細胞増殖/細胞毒性アッセイキット Cell Counting Kit-8 同仁化学研究所

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細胞増殖/細胞毒性アッセイキット Cell Counting Kit-8 同仁化学研究所Cell Counting Kit-8

01 細胞増殖/細胞毒性測定用試薬

Cell Counting Kit-8

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細胞増殖/細胞毒性アッセイキット

  • 製品コード
    CK04  Cell Counting Kit-8
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
100 回用 ¥6,200 341-07761
500 回用 ¥15,400 347-07621
2500 回用 ¥42,600 343-07623
5000 回用 ¥79,200 341-07624
10000 回用 ¥113,000 341-08001
キット内容
100 回用 1 ml×1
500 回用 5 ml×1
2500 回用 5 ml×5
5000 回用 5 ml×10
10000 回用 100 ml×1

  • 細胞増殖/細胞毒性アッセイキット Cell Counting Kit-8 同仁化学研究所
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  • プロトコル 細胞増殖/細胞毒性アッセイキット Cell Counting Kit-8 同仁化学研究所 生細胞数を測りたい(吸光測定)
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技術情報

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参考文献

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1) M. Ishiyama, Y. Miyazono, K. Sasamoto, Y. Ohkura and K. Ueno, "A Highly Water-Soluble Disulfonated Tetrazolium Salt as a Chromogenic Indicator for NADH as Well as Cell Viability", Talanta., 199744, 1299.
2) H. Tominaga, M. Ishiyama, F. Ohseto, K. Sasamoto, T. Hamamoto, K. Suzuki and M. Watanabe, "A water-soluble tetrazolium salt useful for colorimetric cell viability assay", Anal. Commun., 1999, 36, 47.
3) T. Miyamoto, W. Min and H. S. Lillehoj, "Lymphocyte Proliferation Response During Eimeria tenella Infection Assessed by a New, Reliable, Nonradioactive Colorimetric Assay", Avian Dis., 2002, 46, 10.
4) K. Yoshimura, A. Tanimoto, T. Abe, M. Ogawa, T. Yutsudo, M. Kashimura and S. Yoshida, "Shiga toxin 1 and 2 Induce Apoptosis in the Amniotic cell line WISH", J. Soc. Gynecol. Investig., 2002, 9, 22.
5) Y. Hayakawa, Y. Hirata, H. Nakagawa, K. Sakamoto, Y. Hikiba, H. Kinoshita, W. Nakata, R. Takahashi, K. Tateishi, M. Tada, M. Akanuma, H. Yoshida, K. Takeda, H. Ichijo, M. Omata, S. Maeda and K. Koike, "Apoptosis signal-regulating kinase 1 and cyclin D1 compose a positive feedback loop contributing to tumor growth in gastric cancer", Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A., 2011, 108, (2), 780.
6) R. Chugh, V. Sangwan, S. P. Patil, V. Dudeja, R. K. Dawra, S. Banerjee, R. J. Schumacher, B. R. Blazar, G. I. Georg, S. M. Vickers and A. K. Saluja, "A Preclinical Evaluation of Minnelide as a Therapeutic Agent Against Pancreatic Cancer", Sci. Transl. Med., 2012, 4, (156), 156ra139.
7) R. Kang, T. Loux, D. Tang, N. E. Schapiro, P. Vernon, K. M. Livesey, A. Krasinskas, M. T. Lotze and H. J. Zeh III, "The expression of the receptor for advanced glycation endproducts (RAGE) is permissive for early pancreatic neoplasia", Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A., 2012, 109, (18), 7031.
8) Y. Matsuo, J H Park, T. Miyamoto, S. Yamamoto, S. Hisada, H. Alachkar and Y. Nakamura, "TOPK inhibitor induces complete tumor regression in xenograft models of human cancer through inhibition of cytokinesis", Sci. Transl. Med., 2014, 6, (259), 259ra145.
9) K. Takayam, Y. Morisaki, S. Kuno, Y. Nagamoto, K. Harada, N. Furukawa, M. Ohtaka, K. Nishimura, K. Imagawa, F. Sakurai, M. Tachibana, R. Sumazaki, E. Noguchi, M. Nakanishi, K. Hirata, K. Kawabata and H. Mizuguchi, "Prediction of interindividual differences in hepatic functions and drug sensitivity by using human iPS-derived hepatocytes", Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A., 2014, 111, (47), 16772.
10) T. Ida, T. Sawa, H. Ihara, Y. Tsuchiya, Y. Watanabe, Y. Kumagai, M. Suematsu, H. Motohashi, S. Fujii, T. Matsunaga, M. Yamamoto, K. Ono, N. O. Devarie-Baez, M. Xian, J. M. Fukuto and Takaaki Akaike, "Reactive cysteine persulfides and S-polythiolation regulate oxidative stress and redox signaling", Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A., 2014, 111, (21), 7606.
11) K. Palumbo-Zerr, P. Zerr, A. Distler, J. Fliehr, R. Mancuso, J. Huang, D. Mielenz, M. Tomcik, B. G Furnrohr, C. Scholtysek, C. Dees, C. Beyer, G. Kronke, D. Metzger, O. Distler, G. Schett and J. H W Distler, Orphan nuclear receptor NR4A1 regulates transforming growth factor-β signaling and fibrosis", Nat. Med., 2015, 21, (2), 150.
12) T. Tu, C. Zhang, H. Yan, Y. Luo, R. Kong, P. Wen, Z. Ye, J. Chen, J. Feng, F. Liu, J. Y Wu and X. Yan, "CD146 acts as a novel receptor for netrin-1 in promoting angiogenesis and vascular development", Cell Res., 2015, 25, (3), 275.
13) S. Ji, Y. Qin, S. Shi, X. Liu, H. Hu, H. Zhou, J. Gao, B. Zhang, W. Xu, J. Liu, D. Liang, L. Liu, C. Liu, J. Long, H. Zhou, P J Chiao, J. Xu, Q. Ni, D. Gao and X. Yu, "ERK kinase phosphorylates and destabilizes the tumor suppressor FBW7 in pancreatic cancer", Cell Res., 2015, 25, (5), 561.
14) N. Li, W. Zhang, M. Khan, L. Lin, JM. Lin, "MoS2-LA-PEI nanocomposite carrier for real-time imaging of ATP metabolism in glioma stem cells co-cultured with endothelial cells on a microfluidic system", Biosens Bioelectron., 2017, 99, (2018), 142.
15) R. Watanabe, T. Kurose, Y. Morishige and K. Fujimori, "Protective Effects of Fisetin Against 6-OHDA-Induced Apoptosis by Activation of PI3K-Akt Signaling in Human Neuroblastoma SH-SY5Y Cells.", Neurochem. Res.., 2018, 43, (2), 488-499.
16) Y. Xu, C. Huang, M. Liu, N. Chen, W. Chen, C. Yang, Y. Zhao, X. Li, J. Duan, S. Liu and S. Yang, "Survivin regulated by autophagy mediates hyperglycemia-induced vascular endothelial cell dysfunction", Exp. Cell Res.., 2018,doi: 10.1016/j.yexcr.2018.01.037 .
17) E. E. Mon, F. Y. Wei, R. N. R. Ahmad, T. Yamamoto, T. Moroishi and K. Tomizawa, "Regulation of mitochondrial iron homeostasis by siderofexin 2 ", J Physiol Sci.,2018,doi:10.1007/s12576-018-0652-2.

