHが中性付近に変化したリソソームにはLysoPrime Greenが集積できないため染色できません。そのため、染色能に影響が少ない染色後の薬剤刺激を推奨しております。

Q

落射型顕微鏡でも観察できますか?

A

落射型顕微鏡でも観察は可能ですが、細胞によっては、確認が困難な場合があります。 その際は、共焦点顕微鏡で観察されることをお勧めします。

リソソーム染色色素 Green LysoPrime Green - High Specificity and pH Resistance 同仁化学研究所 リソソーム染色色素 Green LysoPrime Green - High Specificity and pH Resistance 同仁化学研究所

取扱条件

規格
性状: 黄緑色液体
含量: 試験適合
取扱条件
保存条件: 冷凍(-80℃)
危険・有害
シンボルマーク
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関連製品

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    Mitophagy Detection Kit

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    エクソソーム 膜蛍光染色キット Deep Red

    ExoSparkler Exosome Membrane Labeling Kit-Deep Red

  • リソソーム染色色素 Green LysoPrime Green - High Specificity and pH Resistance 同仁化学研究所

    オートファジー(オートファゴソーム)の検出試薬

    DAPRed – Autophagy Detection

リソソームpH検出キット (Green/Deep Red) Lysosomal Acidic pH Detection Kit-Green/Deep Red 同仁化学研究所

上海金畔生物科技有限公司代理日本同仁化学试剂盒全线产品,欢迎访问日本同仁化学dojindo官网了解更多信息。

リソソームpH検出キット (Green/Deep Red) Lysosomal Acidic pH Detection Kit-Green/Deep Red 同仁化学研究所Lysosomal Acidic pH Detection Kit-Green/Deep Red

05 細胞染色用色素

Lysosomal Acidic pH Detection Kit-Green/Deep Red

リソソームpH検出キット (Green/Deep Red) Lysosomal Acidic pH Detection Kit-Green/Deep Red 同仁化学研究所

  • 細胞染色用色素
  • 細胞機能解析
  • 蛍光色素

リソソームpH検出キット (Green/Deep Red)

  • リソソームpHと量の変化を同一サンプルで測定することで正確なpH変化を検出できる
  • リソソーム酸性化阻害剤同梱のオールインワンキット
  • 蛍光顕微鏡・FCMで検出できる
  • 製品コード
    L268  Lysosomal Acidic pH Detection Kit-Green/Deep Red
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
1 set ¥38,000 345-10111

<使用回数の目安> 1 kit あたり、35 mm dish 10 枚、μ-Slide 8 well 10 枚、96-well Plate 2 枚

キット内容
1 set LysoPrime Deep Red
pHLys Green
Bafilomycin A1
x 1
x 1
x 1

  • リソソームpH検出キット (Green/Deep Red) Lysosomal Acidic pH Detection Kit-Green/Deep Red 同仁化学研究所
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    リソソームpH検出キット (Green/Deep Red) Lysosomal Acidic pH Detection Kit-Green/Deep Red 同仁化学研究所
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技術情報

「pH と量」 2 つの変化で見えること

既存試薬では、単一色素の蛍光輝度の変化で議論するため、リソソームの量が変動したのか、機能(pH)が変動したのかを判別することが困難でした。本キットは、リソソームへの特異性が高くpH に依存的な蛍光の変動を示すpHLys GreenとpH抵抗性のLysoPrime Deep Red[Code:L264]が含まれています。その2種類の色素を使用し、同一サンプルの リソソームpH と 量 を測定することでリソソーム機能の詳細な解析が可能になります。

リソソームpH検出キット (Green/Deep Red) Lysosomal Acidic pH Detection Kit-Green/Deep Red 同仁化学研究所
リソソームpH検出キット (Green/Deep Red) Lysosomal Acidic pH Detection Kit-Green/Deep Red 同仁化学研究所

よくある質問

Q

リソソームpHに影響を与える薬剤刺激を考えています。注意点を教えてください。

A

LysoPrime Deep Redの染色は、必ず薬剤刺激前に行ってください。キット同梱のBafilomycin A1 (リソソーム酸性化阻害剤) を用いた刺激方法は、pHLys Green working solutionにBafilomycin A1を添加し染色と刺激を同時に行うか、pHLys Green working solutionで染色後にBafilomycin A1で刺激を行ってください。

Q

血清含有培地で染色できますか。

A

LysoPrime Deep Redは血清の影響を受けるため染色できません。必ずHBSSや無血清培地等の血清を含まない溶液でworking solutionを作成してください。pHLys Greenは染色可能です。培地以外でしたらHBSSやPBSをご使用いただけます。

Q

染色条件を検討する場合、LysoPrime Deep RedおよびpHLys Greenはどれくらいの濃度で使用すればよいですか?

