マロンジアルデヒド測定キット MDA Assay Kit 同仁化学研究所

发表于2025年12月31日由whatman中国官网

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MDA Assay Kit

02 酸化ストレス関連試薬

MDA Assay Kit

酸化ストレス関連試薬
酸化ストレス関連試薬
細胞機能解析
細胞毒性
フェロトーシス

マロンジアルデヒド測定キット

細胞、組織中のMDA量を測定可能
操作時間を大幅に短縮

製品コード

M496　 MDA Assay Kit

容　量	メーカー希望小売価格	富士フイルム和光純薬
100 tests	￥31,000	341-09961

<使用回数の目安> 96-well plate 1枚

キット内容

100 tests	・Lysis Buffer ・Dilution Buffer ・Standard ・Substrate ・Antioxidant	6.5 ml×1 10 ml×1 200 μl×1 58 mg×1 200 μl×1

試験成績書

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ご購入方法
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マニュアル

取扱説明書日本語
Manual English

技術情報

細胞、組織中のMDA量を測定可能

細胞を測定試料とする場合は、蛍光法で測定できます。組織を測定試料とする場合は、サンプル量や予想されるMDA含有量より蛍光法もしくは比色法から測定方法を選択できます。

	蛍光法	比色法	必要サンプル量	測定可能MDA濃度範囲
細胞	○	×	1-3×10⁷ cells	1-10 µmol/l
組織	○	○	蛍光法：10-30 mg 比色法：20-50 mg	蛍光法：1-10 µmol/l 比色法：1-50 µmol/l

蛍光法

比色法

必要サンプル量

測定可能MDA濃度範囲

細胞

○

1-3×10⁷ cells

1-10 µmol/l

組織

○

蛍光法：10-30 mg

比色法：20-50 mg

蛍光法：1-10 µmol/l

比色法：1-50 µmol/l

参考文献

参考文献を表示する

文献No.	対象サンプル	引用(リンク)
1	組織 (マウス海馬体)	K. Igarashi, H. Iwai, K. Tanaka, Y. Kuwahara, J. Kitanaka, N. Kitanaka, A. Kurimasa, K. Tomita, T. Sato, "Neuroprotective effect of oxytocin on cognitive dysfunction, DNA damage, and intracellular chloride disturbance in young mice after cranial irradiation", 2022, Biochem. Biophys. Res. Commun., doi:10.1016/j.bbrc.2022.04.099.
2	細胞 (HeLa)	J. Zhu, X. Wang, Y. Su, J. Shao, X. Song, W. Wang, L. Zhong, L. Gan, Y. Zhao, X. Dong, "Multifunctional nanolocks with GSH as the key for synergistic ferroptosis and anti-chemotherapeutic resistance", 2022, doi:10.1016/j.biomaterials.2022.121704.
3	細胞 (RAW 264.7)	B. Yang, G. Joe, W. Li, Y. Shimizu, H. Saeki, "Comparison of Maillard-Type Glycated Collagen with Alginate Oligosaccharide and Glucose: Its Characterization, Antioxidant Activity, and Cytoprotective Activity on H2O2-Induced Cell Oxidative Damage", 2022, doi:10.3390/foods11152374.
4	細胞 (HepG2)	L. Dong, Z. Jiang, L. Yang, F. Hu, W. Zheng, P. Xue, S. Jiang, M. E. Andersen, G. He, M. J. C. Crabbe, W. Qu, "The genotoxic potential of mixed nitrosamines in drinking water involves oxidative stress and Nrf2 activation", 2022, doi:10.1016/j.jhazmat.2021.128010.
5	細胞 (OMM-1)	C. Hou, L. Xiao, X. Ren, L. Cheng, B. Guo, M. Zhang, N. Yan., "EZH2-mediated H3K27me3 is a predictive biomarker and therapeutic target in uveal melanoma", 2022, Front. Genet., doi:10.3389/fgene.2022.1013475.
6	細胞 (ヒト歯肉線維芽細胞)	L. Xing, W. Dong, Y. Chen, W. Dai, X. Xiao, Z. Liu, X. Zhang, D. Bai, H. Xu, "Fibroblast ferroptosis is involved in periodontitis-induced tissue damage and bone loss", 2022, Int. Immunopharmacol., doi:10.1016/j.intimp.2022.109607.
7	細胞 (Huh7)	Y. Li, W. Yang, Y. Zheng, W. Dai, J. Ji, L. Wu, Z. Cheng, J. Zhang, J. Li, X. Xu, J. Wu, M. Yang, J. Feng and C. Guo, "Targeting fatty acid synthase modulates sensitivity of hepatocellular carcinoma to via ferroptosis", J. Exp. Clin. Cancer Res., 2023, doi:10.1186/s13046-022-02567-z.
8	組織 (ラット肝臓)	H. Liu, F. Yokoyaa, S. Ishizuka, "Metabolic alterations of the gut–liver axis induced by cholic acid contribute to hepatic steatosis in rats", Biochim. Biophys. Acta, Mol. Cell Biol. Lipids, 2023, doi:10.1016/j.bbalip.2023.159319.
9	細胞 (4T1)	J. Zhao, Y. Chen, T. X, S. Han, C. Li, Y. He, Y. He, G. Zhao, G. Zhao, T. Wang, L. Wang, T. Cheng, C. Wang and J. Wang, "Clustered Cobalt Nanodots Initiate Ferroptosis by Upregulating Heme Oxygenase 1 for Radiotherapy Sensitization", Small, 2023, doi:10.1002/smll.202206415.
10	組織 (マウス膵臓)	L. Liu, Y. Xie, G. Li, T. Zhang, Y. Sui, Z. Zhao, Y. Zhang, W. Yang, X. Geng, D. Xue, H. Chen, Y. Wang, T. Lu, L. Shang, Z. Li, L. Li, B. Sun, "Gut microbiota-derived alleviates acute pancreatitis by activating pancreatic SIRT3 signalling", Br. J. Pharmacol., 2023, doi:10.1111/bph.15980.
11	組織 (乳がん細胞)	Z. ZHu, H. Shen, J. Xu, Z. Fang, G. Wo, Y. Ma, K. Yang, Y. Wang, Q. Yu, J. Tang., "GATA3 mediates doxorubicin resistance by inhibiting CYB5R2-catalyzed iron reduction in breast cancer cells", 2023, doi:10.1016/j.drup.2023.100974.

よくある質問

Q 本キットの測定原理を教えてください。: A

本キットはSubstrateにチオバルビツール酸 (TBA)を使用しております。MDAとTBAの反応により生成したTBA付加体の吸光度もしくは蛍光強度を測定し、Standardの値と比較することでサンプル中のMDA濃度を測定できます。

Q 1キットあたり測定可能なサンプル数を教えてください。: A

サンプルの測定をn=3で行った場合、24サンプルの測定が可能です。

Q 溶液調製後の保存方法を教えてください。: A

Substrate stock solutionは調製後、冷凍保存 (－20℃)して下さい(2カ月間安定)。
Antioxidant PBS solutionとWorking solutionは保存できません。その日の内にお使い下さい。

Q 本キットを使用する場合、細胞数の補正は必要ですか？: A

薬剤刺激等を行っても細胞数の変化がない場合は、細胞数の補正は必要ありません。
細胞数が変化する場合は、タンパク質定量法によってMDA濃度を補正できます。
なお、タンパク質定量で補正を行う場合はBCA法を推奨します。

取扱条件

取扱条件
保存条件: 冷凍
危険・有害シンボルマーク

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トータルROS検出キット ROS Assay Kit -Highly Sensitive DCFH-DA- 同仁化学研究所

发表于2025年12月31日由whatman中国官网

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ROS Assay Kit -Highly Sensitive DCFH-DA-

02 酸化ストレス関連試薬

ROS Assay Kit -Highly Sensitive DCFH-DA-

酸化ストレス関連試薬
酸化ストレス関連試薬
蛍光色素

トータルROS検出キット

トータルROSを高感度に検出
蛍光顕微鏡、プレートリーダー、フローサイトメーターで検出可能

製品コード

R252　 ROS Assay Kit -Highly Sensitive DCFH-DA-

容　量	メーカー希望小売価格	富士フイルム和光純薬
100 tests	￥19,300	340-09811

キット内容

100 tests	・Highly Sensitive DCFH-DA Dye ・loading Buffer (10x)	10 μl×1 1.0 ml×1

試験成績書

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ご購入方法
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マニュアル

取扱説明書日本語
Manual English

技術情報

比較表：既存試薬との性能

弊社ROS Assay Kit -Highly Sensitive DCFH-DA-を含む、一般的に知られている既存色素との比較表を下記に示します。

	同仁化学研究所		T社
品コード	R252	R253	–	–
製品名	本製品 ROS Assay Kit -Highly Sensitive DCFH-DA-	関連製品 ROS Assay Kit -Photo-oxidation Resistant DCFH-DA-	D色素	C色素
感度 (細胞染色時)	◎ 最も感度が高い	○ 既存色素に比べ感度が高い	△ 感度が低い	△ 感度が低い
耐光性 ※観察光による自動酸化	× 観察光による自動酸化あり	◎ 最も耐光性が高い	× 観察光による自動酸化あり	× 観察光による自動酸化あり
固定化操作	× 固定化不可	◎ 固定化可能	× 固定化不可	○ 固定化可能

参考文献

参考文献を表示する

文献No.	対象サンプル	装置	引用（リンク）
1)	細胞 U-251MG cells(ヒトグリア芽腫・アストロサイトーマ )	蛍光顕微鏡	S. Kato, "Effects of platinum‑coexisting dopamine with X‑ray irradiation upon human glioblastoma cell proliferation", Hum. Cell, 2021, doi:10.1007/s13577-021-00591-3.
2)	細胞 Valve Interstitial Cells(弁間質細胞)	蛍光顕微鏡	K. Kanno, T. Sakaue, M. Hamaguchi, K. Namiguchi, D. Nanba, J. Aono, M. Kurata, J. Masumoto, S. Higashiyama, H. Izutani, "Hypoxic Culture Maintains Cell Growth of the Primary Human Valve Interstitial Cells with Stemness", Int. J. Mol. Sci. 2021, doi:10.3390/ijms221910534.
3)	細胞 BPH-1細胞(LPS誘導)	フローサイトメーター	C. Fang, L. Wu, M. Zhao, T. Deng, J. Gu, X. Guo, C. Li, W. Li, X. Zeng, "Periodontitis Exacerbates Benign Prostatic Hyperplasia through Regulation of Oxidative Stress and Inflammation", Oxid. Med. Cell. Longevity, 2021, doi:10.1155/2021/2094665.
4)	菌（Synechococcus elongatus PCC7942)	プレートリーダー	M. Tamoi and S. Shigeoka, "CP12 Is Involved in Protection against High Light Intensity by Suppressing the ROS Generation in Synechococcus elongatus PCC7942", Plants, 2021, doi:10.3390/plants10071432.
5)	細胞 SW982(ヒト滑膜肉腫細胞株)	蛍光顕微鏡	S. Xia, Z. Ma, B. Wang, F. Gao, C. Yi, X. Zhou, S. Guo, L. Zhou, "In vitro anti-synovial sarcoma effect of diallyl trisulfide and mRNA profiling", Gene, 2021, doi:10.1016/j.gene.2021.146172.
6)	細胞 BRL3A(肝由来細胞株)	蛍光顕微鏡	Z. Luo, Q. Gao, H. Zhang, Y. Zhang, S. Zhou, J. Zhang, W. Xu, J. Xu, " Microbe-derived antioxidants attenuate cobalt chloride-induced mitochondrial function, autophagy and BNIP3-dependent mitophagy pathways in BRL3A cells", 2022, doi:10.1016/j.ecoenv.2022.113219.
7)	細胞 (骨髄由来抑制細胞)	フローサイトメーター	Z. Xie, T. Kawasaki, H. Zhou, D. Okuzaki, N. Okada and M. Tachbana, "Targeting GGT1 Eliminates the Tumor-Promoting Effect and Enhanced Immunosuppressive Function of Myeloid-Derived Suppressor Cells Caused by G-CSF", Front. Pharmacol., 2022, doi:10.3389/fphar.2022.873792.
8)	細胞 TIG-1 (老化研究用、ヒト胎児肺由来線維芽細胞)	蛍光顕微鏡	Y. Fujita, M. Iketani, M. Ito, I. Ohsawa, "Temporal changes in mitochondrial function and reactive oxygen species generation during the development of replicative senescence in human fibroblasts", 2022, doi:10.1016/j.exger.2022.111866.
9)	細胞 (SK-Hep1)	蛍光顕微鏡	G. Tsujimoto, R. Ito, K. Yoshikawa, C. Ueki and N. Okada, "NFYA promotes the anti-tumor effects of gluconeogenesis in hepatocellular carcinoma through the regulation of PCK1 expression", 2022, doi:10.3389/fcell.2022.983599.

よくある質問

Q 1キットで測定可能なサンプル数を教えてください。: A

測定可能なサンプル数は以下をご参考ください。
・ 96-well plate：1枚
・ ibidi 8-well plate：6枚
・ 35 mm dish：5枚
・ 6-well plate：5ウェル

Q ポジティブコントロールになる実験例はありますか？: A

取扱説明書に過酸化水素処理をしたHeLa細胞による検出例を掲載しております。

Q Highly Sensitive DCFH-DA working solutionはLoading Buffer以外でも調製できますか？: A

染色時の細胞へのダメージを軽減するため付属のLoading Bufferを推奨しますが、Hanks’ HEPESやHBSSでも調製できます。
培地で調製する場合は無血清培地をご使用ください。

Q 染色後の洗浄には、HBSSの代わりにPBSを使用できますか？: A

細胞へのダメージを軽減するためHBSSを推奨しております。
HBSSがお手元にない場合は培地での洗浄をお勧めします。

Q 蛍光顕微鏡でイメージングする際の注意点はありますか？: A

色素はROSと反応し、酸化することで蛍光を発します。
励起光を照射し続けると色素が酸化されることでバックグラウンドが上昇するため、イメージング画像を取得する際は明視野でピントを調整後に蛍光画像を取得してください。

観察光の影響により撮影が困難であった場合は、下記製品がおすすめです。
製品コード: R253、製品名: ROS Assay Kit -Photo-oxidation Resistant DCFH-DA-

Q フローサイトメーターで使用する際、細胞を剥がす操作はどの段階で行えば良いですか？: A

取扱説明書操作6の後(薬剤処理しHBSSで洗浄した後)に細胞を剥がす操作(トリプシン処理)を行ってください。
トリプシン処理後は、培地を添加し反応を止めた後、遠心しHBSSで１回洗浄後、
さらに遠心しHBSSで細胞を懸濁して測定サンプルとしてください。

取扱条件

取扱条件
保存条件: 冷凍
危険・有害シンボルマーク

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耐光性トータルROS検出キット ROS Assay Kit -Photo-oxidation Resistant DCFH-DA- 同仁化学研究所

发表于2025年12月31日由whatman中国官网

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ROS Assay Kit -Photo-oxidation Resistant DCFH-DA-