よくある質問

Q

カタログや説明書には96 wellプレートでの測定例が示してありますが、 24 wellや12 wellのプレートで測定を行うことができますか? その場合には試薬(Cell Counting Kit)の添加量はどのようにすれば良いでしょうか?

A

96wellプレート以外でも測定できます。

試薬の添加量は使用培地の10分の1を目安にして下さい。
(1 mLであれば試薬を100 μL など)

細胞数などにより、試薬の添加量を少なくして測定できる可能性もありますが、最初は10分の1量を目安として検討されることをお勧めします。

Q

Cell Counting Kit-8とCell Counting Kit-Fの違いは何ですか?

A

Cell Counting Kit-8は細胞内酵素活性を指標とし、比色測定を行います。

【Cell Counting Kit-8】
色素:WST-8
形態:1ボトル

Cell Counting Kit-Fは蛍光での測定となります。
細胞内エステラーゼ活性を指標に蛍光測定を行います。
比色法よりも少ない細胞数から測定出来ます。(50 cells/well 以上)

【Cell Counting Kit-F】
色素:Calcein-AM
形態:1ボトル
 

  • 製品別に細胞増殖および毒性試験法の特徴を一覧表で比較しています 細胞増殖/細胞毒性測定試薬ガイド
Q

Cell Counting Kit-8とMTTの違いは何でしょうか?

A

細胞の酵素により、テトラゾリウムがホルマザンになるというのは共通したところです。
それぞれの違いとしては

【Cell Counting Kit-8】
生成するホルマザンが水溶性である。(溶解操作が不要)
測定波長:400~450 nm
細胞全体の酵素活性を反映している。
生成するホルマザンは細胞毒性がない。
細胞が生きたまま測定できる。

【MTT】
生成するホルマザンが非水溶性である。(有機溶媒等による溶解が必要)
測定波長:550~600 nm
主にミトコンドリアの酵素活性を反映している。
生成するホルマザンが細胞毒性を示す。
細胞を溶かさないと測定できない。

有機溶媒によるホルマザン溶解が必要な分、MTTの方が操作が煩雑になります。
 

  • 製品別に細胞増殖および毒性試験法の特徴を一覧表で比較しています 細胞増殖/細胞毒性測定試薬ガイド
Q

ブランク試験を行うとしたらどのような条件で吸光度を測定すればよいでしょうか? (細胞単独、細胞+培地、培地のみ、いずれも無し etc.)

A

ブランクとして確認するのは3種類の考え方があります。

①細胞+培地にて600 nm以上で測定する。
→細胞を含む培地の測定試料に濁りがある場合に測定します。
濁りによる散乱が測定誤差となるためで、全波長領域で高くなります。試薬の吸収がない600 nm以上で測定します。しかし、濁りがない、殆ど無視できる程度の濁りであれば、測定する必要はありません。

②細胞+培地にて450 nm(測定波長)を測定する。
→細胞を含む培地の測定試料に試薬の発色と同じ吸収がある場合に測定します。
450 nmの吸収ですので、試料の着色で判断できます。着色がなければ必要はありません。

③培地+試薬(CCK)にて450 nm(測定波長)を測定する。
→細胞を含まない培地に試薬を添加した場合の吸収を測定するもので、一般的な試薬ブランクです。
培地に還元性物質が含まれると、試薬が発色します。そのような発色がないことを確認します。
発色が僅かであれば、ブランクとして差し引いてもよいです。しかし、発色が強いようであれば培地中の還元物質を除くか、別の培地をご検討下さい。
また、薬物添加試験を行われるのであれば、添加する薬物で発色しないかを確認してください。

*ブランクとして大きく出てくるのは②の培地に着色がある場合と③の試薬の誤発色です。
 これらをご確認ください。

Q

前培養をするように取扱説明書に指示されていますが、これは必要なものですか?

A

付着細胞では前培養を推奨しております。
トリプシン処理等により培養用フラスコから回収する際に、細胞はダメージを受けます。
そのため、対数増殖期の状態にために細胞の前培養が必要になります。

浮遊細胞の場合は省略しても構いません。

Q

Cell Counting Kit-8の発色に阻害を与えるような物質はなんですか?

A

一般的に還元物質(アスコルビン酸など)が共存していると正誤差が生じます。

フェノールレッドや血清は問題ありません。
フェノールレッドの場合、若干(5%程度)のブランク上昇がみられますが、使用上は問題ありません。

しかし、発色に阻害を与える培地成分が含まれているかもしれませんので、ご使用の培地が誤発色を与えないかご確認の上、ご使用ください。(薬剤も同様です)

また薬剤によっては細胞の機能に影響を与えるものがあるようで、細胞の増殖能は止まっていても酵素活性を働かせたりしていると(タンパク合成を行なったり)発色を起こしたりします。

負誤差の要因としては、特にこの物質が影響があるといわれているものはないのですが、上記と逆で、薬剤により影響を受け、実際には増殖しているのに発色が低く出る
という現象が起ることはあるようです。また、酸化剤も発色を阻害し負誤差を与える要因となることがあります。

Q

細胞数は変わらないのに吸光度が上昇します。どのような要因が考えられますか。

A

以下の要因が考えられます。

(1)還元物質の影響            
(2)細胞当たりの代謝活性の変化   

詳細は下記をご確認下さい。

—————————————————————————————————————————————-
(1)還元物質の影響について

    試料や被験物質に還元性を持つ物質が存在する場合、Cell Counting Kit-8に含まれるWST-8を直接還元し誤発色することがあります。

  細胞が無い系で、Cell Counting Kit-8を添加し、発色の有無を予めご確認ください。
  発色する場合は、Cell Counting Kit-8を添加する前に培地交換を行ってください。