A

染色条件を最適化される場合は以下をご参考ください。

・LysoPrime Deep Red
 <蛍光強度が弱い場合>
  500~1,000倍希釈の間でご検討ください。

 <非特異吸着がみられる場合>
  1,000~5,000倍希釈の間でご検討ください。

・pHLys Green
 <蛍光強度が弱い場合>
  250~1,000倍希釈の間でご検討ください。

 <非特異吸着がみられる場合>
  1,000~2,000倍希釈の間でご検討ください。

リソソームpH検出キット (Green/Deep Red) Lysosomal Acidic pH Detection Kit-Green/Deep Red 同仁化学研究所 リソソームpH検出キット (Green/Deep Red) Lysosomal Acidic pH Detection Kit-Green/Deep Red 同仁化学研究所

取扱条件

取扱条件
保存条件: 冷凍,遮光 , 取扱条件: 窒素置換,吸湿注意
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リソソームpH検出キット (Green/Deep Red) Lysosomal Acidic pH Detection Kit-Green/Deep Red 同仁化学研究所

関連製品

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    リソソームpH検出キット

    Lysosomal Acidic pH Detection Kit

  • リソソームpH検出キット (Green/Deep Red) Lysosomal Acidic pH Detection Kit-Green/Deep Red 同仁化学研究所

    リソソーム染色色素 Deep Red

    LysoPrime Deep Red – High Specificity and pH Resistance

  • リソソームpH検出キット (Green/Deep Red) Lysosomal Acidic pH Detection Kit-Green/Deep Red 同仁化学研究所

    リソソームpH検出色素 Red

    pHLys Red – Lysosomal Acidic pH Detection

  • リソソームpH検出キット (Green/Deep Red) Lysosomal Acidic pH Detection Kit-Green/Deep Red 同仁化学研究所

    リソソームpH検出キット

    Lysosomal Acidic pH Detection Kit

  • リソソームpH検出キット (Green/Deep Red) Lysosomal Acidic pH Detection Kit-Green/Deep Red 同仁化学研究所

    細胞内鉄イオン測定試薬

    FerroOrange

エクソソーム 膜蛍光染色キット Green ExoSparkler Exosome Membrane Labeling Kit-Green 同仁化学研究所

上海金畔生物科技有限公司代理日本同仁化学试剂盒全线产品,欢迎访问日本同仁化学dojindo官网了解更多信息。

エクソソーム 膜蛍光染色キット Green ExoSparkler Exosome Membrane Labeling Kit-Green 同仁化学研究所ExoSparkler Exosome Membrane Labeling Kit-Green

08 ラベル化剤

ExoSparkler Exosome Membrane Labeling Kit-Green

エクソソーム 膜蛍光染色キット Green ExoSparkler Exosome Membrane Labeling Kit-Green 同仁化学研究所

  • ラベル化剤

エクソソーム 膜蛍光染色キット Green

  • 細胞外で凝集せず、より正確な動態を観察できる
  • 本キットだけで蛍光標識から精製まで可能
  • 製品コード
    EX01  ExoSparkler Exosome Membrane Labeling Kit-Green
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
5 samples ¥26,800 343-09661

精製済エクソソームを染色することができます。

精製法をお探しの場合は、ExoIsolator Exosome Isolation Kitもご参考ください。
キット内容
5 samples ・Mem Dye-Green
・Filtration tube
×1
×5

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  • 取扱説明書 日本語
    エクソソーム 膜蛍光染色キット Green ExoSparkler Exosome Membrane Labeling Kit-Green 同仁化学研究所
  • Manual English
    エクソソーム 膜蛍光染色キット Green ExoSparkler Exosome Membrane Labeling Kit-Green 同仁化学研究所

技術情報

より正確にエクソソームの動態を観察する

エクソソームの膜を染色するためによく用いられている膜染色色素(S 社 製品P)には、色素自体が凝集を起こし、エクソソームに由来しない蛍光起点が生じたり、エクソソームの性質変化やバックグラウンドの上昇などを招く課題が挙げられています1), 2)
ExoSparkler シリーズで用いている色素(Mem Dye-Green, Red, Deep Red)は凝集を起こさず、エクソソームの性質にもほとんど影響を及ぼさないため、より正確にエクソソームの動態を観察することが可能です。

参考文献
1) Mehdi Dehghani et al., “Exosome labeling by lipophilic dye PKH26 results in significant increase in vesicle size”.bioRxiv., 2019, doi:10.1101/532028.
2) Pužar Dominkuš P et al., “PKH26 labeling of extracellular vesicles: Characterization and cellular internalization of contaminating PKH26 nanoparticles.” Biochim Biophys Acta Biomembr., 2018, doi: 10.1016/j.bbamem.2018.03.013.