02 酸化ストレス関連試薬

ROS Assay Kit -Photo-oxidation Resistant DCFH-DA-

酸化ストレス関連試薬
細胞機能解析
細胞毒性
蛍光色素
顕微鏡
FCM

耐光性トータルROS検出キット

ROS 発生の継時変化が観察可能
染色後のPFA固定化や免疫染色法の共染色が可能
色素の高感度化により多くの測定装置に対応

製品コード

R253　 ROS Assay Kit -Photo-oxidation Resistant DCFH-DA-

容　量	メーカー希望小売価格	富士フイルム和光純薬
100 tests	￥36,000	345-09981

モニタリング動画を公開中
実験例：「活性化マクロファージの死細胞におけるROS生産のライブセルハイコンテントイメージング」をご参照ください。

キット内容

100 tests	・Photo-oxidation Resistant DCFH-DA Dye ・Loading Buffer (10x)	100 nmol×1 1.0 ml×1

試験成績書

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マニュアル

取扱説明書日本語
Manual English

製品紹介30秒動画

技術情報

ROS測定の大きな課題

測定のバラつき、高いバックグラウンド、撮像時のピントが合わない状況は、色素が観察光により偽応答していることが原因として考えられます。本キットではこちらの課題を解決できる可能性があります。

※照射する励起光が強すぎる場合や長時間の励起光照射を行うと、自動酸化によりバックグラウンドが高くなる場合があります。

参考文献

参考文献を表示する

文献No.	対象サンプル	装置	他の測定指標 (試薬)	引用（リンク）
1	細胞 (HaCaT, D66H)	蛍光顕微鏡 (核染色:　Hoechst33342)	SOD, Lipid peroxidation, GSH/GSSG	Y. Chen, Z. Wang, Y. Song, N. Chen, J. Guo, W. Liu, K. Guo, X. Ling and L. Zhang,"4‐octyl itaconate improves the viability of D66H cells by regulating the KEAP1‐NRF2‐GCLC/HO‐1 pathway", J Cell Mol Med., 2022, doi: 10.1111/jcmm.17708.
2	細胞 (髄核細胞)	蛍光顕微鏡 (核染色:　Hoechst33342)	ミトコンドリア膜電位(MT-1)	K. Suyama, D. Sakai, S. Hayashi, N. Qu, H. Terayama, D. Kiyoshima, K. Nagahori and M. Watanabe,"Bag-1 Protects Nucleus Pulposus Cells from Oxidative Stress by Interacting with HSP70", Biomedicines., 2023, doi: 10.3390/biomedicines11030863.
3	細胞 (HCC)	蛍光顕微鏡	GSH/GSSG, γH2AX, 細胞周期	H. Liu, W. Zhang, L. Jin, S. Liu, L. Liang and Y. Wei,"Plumbagin Exhibits Genotoxicity and Induces G2/M Cell Cycle Arrest via ROS-Mediated Oxidative Stress and Activation of ATM-p53 Signaling Pathway in Hepatocellular Cells", Int. J. Mol. Sci., 2023, doi: 10.3390/ijms24076279.
4	細胞 (ヒト臍帯血CD34⁺ 前駆細胞)	フローサイトメーター	γH2AX	M. Sakurai, K. Ishitsuka, T. Ito, A. C. Wilkinson, T. Kimura, E. Mizutani, H. Nishikii, K. Sudo, H. J. Becker, H. Takemoto, T. Sano, K Kataoka, S. Takahashi, Y. Nakamura, D. G. Kent, A. Iwama, S. Chiba, S. Okamoto, H. Nakauchi and S. Yamazaki, "Chemically defined cytokine-free expansion of human haematopoietic stem cells", Nature, 2023, doi:10.1038/s41586-023-05739-9.

よくある質問

Q 1キットで測定可能なサンプル数を教えてください。: A

測定可能なサンプル数は以下をご参考ください。
・ 96-well plate：1枚
・ ibidi 8-well plate：6枚
・ 35 mm dish：5枚
・ 6-well plate：5ウェル

Q ポジティブコントロールになる実験例はありますか？: A

取扱説明書に過酸化水素処理をしたHeLa細胞による検出例を掲載しております。実験例2の項目の操作1-5をご参考ください。

Q Working SolutionはLoading Buffer以外でも調製できますか？: A

染色時の細胞へのダメージを軽減するため付属のLoading Bufferを推奨しますが、Hanks’ HEPESやHBSSでも調製できます。
培地で調製する場合は無血清培地をご使用ください。

Q 染色後の洗浄には、HBSSの代わりにPBSを使用できますか？: A

細胞へのダメージを軽減するためHBSSを推奨しております。
HBSSがお手元にない場合は培地での洗浄をお勧めします。

Q フローサイトメーターで使用する際、細胞を剥がす操作はどの段階で行えば良いですか？: A

取扱説明書操作6の後(薬剤処理しHBSSで洗浄した後)に細胞を剥がす操作(トリプシン処理)を行ってください。
トリプシン処理後は、培地を添加し反応を止めた後、遠心しHBSSで１回洗浄後、さらに遠心しHBSSで細胞を懸濁して測定サンプルとしてください。

取扱条件

取扱条件
保存条件: 冷蔵 , 取扱条件: 吸湿注意

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抗酸化能測定キット DPPH Antioxidant Assay Kit 同仁化学研究所

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DPPH Antioxidant Assay Kit

02 酸化ストレス関連試薬

DPPH Antioxidant Assay Kit

酸化ストレス関連試薬
食品機能評価

抗酸化能測定キット

キット化したDPPH法で抗酸化能を再現よく検出
試薬の調製手間を大幅削減
再現性の高いデータを実現
従来の課題を解決

製品コード

D678　 DPPH Antioxidant Assay Kit

容　量	メーカー希望小売価格	富士フイルム和光純薬
100 tests	￥7,100	347-09561
500 tests	￥21,000	343-09563

キット内容

100 tests	・DPPH Reagent ・Trolox Standard ・Assay Buffer	×1 ×1 11 ml×1
500 tests	・DPPH Reagent ・Trolox Standard ・Assay Buffer	×5 ×5 55 ml×1

試験成績書

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ご購入方法
お問い合わせ

マニュアル

取扱説明書日本語
Manual English

技術情報

簡単な準備

DPPH およびTrolox は溶液状態で不安定なため用時調製が必要ですが、特に測定に影響を与えるDPPH は、吸光度による含量確認まで行う必要があり、試薬調製には長い時間を要していました。本キットでは測定に必要な試薬が小分けされており、測定前の簡単な準備で、直ぐに実験を開始できます。
(DPPH の溶解操作には超音波洗浄機が必要です)

参考文献

参考文献を表示する

文献No.	対象サンプル	引用(リンク)
1	化合物 (芳香族ポリケチド)	Enjuro Harunari, Chiaki Imada, Yasuhiro Igarashi, "⑯Konamycins A and B and Rubromycins CA1 and CA2, Aromatic Polyketides from the Tunicate-Derived Streptomyces hyaluromycini MB-PO13^T", J. Nat. Prod., 2019, 82, (6), 1609-1615.
2	農産品抽出物 (ピーマン、生姜、茄子)	Hiroki Ishida, Naoki Yamasaki, Yuuki Otsuka, Daichi Mori, Tomoko Shimamura, Takuya Hasegawa, Shuhei Ogo, Tadaharu Ueda, "Electrochemical Antioxidant Capacity Measurement: A Downsized System and Its Application to Agricultural Crops", Anal. Sci., 2021, doi:10.2116/analsci.21P217.
3	生物活性ペプチド (骨格筋加水分解物)	M. A. Maky and T. Zendo, "Generation and Characterization of Novel Bioactive Peptides from Fish and Beef Hydrolysates", Appl. Sci., 2021, doi:10.3390/app112110452.
4	ドーパミン	S. Kato, K. Kuwata, "Pro-/anti-oxidative properties of dopamine on membrane lipid peroxidation upon X-ray irradiation", Radiat. Phys. Chem., 2021, doi:10.1016/j.radphyschem.2021.109518.
5	食用キノコ抽出物	F. F. Sofian, N. Kikuchi, T. Koseki, Y. Kanno, S. Uesugi, Y. Shiono, "Antioxidant p-terphenyl compound, isolated from edible mushroom, Boletopsis leucomelas", Biosci., Biotechnol., Biochem., 2022, doi:10.1093/bbb/zbab224.
6	コロイド粒子	S. Jin, S. Kim, D. S. Kim, D. Son and M. Shin, "Optically Anisotropic Topical Hemostatic Coacervate for Naked-Eye Identification of Blood Coagulation", Adv. Funct. Mater., 2022, doi:10.1002/adfm.202110320.

よくある質問

Q IC₅₀値がばらつくのですが、注意点はありますか？: A

(1) DPPH Reagentのチューブに溶け残りがないかご確認ください。

DPPHは溶けづらいため超音波洗浄機をお使い頂き、溶け残りなないよう、注意深く溶解して頂く必要があります。
特にチューブ底の先端にDPPHが溶け残ることがありますので、取扱説明書に記載の通り数回エタノールをチューブに移し入れ、エタノールに着色がなくなったことを確認しご使用ください。

(2) サンプルの希釈間隔が広い場合や、阻害曲線が飽和しているポイント（下図）で測定した場合IC₅₀値が大きく変動することがあります。そのため、予備実験にて最適な濃度域を確認されることをお勧めします。

Q ボルテックスやピペッティングでDPPHを溶解しても良いですか？: A

DPPHは溶解しにくいため、ボルテックスのみでの溶解やピペッティング操作での溶解はできません。
溶け残りがIC50のばらつきの原因となりますので、必ず超音波洗浄機をお使いください。

Q 測定可能なサンプル数について教えて下さい。: A

＜100 tests使用時＞
・本キットは96穴マイクロプレート1枚分を測定できる試薬となります。
・データ信頼性を確保するため、n=3での測定をお勧めしております。そのため、測定可能なサンプル数は、n:3で測定したことを想定し下記の通り算出しています。
・1キットあたりのDPPH Reagent量は100 well分になります。
　（Blank２はDPPH Reagentを使用しないため、下記内訳のwell数にはカウントしていません）

未知サンプルの場合： 1サンプル
・小社キットで測定実績がない場合、1キットで1サンプル分の測定が可能です。

＜予備実験時の使用ウェル数：最適濃度域の確認＞
サンプル：8（8点の希釈系列） X 3（n:3） = 24 well
Blank：1（Blank1） X 3（n:3） = 3 well

＜IC₅₀値の算出時の使用ウェル数＞
サンプル：8（8点の希釈系列） X 3（n:3） = 24 well
Trolox： 4（4点の希釈系列） X 3（n:3） = 12 well
Blank：1（Blank1） X 3（n:3） = 3 well
＊予備実験不要のサンプルの場合、もう１サンプル測定が可能。

IC50値が既知の場合： 3サンプル
・小社キットでIC50値を既に測定した実績のあるサンプルの場合、3サンプルの測定が可能です。
小社キットでIC50値を測定されていない場合は、未知サンプルとして予備実験をされることを推奨いたします。

＜IC₅₀値の算出時の使用ウェル数＞
サンプル：8（8点の希釈系列） X 3（n:3） X 3（サンプル数） = 72 well
Trolox： 4（4点の希釈系列） X 3（n:3） = 12 well
Blank：1（Blank1） X 3（n:3） = 3 welll

＜500 tests使用時＞
・本キットはDPPHが1プレート毎に測定できるように５本組みとなっております。
・下記内容は、500 testsをまとめて測定する場合の測定可能なサンプル数です。１プレート毎に測定する場合は、上記の100test使用時のサンプル数を参照ください。
・1キットあたりのDPPH Reagent量は500 well分になります。
　（Blank２はDPPH Reagentを使用しないため、下記内訳のwell数にはカウントしていません）

未知サンプルの場合： 8サンプル
・小社キットで測定実績がない場合、1キットで8サンプル分の測定が可能です。

＜予備実験時の使用ウェル数：最適濃度域の確認＞
サンプル：8（8点の希釈系列） X 3（n:3） X 8 (8サンプル)= 192 well
Blank：1（Blank1） X 3（n:3） X 3 (3 プレート) = 9 well

＜IC₅₀値の算出時の使用ウェル数＞
サンプル：8（8点の希釈系列） X 3（n:3） X 8 (8サンプル)= 192 welll
Trolox： 4（4点の希釈系列） X 3（n:3） X 5 (5 プレート) = 60 well
Blank：1（Blank1） X 3（n:3） X 3 (3 プレート) = 9 well

Q 反応から測定までの時間が長くなった場合、測定値に影響しますか？: A

反応時間が長くなると、測定値が変化する可能性があります。
再現精度のよい結果を得るためにも、取扱説明書に記載のインキュベーション（25℃、30分、暗所）後は速やかに測定ください。
複数のプレートを測定する場合、各プレート毎の測定までの時間を合わせてください。

Q 食品の前処理方法を教えて下さい。: A

前処理方法として下記の実施例があります。

<茶葉>

1) 茶葉試料 5 g に100℃ の超純水 50 ml を加える。

2) 100℃ で 10 分間攪拌して抽出する。

3) 10 分後、超純水を用いて 55 g に重量調整を行い、綿ろ過する。

4) 抽出液を遠心管に取り、23℃、4000×g で 10 分間遠心する。

5) 上清をメンブレンフィルター (pore si0ze 0.45μm) でろ過したろ液を測定試料とする。

<ピーマン・パプリカ>

1) 試料は凍結乾燥したものをミキサーで粉末状にする。

2) 粉末試料 0.5 g に海砂 2.5 g を加え、抽出溶媒MWAを 5 ml添加する。

(MWA組成メタノール：超純水：酢酸＝90：9.5：0.5 の比率で混合した溶液)

3) 10 秒間の攪拌後、超音波洗浄層を用いて37℃、5 分間の超音波処理をする。

4) 23℃、1600×g で 10 分間遠心し、上清を回収する。

5) 沈殿物に再度、MWAを5 ml 添加し、3)~4) の処理・回収を 3 回繰り返す。

6) 回収した上清をMWAを用いて25 mlに定容し、測定試料とする。

Q サンプルに濁りがありますが測定できますか？また、測定ができるかどうか確認方法はありますか？: A

<濁りのあるサンプルについて>

測定サンプルの濁りは測定に影響を与えます。

サンプルを溶解する実績のある溶媒は、水、エタノール、メタノール、MWA、DMSOです。

　※MWAの組成　メタノール：超純水：酢酸＝90：9.5：0.5 の比率で混合した溶液

　※DMSOではTEAC値が高くでる可能性があります

サンプルが完全に溶けきれず濁りがある場合には、ろ過を行ないサンプルを調製して下さい。

濁り成分が活性物質の場合、抗酸化活性は測定できません。

サンプルを溶解する溶媒が水の場合には、SOD Assay Kit-WSTでの使用も可能です。

DPPH法と反応機序が異なるため、2つの指標での測定をおすすめします。

また、カロテン類や濃く紫色に着色したサンプルでは測定が難しいため、

他の方法での測定をおすすめします。

<確認方法について>

本キットは測定前のウェルは、図のような組成になります。

測定前に濁りがあるかをチェックする方法として、

56%エタノール (水:エタノール=4:5) 180 µlにサンプル溶液 20 µl を加えた時に濁らないかをチェックして下さい。

濁る場合には、サンプルの濃度を薄くして、濁らない程度に調整して下さい。

特に、タンパク質を豊富に含む試料（例えば、牛乳など）はタンパク質の凝集を起こします。

取扱条件

取扱条件
保存条件: 冷蔵

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抗酸化能測定キット SOD Assay Kit – WST 同仁化学研究所