  その他発色に影響を与える因子については、
  よくある質問「Cell Counting Kit-8の発色に阻害を与えるような物質はなんですか?」をご確認ください。
—————————————————————————————————————————————-
(2)細胞当たりの代謝活性の変化について

 細胞当たりの代謝活性が上昇した場合、細胞数が変わらなくても、吸光度が上昇することがあります。

 Cell Counting Kit-8は生細胞の脱水素酵素の活性を指標としています。
 そのため、細胞数の変化がなくても、細胞の代謝活性が変化した場合に吸光度が変化する可能性があります。

 細胞の代謝活性の変化の有無は、別の指標で生細胞を測定*1したり、細胞の代謝産物*2を確認することで
 複合的に評価される場合があります。下記リンク先の資料もご参考ください。

 *1:細胞増殖/細胞毒性測定用試薬の選択ガイド

 *2:細胞内代謝測定
—————————————————————————————————————————————-
 ご不明点がありましたら、小社カスタマーサポートまでお問合せください。
 (free dial:0120-489548 / E-mail:info@dojindo.co.jp)

Q

呈色反応を途中で止めたい(測定までに時間が空く)のですが、どうすれば反応を止められますか?

A

Cell Counting Kitの発色機構は細胞内に存在する脱水素酵素に依存しているので、
呈色反応を止めるには、この酵素反応を止める為に細胞を死滅させます。

下記のいずれかの方法で反応停止を行ってください(添加量は96wellの場合)
反応停止後は24時間以内に測定して下さい。

(1)1 w/v% SDSを10 μL添加する。
  *SDSを添加する場合には、泡立たないように注意して下さい。
   表面に泡があると光散乱して吸光度が高くなります。
  
(2)0.1 mol/ HClを10 μL添加する。
  *もし、緩衝能の高い培地をご使用の場合には、もっと濃い酸を添加してください。
   アルカリ溶液による反応停止では定量が出来ません。
   反応液をアルカリ性にすると、生成したホルマザン色素が青変し、定量性が失われます。

Q

450 nm 以外のフィルターは使用できますか?

A

430-490 nm のフィルターが使用できますが、450 nm のフィルターをご使用いただきますと最も高感度に測定できます。

   参考)WST-8ホルマザンの吸収スペクトル

細胞増殖/細胞毒性アッセイキット Cell Counting Kit-8 同仁化学研究所

Q

Cell Counting Kit-8の保存期間を教えてください。

A

キット溶液は4℃で12ヶ月安定です。遮光して冷蔵にて保管してください。

長期保存の際は、遮光し-20℃で保存してください。

凍結-融解操作はなるべく行わないで下さい。

*容器をプラスチック容器に変更いたしました。(以前はガラス容器)それに伴い、安定性試験を再度行い冷蔵での長期安定性が確認出来ましたので保管条件を変更しております。

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保存条件: 冷蔵,遮光
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関連製品

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  • 細胞増殖/細胞毒性アッセイキット Cell Counting Kit-8 同仁化学研究所

    細胞毒性測定キット

    Cytotoxicity LDH Assay Kit-WST

  • 細胞増殖/細胞毒性アッセイキット Cell Counting Kit-8 同仁化学研究所

    細胞増殖/細胞毒性アッセイキット

    Viability/Cytotoxicity Multiplex Assay Kit

  • 細胞増殖/細胞毒性アッセイキット Cell Counting Kit-8 同仁化学研究所

    微生物増殖アッセイキット

    Microbial Viability Assay Kit-WST

  • 細胞増殖/細胞毒性アッセイキット Cell Counting Kit-8 同仁化学研究所

    グルタチオン定量キット

    GSSG/GSH Quantification Kit

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Cell Counting Kit-F

細胞増殖/細胞毒性アッセイキット Cell Counting Kit-F 同仁化学研究所

  • 細胞増殖/細胞毒性測定用試薬
  • 細胞増殖/細胞毒性測定用試薬
  • 細胞毒性

細胞増殖/細胞毒性アッセイキット

  • 製品コード
    CK06  Cell Counting Kit-F
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
500 回用 ¥16,500 343-07743
キット内容
500 回用 Calcein-AM DMSO solution 110 μl x1

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技術情報

  • 細胞増殖/細胞毒性測定試薬ガイド 細胞増殖および毒性試験法の特徴を一覧表で比較
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参考文献

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1) S. Sakamoto, M. Yokoyama, X. Zhang, K. Prakash, K. Nagao, T. Hatanaka, R. H. Getzenberg and Y. Kakehi, "Increased Expression of CYR61, an Extracellular Matrix Signaling Protein, in Human Benign Prostatic Hyperplasia and Its Regulation by Lysophosphatidic Acid", Endocrinology2004145, 2929.

よくある質問

Q

51Cr-release法とCell Couting Kit-Fとの相関はありますか?

A

Cell Couting Kit-Fとしての相関は確認していませんが、
蛍光試薬として用いているCalcein-AMと51Cr-release法との相関の報告はございます。

N.G.Papadopoulos, et.al., J.Immunol.Methods, 177,101-111(1994)

Q

Cell Counting KitとCell Counting Kit-8、Cell Counting Kit-Fの違いは何ですか?

A

Cell Counting KitとCell Counting Kit-8は、発色色素が違いますが基本的な原理は同じです。
細胞内酵素活性を指標とし、比色測定を行います。
また、Cell Counting Kit-8は、Cell Counting Kitと比較して、「感度が高い」、「試薬安定性が高い」と利点があります。

Cell Counting Kit-Fは蛍光での測定となります。細胞内エステラーゼ活性を指標に蛍光測定を行います。
比色法よりも少ない細胞数から測定出来ます。

各製品で使用される色素と形態は以下の通りです。
 【Cell Counting Kit】
  色素: WST-1
  形態: 2ボトル

 【Cell Counting Kit-8】
  色素:WST-8
  形態:1ボトル

 【Cell Counting Kit-F】
  色素:Calcein-AM
  形態:1ボトル

Q

通常の透明な培養プレートでも測定出来ますか?