技術や使用製品に関する補足

技術情報のデータは京都大学大学院工学研究科高分子化学専攻 秋吉一成先生のご支援のもと取得いたしました。

  • エクソソーム 膜蛍光染色キット Green ExoSparkler Exosome Membrane Labeling Kit-Green 同仁化学研究所

    細胞外小胞、エクソソームの特性と機能
    小社季刊冊子「DojinNews vol.169」に執筆いただいた記事を掲載しています。

参考文献

参考文献を表示する

 

文献No. 対象サンプル 装置    引用(リンク)
1) GMSC由来
マクロファージ取り込み
蛍光顕微鏡 R.Kawata, S.Oda, Y. Koya, H.Kajiyama, T. Yokoi, "Macrophage-derived extracellular vesicles regulate concanavalin A-induced hepatitis by suppressing macrophage cytokine production", Toxicology, 2020, doi:10.1016/j.tox.2020.152544.
2) HEK293s由来
HeLa取り込み
蛍光顕微鏡 Y. Nakao, T. Fukuda, Q. Zhang, T. Sanui, T. Shinjo, X. Kou, C. Chen, D. Liu, Y. Watanabe, C. Hayashi, H. Yamato, K. Yotsumoto, U. Tanaka, T. Taketomi, T. Uchiumi, A. D. Le, S. Shi, F. Nishiura, "Exosomes from TNF-α-treated human gingiva-derived MSCs enhance M2 macrophage polarization and inhibit periodontal bone loss", Acta Biomater., 2020, doi:10.1016/j.actbio.2020.12.046.
3) HEK293.2sus由来
磁性ナノゲルと融合
フローサイトメーター R. Mizuta, Y. Sasaki, k. Katagiri, S. Sawada and K. Akiyoshi, "Reversible conjugation of biomembrane vesicles with magnetic nanoparticles using a self-assembled nanogel interface: single particle analysis using imaging flow cytometry", Nanoscale Adv.2022, doi:10.1039/d1na00834j.
4) マウス T細胞由来
マウス肝臓、腎臓、足細胞取り込み
蛍光顕微鏡 H. Chuang, M. Chen, Y. Chen, Y. Ciou, C. Hsueh, C. Tsai and T. Tan, "Induction of Interferon-γ and Tissue Inflammation by Overexpression of Eosinophil Cationic Protein in T Cells and Exosomes", Arthritis Rheumatol.2021, doi:10.1002/art.41920.
5) HeLa; MSC(mesenchymal stem cells)細胞由来 蛍光顕微鏡 N. Kamei, H. Nishimura, A. Matsumoto, R. Asano, K. Muranaka, M. Fujita, M. Takeda, H. Hashimoto, M. Takeda-Morishita, "Comparative study of commercial protocols for high recovery of high-purity mesenchymal stem cell-derived extracellular vesicle isolation and their efficient labeling with fluorescent dyes,", 2021, doi:10.1016/j.nano.2021.102396.
6) Lck-BPI Tg T cells-由来 蛍光顕微鏡 H. Chuang, M. Chen, Y. Chen, H. Yang, Y. Ciou, C. Hsueh, C. Tsai, T. Tan, "BPI overexpression suppresses Treg differentiation and induces exosome-mediated inflammation in systemic lupus erythematosus", 2021, doi:10.7150/thno.63743.
7) Colorectal Cancer細胞由来 蛍光顕微鏡 H. Takakura, T. Nakao, T. Narita, M. Horinaka, Y. Nakao-Ise, T. Yamamoto, Y. Iizumi, M. Watanabe, Y. Sowa, K. Oda, N. Mori, T. Sakai, and M. Mutoh, "Citrus limon L.-Derived Nanovesicles Show an Inhibitory Effect on Cell Growth in p53-Inactivated Colorectal Cancer Cells via the Macropinocytosis Pathway ", 2022, doi:10.3390/biomedicines10061352.

よくある質問

Q

推奨されるエクソソームの精製法はありますか?

A

超遠心法での精製を推奨しておりますが、免疫沈降法や磁気ビーズで精製したエクソソームの染色実績もございます。
また、超遠心法と同等の回収実績のある、ExoIsolator Exosome Isolation Kit(EX10)もご利用いただけます。

なお、ポリマー沈殿法で精製したエクソソームは下記の理由により、残存するポリマーの影響を受けるため、本キットでの染色はできません。

1)未反応色素の精製工程で使用するフィルトレーションチューブにポリマーがつまり、精製できなくなる可能性がございます。

2)ポリマーがエクソソームと相互作用し、エクソソームの膜電位が変わる可能性がございます。膜電位が変わると、細胞取り込みアッセイに標識エクソソームを使用する場合、細胞内動態が変化する恐れがございます。

Q

標識後の精製操作でフィルターは着色していますが、未反応の色素は分離できていますか?