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SOD Assay Kit – WST

02 酸化ストレス関連試薬

SOD Assay Kit – WST

酸化ストレス関連試薬
食品機能評価

抗酸化能測定キット

製品コード

S311　 SOD Assay Kit – WST

容　量	メーカー希望小売価格	富士フイルム和光純薬
100 tests	￥10,100	341-90193
500 tests	￥26,000	345-90191

キット内容

100 tests	・WST Solution ・Enzyme Solution ・Buffer Solution ・Dilution Buffer	1 ml x 1 20 μl x 1 11 ml x 2 10 ml x 1
500 tests	・WST Solution ・Enzyme Solution ・Buffer Solution ・Dilution Buffer	5 ml x 1 100 μl x 1 100 ml x 1 50 ml x 1

試験成績書

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ご購入方法
お問い合わせ

マニュアル

取扱説明書 500 tests 日本語
Manual 500 tests English
取扱説明書 100 tests 日本語
Manual 100 tests English
プロトコル SOD様活性を測定したい

技術情報

測定方法

96wellプレートを用い、サンプル調製から測定まで約1時間で完了します。

参考文献

参考文献を表示する

1) H. Ukeda, A. K. Sarker, D. Kawana and M. Sawamura, "Flow-Injection Assay of Superoxide Dismutase Based on the Reduction of Highly Water-Soluble Tetrazolium", Anal. Sci., 1999, 15, 353.
2) H. Ukeda, D. Kawana, S. Maeda and M. Sawamura, "Spectrophotometric Assay for Superoxide Dismutase Based on the Reduction of Highly Water-soluble Tetrazolium Salts by Xanthine-Xanthine Oxidase", Biosci. Biotechnol. Biochem., 1999, 63, 485.
3) <受田浩之, 森山洋憲, 川名大介, 片山泰幸, 中林錦一, 沢村正義, 「スーパーオキシドアニオン消去活性新規測定法の食品への応用」, 日本食品科学工学会誌, 2002,49, 25.
4) <森山洋憲, 片山泰幸, 中林錦一, 受田浩之, 沢村正義, 「高知県産茶および青果物の有するスーパーオキシドアニオン消去能の測定」, 日本食品科学工学会誌, 2002,49, 679.
5) H. Ukeda, T. Shimamura, M. Tsubouchi，Y. Harada, Y. Nakai and M. Sawamura, "Spectrophotometric Assay of Superoxide Anion Formed in Maillard Reaction Based on Highly Water-soluble Tetrazolium Salt", Anal. Sci., 2002, 18, 1151.
6) N. Tsuji, N. Hirayanagi, M. Okada, H. Miyasaka, K. Hirata, M. H. Zenk and K. Miyamoto, "Enhancement of Tolerance to Heavy Metals and Oxidative Stress in Dunaliella Tertiolecta by Zn-induced Phytochelatin Synthesis", Biochem. Biophys. Res. Commun., 2002, 293, 653.
7) A. Sakudo, D. C. Lee, K. Saeki, Y. Nakamura, K. Inoue, Y. Matsumoto, S. Itohara and T. Onodera, "Impairment of Superoxide Dismutase Activation by N-Terminally Truncated Prion Protein (PrP) in PrP-deficient Neuronal Cell Line", Biochem. Biophys. Res. Commun., 2003, 308, 660.
8) J.-H. Zhu, X. Zhang, J. P. Mcclung and X. G. Lei, "Impact of Cu,Zn-Superoxide Dismutase and Se-Dependent Glutathione Peroxidase-1 Knockouts on Acetaminophen-Induced Cell Death and Related Signaling in Murine Liver", Exp. Biol. Med., 2006, 231, 1726.
9) H. R. Rezvani, S. Dedieu, S. North, F. Belloc, R. Rossignol, T. Letellier, H. de Verneuil1, A. Taieb1, F.Mazurier, "HIF-1α: a Key Ffactor in the Keratinocyte Response to UVB Exposure", J. Biol. Chem., 2007, 10, 1074.
10) S. Goldstein and G. Czapski, "Comparison Between Different Assays for Superoxide Dismutase-like Activity", Free Rad. Res. Comms., 1991, 12, 5.
11) R. H. Burdon, V. Gill and C. Rice-Evans, "Reduction of a Tetrazolium Salt and Superoxide Generation in Human Tumor Cells (HeLa)", Free Rad. Res. Commun., 1993,18, 369.
12) Y. Sakurai, I. Anzai and Y. Furukawa, "A Primary Role for Disulfide Formation in the Productive Folding of Prokaryotic Cu,Zn-superoxide Dismutase", J. Biol. Chem., 2014, 289(29), 20139.
13) A. Weichert, A. S. Besemer, M. Liebl, N. Hellmann, I. Koziollek-Drechsler, P. Ip, H. Decker, J. Robertson, A. Chakrabartty, C. Behl and A. M. Clement, "Wild-type Cu/Zn superoxide dismutase stabilizes mutant variants by heterodimerization", Neurobiol. Dis., 2014, 62, 479.
14) J. M. Hartney, T. Stidham, D. A. Goldstrohm, R. E. Oberley-Deegan, M. R. Weaver, Z. Valnickova-Hansen, C. Scavenius, R. K.P. Benninger, K. F. Leahy, R. Johnson, F. Gally, B. Kosmider, A. K. Zimmermann, J. J. Enghild, E. Nozik-Grayck and R. P. Bowler, "A common polymorphism in extracellular superoxide dismutase affects cardiopulmonary disease risk by altering protein distribution", Circ Cardiovasc Genet, 2014, 7(5), 659.
15) J. Wu, Y. Sun, Y. Zhao, J. Zhang, L. Luo, M. Li, J. Wang, H. Yu, G. Liu, L. Yang, G. Xiong, J. Zhou, J. Zuo, Y. Wang and J. Li, "Deficient plastidic fatty acid synthesis triggers cell death by modulating mitochondrial reactive oxygen species", Cell Res., 2015, 25(5), 621.
16) E. Harunari, C. Imada, Y. Igarashi, "Konamycins A and B and Rubromycins CA1 and CA2, Aromatic Polyketides from the Tunicate-Derived Streptomyces hyaluromycini MB-PO13^T'", J. Nat. Prod., 2019, 82, (6), 1609-1615.
17) N. Kajihara, D. Kukidome, K. Sada, H. Motoshima, N. Furukawa, T. Matsumura, T. Nishikawa and E. Araki, "Low glucose induces mitochondrial reactive oxygen species via fatty acid oxidation in bovine aortic endothelial cells", J Diabetes Investig, 2017, 8, (6), 750.
18) H- J. Kim, H- J. Kim, J. Jeon, K- C. Nam, K- S. Shim, J- H. Jung, K. S. Kim, Y. Choi, S- H. Kim, A. Jang, Comparison of the quality characteristics of chicken breast meat from conventional and animal welfare farms under refrigerated storage', Poultry Science., 2020, 99, 1788-1796.
19) T. Shoji, S. Masumoto, N. Moriichi, Y. Ohtake, T. Kanda, Administration of Apple Polyphenol Supplements for Skin Conditions in Healthy Women: A Randomized, Double-Blind, Placebo-Controlled Clinical Trial', Nutrients., 2020, 12, (1071), .
20) Y. Hirata, Y. Ito, M. Takashima, K Yagy, K. Oh-Hashi, H. Suzuki, K. Ono, K. Furuta and M. Sawada, Novel Oxindole-Curcumin Hybrid Compound for Antioxidative Stress and Neuroprotection.', ACS Chem. Neurosci.., 2020, 11, (1), 76-85.

よくある質問

Q SOD様活性と試薬の発色の関係について教えてください。: A

SOD様活性が強いと試薬の発色は弱くなります。また、SOD様活性が弱いと試薬の発色は強くなります。下記をご参照ください。

＜キットの原理＞

WST-1はスーパーオキサイド（以下、2O₂^–）によって還元されることで、WST-1 formazanに変化し発色します。SOD様活性を持つ物質がサンプル中に存在するとキサンチンオキシダーゼ（XO）を介して発生する2O₂^–を除去しますので、還元されるWST-1の量が少なくなります。2O₂^–がWST-1の還元に使われるか、SOD様活性により除去されるかの競争反応により発色の度合いが変化します（下図）。併せて製品ページの「技術情報：測定原理」もご参照ください。

・SOD様活性が弱い場合

・SOD様活性が強い場合

Q Mn-SODとCu, Zn-SOD 及びEC(extracellular)-SODの測り分けはできますか？: A

サンプル溶液にKCN（potassium cyanide）またはDDC（Diethyldithiocarbamate）を添加することでCu, Zn-SOD 及びEC(extracellular)-SODの活性を阻害し、Mn-SOD の活性が測定できます。

【測定例】
・SODのサンプル溶液にKCNまたはDDCを終濃度が1-10 mmol/l となるように添加し、室温にて5分間インキュベートする。
・インキュベート後の溶液（20 μl）を用いて、SOD Assay Kit-WSTのマニュアルに従ってSOD様活性を測定する。

*注意点*
・KCNやDDCの濃度およびインキュベーション時間は、サンプルによって検討が必要となります。下記の論文を参考してください。
・ユニット（U）算出の際は、KCN又はDDC添加により希釈されたサンプルの希釈倍率を考慮して計算して下さい。

1) Greenough MA, Volitakis I, Li QX, Laughton K, Evin G, Ho M, Dalziel AH, Camakaris J, Bush AI, “Presenilins promote the cellular uptake of copper and zinc and maintain copper chaperone of SOD1-dependent copper/zinc superoxide dismutase activity”, J Biol Chem., 2011, 286, 9776.

2) Hajime Fujimoto, Jun-ichi Taguchi, “Manganese superoxide dismutase polymorphism affects the oxidized low-density lipoproteininduced apoptosis of macrophages and coronary artery disease.”, European Heart Journal. 2008. 29, 1267.

3) A. Dacanay, S. C. Johnson, R. Bjornsdottir, R. O. Ebanks, N. W. Ross, M. Reith, R. K. Singh, J. Hiu, and L. L. Brown, "Molecular Characterization and Quantitative Analysis of Superoxide Dismutases in Virulent and Avirulent Strains of Aeromonas salmonicida subsp. salmonicida"Journal of Bacteriology, 2003, 185 (15), 4336.

1) Heikkila RE, Cabbat FS, Cohen G. “In vivo inhibition of superoxide dismutase in mice by diethyldithiocarbamate”, J Biol Chem., 1976, 251, 2182.

Q SODキットを使用して、測定した際の[unit]算出の方法はどのようにすればよいのでしょうか？: A

SOD活性の定義としましては、チトクロムｃ法の時も同様ですが、「IC50=1U:発色を50％阻害する時のSODの活性を示す濃度」になります。

このキットでの1Uの定義は、「WSTの発色を50%阻害する時のSODの活性」です。
従って、サンプルを希釈していき、IC50の時の希釈倍率のSODの活性が1Uです。

「U」は「単位」ですので、これを「量」に換算します。

この時、タンパク量を容量で算出するのか、重量で算出するのかで、1U/mlもしくは1U/mg proteinと表示します。

カタログに記載している阻害曲線は、活性既知のSODを希釈し測定しています。
たまたまIC50値が1U/ml付近になっています。

<50％阻害するサンプル濃度を1Uとする方法：ユニットをWST法として表現>
例：サンプルのIC50値の希釈倍率を x10.75　とする。

（このキットでは測定に使用するサンプル量が20μl、全量が240μl）

IC50を示す測定時のサンプル希釈率は「10.75倍」になります。
　–>『10.75倍に希釈された液、「20 μl中」に存在する SOD 量が1単位である』
　となります。

単位で考えると、測定時のものが「１U」ですので、希釈前サンプルは「10.75U」　となります。

アッセイで添加したのは20 μ （0.02 ml)ですので、サンプル 1 mlあたりのunit数を計算する。

アッセイで添加する20 μl中に1単位含まれるので
10.75/0.02 = 537.5 U/ml

SOD抽出過程（前処理）で希釈が生じていれば、元々の試料の活性は前処理での希釈を計算して
希釈率ｘ537.5 = ○ U/ml of サンプル

となります。

＊ここでは容量に換算しております。
　例えば：血液であれば　「○ U/ml of blood」など
　タンパク量や質量(mg)に換算したい場合は、さらに別途換算してください。

Q 酸化ストレスの指標としてSOD様活性はよく測定されますが、 SOD様活性の他に酸化ストレスマーカーとなるものはありますか？: A

酸化ストレスマーカーについてまとめた資料を作成しております。
カスタマーサポートの視点から、各酸化ストレスマーカーの特徴・測定サンプルの前処理方法などを記載しておりますので、ご参照ください。

下記URLよりダウンロード可能です。

「はじめての酸化ストレスマーカー測定プロトコル～カスタマーサポートの視点から～」

Q SOD様活性を測定する方法としてはどのようなものがありますか？: A

一番一般的に知られている方法は
・チトクロムｃ法

　です。その他

・NBT法

・エピネフリン法

・亜硝酸法

・ESR法

などが知られております。

NBT法はxanthine/xanthine oxidaseをスーパーオキサイド産生系とし、テトラゾリウム塩の還元反応を利用しており、操作が簡便であることから汎用されております。

しかし、生成するホルマザンが不溶性の沈殿物であることやNBTがxanthine oxidaseと直接反応することから100％阻害率を測定できないなどの問題がありました。

弊社のWST法は、発色基質として「WST-1」を使用しこれらの問題を解決しております。

（測定原理はNBTと同様とお考え下さい）

Q superoxideとWST-1の反応の阻害が０（発色が100％）となるところが全く発色しません。酵素(Xanthine oxidase)が失活しているのでしょうか？: A

酵素(Xanthine oxidase)は失活していなくても、働いていない場合があります。酵素溶液は懸濁液になっていますので静置して置くと酵素が沈んでしまいます。良く振ってからご使用ください。上澄みだけを取ってしまうとsuperoxideは全く発生しませんので発色もしません。

Q 脂溶性成分は測定できますか？: A

本キットは水溶性サンプルの測定を主な対象としており、水に溶解できないサンプルは測定出来ません。なお、脂溶性物質を低濃度域で溶解可能な場合は、DMSOやエタノールに一度溶解後、蒸留水やPBSで出来る限り希釈し、測定してください。
注意①サンプル中にDMSOは5%、エタノールは25%含まれますと測定に影響します。溶媒濃度を測定に影響しない濃度まで希釈しご使用ください。

注意②検討の際は、必ずBlank2とBlank3を測定し、誤発色等の影響がないかご確認ください。

Q SOD Assay Kit – WSTは食品等の測定も可能となっておりましたが、必要な前処理の方法を教えて下さい。: A

下記のような方法により処理し、測定を行うことが出来ます。

<茶葉>
茶葉資料10 gに蒸留水400 mlを加えてホモジナイズ処理し、5 ℃で48時間静置して抽出し、ろ過(No.2:アドバンテック東洋(株))した後、さらにメンブレンフィルター(pore size 0.45μm:富士フィルム(株))で処理する。
<ワイン>
直接メンブランフィルターでろ過し、測定試料とする。
緑茶や赤ワイン等はそのもの自体に着色がありますが、100倍程度に希釈すると測定に対する色の影響は回避できます。
<植物・野菜類>
1)蒸留水(野菜の重量に対し5倍量程度）で4 ℃、1分間ホモジナイズする。
2)ホモジネートをろ紙でろ過し、ろ液(水での抽出物）を凍結乾燥する。
3)凍結乾燥したものを0.1 mol/lリン酸バッファー(pH7.4)に溶かし、これを測定試料とする。溶かしたものはなるべく早く使用する。
＊上記試料により得られた活性値は、水による抽出物の凍結乾燥後の重量もしくはホモジナイズ前の野菜重量当りの活性値とする。

【参考文献】
日本食品科学工学会誌,2002, 49(1),25～31.
日本食品科学工学会誌,2002, 49(10),679～682.