A

白か黒のプレートを使用してください。

透明な培養プレートでは測定時の照射した光が散乱してしまい、正確な測定が行えません。
正確な測定を行うためにも、白色及び黒色の蛍光用プレートの御使用をお薦めします。

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取扱条件

取扱条件
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関連製品

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    細胞増殖/細胞毒性アッセイキット

    Cell Counting Kit-8

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    細胞増殖/細胞毒性アッセイキット

    Viability/Cytotoxicity Multiplex Assay Kit

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    細胞毒性測定キット

    Cytotoxicity LDH Assay Kit-WST

  • 細胞増殖/細胞毒性アッセイキット Cell Counting Kit-F 同仁化学研究所

    グルタチオン定量キット

    GSSG/GSH Quantification Kit

細胞数ノーマライゼーションキット Cell Count Normalization Kit 同仁化学研究所

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細胞数ノーマライゼーションキット Cell Count Normalization Kit 同仁化学研究所Cell Count Normalization Kit

01 細胞増殖/細胞毒性測定用試薬

Cell Count Normalization Kit

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  • 細胞増殖/細胞毒性測定用試薬
  • 細胞増殖/細胞毒性測定用試薬
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  • 細胞老化

細胞数ノーマライゼーションキット

  • 製品コード
    C544  Cell Count Normalization Kit
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
200 tests ¥9,000 342-09393
1000 tests ¥22,000 346-09391
キット内容
200 tests ・Staining Solution
・Dilution Buffer
・Quenching Buffer
50 μl×1
10 ml×4
10 ml×2
1000 tests ・Staining Solution
・Dilution Buffer
・Quenching Buffer
250 μl×1
100 ml×2
100 ml×1

  • 細胞数ノーマライゼーションキット Cell Count Normalization Kit 同仁化学研究所
試験成績書

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  • ご購入方法
  • お問い合わせ

マニュアル

  • 取扱説明書 日本語
    細胞数ノーマライゼーションキット Cell Count Normalization Kit 同仁化学研究所
  • Manual English
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  • 老化細胞検出キットとの併用プロトコル
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  • Protocol for a Combined Analysis with Cellular Senescence Plate Assay Kit – SPiDER-βGal [English]
    細胞数ノーマライゼーションキット Cell Count Normalization Kit 同仁化学研究所

技術情報

細胞数補正の必要性

マイクロプレートを用いた細胞の解析では、得られる結果がウェル中の細胞数によって変化する場合があります。その際には、
サンプル中の細胞数に応じた測定値の補正(ノーマライゼーション)が必要になります。

細胞数ノーマライゼーションキット Cell Count Normalization Kit 同仁化学研究所

参考文献

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文献No. ノーマライズ
測定対象
引用(リンク)
1) ROS Level A. Alimu et al, "The 7-days-exposure to gammahexachlorocyclohexane causes resistance to insulin in differentiated mature 3T3-L1 adipocytes", Jpn. J. Clin. Ecol., 2020, 29(2), 45.
2) ATP Assay
Mitochondria
M. Ganbold et al, "New Amphiphilic Squalene Derivative Improves Metabolism of Adipocytes Differentiated From Diabetic Adipose-Derived Stem Cells and Prevents Excessive Lipogenesis", Front. Cell Dev. Biol.2020, 8, 1.  DOI: 10.3389/fcell.2020.577259
3) SA-β-Gal H. Yamamoto-Imoto et al, "Measurement of autophagy via LC3 western blotting following DNA-damage-induced senescence", STAR Protocols, 2022, 3(3), 101539. DOI: 10.1016/j.xpro.2022.101539
4) SA-β-Gal H. Yamamoto-Imoto et al, "Age-associated decline of MondoA drives cellular senescence through impaired autophagy and mitochondrial homeostasis", Cell Reports, 2022, 38, 110444. DOI: 10.1016/j.celrep.2022.110444
5) SA-β-Gal W. Klinngam et al, "Polymethoxyflavones from Kaempferia parviflora ameliorate skin aging in primary human dermal fibroblasts and ex vivo human skin", 2022, 145, 112461. DOI: 10.1016/j.biopha.2021.112461
6) SA-β-Gal B. Tsevegjav et al, "Holliday junction recognition protein as a prognostic biomarker and therapeutic target for oral cancer", Int. J. Oncol., 2022, 60(3), 26. DOI: 10.3892/ijo.2022.5316
7) NAD+ H. Murata et al, "STAT1/3 signaling suppresses axon degeneration and neuronal cell death through regulation of NAD+-biosynthetic and consuming enzymes", Cell Signal.2023, 108, 110717. DOI: 10.1016/j.cellsig.2023.110717
8) Stem cells (585A1) R. Abdalkader et al, "Early Differentiation Signatures in Human Induced Pluripotent Stem Cells Determined by Non-Targeted Metabolomics Analysis", Metabolites, 2023, 13(6), 706. DOI: 10.3390/metabo13060706

よくある質問

Q

他の蛍光色素との同時測定は可能ですか?

A

本キットで使用しているHoechst 33342と励起・蛍光波長が重なる場合は、共染色による評価はできません。
Hoechst 33342の励起波長(300-400 nm)及び蛍光波長(400-550 nm)に重ならないことを確認し評価下さい。

なお上記波長に重ならない場合は、他の蛍光色素で評価した後に本キットにて測定ください。

細胞数ノーマライゼーションキット Cell Count Normalization Kit 同仁化学研究所 細胞数ノーマライゼーションキット Cell Count Normalization Kit 同仁化学研究所

取扱条件

取扱条件
保存条件: 冷蔵,遮光
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細胞数ノーマライゼーションキット Cell Count Normalization Kit 同仁化学研究所

関連製品

この製品に関連する研究では、下記の関連製品も使われています。

  • 細胞数ノーマライゼーションキット Cell Count Normalization Kit 同仁化学研究所

    乳酸測定キット

    Lactate Assay Kit-WST

  • 細胞数ノーマライゼーションキット Cell Count Normalization Kit 同仁化学研究所

    オートファジー(オートファゴソーム)の検出試薬

    DAPGreen – Autophagy Detection

  • 細胞数ノーマライゼーションキット Cell Count Normalization Kit 同仁化学研究所

    老化細胞検出キット

    Cellular Senescence Detection Kit – SPiDER-βGal

  • 細胞数ノーマライゼーションキット Cell Count Normalization Kit 同仁化学研究所

    グルタチオン定量キット

    GSSG/GSH Quantification Kit

細胞周期測定試薬 Cell Cycle Assay Solution Deep Red 同仁化学研究所

上海金畔生物科技有限公司代理日本同仁化学试剂盒全线产品,欢迎访问日本同仁化学dojindo官网了解更多信息。

細胞周期測定試薬 Cell Cycle Assay Solution Deep Red 同仁化学研究所Cell Cycle Assay Solution Deep Red