A

未反応の色素はフィルターに保持されるために着色が見られますが、小社では以下の実験でフィルター上の回収物に未反応色素が含まれないことを確認しております。

 

<実験条件>
超遠心法で精製した ①エクソソーム(タンパク質量として10µg)のバッファー溶液 または ②バッファーのみ を各キットのプロトコルに従って染色操作したのち、得られた回収物をHeLa細胞(1.25×104 cells)に添加して、4時間後の蛍光画像を観察しました。

結果として、バッファーのみで得られた回収物は細胞へ添加しても蛍光輝点が観察されず、回収物に未反応の色素が残っていないことを確認しました。

エクソソーム 膜蛍光染色キット Green ExoSparkler Exosome Membrane Labeling Kit-Green 同仁化学研究所

 

①エクソソーム+バッファーをキットで処理した場合

エクソソーム 膜蛍光染色キット Green ExoSparkler Exosome Membrane Labeling Kit-Green 同仁化学研究所

                  細胞へ添加後(4h)の蛍光画像

 

②バッファーのみをキットで処理した場合

エクソソーム 膜蛍光染色キット Green ExoSparkler Exosome Membrane Labeling Kit-Green 同仁化学研究所

                   細胞へ添加後(4h)の蛍光画像

 検出条件

Green:Ex 488 nm / Em 490 – 540 nm
Red    :Ex 561 nm / Em 570 – 640 nm
Deep Red:Ex 640 nm / Em 640 – 760 nm

Q

染色後のエクソソームは保存できますか?

A

染色後のエクソソームの保存は推奨しておりません。
エクソソームの染色後はできるだけ早く実験にご使用ください。

Q

エクソソームの取込実験で使用実績のある培地を教えてください。

A

小社では染色後のエクソソームを用いた細胞への取り込み実験において、
MEM(Minimum Essential Medium)ならびにDMEM(Dulbecco's Modified Eagle's Medium)での実績がございます。

なお、ExoSparklerシリーズは血清含有培地中での取込実験に最適化しているため、
無血清培地中で使用することはお勧めできません。

Q

1sampleあたりの染色できるエクソソーム量(タンパク質量、粒子数)を教えてください。

A

1sampleあたりのエクソソーム量(タンパク質量、粒子数)は以下の通りです。
精製済エクソソーム(超遠心法)として、タンパク質:1-10 μg/sample, 粒子数 10-100x 108 個/sample  
 

Q

エクソソーム以外に夾雑物が含まれる場合、夾雑物も染色されますか?

A

はい。エクソソームにタンパク質やポリマー*等の夾雑物が含まれると、夾雑物も染色されてしまいます。
そのため、精製したエクソソームをご準備ください。
  *精製方法によっては、ポリマーが残存する場合があります。

精製方法については、「推奨されるエクソソームの精製法はありますか?」をご参照ください。
 

エクソソーム 膜蛍光染色キット Green ExoSparkler Exosome Membrane Labeling Kit-Green 同仁化学研究所 エクソソーム 膜蛍光染色キット Green ExoSparkler Exosome Membrane Labeling Kit-Green 同仁化学研究所

取扱条件

取扱条件
保存条件: 冷蔵,遮光
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エクソソーム 膜蛍光染色キット Green ExoSparkler Exosome Membrane Labeling Kit-Green 同仁化学研究所

関連製品

この製品に関連する研究では、下記の関連製品も使われています。

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    エクソソーム タンパク質蛍光染色キット Green

    ExoSparkler Exosome Protein Labeling Kit-Green

  • エクソソーム 膜蛍光染色キット Green ExoSparkler Exosome Membrane Labeling Kit-Green 同仁化学研究所

    エクソソーム 膜蛍光染色キット Red

    ExoSparkler Exosome Membrane Labeling Kit-Red

エクソソーム タンパク質蛍光染色キット Green ExoSparkler Exosome Protein Labeling Kit-Green 同仁化学研究所

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エクソソーム タンパク質蛍光染色キット Green ExoSparkler Exosome Protein Labeling Kit-Green 同仁化学研究所ExoSparkler Exosome Protein Labeling Kit-Green

08 ラベル化剤

ExoSparkler Exosome Protein Labeling Kit-Green

エクソソーム タンパク質蛍光染色キット Green ExoSparkler Exosome Protein Labeling Kit-Green 同仁化学研究所

  • ラベル化剤

エクソソーム タンパク質蛍光染色キット Green

  • 細胞外で凝集せず、より正確な動態を観察できる
  • 本キットだけで蛍光標識から精製まで可能
  • 製品コード
    EX04  ExoSparkler Exosome Protein Labeling Kit-Green
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
5 samples ¥21,400 344-09691

精製済エクソソームを染色することができます。

精製法をお探しの場合は、ExoIsolator Exosome Isolation Kitもご参考ください。
キット内容
5 samples ・Protein Dye-Green
・Filtration tube
×1
×5

  • エクソソーム タンパク質蛍光染色キット Green ExoSparkler Exosome Protein Labeling Kit-Green 同仁化学研究所
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技術情報

このキットだけで蛍光標識から精製まで

ExoSparkler シリーズは、エクソソームの標識に最適化したプロトコルに加え、蛍光標識後の未反応色素を除去できるフィルトレーションチューブを同梱しているため、簡単な操作で蛍光標識エクソソームを調製できます。

エクソソーム タンパク質蛍光染色キット Green ExoSparkler Exosome Protein Labeling Kit-Green 同仁化学研究所

 

精製手法(未反応色素の除去)の比較

ExoSparklarシリーズで未反応色素の除去に使用しているフィルトレーションチューブは、同用途で従来から用いられているゲルろ過法と比較して、高い回収率でエクソソームを精製することが可能です。