-注-
食品中にはキットのに使用している色素を直接発色させてしまう還元物質が多く存在します。これまで得られている報告では20～100倍に希釈する事によりその影響を押さえることが出来ております。

Q 測定に影響を与える物質にはどのようなものがありますか？: A

アスコルビン酸、グルタチオン(還元型)など還元性物質は正誤差を与えます。
これらの物質が下記の濃度存在した場合10％程度の吸光度の上昇が認められますが、
吸光度の上昇は[blank2]として差し引くことにより影響は回避できます。
・ascorbic acid：0.1 mmol/l

・glutathione,reduced form：5 mmol/l

・bovine serum albumin(BSA)：5% w/v

（BSAは吸光度の上昇は見られませんが、SOD様活性を示しますのでこれよりも高濃度にならないようにして下さい）

Q 組織の前処理に使用するショ糖緩衝液はどのように調製すればよいですか？

下記の調製例をご参照ください。

＜ショ糖緩衝液 1000mlを調製する場合＞

試薬	使用量（モル濃度）
ショ糖	85.57 g（0.25 mol/l）
2-Amino-2-hydroxymethyl-1,3-propanediol （トリス緩衝剤）	1.21 g（0 mmol/l）
2NA(EDTA・2Na)	372 mg（1 mmol/l）

上記3種類の試薬を800 ml程度の純水に加えて溶解させ、攪拌しながら塩酸を加えてpH 7.4に調整する。
その後、純水を加え全量1000 mlとする。

取扱条件

取扱条件
保存条件: 冷蔵
危険・有害シンボルマーク

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脂肪滴測定キット Lipid Droplet Assay Kit – Blue 同仁化学研究所

发表于2025年12月27日由whatman中国官网

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Lipid Droplet Assay Kit – Blue

05 細胞染色用色素

Lipid Droplet Assay Kit – Blue

細胞染色用色素
細胞染色用色素
細胞機能解析

脂肪滴測定キット

製品コード

LD05　 Lipid Droplet Assay Kit – Blue

容　量	メーカー希望小売価格	富士フイルム和光純薬
1 set ^※	￥26,800	349-09641

※ 96 well plate : 1 枚分、フローサイトメトリー: 40 アッセイ分

キット内容

1 set ^※	・Staining Dye – Blue ・loading Buffer (10x)	×1 6 ml ×1

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マニュアル

取扱説明書日本語
Manual English

技術情報

脂肪滴とその機能

脂肪滴は、トリアシルグリセロールやコレステロールエステルなどの中性脂肪が単分層のリン脂質一重膜によって取り囲まれた構造体です。脂肪滴は脂肪細胞のみに存在するわけではなく、すべての細胞に普遍的に存在しています。最近の研究から、脂肪滴はその表面に種々のタンパク質が結合し、体内の脂質代謝制御において重要な役割を担っていることが明らかになってきています¹⁾。近年、脂肪滴とオートファジー²⁾、細胞老化³⁾ といった細胞内現象との関連性も示唆されており、脂肪滴の形成・成長・融合・分解のメカニズムをより詳細に解明するツールが待ち望まれています。

1) T. Fujimoto et al., “Lipid droplets: a classic organelle with new outfits.” Histochem Cell Biol., 2008, 130(2), 263.
2) R. Singh et al., “Autophagy regulates lipid metabolism.” Nature, 2009, 458(7242), 1131.
3) M. Yokoyama et al., “Inhibition of endothelial p53 improves metabolic abnormalities related to dietary obesity.” Cell Reports, 2014, 7(5), 1691.

取扱条件

取扱条件
保存条件: 冷蔵

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脂肪滴測定キット Lipid Droplet Assay Kit – Deep Red 同仁化学研究所

发表于2025年12月27日由whatman中国官网

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Lipid Droplet Assay Kit – Deep Red

05 細胞染色用色素

Lipid Droplet Assay Kit – Deep Red

細胞染色用色素
細胞染色用色素
細胞機能解析

脂肪滴測定キット

製品コード

LD06　 Lipid Droplet Assay Kit – Deep Red

容　量	メーカー希望小売価格	富士フイルム和光純薬
1 set ^※	￥26,800	346-09651

※ 96 well plate : 1 枚分、フローサイトメトリー: 40 アッセイ分

キット内容

1 set ^※	・Staining Dye – Deep Red ・loading Buffer (10x)	×1 6 ml ×1

試験成績書

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マニュアル

取扱説明書日本語
Manual English

技術情報

脂肪滴とその機能

取扱条件

取扱条件
保存条件: 冷蔵

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バイオフィルム形成量・形成阻害測定キット Biofilm Formation Assay Kit 同仁化学研究所

发表于2025年12月27日由whatman中国官网

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Biofilm Formation Assay Kit

06 細菌研究用試薬

Biofilm Formation Assay Kit

細菌研究用試薬
食品機能評価
バイオフィルム

バイオフィルム形成量・形成阻害測定キット

バイオフィルム形成量および薬剤のバイオフィルム形成阻害を測定できる
測定の手間を大幅に低減
バラツキを抑えることが可能

製品コード

B601　 Biofilm Formation Assay Kit

容　量	メーカー希望小売価格	富士フイルム和光純薬
96 tests	￥17,400	340-09573

「試験片用バイオフィルム形成能測定キット」をラインナップ！

・独自開発の蓋(TestPiece Holder)で、任意の素材をを簡便に測定できます

キット内容

96 tests	・Crystal Violet Solution ・96-peg lid ・96-well Plate	22 ml ×1 ×1 ×10

試験成績書

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ご購入方法
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マニュアル

取扱説明書日本語
Manual English

Biofilm Formation Assay Kitの特長と操作

技術情報

特徴① 測定の手間を大幅に低減

既存法はマイクロプレートの底にバイオフィルムを形成するため、菌の培養に伴う培地交換や、染色工程前後の洗浄作業に多くの手間を要していました。本キットは蓋に固定されたピン上にバイオフィルムを形成させるため、培地交換や染色工程が蓋を移すだけで完了し、操作が非常に簡便です。

参考文献

参考文献を表示する

文献No.	対象サンプル	引用（リンク）
1)	Streptococcus mutans （ATCC 35668）	I. Okamoto, H. Miyaji, S. Miyata, K. Shitomi, T. Sugaya, N. Ushijima, T. Akasaka, S. Enya, S. Saita and H. Kawasaki, "Antibacterial and Antibiofilm Photodynamic Activities of Lysozyme-Au Nanoclusters/Rose Bengal Conjugates", ACS Omega, 2021, doi:10.1021/acsomega.1c00838.
2)	A. baumannii （MDRAB）	Y. Sato, T. Ubagai, S. T.-Nagakawa, Y. Yoshino, Y. Ono, "Effects of colistin and on multidrug-resistant Acinetobacter baumannii biofilms: advantages and disadvantages of their combination", Sci. Rep., 2021, 11, 11700. doi:10.1038/s41598-021-90732-3.
3)	Staphylococcus aureus	S. Zhang, X. Qu, J. Jiao, H. Tang, M. Wang. Y. Wang, H. Yang, W. Yuan and B. Yue, " enhances aminoglycosides efficacy against implant infections caused by methicillin-resistant Staphylococcus aureus, persisters and biofilms", Bioact. Mater., 2021, doi: 10.1016/j.bioactmat.2021.11.019.
4)	Vibrio parahaemolyticus （腸炎ビブリオ）	M. Billaud, F. Seneca, E. Tambutté and D. Czerucka, "An Increase of Seawater Temperature Upregulates the Expression of Vibrio parahaemolyticus Virulence Factors Implicated in Adhesion and Biofilm Formation", Frontiers in Microbiology, 2022, 13, 840628.
5)	R. capsulatus	T. Shimizu, T. Aritoshi, J. T. Beatty and T. Masuda, "Persulfide-Responsive Transcription Factor SqrR Regulates Gene Transfer and Biofilm Formation via the Metabolic Modulation of Cyclic di-GMP in Rhodobacter capsulatus", 2022, doi:10.3390/microorganisms10050908.

よくある質問

Q バイオフィルムの形成条件はどのように検討すればいいですか？: A

バイオフィルム形成条件の検討項目としては、培地の種類、菌播種濃度、培地の交換回数、培養時間、培養温度などが挙げられます。

そのうち、培地の種類、菌播種濃度、培地の交換回数、培養時間を検討する場合の実験例をご紹介致します。
培養温度を検討される場合には、Biofilm Formation Assay Kit（製品コード：B601）を複数ご用意頂く必要がございます。
———————————————————————————————
形成量検討例-①
この検討により培地の種類、菌播種濃度、培地交換条件下でのバイオフィルム形成量を確認できます。

（プレート配置例）

日程表

手順

1)一日目：96-well plate① A, B行の各ウェルに培地A～Dで調液した菌濃度①, ②の菌液を配置例と同じように180 μl播種する。
　C～H行は空のままにする。96-peg Lidを被せ、微生物の成長に適した温度で24時間培養する。
　※例：菌濃度①約10⁷CFU/ml、菌濃度②約10⁶CFU/ml
2)二日目：96-well plate② A, B行の各ウェルに菌を含まない培地を配置例と同じように180 μl入れる。
　C, D行の各ウェルに培地A～Dで調液した菌濃度①, ②の菌液を配置例と同じように180 μl播種する。E～H行は空のままにする。
　手順1)の96-peg Lidを96-well plate②に被せ、微生物の成長に適した温度で引き続き24時間培養する。
3)三日目：96-well plate③ A～D行の各ウェルに菌を含まない培地を配置例と同じように180 μl入れる。
　E，F行の各ウェルに培地A～Dで調液した菌濃度①, ②の菌液を配置例と同じように180 μl播種する。G，H行は空のままにする。
　手順2)の96-peg Lidを96-well plate③に被せ、微生物の成長に適した温度で引き続き24時間培養する。
4)四日目：96-well plate④ A～F行の各ウェルに菌を含まない培地を配置例と同じように180 μl入れる。
　G，H行の各ウェルに培地A～Dで調液した菌濃度①, ②の菌液を配置例と同じように180 μl播種する。
　手順3)の96-peg Lidを96-well plate④に被せ、微生物の成長に適した温度で引き続き24時間培養する。
5)取扱説明書のバイオフィルム形成量・バイオフィルム形成阻害測定の手順(2)～(6)を新しい96-well plateを用いて行う。

———————————————————————————————
形成量検討例-②
この検討により培地の種類、菌播種濃度、培養時間条件下でのバイオフィルム形成量を確認できます。

（プレート配置例）

日程表

手順

1)一日目：96-well plate① A, B行の各ウェルに培地A～Dで調液した菌濃度①, ②の菌液を配置例と同じように180 μl播種する。
　C～H行は空のままにする。96-peg Lidを被せ、微生物の成長に適した温度で24時間培養する。
　※例：菌濃度①約10⁷CFU/ml、菌濃度②約10⁶CFU/ml
2)二日目：96-peg Lidを外す。96-well plate①の A, B行は培地を交換せずに培養を継続する。
　C，D行の各ウェルに培地A～Dで調液した菌濃度①, ②の菌液を配置例と同じように180 μl播種する。E～H行は空のままにする。
　外しておいた96-peg Lidを96-well plate①に被せ、微生物の成長に適した温度で引き続き24時間培養する。
3)三日目：96-peg Lidを外す。96-well plate①の A～D行は培地を交換せずに培養を継続する。
　E, F行の各ウェルに培地A～Dで調液した菌濃度①, ②の菌液を配置例と同じように180 μl播種する。G, H行は空のままにする。
　外しておいた96-peg Lidを96-well plate①に被せ、微生物の成長に適した温度で引き続き24時間培養する。
4)四日目：96-peg Lidを外す。96-well plate①の96-well plate①の A～F行は培地を交換せずに培養を継続する。
　G，H行の各ウェルに培地A～Dで調液した菌濃度①, ②の菌液を配置例と同じように180 μl播種する。
　外しておいた96-peg Lidを96-well plate①に被せ、微生物の成長に適した温度で引き続き24時間培養する。
5)取扱説明書のバイオフィルム形成量・バイオフィルム形成阻害測定の手順(2)～(6)を新しい96-well Plateを用いて行う。

Q どのような菌種での測定実績がありますか？: A

小社ではBiofilm Formation Assay Kit（本製品）ならびにBiofilm Viability Assay Kit（製品コード：B603）を用いたバイオフィルムの評価において、以下の菌種での評価実績がございます。
　・Staphylococcus aureus（黄色ブドウ球菌）
　・Pseudomonas aeruginosa（緑膿菌）
　・Escherichia coli（大腸菌）
　・Streptococcus mutans（虫歯の原因菌のひとつ）
　・Porphyromonas gingivalis（歯周病の代表的な原因細菌）

上記の細菌を用いた実験例や培養条件等は、取扱説明書をご参照ください。

Q バイオフィルムの形成阻害や薬剤効果を評価するには、どの程度のバイオフィルム形成量が必要ですか？: A

Biofilm Formation Assay Kit（製品コード：B601）を利用した場合、測定手順の最後に得られるクリスタルバイオレット(CV)溶液の吸光度として、0.5 以上(590 nm)を目安としています。

取扱条件

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バイオフィルム薬剤効果測定キット Biofilm Viability Assay Kit 同仁化学研究所

发表于2025年12月27日由whatman中国官网

上海金畔生物科技有限公司代理日本同仁化学试剂盒全线产品，欢迎访问日本同仁化学dojindo官网了解更多信息。

Biofilm Viability Assay Kit

06 細菌研究用試薬

Biofilm Viability Assay Kit

細菌研究用試薬
食品機能評価
バイオフィルム

バイオフィルム薬剤効果測定キット

バイオフィルム内微生物の生存率や活性度合を確認できる
測定の手間を大幅に低減
バラツキを抑えることが可能

製品コード

B603　 Biofilm Viability Assay Kit

容　量	メーカー希望小売価格	富士フイルム和光純薬
96 tests	￥20,000	347-09583

「試験片用バイオフィルム形成能測定キット」をラインナップ！

・独自開発の蓋(TestPiece Holder)で、任意の素材をを簡便に測定できます

キット内容

96 tests	・WST Solution ・Electron Mediator Reagent ・96-peg lid ・96-well Plate	1 ml×1 0.12 ml×1 ×1 ×10

試験成績書

SDSダウンロード

ご購入方法
お問い合わせ

マニュアル

取扱説明書日本語
Manual Engllish

Biofilm Viability Assay Kitの特長と操作

技術情報

測定原理

本キットはバイオフィルム内の生菌の代謝活性を測定することで、バイオフィルム内微生物に対する薬剤効果を確認するキットです。エネルギー代謝活動に関与する補酵素であるNADH（NADPH）は電子メディエーターを介してWSTを有色のformazanへと還元します。この還元能を利用することで微生物の代謝活性を検出します。

参考文献

参考文献を表示する

1) 古畑勝則, "Legionella pneumophilaの実験的バイオフィルム形成条件の検討", Bacterial adherence & Biofilm., 2019, 33, 39-42.