01 細胞増殖/細胞毒性測定用試薬

Cell Cycle Assay Solution Deep Red

細胞周期測定試薬 Cell Cycle Assay Solution Deep Red 同仁化学研究所

  • 細胞増殖/細胞毒性測定用試薬
  • 細胞増殖/細胞毒性測定用試薬
  • 細胞機能解析
  • 細胞周期

細胞周期測定試薬

  • 細胞の固定化、RNase 処理が不要、試薬を添加するだけ
  • 633 nm のレーザーで励起が可能
  • 製品コード
    C548  Cell Cycle Assay Solution Deep Red
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
50 tests ¥13,900 348-09591
キット内容
50 tests Cell Cycle Assay Solution Deep Red 250 ×l×1

  • 細胞周期測定試薬 Cell Cycle Assay Solution Deep Red 同仁化学研究所
試験成績書

SDSダウンロード

  • ご購入方法
  • お問い合わせ

マニュアル

  • 取扱説明書 日本語
    細胞周期測定試薬 Cell Cycle Assay Solution Deep Red 同仁化学研究所
  • Manual English
    細胞周期測定試薬 Cell Cycle Assay Solution Deep Red 同仁化学研究所

技術情報

測定の手間を大幅に削減

フローサイトメーターでの細胞周期測定で一般的に使用されるPropidium Iodide (PI) を用いた手法と比較して、本製品は細胞膜透過性があり、かつDNA 選択性が高い色素を使用しているため、細胞懸濁液に試薬を添加するだけで測定が可能です。また、633 nm のレーザーで測定可能なため、汎用性の高い488 nm のレーザーを用いた実験と併用することが可能です。

細胞周期測定試薬 Cell Cycle Assay Solution Deep Red 同仁化学研究所

実験例:抗がん剤による細胞機能の変化

細胞周期のG2/M 期に作用して細胞増殖を停止させ、細胞老化を誘導することが知られているDoxorubicin(DOX) をA549 細胞へ添加後、本製品でA549 細胞における細胞周期の変化と、Cellular Senescence Detection Kit – SPiDER-βGal(製品コード:SG03)で細胞老化、JC-1 MitoMP Detection Kit (製品コード:MT09)でミトコンドリア膜電位の変化を確認しました。

細胞周期測定試薬 Cell Cycle Assay Solution Deep Red 同仁化学研究所
細胞周期測定試薬 Cell Cycle Assay Solution Deep Red 同仁化学研究所 細胞周期測定試薬 Cell Cycle Assay Solution Deep Red 同仁化学研究所
細胞周期測定試薬 Cell Cycle Assay Solution Deep Red 同仁化学研究所

技術や使用製品に関する補足

  • 細胞周期測定試薬 Cell Cycle Assay Solution Deep Red 同仁化学研究所

    ミトコンドリア膜電位検出キット

    JC-1 MitoMP Detection Kit

  • 細胞周期測定試薬 Cell Cycle Assay Solution Deep Red 同仁化学研究所

    老化細胞検出キット

    Cellular Senescence Detection Kit – SPiDER-βGal

参考文献

参考文献を表示する

 

文献No. 対象サンプル 引用(リンク)
1) 細胞
(HCAECs)
N. Sasaki, Y. Itakura and M. Toyoda, "Rapamycin promotes endothelial-mesenchymal transition during stress-induced premature senescence through the activation of autophagy”, Cell Commun. Signal, 2020, 18(1), 43
2) 細胞
(ARPE-19)
T. Yamazaki, H. Suzuki, S. Yamada, K. Ohshio, M. Sugamata, T. Yamada and Y. Morita, "Lactobacillus paracasei KW3110 Suppresses Inflammatory Stress-Induced Premature Cellular Senescence of Human Retinal Pigment Epithelium Cells and Reduces Ocular Disorders in Healthy Humans”, Int J Mol Sci, 2020, 21(14), 5091
3) 細胞
(MIA PaCa-2)
N. Sasaki, F. Gomi, F. Hasegawa, K. Hirano, M. Fujiwara, M. Toyoda and T. Ishiwata, "Characterization of the metastatic potential of the floating cell component of MIA PaCa-2, a human pancreatic cancer cell line”, Biochem. biophys. res. commun, 2020, 522(4), 881-888
4) 細胞
(ヒト小気道上皮細胞)
M. Komura, T. Sata, H. Yoshikawa, N. A. Nitta, Y. Suzuki, K KOike, Y. Kodama, K. Seyama and K. Takahashi, "Propylene glycol, a component of electronic cigarette liquid, damages epithelial cells in human small airways", 2022,  Respir. Res., doi:10.1186/s12931-022-02142-2.

よくある質問

Q

浮遊細胞と接着細胞のどちらも測定できますか?

A

浮遊細胞、接着細胞の両方で使用可能です。

Q

トリプシンは測定に影響しますか?

A

トリプシンが残存すると測定に影響します。
トリプシンを用いた細胞の回収後は、プロトコルに従い染色前の洗浄操作を確実に行ってください。

トリプシンの影響を確認した実験例を以下に掲載します。
細胞周期測定試薬 Cell Cycle Assay Solution Deep Red 同仁化学研究所

Q

細胞表面抗原の免疫染色とCell Cycle Assay Solutionの共染色はできますか?

A

Cell Cycle Assay Solution中の添加剤が免疫検出系に影響するため、共染色は出来ません。

Q

細胞の固定化は必要ですか?

A

 未固定および固定化した細胞の両方に使用できます。

Q

固定化細胞を保存して測定する場合、染色は保存する前と後のどちらが良いですか?

A

どちらも染色できます。小社では以下の条件で染色した実績がございます。
固定化細胞を保存する前後で染色した各サンプルをフローサイトメトリーで測定したところ、結果に変化は見られませんでした。

・固定化細胞を冷蔵(4℃)で1週間保存し、取扱説明書に従って細胞を染色した。
・固定化細胞を取扱説明書に従って染色し、細胞を冷蔵(4℃)で1週間保存した。

冷凍で細胞を保存すると不溶物が析出する可能性があるため、冷凍での保存はお勧めできません。
 

Q

Cell Cycle Assay Solutonで染色後、過剰な試薬を除くために細胞を洗浄してもいいですか?