  回収率
フィルトレーションチューブ(本キット) 50% 程度
ゲルろ過法 10% 程度
※ 小社での実施例:精製前後のエクソソーム粒子数をNTA(ナノ粒子トラッキング解析)で比較

フィルトレーションチューブを用いた精製の有効性確認の蛍光画像をよくある質問:標識後の精製操作でフィルターは着色していますが、未反応の色素は分離できていますか?に掲載しています。

技術や使用製品に関する補足

技術情報のデータは京都大学大学院工学研究科高分子化学専攻 秋吉一成先生のご支援のもと取得いたしました。

  • エクソソーム タンパク質蛍光染色キット Green ExoSparkler Exosome Protein Labeling Kit-Green 同仁化学研究所

    細胞外小胞、エクソソームの特性と機能
    小社季刊冊子「DojinNews vol.169」に執筆いただいた記事を掲載しています。

よくある質問

Q

推奨されるエクソソームの精製法はありますか?

A

超遠心法での精製を推奨しておりますが、免疫沈降法や磁気ビーズで精製したエクソソームの染色実績もございます。
また、超遠心法と同等の回収実績のある、ExoIsolator Exosome Isolation Kit(EX10)もご利用いただけます。

なお、ポリマー沈殿法で精製したエクソソームは下記の理由により、残存するポリマーの影響を受けるため、本キットでの染色はできません。

1)未反応色素の精製工程で使用するフィルトレーションチューブにポリマーがつまり、精製できなくなる可能性がございます。

2)ポリマーがエクソソームと相互作用し、エクソソームの膜電位が変わる可能性がございます。膜電位が変わると、細胞取り込みアッセイに標識エクソソームを使用する場合、細胞内動態が変化する恐れがございます。

Q

標識後の精製操作でフィルターは着色していますが、未反応の色素は分離できていますか?

A

未反応の色素はフィルターに保持されるために着色が見られますが、小社では以下の実験でフィルター上の回収物に未反応色素が含まれないことを確認しております。

<実験条件>
超遠心法で精製した ①エクソソーム(タンパク質量として10 µg)のバッファー溶液 または ②バッファーのみ を各キットのプロトコルに従って染色操作したのち、得られた回収物をHeLa細胞(1.25×104 cells)に添加して、4時間後の蛍光画像を観察しました。

結果として、バッファーのみで得られた回収物は細胞へ添加しても蛍光輝点が観察されず、回収物に未反応の色素が残っていないことを確認しました。
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①エクソソーム+バッファーをキットで処理した場合

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             細胞へ添加後(4h)の蛍光画像

 

②バッファーのみをキットで処理した場合

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             細胞へ添加後(4h)の蛍光画像

■ 検出条件
 Green:Ex 488 nm / Em 490 – 540 nm
 Red    :Ex 561 nm / Em 570 – 640 nm
 Deep Red:Ex 640 nm / Em 640 – 760 nm

Q

染色後のエクソソームは保存できますか。

A

染色後のエクソソームの保存は推奨しておりません。
エクソソームの染色後はできるだけ早く実験にご使用ください。

Q

エクソソームの取込実験で使用実績のある培地を教えてください。

A

小社では染色後のエクソソームを用いた細胞への取り込み実験において、
MEM(Minimum Essential Medium)ならびにDMEM(Dulbecco's Modified Eagle's Medium)での実績がございます。

なお、ExoSparklerシリーズは血清含有培地中での取込実験に最適化しているため、
無血清培地中で使用することはお勧めできません。

Q

1sampleあたりの染色できるエクソソーム量(タンパク質量、粒子数)を教えてください。

A

1sampleあたりのエクソソーム量(タンパク質量、粒子数)は以下の通りです。
精製済エクソソーム(超遠心法)として、タンパク質:1-10 μg/sample, 粒子数 10-100x 108 個/sample  

Q

エクソソーム以外に夾雑物が含まれる場合、夾雑物も染色されますか?

A

はい。エクソソーム以外のタンパク質等の夾雑物が含まれると、夾雑物も染色されてしまいます。
そのため、精製したエクソソームをご準備ください。
精製方法については、「推奨されるエクソソームの精製法はありますか?」をご参照ください。

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取扱条件

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QuantiFast SYBR Green PCR Kitqiagen204054

QuantiFast SYBR Green PCR Kit

  • 产品型号:  qiagen204054
  • 简单描述
  • QuantiFast SYBR Green PCR Kit试剂盒通过正在申请Q-Bond技术实现快速real-time PCR。不仅通过快速PCR仪上快速升降温缩短循环时间,在普通PCR仪上也可快速循环。提供即用型预混液,包含SYBR Green I 染料、ROX参比染料 (浓度优化)、HotStarTaq Plus DNA Polymerase (严谨的热启动酶确保高特异性PCR和含有
详细介绍