2) Y. Sato, T. Ubagai, S. T.-Nagakawa, Y. Yoshino, Y. Ono, "Effects of colistin and tigecycline on multidrug-resistant Acinetobacter baumannii biofilms: advantages and disadvantages of their combination", Sci. Rep.., 2021, 11, 11700. doi:10.1038/s41598-021-90732-3.

よくある質問

Q 発色試薬添加後のインキュベートはどのくらい行えばいいですか？: A

微生物種や代謝活性により、発色に要する時間は異なります。
初回は一定時間ごとに吸光度を確認しながら、24時間ほどインキュベートされる事をお勧めします。
取扱説明書の図2および図3にS.aureus、S.mutansを用いた実験例を掲載してます、ご参照ください。

Q 450 nm以外のフィルターで測定することは可能ですか？: A

440～480 nmの範囲に入るフィルターをご利用いただけます。

Q バイオフィルムの形成阻害や薬剤効果を評価するには、どの程度のバイオフィルム形成量が必要ですか？: A

Biofilm Formation Assay Kit（製品コード：B601）を利用した場合、測定手順の最後に得られるクリスタルバイオレット(CV)溶液の吸光度として、0.5以上(590 nm)を目安としております。

Q どのような菌種での測定実績がありますか？: A

小社ではBiofilm Formation Assay Kit（製品コード：B601）ならびにBiofilm Viability Assay Kit（本製品）を用いたバイオフィルムの評価において、以下の菌種での評価実績がございます。
　・Staphylococcus aureus（黄色ブドウ球菌）
　・Pseudomonas aeruginosa（緑膿菌）
　・Escherichia coli（大腸菌）
　・Streptococcus mutans（虫歯の原因菌のひとつ）
　・Porphyromonas gingivalis（歯周病の代表的な原因細菌）

上記の細菌を用いた実験例や培養条件等は、取扱説明書をご参照ください。

取扱条件

取扱条件
保存条件: 冷蔵
危険・有害シンボルマーク

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試験片用バイオフィルム形成能測定キット Biofilm TestPiece Assay Kit 同仁化学研究所

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Biofilm TestPiece Assay Kit

06 細菌研究用試薬

Biofilm TestPiece Assay Kit

細菌研究用試薬
食品機能評価
バイオフィルム

試験片用バイオフィルム形成能測定キット

測定の手間を大幅に低減
バラツキを抑えることが可能

製品コード

B606　 Biofilm TestPiece Assay Kit

容　量	メーカー希望小売価格	富士フイルム和光純薬
24 tests	￥26,800	344-09831

ご購入に際してはページ下部の本製品のキット内容についての項をご確認ください。

キット内容

24 tests	・TestPiece Holder ・Crystal Violet Solution	×1 50 ml ×1

試験成績書

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ご購入方法
お問い合わせ

マニュアル

取扱説明書日本語
Manual English

技術情報

動画で紹介！

Tips! TestPiece Holderへの試験片の取り付け方

参考文献

参考文献を表示する

1) Shutao Zhang, Xinhua Qu, Juyang Jiao, Haozheng Tang, Minqi Wang. You Wang, Hongtao Yang, Weien Yuan, Bing Yue, "Felodipine enhances aminoglycosides efficacy against implant infections caused by methicillin-resistant Staphylococcus aureus, persisters and biofilms", Bioact. Mater., 2021, doi:10.1016/j.bioactmat.2021.11.019.

よくある質問

Q 24ウェルプレートは指定のもの以外で使用できますか。: A

TestPiece Holderは、各社24ウェルプレートの形状が僅かに異なるため、指定のもの以外は対応しておりません。
小社ではFalcon^®24-wellプレートに適合することは確認しております。

Q TestPiece Holderの再利用はできるのでしょうか。: A

TestPiece Holderはガンマ線照射して提供しております。再利用は雑菌等のコンタミネーションの可能性があるため推奨致しません。

Q どのような菌種での測定実績がありますか？: A

以下の菌種での評価実績がございます。
　・Staphylococcus aureus（黄色ブドウ球菌）
　・Pseudomonas aeruginosa（緑膿菌）
　・Escherichia coli（大腸菌）

上記の細菌を用いた実験例や培養条件等は、取扱説明書をご参照ください。

Q バイオフィルム測定の経験が無い、または必要な設備や装置がありません。測定の委託はできますか。: A

ページ下部の「お問合せフォーム」よりお問合せください。

取扱条件

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Biofilm TestPiece Assay Kit用24ウェルプレート 24-well Plate 同仁化学研究所

发表于2025年12月27日由whatman中国官网

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24-well Plate

06 細菌研究用試薬

24-well Plate

細菌研究用試薬
食品機能評価
バイオフィルム

Biofilm TestPiece Assay Kit用24ウェルプレート

TestPiece Holderに対応した24-well Plate
小容量(8枚)で購入可能

製品コード

B608　 24-well Plate

容　量	メーカー希望小売価格
8 plates	￥Request

ご注意：	本製品は単品での販売はしていません。
Biofilm TestPiece Assay Kit (B606) をご購入時に合わせてご注文ください。

試験成績書

ご購入方法
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取扱条件

微生物増殖アッセイキット Microbial Viability Assay Kit-WST 同仁化学研究所

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Microbial Viability Assay Kit-WST

06 細菌研究用試薬

Microbial Viability Assay Kit-WST

細菌研究用試薬

微生物増殖アッセイキット

寒天培地法や微量液体希釈法に比べ短時間での検出が可能である
マイクロプレートを使った多検体処理が可能である
培地成分による影響を受けにくい製品である

製品コード

M439　 Microbial Viability Assay Kit-WST

容　量	メーカー希望小売価格	富士フイルム和光純薬
100 tests	￥6,800	348-08913
500 tests	￥24,200	342-08911

キット内容

100 tests	・WST Solution ・Electron Mediator Reagent (DMSO Solution)	1 ml×1 0.1 ml×1
500 tests	・WST Solution ・Electron Mediator Reagent (DMSO Solution)	1 ml×5 0.5 ml×1

試験成績書

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ご購入方法
お問い合わせ

マニュアル

取扱説明書日本語
Manual English
プロトコル生菌の代謝活性を測定したい

技術情報

技術情報の目次

評価にかかる時間を大幅に短縮することが可能
わかりにくい濁度から見やすい色の変化へ
抗菌性試験での従来法(Spot-on-lawn法)との相関
発色原理
測定実績のある微生物

参考文献

参考文献を表示する

文献No.	対象サンプル	引用（リンク）
1)	＜真菌（酵母）＞・Candida albicans JCM 1542	A. Azuma, N. Akiba and S. Minakuchi, "Hydrophilic surface modification of acrylic denture base material by silica coating and its influence on Candida albicans adherence", J. Med. Dent. Sci.., 2012, 59, (1), 1-7.
2)	＜グラム陰性菌＞・Escherichia coli BW25113	H. Y. Oh, J. O. Lee and O. B. Kim, "Increase of organic solvent tolerance of Escherichia coli by the deletion of two regulator genes, fadR and marR", Appl. Microbiol. Biotechnol.., 2012, 96, (6), 1619-27.
3)	＜グラム陰性菌＞・Escherichia coli K-12	T. Nakayashiki, N. Saito, R. Takeuchi, H. Kadokura, K. Nakahigashi, B. L. Wanner and H. Mori, "The tRNA thiolation pathway modulates the intracellular redox state in Escherichia coli", J. Bacteriol.., 2013, 195, (9), 2039-49.
4)	＜グラム陽性菌＞・Streptococcus mutans UA 159 ＜グラム陰性菌＞・Escherichia coli 1.1369	S. He, P. Zhou, L. Wang, X. Xiong, Y. Zhang, Y. Deng and S. Wei, "Antibiotic-decorated titanium with enhanced antibacterial activity through adhesive polydopamine for dental/bone implant", J. R. Soc. Interface., 2014, 11, (95).
5)	＜真菌（カビ）＞・Trichophyton rubrum NBRC 5807	K. Z. Hein, H. Takahashi, T. Tsumori, Y. Yasui, Y. Nanjoh, T. Toga, Z. Wu, J. Grötzinger, S. Jung, J. Wehkamp, B. O. Schroeder, J. M. Schroeder and E. Morita, "Disulphide-reduced psoriasin is a human apoptosis-inducing broad-spectrum fungicide", Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A.., 2015, 112, (42), 13039-44.
6)	＜真菌（カビ）＞・Trichophyton rubrum	S. Arai, T. Yoshino, T. Fujimura, S. Maruyama, T. Nakano, A. Mukuno, N. Sato and K. Katsuoka, "Mycostatic effect of recombinant dermcidin against Trichophyton rubrum and reduced dermcidin expression in the sweat of tinea pedis patients", J. Dermatol.., 2015, 42, (1), 70-6.
7)	＜グラム陽性菌＞・Staphylococcus aureus NBRC13276 ＜グラム陰性菌＞・Pseudomonas aeruginosa NBRC13275	T. Tsukatani, T. Kawaguchi, H. Suenaga, M. Shiga and T. Ikegami, "RAPID AND SIMPLE DETERMINATION OF MINIMUM BIOFILM ERADICATION CONCENTRATION BY A COLORIMETRIC MICROBIAL VIABILITY ASSAY BASED ON REDUCTION OF A WATER-TETRAZOLIUM SALT AND COMBINATED EFFECT OF ANTIBIOTICS AGAINST MICROBIAL BIOFILM", J Microbiol Biotechnol Food Sci.., 2016, 6, (1), 677.
8)	＜グラム陽性菌＞・Streptococcus mutans NCTC 10449	M. Hashimoto, H. Yanagiuchi, H. Kitagawa and Y. Honda, "Inhibitory Effect of Platinum Nanoparticles on Biofilm Formation of Oral Bacteria", Nano Biomed., 2017, 9, (2), 77-82.
9)	＜グラム陽性菌＞・Enterococcus faecalis FSCC 146002 ・Staphylococcus aureus ATCC 25923 ・Staphylococcus epidermidis FSCC 223011 ＜グラム陰性菌＞・Acinetobacter baumannii ATCC 19606 ・Enterobacter cloacae FSCC 145003 ・Escherichia coli ATCC 25922 ・Klebsiella pneumoniae FSCC 167002 ・Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 ・Stenotrophomonas maltophilia ATCC 51331	Z. Xu, X. Zhao, X. Chen, Z. Chen and Z. Xia, "Antimicrobial effect of gallium nitrate against bacteria encountered in burn wound infections", RSC Adv.., 2017, 7, 52266-52273.
10)	＜真菌（酵母）＞・Candida albicans SC5314	J. Nagao, T. Cho, M. Mitarai, K. Iohara, K. Hayama, S. Abe and Y. Tanaka, "Antifungal activity in vitro and in vivo of a salmon protamine peptide and its derived cyclic peptide against Candida albicans", FEMS Yeast Res.., 2017, 17, (1).
11)	＜真菌（カビ）＞・Trichosporon asahii M9459 ・Trichosporon asahii M9925	T. Ichikawa, C. Hirata, M. Takei, N. Tagami, H. Murasawa and R. Ikeda, "Cell surface hydrophobicity and colony morphology of Trichosporon asahii clinical isolates", Yeast., 2017, 34, (3), 129-137.
12)	・土壌微生物	M. Kamitakahara, S. Takahashi, T. Yokoi, C. Inoue and K. Ioku, "Preparation of spherical porous hydroxyapatite granules as support materials for microorganisms", JCS Japan., 2018, 126, (9), 732-735.
13)	＜グラム陽性菌＞・Staphylococcus epidermidis ATCC 14990	F. Boschetto, T. Adachi, S. Horiguchi, D. Fainozzi, F. Parmigiani, E. Marin, W. Zhu, B. McEntire, T. Yamamoto, N. Kanamura, O. Mazda, E. Ohgitani and G. Pezzotti, "Monitoring metabolic reactions in Staphylococcus epidermidis exposed to silicon nitride using in situ time-lapse Raman spectroscopy", J Biomed Opt.., 2018,(5), 1-10.
14)	＜グラム陰性菌＞・Campylobacter concisus ATCC 33237 ・Fusobacterium nucleatum subsp. polymorphum JCM 12990	T. Nambu, D. Wang, C. Mashimo, H. Maruyama, K. Kashiwagi, K. Yoshikawa, K. Yamamoto and T. Okinaga, "Nitric Oxide Donor Modulates a Multispecies Oral Bacterial Community-An In Vitro Study", Microorganisms., 2019, 7, (9), 353.
15)	・Staphylococcus aures	S. Zhang, X. Qu, J. Jiao, H. Tang, M. Wang. Y. Wang, H. Yang, W. Yuan and B. Yue, "Felodipine enhances aminoglycosides efficacy against implant infections caused by methicillin-resistant Staphylococcus aureus, persisters and biofilms", Bioact. Mater., 2021, doi: 10.1016/j.bioactmat.2021.11.019.