A

染色後の洗浄はお勧めしません。
洗浄時の遠心操作により、細胞周期解析に適切なヒストグラムが得られない可能性があります。

Q

フローサイトメトリーを行う際は、どのような点に注意すべきでしょうか?

A

フローサイトメトリーを行う際は、最適な条件で測定を行う必要があります。
以下で実際にお客様から寄せられた測定時の失敗例をご紹介します。

 

①フィルターが測定条件に合っていない。
例えばフローサイトメーターでの細胞周期測定で一般的に使用されるPropidium Iodide (PI)法で使用するフィルターを用いた場合、
電圧の設定に関わらず、良好なヒストグラムが得られません。

測定には以下のフィルターをご利用下さい。

細胞周期測定試薬 Cell Cycle Assay Solution Deep Red 同仁化学研究所

細胞周期測定試薬 Cell Cycle Assay Solution Deep Red 同仁化学研究所

 

②測定電圧が適切でない。
例えばフローサイトメーターの電圧が高すぎる(または低すぎる)場合、良好なヒストグラムが得られません。
ヒストグラムでG0/G1期、S期、G2/M期が明瞭となる測定電圧に調整してください。
細胞周期測定試薬 Cell Cycle Assay Solution Deep Red 同仁化学研究所

 

③細胞のゲーティングが適切でない。
例えば解析時のゲーティングが不適切な場合、良好なヒストグラムが得られません。
解析時には細胞全体をゲーティングするようにしてください。
細胞周期測定試薬 Cell Cycle Assay Solution Deep Red 同仁化学研究所

Q

試薬添加後に凝集物が見られました。どうすればよいですか?

A

細胞によっては、細胞数が多いと下記のような凝集物が見られる場合があります。
その場合、細胞数を減らして(目安:0.25-1×105 cells/ml)試薬を添加し、速やかに測定を行ってください。
細胞周期測定試薬 Cell Cycle Assay Solution Deep Red 同仁化学研究所

*写真下の細胞数は、取扱説明書の操作1における細胞数を示しています。

細胞周期測定試薬 Cell Cycle Assay Solution Deep Red 同仁化学研究所 細胞周期測定試薬 Cell Cycle Assay Solution Deep Red 同仁化学研究所

取扱条件

取扱条件
保存条件: 冷凍,遮光
危険・有害
シンボルマーク
細胞周期測定試薬 Cell Cycle Assay Solution Deep Red 同仁化学研究所細胞周期測定試薬 Cell Cycle Assay Solution Deep Red 同仁化学研究所
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細胞周期測定試薬 Cell Cycle Assay Solution Deep Red 同仁化学研究所

関連製品

この製品に関連する研究では、下記の関連製品も使われています。

  • 細胞周期測定試薬 Cell Cycle Assay Solution Deep Red 同仁化学研究所

    ミトコンドリア膜電位検出キット

    JC-1 MitoMP Detection Kit

  • 細胞周期測定試薬 Cell Cycle Assay Solution Deep Red 同仁化学研究所

    老化細胞検出キット

    Cellular Senescence Detection Kit – SPiDER-βGal

  • 細胞周期測定試薬 Cell Cycle Assay Solution Deep Red 同仁化学研究所

    DNAダメージ検出抗体

    DNA Damage Detection Kit – γH2AX - Green

  • 細胞周期測定試薬 Cell Cycle Assay Solution Deep Red 同仁化学研究所

    グルタチオン定量キット

    GSSG/GSH Quantification Kit

細胞周期測定試薬 Cell Cycle Assay Solution Blue 同仁化学研究所

上海金畔生物科技有限公司代理日本同仁化学试剂盒全线产品,欢迎访问日本同仁化学dojindo官网了解更多信息。

細胞周期測定試薬 Cell Cycle Assay Solution Blue 同仁化学研究所Cell Cycle Assay Solution Blue

01 細胞増殖/細胞毒性測定用試薬

Cell Cycle Assay Solution Blue

細胞周期測定試薬 Cell Cycle Assay Solution Blue 同仁化学研究所

  • 細胞増殖/細胞毒性測定用試薬
  • 細胞増殖/細胞毒性測定用試薬
  • 細胞機能解析
  • 細胞周期

細胞周期測定試薬

  • 細胞の固定化、RNase 処理が不要、試薬を添加するだけ
  • 405 nm のレーザーで励起が可能
  • 製品コード
    C549  Cell Cycle Assay Solution Blue
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
50 tests ¥13,900 341-09601
キット内容
50 tests Cell Cycle Assay Solution Blue 250 μl×1

  • 細胞周期測定試薬 Cell Cycle Assay Solution Blue 同仁化学研究所
試験成績書

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  • ご購入方法
  • お問い合わせ

マニュアル

  • 取扱説明書 日本語
    細胞周期測定試薬 Cell Cycle Assay Solution Blue 同仁化学研究所
  • Manual English
    細胞周期測定試薬 Cell Cycle Assay Solution Blue 同仁化学研究所

技術情報

測定の手間を大幅に削減

フローサイトメーターでの細胞周期測定で一般的に使用されるPropidium Iodide (PI) を用いた手法と比較して、本製品は細胞膜透過性があり、かつDNA 選択性が高い色素を使用しているため、細胞懸濁液に試薬を添加するだけで測定が可能です。また、405 nm のレーザーで測定可能なため、汎用性の高い488 nm のレーザーを用いた実験と併用することが可能です。

細胞周期測定試薬 Cell Cycle Assay Solution Blue 同仁化学研究所

実験例:抗がん剤による細胞機能の変化

細胞周期のG2/M 期に作用して細胞増殖を停止させ、細胞老化を誘導することが知られているDoxorubicin(DOX) をA549 細胞へ添加後、本製品でA549 細胞における細胞周期の変化と、Cellular Senescence Detection Kit – SPiDER-βGal(製品コード:SG03)で細胞老化、JC-1 MitoMP Detection Kit (製品コード:MT09)でミトコンドリア膜電位の変化を確認しました。

細胞周期測定試薬 Cell Cycle Assay Solution Blue 同仁化学研究所
細胞周期測定試薬 Cell Cycle Assay Solution Blue 同仁化学研究所 細胞周期測定試薬 Cell Cycle Assay Solution Blue 同仁化学研究所
細胞周期測定試薬 Cell Cycle Assay Solution Blue 同仁化学研究所