QuantiFast SYBR Green PCR Kit 

  • 快速分析,节约至60%的时间
  • 含单细胞灵敏度极热启动PCR酶HotStarTaq
  • 通用的操作流程用于标准和快速定量PCR仪
  • 可特异性检测低拷贝的模板,准确检测各种起始量的模板
  • 优化的即用型预混液用于快速循环

QuantiFast SYBR Green PCR Kit 

原理

缩减多至60%的PCR运行时间(见图“明显缩减时间”),让您可更快获取结果。您也可以大幅度提高样本通量,或通过与其他用户共用PCR仪。试剂盒提供*的PCR缓冲夜,包含正在申请的添加剂Q-Bond,可缩减变性、退化和延伸时间(见图 “引物快速退火”)。缓冲夜也包含HotStarTaq Plus DNA Polymerase,激活该聚合酶在95°C 的条件下只需5分钟。可快速获取PCR结果的同时丝毫不影响PCR的表现(见图“在Applied Biosystems 7500 Fast System工作站上更快获取结果,PCR表现有保障”)。

应用可获得高特异、高灵敏的结果,胜过快速循环模式下的其他 real-time PCR 试剂盒(见图 “iCycler iQ上灵敏的两步法RT-PCR”)。快速PCR缓冲夜中KCl和NH4Cl 的平衡组合有利于特异引物的退火,支持高特异性的PCR。另外,HotStarTaq Plus DNA Polymerase 确保起始严谨,避免形成非特异性的产物。

确保对模板得多个稀释倍数可精确定量分析靶分子。即使是差异较小的低拷贝也可有明显的差异(见图 “在Mastercycler ep realplex上小差异拷贝的分辨率”)。

过程

是即用型预混液,无需优化反应和循环条件。操作手册提供可用于所有real-time PCR仪的操作程序。

2x QuantiFast SYBR Green PCR 预混液组分

组分 特性和优点

HotStarTaq Plus DNA Polymerase

95ºC 下激活只需5分钟,确保快速严谨的启动。

QuantiFast SYBR Green PCR Buffer

*的缓冲夜成分,包含Q-Bond,缩减变性、退火和延伸时间,离子平衡有利于特异性引物延伸。

dNTP Mix

dATP、dCTP、 dGTP和dTTP混合物

SYBR Green I dye

结合双链DNA,产生强烈的荧光信号。无需设计序列特异性探针,可定量分析任何靶分子。

ROX dye

Applied Biosystems与任意Stratagene仪器上荧光信号标准化 。在任何real-time R仪上不干扰PCR反应。

2x QuantiFast SYBR Green PCR 预混液可储存在2-8ºC,无需解冻反应组分,可更快构建反应体系。

 

应用

适用于任何real-time PCR仪,包括Applied Biosystems、Bio-Rad、Cepheid,、Corbett、Eppendorf、 Roche和Stratagene的仪器。

为了获得*的real-time两步法RT-PCR结果,我们推荐使用 QuantiTect Reverse Transcription Kit合成cDNA。该试剂盒可在20分钟内快速合成cDNA,同时去除基因组。除了QuantiTect Reverse Transcription Kit 还可应用FastLane Cell cDNA Kit,该试剂盒可直接从培养细菌中制备cDNA,没有纯化RNA。如果只有少量的RNA模板,我们建议应用QuantiTect Whole Transcriptome Kit制备cDNA存档,该试剂盒可均一扩增靶分子,确保可靠的基因表达分析。

对于两步法real-time RT-PCR我们也推荐QuantiTect Primer Assays ,这是全基因组的,多样的,经验证的引物系列。

对于普通PCR,我们推荐QIAGEN Fast Cycling PCR Kit,该试剂盒基于与QuantiFast Kits同样的技术,可在任何PCR仪上实现快速、特异性PCR 。

Images

QuantiFast SYBR Green PCR Kitqiagen204054 大幅度缩减PCR运行时间 QuantiFast SYBR Green PCR Kitqiagen204054 引物快速退火 QuantiFast SYBR Green PCR Kitqiagen204054 在Applied Biosystems 7500 Fast System工作站上更快获取结果,PCR表现有保障 QuantiFast SYBR Green PCR Kitqiagen204054 iCycler iQ上灵敏的两步法RT-PCR QuantiFast SYBR Green PCR Kitqiagen204054 在Mastercycler ep realplex上小差异拷贝的分辨率 QuantiFast SYBR Green PCR Kitqiagen204054 Specific primer annealing.

