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KAPA Library Amplification Kits文库扩增试剂盒

KAPA 文库扩增试剂盒

罗氏测序解决方案推出的文库扩增方案,采用了KAPA HiFi DNA聚合酶,一种具有行业领先高保真和性能稳定的新型酶。这种新型酶改进了测序总体序列质量,具有低扩增偏差,低重复率和在困难区域更均匀的覆盖度。

罗氏提供的另一种聚合酶,KAPA HiFi Uracil+DNA聚合酶,保持高保真、高稳定性的特性外,还具有尿嘧啶耐受活性,从而适合应用于亚硫酸氢盐转化DNA的文库构建。

KAPA 文库扩增解决方案

高保真、低扩增偏差,适用于所有需要PCR的NGS工作流程。

更有效地扩增GC-rich和AT-rich片段和基因组

  • 改进对所有文库片段和序列区域的覆盖
  • 由于具有更高的扩增效率,仅需更少的循环数即可获得相等的产量
KAPA 文库扩增试剂盒
KAPA 文库扩增试剂盒

KAPA HiFi已成为NGS文库扩增的行业金标准。

使用N系列产品以及K系列产品扩增从相同打断的P. falciparum(19% GC)、C. difficile(28% GC)、E. coli(51% GC)和B. pertussis(68% GC)基因组DNA构建的文库。

(A) 与N相比,K更显著地均匀覆盖了C. difficile的基因组。
(B) 对于所有生物体的扩增效率,K的性能优于N,更少的扩增次数对关键测序指标有积极的影响。

提高测序覆盖度

  • 所有GC窗口的覆盖均匀度得到提升
KAPA 文库扩增试剂盒

KAPA HiFi HotStart ReadyMix降低扩增偏差,提高测序覆盖度。

使用产品K(左)或产品C(右),从100 ng Covaris打断的人类基因组DNA构建文库用作全基因组鸟枪法测序。使用K的扩增偏差更低,覆盖更均匀。数据由The Broad Institute提供 (Cambridge, MA, USA)。

行业领先的NGS文库扩增高保真度

  • 增强(3-5外切核酸酶)校对活性
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焦磷酸测序确定了KAPA HiFi酶行业领先的高保真度。

Taq酶、基于Taq酶的长片段PCR预混液、具有校正功能的DNA聚合酶(产品N和产品T)的已发表错误率,与KAPA HiFi HotStart DNA聚合酶的错误率比较结果(每3.54×10-6个核苷酸掺入1个错误,由454平台深度测序验证)。相比而言,KAPA HiFi酶比Taq酶低50-100倍。

KAPA HiFi Uracil+ DNA 扩增酶

甲基化测序工作流程中准确、有效地扩增亚硫酸氢盐处理的DNA

高效扩增含尿嘧啶的模板

  • 来源于KAPA HiFi DNA聚合酶的尿嘧啶耐受的,具有校正功能的扩增酶
KAPA 文库扩增试剂盒

KAPA HiFi Uracil+ReadyMix不受dUTP抑制。

SYBR® Green法实时荧光定量PCR检测dUTP对PCR扩增的影响,结果显示dUTP可以抑制常规PCR反应液的扩增(左),而KAPA HiFi Uracil+ ReadyMix (右) 无扩增抑制(dUTP浓度为0.2 mM,扩增片段长度为452 bp,模板稀释比例为80 pM-0.8 fM)。

解锁亚硫酸氢盐转化文库构建的真正潜能

  • 通过更高的文库产量和更少的扩增循环数来降低PCR重复和偏差
  • 高扩增效率保证长片段文库构建质量
KAPA 文库扩增试剂盒

KAPA HiFi Uracil+ ReadyMix 提供更高的文库产量和最小的文库分子大小偏差。

使用12、14或16个循环的标准方案扩增人类全基因组亚硫酸氢盐处理的文库,并使用Bioanalyzer® 2100高灵敏度DNA检测系统分析扩增文库。与A相比,KAPA HiFi Uracil+ ReadyMix的产量更高 (左),片段大小偏差更小 (右)。

与DNA甲基化测序应用无缝连接

  • 高效扩增亚硫酸氢盐转化的文库
  • 改善亚硫酸氢盐测序read的质量
KAPA 文库扩增试剂盒
KAPA 文库扩增试剂盒

KAPA HiFi Uracil+ReadyMix成功扩增简化亚硫酸氢盐测序文库。

起始量为500 ng或10 ng的小鼠B细胞基因组DNA,经MspI消化后,使用KAPA HyperPrep Kit构建文库,及使用KAPA HiFi Uracil+ ReadyMix进行最后文库扩增。500 ng文库扩增10个循环,10 ng文库扩增15个循环。(A) 10 ng文库与500 ng文库(左)以及两次500文库之间(右)有着很好的相关性。(B)碱基组成与序列位置关系图显示,测序结果中>95%的reads都是以MspI切割位点(CCGG)开头。数据来自Emory University (Atlanta, GA, USA)。

MC-CN-00368 有效期至2021-12-31

仅供研究,不用于临床诊断。

相关应用

  • Amplification of Illumina libraries (DNA and RNA sequencing)
  • Pre- and post-capture amplification in targeted capture workflows
  • Real-time amplification of libraries prepared from low input, ChIP DNA and other precious samples

文件下载

产品手册

KAPA_Library Amplification Kit_TDS.pdf

规格明细 / 储存条件

Kits can be stored for up to 12 months at -20˚C.

Kits include KAPA HiFi HotStart ReadyMix (2X), a convenient PCR master mix containing KAPA HiFi HotStart DNA Polymerase, KAPA dNTPs, reaction buffer, and MgCl2 at a final concentration of 2.5 mM. Kits with primers are also available.

Kits for real-time library amplification include a real-time version of the KAPA HiFi HotStart ReadyMix, as well as fluorescent standards to monitor library amplification.

构成要素

KAPA 文库扩增试剂盒

规格明细

规格 描述
Compatible Platform Illumina HiSeq, MiSeq, NextSeq, and GAIIx
Library Type DNA, RNA, and bisulfite-treated DNA
Starting Material Any NGS library that requires amplification
Sequencing Applications Whole Genome Sequencing Whole Exome Sequencing Targeted Sequencing (custom panels) RNA-Seq ChIP-Seq Amplicon Sequencing/td>

Coming Soon!

订货信息

KAPA 文库扩增试剂盒(50 反应)

  • KK货号:KK2611
  • 产品货号:7958951001
  • 规格:50反应

KAPA 文库扩增试剂盒+引物(50 反应)

  • KK货号:KK2620
  • 产品货号:7958978001
  • 规格:50反应

KAPA 文库扩增试剂盒+引物(250 反应)

  • KK货号:KK2621
  • 产品货号:7958986001
  • 规格:250反应

KAPA 文库扩增引物(250 反应)

  • KK货号:KK2623
  • 产品货号:7958994001
  • 规格:250反应

KAPA 实时文库扩增试剂盒(250 反应)

  • KK货号:KK2702
  • 产品货号:7959028001
  • 规格:250反应