よくある質問

Q 1cmや0.25cmのセルを使って測定できますか？: A

基本的には測定は可能です。
但し、96ウエルマイクロプレートと比較して、発色試薬量を多く必要としますので、実際に測定可能な検体数が減少します。

Q 糸状菌での使用実績はありますか？: A

Aspergillus属の麹菌を使用した実績があります。

Q 菌の増殖試験を行う場合、インキュベート時間はどれくらい行えばよいでしょうか？: A

微生物種(菌)の細胞密度により、インキュベート時間が異なります。
例えば、細胞密度が1×10⁶ CFU/mLで、約6時間後にコンフルエントに達する場合、2～5.5時間の間でインキュベートすることで、菌数を確認することができます。

Q 偏性嫌気性菌の測定は可能ですか？: A

偏性嫌気性菌は、酸素に暴露することで死滅し、十分な発色が得られないため測定できません。

Q 微生物の測定実績を教えて下さい。

  本製品ページの「技術情報」に微生物の測定実績を記載しております。  「測定実績のある微生物」の表をご参照ください。

取扱条件

取扱条件
保存条件: 冷蔵
危険・有害シンボルマーク

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グルコース-6-リン酸脱水素酵素活性測定用キット G6PD Assay Kit-WST 同仁化学研究所

发表于2025年12月19日由whatman中国官网

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G6PD Assay Kit-WST

19 その他の生化学、分析用試薬

G6PD Assay Kit-WST

その他の生化学、分析用試薬

グルコース-6-リン酸脱水素酵素活性測定用キット

ヘモグロビンと反応しない
産生されたホルマザンが高水溶性である
発色結果を視認で判断できる
マラリア流行地のような電気が供給されていない地域でも使用できる
従来法では測定できなかった20?50％程度の欠損者に対しても使用できる
プレートリーダーなどを利用して、測定できる

製品コード

G256　 G6PD Assay Kit-WST

容　量	メーカー希望小売価格	富士フイルム和光純薬
100 assays	￥23,800	346-08953
500 assays	￥38,100	340-08951

キット内容

100 assays	・Substrate Mixture ・Dye Mixture	2 ml x 1 2 ml x 1
500 assays	・Substrate Mixture ・Dye Mixture	2 ml x 5 2 ml x 5

試験成績書

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ご購入方法
お問い合わせ

マニュアル

取扱説明書日本語
取扱説明書 English
プロトコル G6PD 活性を測定したい

技術情報

キット以外に必要なもの

・20 μLおよび1000 μLのマイクロピペットとチップ・1.5 mLマイクロチューブ
・蒸留水・1 mol/L HCl

参考文献

参考文献を表示する

1) A. Jalloh, I. S. Tantular, S. Pusarawati, A. P. Kawilarang, H. Kerong, K. Lin, M. U. Ferreira, H. Matsuoka, M. Arai, K. Kita and F. Kawamoto, "Rapid Epidemiologic Assessment of Glucose-6-phosphate Dehydrogenase Deficiency in Malaria-endemic Areas in Southeast Asia Using a Novel Diagnostic kit", Trop. Med. Int. Health, 2004, 9(5), 615.
2) I. S. Tantular, K. Iwai, K. Lin, S. Basuki, T. Horie, H. H. Htay, H. Matsuoka, H. Marwoto, C. Wongsrichanalai, Y. P. Dachlan, S. Kojima, A. Ishii and F. Kawamoto, "Field Trials of a Rapid Test for G6PD Deficiency in Combination with a Rapid Diagnosis of Malaria", Trop. Med. Int. Health, 1999, 4, 245.
3) A. Ishii, H. Asahi and S.Kawabata, "Glucose-6-Phosphate Dehydrogenase Deficiency in Solomon Islands", Jpn. J. Parasitol., 1994, 43, 312.
4) E. Beutler, "A Series of New Screening Procedures for Pyruvate Kinase Deficiency, Glucose-6-Phosphate Dehydrogenase Deficiency, and Glutathione Reductase", Blood, 1966, 28, 553.
5) E. Beutler and M. Mitchell, "Special Modification of the Fluorescent Screening Method for Glucose-6-Phosphate Dehydrogenase Deficiency", Blood, 1968, 32, 816.
6) H. Fujii, K. Takahashi and S. Miwa, "A New Simple Screening Method for Glucose 6-Phosphate Dehydrogenase Deficiency", Acta Haematologica Japonica, 1984, 47, 185.
7) A. Hirono, H. Fujii and S. Miwa, "An Improved Single-step Screening Method for Glucose-6-phosphate Dehydrogenase Deficiency", Jpn. J. Trop. Med. Hyg., 1998, 26, 1.
8) A. Pujades, M. Lewis, A. M. Salvati, S. Miwa, H. Fujii, R. Zarza, R. Alvarez, E. Rull and J. -L. V. Corrons, "Evaluation of the Blue Formazan Spot Test for Screening Glucose 6 Phosphate Dehydrogenase Deficiency", Int. J. Hematol., 1999, 69, 234.

取扱条件

取扱条件
保存条件: 冷凍,遮光

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Multiplex PCR Assay Kit Ver.2酶试剂盒Takara

发表于2025年10月12日由whatman中国官网

Multiplex PCR Assay Kit Ver.2
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Takara	RR062A	Multiplex PCR Assay Kit Ver.2	100 次	￥2,003 ￥1,703
Takara	RR062B (A × 4)	Multiplex PCR Assay Kit Ver.2	400 次	￥7,209

*红字为促销价格，促销时间: 2022年9月1日-2022年10月31日

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■ 制品内容 (100 次量)

2×Multiplex PCR Buffer(Mg²⁺, dNTP plus)*	1.25 ml×2支
Multiplex PCR Enzyme Mix	25 μl

* 内含Buffer、dNTP Mixture等，Mg²⁺的终浓度是2 mM。

■ 制品说明

Multiplex PCR是在同一个PCR反应体系中，使用多对引物，对多个基因同时进行扩增的方法。Multiplex PCR具有节约试剂及器材的经济性，以及同时检出多个基因所带来的迅速性等优点，特别适用于珍贵样品的检测。
本制品是由能快速进行Priming的酶与能很好提高引物退火特异性的反应液配套组成的Multiplex PCR用试剂盒。同以往Multiplex PCR Enzyme相比，可在短时间内特异性地进行无偏差的PCR扩增。另外，调整酶量和反应时间也可对大约200对引物进行Multiplex PCR。使用本制品不仅能进行Multiplex PCR，而且在Extra band及Smear大量出现时，以及难以获得目的扩增片段的Single PCR反应时也可使用，能减少Extra band及Smear的量，可在短时间内特异性扩增目的片段。

■ 保存

-20℃。

■ 注意事项

以下为使用本试剂盒时的注意事项，使用前请一定认真阅读。

1. 进行PCR反应液的配制时，配制成Master mix(2×Multiplex PCR Buffer(Mg²⁺, dNTP plus)、Multiplex PCR Enzyme Mix、灭菌水等混合液)，即配制成数份(～10份)使用量比较方便。制品配制成Master mix的形式后，可以减少试剂分注、混匀次数，并能保证准确的试剂分注，有效降低实验结果间的误差。

2. 2×Multiplex PCR Buffer(Mg²⁺, dNTP plus)、Multiplex PCR Enzyme Mix在混匀时要缓慢进行，避免产生气泡。不要Vortex混匀。在移液操作前，要将试剂轻轻离心至Microtube底部。Multiplex PCR Enzyme Mix因为含有50%的甘油，粘度很高，在取液时一定要缓慢操作。
3. 2×Multiplex PCR Buffer(Mg²⁺, dNTP plus)、Multiplex PCR Enzyme Mix使用前于-20℃保存，使用后也要立即置于-20℃保存。
4. 反应液的配制、分装请一定使用新的(无污染的)枪头，尽量避免污染。
5. 本说明书中的PCR反应条件是使用TaKaRa PCR Thermal Cycler Dice^™时的条件。在使用其它基因扩增仪器时，适宜PCR条件可能会发生变化。

页面更新：2019-11-27 13:42:12

Multiplex PCR Assay Kit Ver.2酶试剂盒Takara

发表于2025年10月3日由whatman中国官网

Multiplex PCR Assay Kit Ver.2
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Takara	RR062A	Multiplex PCR Assay Kit Ver.2	100 Rxns	￥2,003 ￥1,703
Takara	RR062B (A × 4)	Multiplex PCR Assay Kit Ver.2	100 Rxns × 4	￥7,209

*红字为促销价格，促销时间: 2022年9月1日-2022年10月31日

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无标题文档

■ 制品内容 (100 次量)

2×Multiplex PCR Buffer(Mg²⁺, dNTP plus)*	1.25 ml×2支
Multiplex PCR Enzyme Mix	25 μl

* 内含Buffer、dNTP Mixture等，Mg²⁺的终浓度是2 mM。

■ 制品说明

■ 保存

-20℃。

■ 注意事项

以下为使用本试剂盒时的注意事项，使用前请一定认真阅读。

页面更新：2019-11-20 16:23:56

日本同仁化学Glutamate Assay Kit-WST试剂盒货号：G269 谷氨酸的定量检测试剂盒- DOJINDO

发表于2024年6月19日由whatman中国官网

上海金畔生物科技有限公司代理日本同仁化学 DOJINDO代理商全线产品，欢迎访问官网了解更多信息

Glutamate Assay Kit-WST

商品信息

储存条件：0-5度保存，避光，防潮

运输条件：室温

特点：

● 享有显色底物WST专利

● 用于L-Glutamate的定量

产品文献

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1set

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Glutamate Assay Kit-WST试剂盒货号：G269 谷氨酸的定量检测试剂盒

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试剂盒内含

产品概述

原理

操作步骤

实验例

常见问题Q&A

参考文献

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凑单关联产品TOP5

NO.1. FerroOrange 细胞亚铁离子检测

NO.2. Glutamine Assay Kit-WST 谷氨酰胺的定量检测

NO.3. GSSG/GSH Quantification Kit II 氧化型/还原型谷胱甘肽定量

NO.4. Liperfluo 细胞脂质过氧化物检测

NO.5. Mito-FerroGreen 铁离子荧光探针

试剂盒内含

Glutamate Assay Kit-WST试剂盒货号：G269 谷氨酸的定量检测试剂盒

产品概述

谷氨酸不仅用于蛋白质和谷胱甘肽的生物合成，而且还作为神经递质发挥重要作用，谷氨酸过多被认为是引起神经退行性疾病如阿尔茨海默氏病的原因。根据文献报道，胱氨酸/谷氨酸的转运蛋白(xCT)具有吸收胱氨酸放出谷氨酸的功能，而抑制xCT会诱导细胞发生铁依赖性的死亡—铁死亡，近年来针对xCT的癌症研究越来越多。

Glutamate Assay Kit-WST是谷氨酸的定量检测试剂盒。细胞培养基中或细胞内的谷氨酸都可以通过WST的还原反应进行定量，谷氨酸定量的最低浓度为5 μmol/l。此外，本试剂盒还可以使用96孔板进行多样品批量检测。

原理

本试剂盒通过WST的还原反应对细胞和培养基中的谷氨酸进行定量。此外，本试剂盒还包含谷氨酸标准溶液，可用于通过制作标准曲线来定量样品中谷氨酸的浓度。

操作步骤

　只需将细胞培养上清液或组织/细胞裂解溶液转移到孔板中，加入试剂后孵育即可。

Glutamate Assay Kit-WST试剂盒货号：G269 谷氨酸的定量检测试剂盒

实验例

标准曲线的实验例：

样品中的谷氨酸浓度可通过使用该试剂盒的谷氨酸标准溶液制作标准曲线来确定。如果谷氨酸浓度为0.5 mmol/l或更高，则可以通过稀释样品进行检测。

Glutamate Assay Kit-WST试剂盒货号：G269 谷氨酸的定量检测试剂盒

谷氨酰胺和谷氨酸的检测实验例：

将A549细胞接种在6孔板中，用Glutamine Assay Kit-WST和Glutamate Assay Kit-WST分别检测细胞培养上清液中谷氨酰胺和谷氨酸浓度随培养时间的变化。

结果，培养基中的谷氨酰胺浓度随培养时间增加而降低，而谷氨酸浓度则升高。

Glutamate Assay Kit-WST试剂盒货号：G269 谷氨酸的定量检测试剂盒

铁死亡研究中谷氨酸和谷胱甘肽的检测实验例:

据报道通过弹性蛋白，抑制胱氨酸/谷氨酸转运体(xCT)造成铁依赖性的细胞死亡，即细胞铁死亡。在通过弹性蛋白处理后的A549细胞中，确认谷氨酸的释放量和细胞内谷胱甘肽的量。结果显示，通过弹性蛋白处理的细胞中谷氨酸释放的量减少，抑制胱氨酸的摄取，从而导致谷胱甘肽的量减少。

Glutamate Assay Kit-WST试剂盒货号：G269 谷氨酸的定量检测试剂盒

Sulfasalazine (SSZ) 引起的细胞内代谢变化实验例：

将已知会抑制胱氨酸/谷氨酸转运体(xCT)的Sulfasalazine(SSZ)加入到A549细胞后，确认谷氨酸释放量、细胞内ATP、α-酮戊二酸(α-KG)、谷胱甘肽(GSH)以及ROS的变化。

结果显示，SSZ加入后细胞内ATP、谷胱甘肽(GSH)和谷氨酸释放量减少，细胞内α-酮戊二酸和ROS增加。 Glutamate Assay Kit-WST试剂盒货号：G269 谷氨酸的定量检测试剂盒

<使用产品>

· 细胞内GSH：GSSG/GSH Quantification Kit II（货号：G263）⬅电脑浏览点击品名（手机浏览点击此处）

· 细胞内ROS：ROS Assay Kit -Highly Sensitive DCFH-DA-（货号：R252）⬅电脑浏览点击品名（手机浏览点击此处）

· 细胞内ATP：ATP Assay Kit-Luminescence（货号：A550）

· 细胞内α-KG：α-Ketoglutarate Assay Kit-Fluorometric（货号：K261）

<实验条件>

细胞：A549细胞 (1 x 10⁶ cells) 　药物处理时间：48 h

Glutamate Assay Kit-WST试剂盒货号：G269 谷氨酸的定量检测试剂盒

参考文献) Shogo Okazaki et al.,”Glutaminolysis-related genes determine sensitivity to xCT-targeted therapy in head and neck squamous cell carcinoma”.Cancer Sci.,2019,doi:10.1111/cas.14182.

常见问题Q&A

Q1：一个试剂盒可以检测样品的数量是多少？

A1：制备标准曲线和样品(n=3)，可以检测的样品数量如下所示。

100 tests

样品数量(n=3) 24个样品(参照下图)

谷氨酸标准溶液和样品的96孔板排列示意图(n=3)

Glutamate Assay Kit-WST试剂盒货号：G269 谷氨酸的定量检测试剂盒

Q2：配制后的Working solution可以保存多久？

A2：Working solution无法保存，需要现配现用。此外光会影响Working solution的稳定性，所以配制后请避光。

※Working solution配制后，避光室温条件下4 h稳定。当暴露于光线下，溶液的颜色会变成褐色。

Q3：是否可以定量D-Glutamate？

A3：该试剂盒是用于L-Glutamate定量，无法定量D-Glutamate。

Q4：是否可以检测含有还原性物质的样品？

A4：如果样品中含有还原性的物质，则WST染料也会发生显色，此时无法准确定量谷氨酸浓度。实验中如遇到以上情况，可以准备药物对照(不含细胞含药物的培养基+试剂)。

Q5：待测样品可以保存吗？

A5：我们确认过细胞培养上清液样品可以-20°C保存1个月。

细胞裂解样品也可以-20°C保存1个月。但是，在保存之前请使用试剂盒中的Filtration Tube进行脱蛋白处理。

Q6：为什么我的样品孔没有显色？

A6：样品中的谷氨酸浓度可能低于检测限(5 µmol/l)，谷氨酸浓度低于5 µmol/l的样品无法用该试剂盒检测。

如果待测样品被稀释，则稀释样品中含有的谷氨酸浓度可能低于5 µmol/l。请减少稀释比例，从而将检测样品的谷氨酸浓度调整到最低检测限以上。

Q7：是否可以使用450 nm以外波长的滤光片进行检测？

A7：也可以使用490 nm的滤光片。但是，吸光度会低于在450nm处的吸光度。(见下图)

Glutamate Assay Kit-WST试剂盒货号：G269 谷氨酸的定量检测试剂盒

参考文献

1)Cobler,L.et al.,”xCT inhibition sensitizes tumors to γ-radiation via glutathione reduction”,Oncotarget,2018,9,32280-32297.

2)Tobias,M.et al.,”Role of GPX4 in ferroptosis and its pharmacological implication”,Free Radical Bioglogy and Medicine,2019,133,144-152.