 

日本同仁化学Nucleolus Bright Green试剂货号:N511 核仁荧光染色试剂-绿色- DOJINDO

上海金畔生物科技有限公司代理日本同仁化学 DOJINDO代理商全线产品,欢迎访问官网了解更多信息

Nucleolus Bright Green试剂货号:N511
核仁荧光染色试剂-绿色
Nucleolus Bright Green
商品信息
储存条件:避光,在冷暗处保存
运输条件:室温

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选择规格:
60 nmol

现货

 
衰老

Nucleolus Bright Green试剂货号:N511 核仁荧光染色试剂-绿色

Nucleolus Bright Green试剂货号:N511 核仁荧光染色试剂-绿色

活动进行中
产品概述
原理
核仁染色试剂的比较
产品特点
衰老细胞的评价例
产品实验例
核仁数分析
荧光特性
常见问题Q&A

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DNA损伤丨从实验思路到检测指标  PDF下

 

指标 关联指标干货参(点击查看) 检测指标(点击查看)
DNA损伤检测
γ-H2AX DNA损伤检测试剂盒- γH2AX(绿、红、深红)
AP位点 DNA损伤检测试剂盒(AP位点法)
核小体 Nucleolus Bright (绿、红)
细胞周期 Cell Cycle Assay Kit – PI/RNase Staining
DNA损伤关联指标 氧化损伤 DMPO
BMPO
TEMP
SOD Assay Kit
DPPH Antioxidant Assay Kit
凋亡 Annexin V, FITC Apoptosis Detection Kit/PI
Annexin V, 633 Apoptosis Detection Kit/PI
Cell Cycle Assay Solution Deep Red/Blue
JC-1 MitoMP Detection Kit
Caspase-3 Assay Kit
铁死亡 Lipid Peroxidation Probe -BDP 581/591 C11
Liperfluo
GSSG/GSH Quantification Kit II
Iron Assay Kit
Mito-FerroGreen
衰老 Cellular Senescence Detection Kit – SPiDER-βGal
Cellular Senescence Plate Assay Kit – SPiDER-βGal
SPiDER-βGal
自噬 Mitophagy Detection Kit
DALGreen – Autophagy Detection
DAPGreen – Autophagy Detection
DAPRed – Autophagy Detection

*点击即可跳转至详情页

产品概述

Nucleolus Bright是一种选择性与RNA结合并产生荧光的小分子荧光染料,只需在固定细胞中加入试剂即可成像。虽然Nucleolus Bright也会和在核仁以外存在的RNA反应,不过核仁作为细胞内RNA最多存在rRNA的产生场所,荧光尤为强烈。

成像时,通过与核染色试剂DAPI[产品货号:D523]共染色,可以更清楚地确认核仁。有关详细信息,请参阅使用说明书中的实验例。

原理

核仁是不带膜的核内结构体,也是核糖体生物合成的起点。核仁中存在许多核糖体RNA(rRNA),并且是 rRNA基因转录以及合成加工的场所。由于蛋白质合成的早期阶段在核仁中进行,因此核仁的变化被认为与多种细胞活动有关。核仁的形态变化已被公认为判断癌症的指标之一,近年来也有一系列的报道论述了核仁应激与DNA损伤、自噬、病毒感染和细胞衰老的关系,因此核仁在这些方面的研究也受到越来越多的关注。

Nucleolus Bright Green试剂货号:N511 核仁荧光染色试剂-绿色

核仁染色试剂的比较

最大激发波长 最大发射波长 MeOH固定后染色 PFA固定后染色 活细胞染色
Nucleolus Bright Green 513 nm 538 nm △※
Nucleolus Bright Red 537 nm 605 nm △※

※希望通过活细胞进行评价时,请咨询公司技术支持。

产品特点

特点1:清晰地观察核仁

用4% PFA或MeOH固定HeLa细胞后,用PBS洗净后用1% Triton X-100进行破膜处理,加入Nucleolus Bright Green或Red和核染色

试剂 (DAPI) 并培养,然后用共聚焦荧光显微镜观察。

结果证实DAPI染色的细胞核内 (蓝色)有数个核仁存在。

Nucleolus Bright Green试剂货号:N511 核仁荧光染色试剂-绿色

<染色条件>

・PFA 固定

细胞在4%PFA室温下浸泡5 min,再用Triton X-100在室温下浸泡20 min,加入各种荧光探针后培养5 min。

・MeOH 固定

细胞在冷的MeOH中浸泡1 min,再用Triton X-100在室温下浸泡20 min,加入各种荧光探针后培养5 min。

 

<检测条件>

Nucleolus Bright Green Ex: 488 nm / Em: 500-600 nm

Nucleolus Bright Red Ex: 561 nm / Em: 565-650 nm

DAPI Ex: 405 nm / Em: 450-495 nm

特点2:核仁定位

用4%PFA固定WI-38细胞后,用抗Fibrillarin一抗和荧光标记的二抗免疫染色,并加入Nucleolus Bright Green或Red和核染色试剂

(DAPI) ,培养后,用落射式荧光显微镜 (Keyence,BZ-X710) 观察。

结果证实Nucleolus Bright Green和Nucleolus Bright Red与核仁标记物(Dense Fibrillar Component)的染色部位一致。