技術や使用製品に関する補足

  • 細胞周期測定試薬 Cell Cycle Assay Solution Blue 同仁化学研究所

    ミトコンドリア膜電位検出キット

    JC-1 MitoMP Detection Kit

  • 細胞周期測定試薬 Cell Cycle Assay Solution Blue 同仁化学研究所

    老化細胞検出キット

    Cellular Senescence Detection Kit – SPiDER-βGal

参考文献

参考文献を表示する

 

文献No. 対象サンプル 引用(リンク)
1) 細胞
(PC-9, A549)
K. Tsuchiya, K. Yoshimura, Y. Iwashita, Y. Inoue, T. Ohta, H. Watanabe, H. Yamada, A. Kawase, M. Tanahashi, H. Ogawa, K. Funai, K. Shinmura, T. Suda and H. Sugimura, "m6 A demethylase ALKBH5 promotes tumor cell proliferation by destabilizing IGF2BPs target genes and worsens the prognosis of patients with non-small-cell lung cancer", Cancer Gene Ther.,  2022, doi:10.1038/s41417-022-00451-8.

よくある質問

Q

浮遊細胞と接着細胞のどちらも測定できますか?

A

 浮遊細胞、接着細胞の両方で使用可能です。

Q

トリプシンは測定に影響しますか?

A

トリプシンが残存すると測定に影響します。
トリプシンを用いた細胞の回収後は、プロトコルに従い染色前の洗浄操作を確実に行ってください。

トリプシンの影響を確認した実験例を以下に掲載します。
細胞周期測定試薬 Cell Cycle Assay Solution Blue 同仁化学研究所

Q

細胞表面抗原の免疫染色とCell Cycle Assay Solutionの共染色はできますか?

A

Cell Cycle Assay Solution中の添加剤が免疫検出系に影響するため、共染色は出来ません。

Q

細胞の固定化は必要ですか?

A

未固定および固定化した細胞の両方に使用できます。

Q

固定化細胞を保存して測定する場合、染色は保存する前と後のどちらが良いですか?

A

どちらも染色できます。小社では以下の条件で染色した実績がございます。
固定化細胞を保存する前後で染色した各サンプルをフローサイトメトリーで測定したところ、結果に変化は見られませんでした。

・固定化細胞を冷蔵(4℃)で1週間保存し、取扱説明書に従って細胞を染色した。
・固定化細胞を取扱説明書に従って染色し、細胞を冷蔵(4℃)で1週間保存した。

冷凍で細胞を保存すると不溶物が析出する可能性があるため、冷凍での保存はお勧めできません。
 

Q

Cell Cycle Assay Solutonで染色後、過剰な試薬を除くために細胞を洗浄してもいいですか?

A

染色後の洗浄はお勧めしません。
洗浄時の遠心操作により、細胞周期解析に適切なヒストグラムが得られない可能性があります。

Q

フローサイトメトリーを行う際は、どのような点に注意すべきでしょうか?

A

フローサイトメトリーを行う際は、最適な条件で測定を行う必要があります。
以下で実際にお客様から寄せられた測定時の失敗例をご紹介します。

 

①フィルターが測定条件に合っていない。
例えばフローサイトメーターでの細胞周期測定で一般的に使用されるPropidium Iodide (PI)法で使用するフィルターを用いた場合、
電圧の設定に関わらず、良好なヒストグラムが得られません。

測定には以下のフィルターをご利用下さい。
細胞周期測定試薬 Cell Cycle Assay Solution Blue 同仁化学研究所

細胞周期測定試薬 Cell Cycle Assay Solution Blue 同仁化学研究所

 

②測定電圧が適切でない。
例えばフローサイトメーターの電圧が高すぎる(または低すぎる)場合、良好なヒストグラムが得られません。
ヒストグラムでG0/G1期、S期、G2/M期が明瞭となる測定電圧に調整してください。
細胞周期測定試薬 Cell Cycle Assay Solution Blue 同仁化学研究所

 

③細胞のゲーティングが適切でない。
例えば解析時のゲーティングが不適切な場合、良好なヒストグラムが得られません。
解析時には細胞全体をゲーティングするようにしてください。
細胞周期測定試薬 Cell Cycle Assay Solution Blue 同仁化学研究所

Q

試薬添加後に凝集物が見られました。どうすればよいですか?

A

細胞によっては、細胞数が多いと下記のような凝集物が見られる場合があります。
その場合、細胞数を減らして(目安:0.25-1×105 cells/ml)試薬を添加し、速やかに測定を行ってください。

細胞周期測定試薬 Cell Cycle Assay Solution Blue 同仁化学研究所

*写真下の細胞数は、取扱説明書の操作1における細胞数を示しています。

細胞周期測定試薬 Cell Cycle Assay Solution Blue 同仁化学研究所 細胞周期測定試薬 Cell Cycle Assay Solution Blue 同仁化学研究所

取扱条件

取扱条件
保存条件: 冷凍
危険・有害
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細胞周期測定試薬 Cell Cycle Assay Solution Blue 同仁化学研究所細胞周期測定試薬 Cell Cycle Assay Solution Blue 同仁化学研究所
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細胞周期測定試薬 Cell Cycle Assay Solution Blue 同仁化学研究所

関連製品

この製品に関連する研究では、下記の関連製品も使われています。

  • 細胞周期測定試薬 Cell Cycle Assay Solution Blue 同仁化学研究所

    ミトコンドリア膜電位検出キット

    JC-1 MitoMP Detection Kit

  • 細胞周期測定試薬 Cell Cycle Assay Solution Blue 同仁化学研究所

    老化細胞検出キット

    Cellular Senescence Detection Kit – SPiDER-βGal

  • 細胞周期測定試薬 Cell Cycle Assay Solution Blue 同仁化学研究所

    DNAダメージ検出抗体

    DNA Damage Detection Kit – γH2AX - Green

  • 細胞周期測定試薬 Cell Cycle Assay Solution Blue 同仁化学研究所

    グルタチオン定量キット

    GSSG/GSH Quantification Kit

死細胞標識試薬(Blue) Dead Cell Makeup Blue – Higher Retention than PI 同仁化学研究所

上海金畔生物科技有限公司代理日本同仁化学试剂盒全线产品,欢迎访问日本同仁化学dojindo官网了解更多信息。

死細胞標識試薬(Blue) Dead Cell Makeup Blue - Higher Retention than PI 同仁化学研究所Dead Cell Makeup Blue – Higher Retention than PI