3)K. Danchana, H. Iwasaki, K. Ochiai, H. Namba, T. Kaneta, “Determination of glutamate using paper-based microfluidic devices with colorimetric detection for food samples”, Microchem. J., 2022, doi:10.1016/j.microc.2022.107513.

4)Z. Xie, T. Kawasaki, H. Zhou, D. Okuzaki, N. Okada and M. Tachbana, “Targeting GGT1 Eliminates the Tumor-Promoting Effect and Enhanced Immunosuppressive Function of Myeloid-Derived Suppressor Cells Caused by G-CSF”, Front. Pharmacol., 2022, doi:10.3389/fphar.2022.873792.

日本同仁化学Iron Assay Kit -Colorimetric-试剂盒货号：I291 Iron Assay Kit -Colorimetric-组织铁离子定量试剂盒- DOJINDO

发表于2024年6月19日由whatman中国官网

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Iron Assay Kit -Colorimetric-试剂盒货号：I291

Iron Assay Kit -Colorimetric-组织铁离子定量试剂盒

Iron Assay Kit -Colorimetric-

商品信息

储存条件：0-5度保存

运输条件：室温

特点：

● 适合组织检测

● 配有标准品，可定量二价、三价铁含量

● 吸光度法

下载说明书

产品文献

选择规格：

50tests

现货

组织/细胞检测

试剂盒配套计算器（点击查看下载）

Iron Assay Kit -Colorimetric-试剂盒货号：I291 Iron Assay Kit -Colorimetric-组织铁离子定量试剂盒

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试剂盒内含

产品概述

原理

金属离子选择性

加标回收实验

实验例

参考文献

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NO.1. FerroOrange 细胞亚铁离子检测

NO.2. Liperfluo 细胞脂质过氧化物检测

NO.3. Cell Counting Kit-8 细胞增殖毒性检测

NO.4. ROS Assay Kit -Highly Sensitive DCFH-DA- ROS检测

NO.5. GSSG/GSH Quantification Kit II 氧化型/还原型谷胱甘肽

试剂盒内含

Iron Assay Kit -Colorimetric-试剂盒货号：I291 Iron Assay Kit -Colorimetric-组织铁离子定量试剂盒

产品概述

铁是生物体内最重要的金属元素之一，生物体内铁元素的含量虽少，但有着重要的生理作用。近年来，随着铁死亡概念的提出，细胞内铁离子的代谢过程的研究逐渐成为了研究热点。同仁化学研究所开发的 Iron Assay Kit-Colorimetric-试剂盒是一套操作简便的比色法铁离子检测试剂盒。与其他市面上的检测试剂盒相比，可以在更短的时间内进行快速检测。通过比较组织裂解液中的铁离子探针 3-(2-Pyridyl)-5,6-bis(5-sulfo-2-furyl)-1,2,4-triazine, disodium salt的吸光度与还原成二价铁离子的三价铁标准品的吸光度，即可确定组织样品中的二价铁含量。同时，还可以通过试剂盒中的还原剂将样品中的三价铁还原成二价铁，以确定总铁含量，进而计算出样品中三价铁的含量。

原理

Iron Assay Kit -Colorimetric-试剂盒货号：I291 Iron Assay Kit -Colorimetric-组织铁离子定量试剂盒

金属离子选择性

Iron Assay Kit -Colorimetric-试剂盒货号：I291 Iron Assay Kit -Colorimetric-组织铁离子定量试剂盒

加标回收实验

Iron Assay Kit -Colorimetric-试剂盒货号：I291 Iron Assay Kit -Colorimetric-组织铁离子定量试剂盒

实验例

组织样品中的Fe²⁺和 Fe³⁺的检测

1. 称量 100 mg肝脏组织。

2. 加入 1 ml冷 PBS，移液器吹打 20次， Vortex振荡 10 s 14,000 RPM离心 4 min，去除上清。

3. 将样品转移至研钵，加入液氮充分研磨成粉末后，加入 1.3 ml Assay Buffer，回收至微管中。

4. 将含有样品的微管置于超声波水浴中 5 min。（为防止样品温度上升，每 1 min间隔置于冰浴上 20 s）。

5. 16,000 g离心 10 min，除去不溶物。

6. 取 1300 μl上清液，每管分别加入 400 μl上清液，制成二价铁样品、总铁样品、样品空白。

7. Standard管中加入 Reducer solution。（参考图 2 H管 30 μl、 G~C管 20 μl、 B管 40 μl、 A管 20 μl）。

二价品样品管中加入 20 μl Assay Buffer。

总铁样品管中加入 20 μl Reducer solution。

样品空白管中加入 20 μl Assay Buffer。

将所有的 Standard管、样品管、样品空白管 37 培养 15 min。

8. 参考表 1和表 2，加入至 96孔板中 37 培养 60 min，检测 593 nm处的吸光度。

9. 将酶标仪数据拷贝至 “Iron Assay Kit – Excel表 ”，自动计算出二价铁和三价铁浓度。

Iron Assay Kit -Colorimetric-试剂盒货号：I291 Iron Assay Kit -Colorimetric-组织铁离子定量试剂盒

参考文献

No.	检测对象	引用 (含链接)	影响因子
1	组织 (小鼠肿瘤组织)	H. Ren, J. Yong, Q. Yang, Z. Liu, Y. Xu, H. Wang, X. Jiang, W. Miao, X. Li, “Self-assembled FeS-based cascade bioreactor with enhanced tumor penetration and synergistic treatments to trigger robust cancer immunotherapy”, Acta Pharm. Sin. B, 2021, doi:10.1016/j.apsb.2021.05.005.	7.097
2	细胞 Kasumi-1 (人急性白血病细胞)	L. Zhang, Y. Song, K. Cao, Y. Du, M. Han, Z. Shi, F. Yan and S. Feng, “Hepcidin-Based Nanocomposites for Enhanced Cancer Immunotherapy by Modulating Iron Export-Mediated N6-Methyladenosine RNA Transcript”, Adv. Funct. Mater., 2021, doi: 10.1002/adfm.202107195.	18.808
3	细胞 (II型肺泡细胞)	H. Cheng, D. Feng, X. Li, L. Gao, S. Tang, W. Liu, X. Wu, S. Yue, C. Li, Z. Luo, “Iron deposition-induced ferroptosis in alveolar type II cells promotes the development of pulmonary fibrosis”, Biochim. Biophys. Acta, Mol. Basis Dis., 2021, doi: 10.1016/j.bbadis.2021.166204.	5.187
4	细胞 MV4-11; Kasumi-1; NB4 (白血病细胞)	Y. Du, M. Han, K. Cao, Q. Li, J. Pang, L. Dou, S. Liu, Z. Shi, F. Yan and S. Feng, “Gold Nanorods Exhibit Intrinsic Therapeutic Activity via Controlling N6‑Methyladenosine Based Epitranscriptomics in Acute Myeloid Leukemia”, ACS Nano, 2021, doi: 10.1021/acsnano.1c05547.	15.881
5	组织 (人软骨组织)	H. Ren, J. Yong, Q. Yang, Z. Yang, Z. Liu, Y. Xu, H. Wang, X. Jiang, W. Miao, X. Li, “Contribution of ferroptosis and GPX4’s dual functions to osteoarthritis progression”, EBioMedicine, 2022, doi: 10.1016/j.ebiom.2022.103847.	8.143
6	组织 (小鼠肺、肝脏、肾脏)	T. Wu, X. Wang, M. Chen, X. Zhang, J. Zhang, J. Cheng, L. Kong, M. Tang,”Respiratory exposure to graphene quantum dots causes fibrotic effects on lung, liver and kidney of mice”, Food Chem. Toxicol., 2022, doi: 10.1016/j.fct.2022.112971.	6.023
7	组织 (小鼠海马组织)	T. Wu, X. Wang, J. Cheng, X. Liang, Y. Li, M. Chen, L. Kong and M. Tang, “Nitrogen‑doped graphene quantum dots induce ferroptosis through disrupting calcium homeostasis in microglia”, Part. Fibre Toxicol., 2022, doi: 10.1186/s12989-022-00464-z.	9.4
8	组织 (宫颈管粘膜)	T. Wang, M. Gong, Y. Cao, C. Zhao, Y. Lu, Y. Zhou, S. Yao, J. Chen, C. Zhao and R. Ju, “Persistent ferroptosis promotes cervical squamous intraepithelial lesion development and oncogenesis by regulating KRAS expression in patients with high risk-HPV infection”, 2022, Cell Death Discovery, doi: 10.1038/s41420-022-01013-5.	5.241
9	组织 (小鼠肺组织)	M. Li, L. Fu, B. Lv, Y. Xiang, H. Xiang, D. Xu, H. Zhao, “Arsenic induces ferroptosis and acute lung injury through mtROS-mediated mitochondria-associated endoplasmic reticulum membrane dysfunction”, Ecotoxicol. Environ. Saf., 2022, doi: 10.1016/j.ecoenv.2022.113595.	6.291
10	细胞 BEL-7402, SMMC-7721 (人肝癌细胞系)	L. Guan, F. Wang, M. Wang, S. Han, Z. Cui, S. Xi, H. Xu and S. Li, “Downregulation of HULC Induces Ferroptosis in Hepatocellular Carcinoma via Targeting of the miR-3200-5p/ATF4 Axis”, 2022, Oxid. Med. Cell. Longevity, doi: 10.1155/2022/9613095.	6.543
11	组织 (小鼠肺部组织)	Z. Zeng, H. Huang, J. Zhang, Y. Liu, W. Zhong, W. Chen, Y. Lu, Y. Qiao, H. Zhao, X. Meng, F. Zou, S. Cai, H. Dong, “HDM induce airway epithelial cell ferroptosis and promote inflammation by activating ferritinophagy in asthma”, FASEB J., 2022, doi: 10.1096/fj.202101977RR.	5.191
12	组织 (大豆叶片)	Y. Cheng, H. Zhang, W. Zhu, Q. Li, R. Meng, K. Yang, Z. Guo, Y. Zhai, R. Ji, H. Peng, D. Dou, M. Jing, “Ferroptosis induced by the biocontrol agent Pythium oligandrum enhances soybean resistance to Phytophthora sojae”, Environ. Microbiol., doi: 10.1111/1462-2920.16248.	5.476
13	组织 (小鼠睾丸组织)	Y. Zhao, H. Zhang, J. Cui, J. Wang, M. Chen, H. Wang, X. Li, J. Li, “Ferroptosis is critical for phthalates driving the blood-testis barrier dysfunction via targeting transferrin receptor”, Redox Biol., 2022, doi: 10.1016/j.redox.2022.102584.	10.787
14	组织 (小鼠结肠组织)	F. Yang, Y. Chen, Y. Xiao, H. Jiang, Z. Jiang, M. Yang, M. Li, Y. Su, Z. Yan, Y. Lin, D. Li, “pH-sensitive Molybdenum (Mo)-based polyoxometalate nanoclusters have therapeutic efficacy in Inflammatory Bowel disease by counteracting ferroptosis”, Pharmacol. Res., 2023, doi: 10.1016/j.phrs.2023.106645.	10.334
15	组织 (小鼠肺部组织)	W. Tang, J. Qin, Y. Zhou, W. Wang, F. Teng, J. Liu, L. Yi, J. Cui, X. Zhu, S. Wang, J. Dong, Y. Wei, “Regulation of ferroptosis and ACSL4-15LO1 pathway contributed to the anti-asthma effect of acupuncture”, Int. Immunopharmacol., 2023, doi: 10.1016/j.intimp.2022.109670.	5.714
16	组织 (小鼠心脏组织)	H. Hu, L. Li, H. Zhang, Y. Zhang, Q. Liu, M. Chen, J. Ning, Y. Pang, W. Hu, Y. Niu, R. Zhang, “Mechanism of YY1 mediating autophagy dependent ferroptosis in PM2.5 induced cardiac fibrosis”, Chemosphere, 2023, doi: 10.1016/j.chemosphere.2023.137749.	8.943
17	细胞 (HK-2, 人肾皮质近曲小管上皮细胞)	L. Kang, D. Wang, T. Shen, X. Liu, B. Dai, D. Zhou, H. Shen, J. Gong, G. Li, Y. Hu, P. Wang, X. Mi, Y. Zhang, X. Tan, “PDIA4 confers resistance to ferroptosis via induction of ATF4/SLC7A11 in renal cell carcinoma”, Cell Death Dis., 2023, doi: 10.1038/s41419-023-05719-x.	9.685
18	细胞 (HK-2, 人肾皮质近曲小管上皮细胞)	C. Dong, C. Song, Z. He, Q. Song, T. Song, J. Liu, Y. Xiong, X. Su, J. Zhou, X. Yang, W. Liao, “Protective efficacy of Schizandrin B on ameliorating nephrolithiasis via regulating GSK3β/Nrf2 signaling-mediated ferroptosis in vivo and in vitro”, 2023, Int. Immunopharmacol., doi:10.1016/j.intimp.2023.110042.	5.714
19	组织 (小鼠肺部组织)	B. Guo, Z. Zuo, X. Di, Y. Huang, G. Gong, B. Xu, L. Wang, X. Zhang, Z. Liang, Y. Hou, X. Liu, Z. Hu, “Salidroside attenuates HALI via IL-17A-mediated ferroptosis of alveolar epithelial cells by regulating Act1-TRAF6-p38 MAPK pathway”, 2022, Cell Commun. Signaling, doi: 10.1186/s12964-022-00994-1.	7.525
20	组织 (小鼠睾丸组织)	J. Ding, B. Lu, L. Liu, Z. Zhong, N. Wang, B. Li, W. Sheng, Q. He, “Guilu-Erxian-Glue alleviates Tripterygium wilfordii polyglycoside-induced oligoasthenospermia in rats by resisting ferroptosis via the Keap1/Nrf2/GPX4 signaling pathway”, Pharm. Biol., 2023, doi:10.1080/13880209.2023.2165114.	3.889
21	细胞 (人髓核细胞)	X. Yang, Y. Chen, J. Guo, J. Li, P. Zhang, H. Yang, K. Rong, T. Zhou, J. Fu, J. Zhao, “Polydopamine Nanoparticles Targeting Ferroptosis Mitigate Intervertebral Disc Degeneration Via Reactive Oxygen Species Depletion, Iron Ions Chelation, and GPX4 Ubiquitination Suppression”, Adv. Sci., 2023, doi:10.1002/advs.202207216.	17.521
22	组织 (小鼠心脏组织)	J. Pan, W Xiong, A. Zhang, H. Zhang, H. Lin, L. Gao, J. Ke, S. Huang, J. ZHang, J. Gu, A. Chang, C. Wang, “The Imbalance of p53–Park7 Signaling Axis Induces Iron Homeostasis Dysfunction in Doxorubicin-Challenged Cardiomyocytes”, Adv. Sci, 2023, doi:10.1002/advs.202206007.	17.521
23	细胞 (H9c2, 4T1)	T. Chen, Y. Qin, Y. Li, Y. Li, J. Luo, L. Fan, M. Feng, Z. Wang and Y. Zhao, “Chiral Polymer Micelles Alleviate Adriamycin Cardiotoxicity via Iron Chelation and Ferroptosis Inhibition”, Adv. Funct. Mater., 2023, doi:10.1002/adfm.202300689.	19.923
24	细胞 (乳腺癌细胞)	Z. ZHu, H. Shen, J. Xu, Z. Fang, G. Wo, Y. Ma, K. Yang, Y. Wang, Q. Yu, J. Tang., “GATA3 mediates doxorubicin resistance by inhibiting CYB5R2-catalyzed iron reduction in breast cancer cells”, Drug Resistance Updates, 2023, doi:10.1016/j.drup.2023.100974.	22.841
25	组织（the brains of 3 × Tg-AD mice）	Xinlu Li, Jianfeng Chen, Wennuo Feng ,Chao Wang, Minyu Chen, Yifan Li, Jinghong Chen, Xinwei Liu, Qiong Liu, Jing Tian,“Berberine ameliorates iron levels and ferroptosis in the brain of 3 × Tg-AD mice”2023, PHYTOMEDICINE, doi:10.1016/j.phymed.2023.154962	7.9
26	组织（Testicular tissues）	Lipeng Li , Zijie Pei , Ruiting Wu , Yaling Zhang , Yaxian Pang , Huaifang Hu , Wentao Hu , Zihan Geng , Tengfei Feng , Yujie Niu , Guimin Hao , Rong Zhang“FDX1 regulates leydig cell ferroptosis mediates PM2.5-induced testicular dysfunction of mice”，Ecotoxicology and Environmental Safety，2023，doi.org/10.1016/j.ecoenv.2023.115309	6.8
27	细胞（macrophage）	Wenlin Yuan , Yuting Yang , Yingming Wei , Xufei Yu , Jiaqi Bao , Jiahui Zhong , Zhongxiu Wang , Lili Chen“Macrophage ferroptosis promotes MMP2/9 overexpression induced by hemin in hemorrhagic plaque”，Thromb Haemost，2023，doi.org/10.1016/j.intimp.2023.110916	6.7
28	细胞（HT-22）	Zixuan Yuan,ORCID,Xiaoming Zhou ,Yan Zou ,Bingtao Zhang ,Yao Jian ,Qi Wu ,Shujuan Chen and Xin Zhang“Hypoxia Aggravates Neuron Ferroptosis in Early Brain Injury Following Subarachnoid Hemorrhage via NCOA4-Meditated Ferritinophagy”，Antioxidants，2023，doi.org/10.3390/antiox12122097	7.0