Nucleolus Bright Green试剂货号:N511 核仁荧光染色试剂-绿色

<检测条件>

Nucleolus Bright Green:Ex: 450-490 nm / Em: 500-550 nm

Nucleolus Bright Red:Ex: 533-548 nm / Em: 570-640 nm

DAPI:Ex: 340-380 nm / Em: 435-485 nm

Anti-Fibrillarin 抗体:Ex: 590-650 nm / Em: 668-733 nm

特点:3:与核仁相关的领域的报告示例

相关领域 概要 文献
评论(衰老)    关于各种参与细胞功能的核仁,
包括与癌症和早老症的已知关系、
特别是关于衰老的核仁功能。
V. Tiku, A.   Antebi, “Nucleolar Function in Lifespan Regulation.”, Trends Cell Biol.,   2018, 28(8), 662.
细胞衰老    由于与抑制衰老有关的蛋白质缺损、
核仁数量的减少和核仁总面积的加。
H. Tanaka,   S. Takebayashi, A. Sakamoto, T. Igata, Y. Nakatsu, N. Saitoh, S. Hino, M.   Nakao, “The SETD8/PR-Set7 Methyltransferase Functions as a Barrier to Prevent   Senescence-Associated Metabolic Remodeling.”, Cell Rep.,2017, 18(9), 2148.
细胞衰老     由于rRNA加工因子的枯竭导致
核仁肥大化,
同时SA-βGal和p16表达增加。
K.   Nishimura, T. Kumazawa, T. Kuroda, N. Katagiri, M. Tsuchiya, N. Goto, R.   Furumai, A. Murayama, J. Yanagisawa, K. Kimura, “Perturbation of ribosome   biogenesis drives cells into senescence through 5S RNP-mediated p53   activation.”, Cell Rep., 2015, 10(8), 1310.
自噬    通过抑制RNA聚合酶的转录,
确认自噬的诱导和核仁的形状变化。
N. Katagiri,   T. Kuroda, H. Kishimoto, Y. Hayashi, T. Kumazawa and K. Kimura, “The   nucleolar protein nucleophosmin is essential for autophagy induced by   inhibiting Pol I transcription”, Scientific Reports, 2015, 8903, DOI:   10.1038/srep08903.

衰老细胞的评价例

将不同传代数的WI-38细胞用4% PFA固定后,用PBS洗净并用1% Triton X-100进行破膜处理,然后加入Nucleolus Bright Green或

Red和核染色试剂 (DAPI),培养后用共聚焦荧光显微镜观察。

结果证实第3代细胞 (P3) 中的一个细胞核内存在多个核仁,而第18代细胞 (P18) 中核仁变大并成为一体。

Nucleolus Bright Green试剂货号:N511 核仁荧光染色试剂-绿色

<染色条件>

细胞在4% PFA室温下浸泡5 min,再用Triton X-100在室温下浸泡20 min,加入各种荧光探针后培养5 min。

<检测条件>

Nucleolus Bright Green Ex: 488 nm / Em: 500-600 nm

Nucleolus Bright Red Ex: 561 nm / Em: 565-650 nm

DAPI Ex: 405 nm / Em: 450-495 nm

产品实验例

实验例:通过共聚焦定量细胞成像仪进行定量分析

使用共聚焦定量细胞成像仪 (横河电机株式会社 CQ1)对衰老细胞的定量分析。

将传代数不同的WI-38细胞固定后,分别用Nucleolus Bright Green和DAPI染色核仁,并用共聚焦定量细胞成像仪进行定量分析

通过图像对核仁进行分析

用共聚焦定量细胞成像仪在405nm处拍摄细胞核图像,在488nm处拍摄核仁体像,通过分析软件Cell Pathfinder识别各个细胞核内的核仁,并计算出其数量。

Nucleolus Bright Green试剂货号:N511 核仁荧光染色试剂-绿色

横河电机CQ1拍摄条件

使用板:96孔板

物镜:40倍

激发波长:

405nm(DAPI):蓝色

488nm(Nucleolus Bright Green):绿色

视野:16视野

<解析图像>

蓝框线:核

红框线:核仁

核仁数分析

在传代数较多的细胞中,得到了一个细胞核中只有一个核仁的比例增加,而两个及以上核仁的比例减少的结果。该结果与下述论文中衰老的WI-38细胞中核仁数的减少(论文中的Table3)*1,以及通过SETD8敲低诱导衰老的细胞核仁的变化(论文中的Figure4D)*2得到了相同的结果。

Nucleolus Bright Green试剂货号:N511 核仁荧光染色试剂-绿色

*1 P. M. Bemiller, L. Lee, “Nucleolar changes in senescing WI-38 cells”, Mech. Ageing Dev., 1978, 8 , 417.

*2 H. Tanaka, S. Takebayashi, A. Sakamoto, T. Igata, Y. Nakatsu, N. Saitoh, S. Hino, M. Nakao, “The SETD8/PR-Set7 Methyltransferase Functions as a Barrier to Prevent Senescence-Associated Metabolic Remodeling.”, Cell Rep., 2017, 18(9), 2148.

荧光特性

Nucleolus Bright Green试剂货号:N511 核仁荧光染色试剂-绿色

常见问题Q&A

Q1:可以染色活细胞吗?
A1:本试剂建议用于固定细胞染色,不建议用活细胞染色。如果您想用活细胞染色,请联系我们的技术支持。