日本同仁化学超氧化物歧化酶检测——SOD Assay Kit货号：S311- DOJINDO

发表于2024年6月19日由whatman中国官网

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超氧化物歧化酶检测——SOD Assay Kit货号：S311

超氧化物歧化酶(SOD)检测试剂盒-WST

SOD Assay Kit

商品信息

储存条件：0-5度保存

运输条件：室温

特点：

● 可以检测细胞、组织等多种样品

● 准确性和灵敏度高

● 可以测定100%SOD抑制率

下载说明书

产品文献

SDS下载

选择规格：

100tests

现货

氧化应激与自由基检测方案

试剂盒配套计算器（点击查看下载）

活动进行中

产品概述

检测原理

所需设备和材料

操作步骤

抑制曲线

实验例

食品抗氧化能力的检测

常见问题Q&A

参考文献

活动进行中

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凑单关联产品TOP5

NO.1. Cell Counting Kit-8 细胞增殖毒性检测

NO.2. ROS Assay Kit -Highly Sensitive DCFH-DA- ROS检测

NO.3. GSSG/GSH Quantification Kit II 氧化型/还原型谷胱甘肽

NO.4. Caspase-3 Assay Kit -Colorimetric 细胞凋亡检测

NO.5. DMPO 超氧阴离子和羟自由基检测

产品概述

超氧化物歧化酶 (SOD) 是一种重要的抗氧化酶，它可以催化超氧阴离子 (O₂^–) 的歧化反应，生成过氧化氢和单质氧。目前有很多种直接或间接地测量SOD活性的方法，在这些方法中，使用硝基蓝四唑 (氮蓝四唑NitroblueTetrazolium ，简称NBT) 的一种间接测量方法因其便捷、简单的使用方法而被广泛应用。但是NBT法存在一些缺点，例如生成的甲臜 (Formazan dye) 的水溶性较低，会和黄嘌呤氧化酶的还原型发生反应等问题。SOD检测试剂盒-WST^®提供了更为简便的检测SOD的方法，它是利用同仁学研究所研发的高度水溶性四唑盐WST^®-1(2-(4-碘苯基)-3-(4-硝基苯)-5-(2,4-二磺酸苯基)-2氢-四唑盐,二钠盐)，能与超氧阴离子(O₂^–) 反应生成一种水溶性的染料。WST^®-1被超氧阴离子还原的比率与黄嘌呤氧化酶的活性线性相关，并且会被SOD所抑制 (见下图，即红色区域SOD反应优先发生，SOD反应完后蓝色区域WST^®-1反应才能发生)。因此SOD或者SOD类似物的IC50(50%的抑制浓度)就能用比色法来测定。

特点
1)可以测定100%SOD抑制率。
2)不需要甲醛溶解操作，操作简单。
3)一次可以进行多样本的测定。
4)由于灵敏度高，可以提高样品的稀释倍率，所以可以抑制干扰物质带来的影响。

检测原理

超氧化物歧化酶检测——SOD Assay Kit货号：S311

所需设备和材料

2-20 µl和20-200 µl的可调式移液器、多通道移液器，酶标仪（450 nm）、96孔板、37℃培养箱

操作步骤

用96孔板，制作样品到检测可在1小时内完成

超氧化物歧化酶检测——SOD Assay Kit货号：S311

抑制曲线

Cu,Zn-SOD的抑制曲线

超氧化物歧化酶检测——SOD Assay Kit货号：S311

实验例

高知大学的岛村等人对石茶制作的每一步都测定了其SOD活性。据报道，在制造过程中和微生物相关的需氧发酵和厌氧发酵极大地增加了SOD样活性，并且在发酵过程中抗氧化能力随着茶提取物成分的变化而改变。

“ 石茶生产过程中儿茶素含量和超氧阴离子清除活性的变化”，日本食品科学技术学会学报，55（12），640

超氧化物歧化酶检测——SOD Assay Kit货号：S311

L：新鲜树叶

SL：蒸煮的树叶

PFL：预发酵（有氧条件下发酵几天）树叶

FL：发酵（在厌氧条件下发酵数天）树叶

DL：晒干（数天）树叶

食品抗氧化能力的检测

我们知道，许多由呼吸和各种外在因素产生的活性氧，会降低机体功能，促进各种疾病的发病和老化。
有越来越多对这此类现象的防御机制(抗氧化能力)的文章出现，关于利用食品所具有的抗氧化能力维持健康、预防疾病的研究也备受关注。

常见问题Q&A

Q1：“1 Unit”的定义是什么？

A1：1 Unit是指样品中的还原性染料（如细胞色素C，WST-1，NBT或XTT）与超氧阴离子之间的比色反应，50%被抑制时的点。例如如果不含任何SOD的样品溶液的O.D.值为1.0的话，那么另一个O.D.值为0.5的样品则被定义为具有1个单位的酶活性。可以使用这个单位来确定样品中的

SOD活性。使用不同染料或方法检测SOD活性，它们之间不具有可比性。

Q2：我能使用SOD标准品来确定样品溶液的SOD活性吗？

A2：可以。制备标准曲线，确定样品溶液的SOD活性。SOD Bovine Erythrocytes

（CAS# 9054-89-1，EC 1.15.1.1）能够从Sigma（Catalog# S2525）购得。

Q3：是否可以用动力学法来测定SOD活性？

A3：可以。因为在20分钟内的生色比率是保持一致的，可以测量直线上升阶段5分钟内的斜率来测定SOD活性。

Q4：如果样品自身带有较深的颜色，这样的样品可以使用吗？

A4：可以。稀释样品可以减小干扰，将样品孔的O.D.值减去Blank 2的O.D.值就可以扣除本底的颜色。但是如果样品溶液的SOD活性过低是不能检测出的。

Q5：如何能够制备更多的Dilution Buffer？

A5：Dilution Buffer为PBS。请按以下浓度配制：137 mM NaCl，2.7 mM KCl，

1.47 mM KH₂PO₄， 8.1 mM Na₂HPO₄，pH 7.4。

Q6：使用该试剂盒能否分别检测Mn-SOD和Cu/Zn-SOD？

A6：可以。要单独检测Mn-SOD活性，可以添加KCN阻断Cu/Zn-SOD活性。向样品中加入

1 mM的KCN可以完全阻断Cu/Zn-SOD活性。要测定Cu/Zn-SOD的活，可以用总的SOD活性减去Mn-SOD活性，就可以得到。

Q7：怎样保存样品？

A7：在-80℃可以保存1年。

Q8：能否使用该试剂盒检测超氧化物阴离子的水平？

A8：不必用这个试剂盒，可以使用WST-1来检测超氧化物。但是必须有一个检测样品溶液中超氧化物量的标准。因为超氧化物不稳定，而且会和其它物质反应，要确定系统中生成的超氧化物的总量是比较困难的。试剂盒中的黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶体系可以被用作检测每个样品中超氧化物相对生成量的标准。

参考文献

1. Manganese superoxide dismutase polymorphism affects the oxidized low-density lipoproteininduced apoptosis of

macrophages and coronary artery disease, European Heart Journal, 2008, 29, 1267-1274

2. Extracellular Superoxide Dismutase Accelerates Endothelial Recovery and Inhibits In-Stent Restenosis in Stented

Atherosclerotic Watanabe Heritable Hyperlipidemic Rabbit Aorta,

Journal of the American College of Cardiology, 2007, 50, 2249-2253

3. An Abnormal Mitochondrial–Hypoxia Inducible Factor-1-Kv Channel Pathway Disrupts Oxygen Sensing and Triggers

Pulmonary Arterial Hypertension in Fawn Hooded Rats: Similarities to Human Pulmonary Arterial Hypertension,

Circulation, 2006, 113, 2630-2641

4. Deficient plastidic fatty acid synthesis triggers cell death by modulating mitochondrial reactive oxygen species,

Cell Research, 2015, 25, 621-633

5. A Tau-Targeted Multifunctional Nanocomposite for Combinational Therapy of Alzheimer’s Disease,

ACS Nano, 2018, 12(2), 1321-1338

6. Endothelial Cell Palmitoylproteomic Identifies Novel Lipid-Modified Targets and Potential Substrates for Protein Acyl

Transferases, Circulation Research, 2012, 110(10), 1336-44

7. Lung EC-SOD overexpression attenuates hypoxic induction of Egr-1 and chronic hypoxic pulmonary vascular remodeling,

American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine, 2008, 295, L422-L430

8. Inhaled Ethyl Nitrite Prevents Hyperoxia-impaired Postnatal Alveolar Development in Newborn Rats,

American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine, 2007, 176, 291-299

9. In vivo guiding nitrogen-doped carbon nanozyme for tumor catalytic therapy,

Nature Communications, 2018, 9(1), 1440

10. A lytic polysaccharide monooxygenase-like protein functions in fungal copper import and meningitis,

Nature Chemical Biology, 2020, doi.org/10.1038/s41589-019-0437-9

11. Nestin regulates cellular redox homeostasis in lung cancer through the Keap1-Nrf2 feedback loop,

Nature Communications, 2019, 10, 5043

12. Allelopathic interactions of linoleic acid and nitric oxide increase the competitive ability of Microcystis aeruginosa,

The ISME Journal, 2017, 11, 1865-1876

13. Phase I Study of Copper-Binding Agent ATN-224 in Patients with Advanced Solid Tumors,

Clinical Cancer Research, 2008, 14, 7526-7534

14. Chemoprevention of Carcinogenic Progression to Esophageal Adenocarcinoma by the Manganese Superoxide Dismutase

Supplementation, Clinical Cancer Research, 2007, 13, 5176-5182

15. Development of insulin resistance and obesity in mice overexpressing cellular glutathione peroxidase,

日本同仁化学Glutamine Assay Kit-WST试剂盒 G268 谷氨酰胺的定量检测- DOJINDO

发表于2024年6月19日由whatman中国官网

上海金畔生物科技有限公司代理日本同仁化学 DOJINDO代理商全线产品，欢迎访问官网了解更多信息

Glutamine Assay Kit-WST试剂盒 G268 谷氨酰胺的定量检测

氧化应激与自由基

氧是合成激素和ATP等生物活性物质的一种重要的分子。获得利用氧的能力是生命进化的重要的驱动力。氧可以激活细胞中的各种酶，被激活的氧种类涉及细胞功能的运作。尽管氧本身是生命的一个基本元素，但在氧化应激中，诸如DNA和蛋白质等细胞中的分子有时会被活性氧 (Reactive oxygen species, ROS) 破坏。

抗氧化能力

活性氧

谷胱甘肽

DNA损伤

脂质过氧化物

铁离子

谷氨酰胺、谷氨酸

自由基

NO研究

品名货号用途

Glutamine Assay Kit-WST试剂盒	G268	谷氨酰胺的定量检测
Glutamate Assay Kit-WST试剂盒	G269	谷氨酸的定量检测

细胞中的氧化应激是由代谢、电离辐射和与DNA直接相互作用的致癌化合物产生的ROS导致的。在代谢的过程中，小部分的氧由于一个电子的还原变成超氧阴离子，接着超氧阴离子被超氧化物岐化酶 (SOD) 转变成氧气和过氧化氢。过氧化氢由过氧化氢酶或谷胱甘肽过氧化物酶还原成水。然而如果过氧化氢并没有被这些酶完全还原，当它被铁(Fenton反应)氧化将产生反应性极强的羟自由基。羟自由基还可以由紫外线照射产生或直接电离辐射水产生。羟自由基可以与脂反应产生脂质过氧化物。然而并非所有ROS都是有害的。次氯酸盐离子是一种由中性粒细胞的髓过氧化物酶产生的过氧化氢衍生而来的ROS，它具有杀菌活性。NO也称为内皮来源的舒张因子，它是由NO合成酶产生的。不过NO和超氧阴离子反应可产生具有细胞毒性的过氧亚硝基阴离子。ROS和活性氮化合物在生物系统中具有许多不同的活性。相应地好氧生物会产生防止氧化应激的防御机制。最近在对防御机制以及氧化损伤与疾病或老化过程之间关系的研究中，氧化应激已成为许多研究的焦点。最终已发展出许多用于检测ROS相关或ROS来源的物质的方法，这些物质包括超氧阴离子、超氧化物岐化酶、谷胱甘肽、谷胱甘肽还原酶、谷胱甘肽过氧化物酶、DNA损伤、8-氧基鸟嘌呤、8-硝基鸟嘌呤和蛋白质羰基等。 Glutamine Assay Kit-WST试剂盒 G268 谷氨酰胺的定量检测

日本同仁化学Cell Cycle Assay Solution Blue试剂货号：C549 细胞周期检测试剂盒-蓝色- DOJINDO

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Cell Cycle Assay Solution Blue试剂货号：C549 细胞周期检测试剂盒-蓝色

Cell Cycle Assay Solution Blue

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Cell Cycle Assay Solution Blue试剂货号：C549 细胞周期检测试剂盒-蓝色

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