05 細胞染色用色素

Dead Cell Makeup Blue – Higher Retention than PI

死細胞標識試薬(Blue) Dead Cell Makeup Blue - Higher Retention than PI 同仁化学研究所

  • 細胞染色用色素
  • 細胞機能解析
  • 細胞毒性
  • 蛍光色素
  • 顕微鏡
  • FCM

死細胞標識試薬(Blue)

  • 色素が死細胞から漏出しない
  • ストック溶液は冷凍保存で半年間保存可能
  • 選べる二種類の色調
  • 製品コード
    C555  Dead Cell Makeup Blue – Higher Retention than PI
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
100 tests ¥39,000 346-10141
  • 死細胞標識試薬(Blue) Dead Cell Makeup Blue - Higher Retention than PI 同仁化学研究所
試験成績書

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  • ご購入方法
  • お問い合わせ

マニュアル

  • 取扱説明書 日本語
    死細胞標識試薬(Blue) Dead Cell Makeup Blue - Higher Retention than PI 同仁化学研究所
  • Manual English
    死細胞標識試薬(Blue) Dead Cell Makeup Blue - Higher Retention than PI 同仁化学研究所

技術情報

PIの課題とは?その解決方法

フローサイトメーター (FCM) を用いて正確なデータを得るためには、死細胞を区別し除外することが重要であり、近年この工程は論文投稿時にも要求されることが増えています。死細胞の区別には Propidium Iodide(PI)が使用されますが、固定化や膜透過処理により PI が細胞から漏れ出てしまい正確なデータが得られない課題があります。本試薬は細胞表面および細胞内のタンパク質と共有結合する性質を持つことから、細胞の 固定化、膜透過処理後も色素は漏れ出しません。さらに、染色後の生細胞と死細胞の蛍光強度差は大きく、FCM で容易に死細胞を区別し解析から除外することができます。死細胞標識試薬(Blue) Dead Cell Makeup Blue - Higher Retention than PI 同仁化学研究所

よくある質問

Q

接着細胞でも測定できますか?

A

接着細胞でも測定可能です。細胞をトリプシン処理またはスクレーパーを用いて回収し、細胞懸濁液を調製してください。

Q

トリプシンは測定に影響を及ぼしますか?

A

HeLa細胞を用いて、トリプシンの影響を確認した実績があります。トリプシン処理とスクレーパーを使用した場合の比較を行い、どちらの場合も解析結果に差がないことを確認しております。

死細胞標識試薬(Blue) Dead Cell Makeup Blue - Higher Retention than PI 同仁化学研究所

Q

顕微鏡を用いて観察することは可能ですか?

A

イメージングできることを確認しております。本色素で染色した HeLa を固定化・膜透過処理を行い、イメージングした結果を下記に示します。

死細胞標識試薬(Blue) Dead Cell Makeup Blue - Higher Retention than PI 同仁化学研究所

Q

染色による細胞毒性はありますか?

A

Cell Counting Kit-8を用いて、HeLa細胞における染色の細胞毒性を評価した結果、細胞毒性はほとんどありませんでした。
よって、染色後色素を洗浄し取り除くと、生細胞の培養が可能です。

Q

染色後に固定化した細胞を保存できますか?

A

お勧めしません。固定化後時間を置くと蛍光強度が下がるため、染色したサンプルはその日の内に測定を行ってください。

Q

DMSO stock solutionは、どれくらい安定ですか?

A

-20℃の冷凍保存で6ヶ月間安定であることを確認しております。
本製品は水分によって劣化します。6ヶ月を超える長期保存をご検討される場合は、水分量の少ない未開封のDMSOを使用してください。
また、必要に応じて小分けし、保存してください。

Q

細胞のゲーティングの仕方を教えてください。

A

ベクトン・ディッキンソン(BD)社製のフローサイトメーターを使用した方法を記載します。

死細胞標識試薬(Blue) Dead Cell Makeup Blue - Higher Retention than PI 同仁化学研究所
死細胞標識試薬(Blue) Dead Cell Makeup Blue - Higher Retention than PI 同仁化学研究所

死細胞標識試薬(Blue) Dead Cell Makeup Blue - Higher Retention than PI 同仁化学研究所 死細胞標識試薬(Blue) Dead Cell Makeup Blue - Higher Retention than PI 同仁化学研究所

取扱条件

規格
含量: 試験適合
確認試験: 試験適合
取扱条件
1.保存方法:冷蔵 2.吸湿注意
SDSダウンロード
死細胞標識試薬(Blue) Dead Cell Makeup Blue - Higher Retention than PI 同仁化学研究所

関連製品

この製品に関連する研究では、下記の関連製品も使われています。

  • 死細胞標識試薬(Blue) Dead Cell Makeup Blue - Higher Retention than PI 同仁化学研究所

    死細胞標識試薬(Deep Red)

    Dead Cell Makeup Deep Red – Higher Retention than PI

  • 死細胞標識試薬(Blue) Dead Cell Makeup Blue - Higher Retention than PI 同仁化学研究所

    細胞増殖/細胞毒性アッセイキット

    Cell Counting Kit-8

  • 死細胞標識試薬(Blue) Dead Cell Makeup Blue - Higher Retention than PI 同仁化学研究所

    細胞毒性測定キット

    Cytotoxicity LDH Assay Kit-WST

  • 死細胞標識試薬(Blue) Dead Cell Makeup Blue - Higher Retention than PI 同仁化学研究所

    解糖系/ミトコンドリア膜電位測定キット

    Glycolysis/JC-1 MitoMP Assay Kit

  • 死細胞標識試薬(Blue) Dead Cell Makeup Blue - Higher Retention than PI 同仁化学研究所

    耐光性トータルROS検出キット

    ROS Assay Kit -Photo-oxidation Resistant DCFH-DA-

Premix WST-1 Cell Proliferation Assay System酶试剂盒Takara


Premix WST-1 Cell Proliferation Assay System
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara MK400 Premix WST-1 Cell Proliferation Assay System 2,500 次 ¥3,405 Premix WST-1 Cell Proliferation Assay System Premix WST-1 Cell Proliferation Assay System Premix WST-1 Cell Proliferation Assay System
收藏产品 加入购物车
 
■ 制品内容
Premix WST-1 25 ml
 
■ 制品说明
本制品是通过吸光度比色分析法对细胞增殖和细胞活力进行检测的试剂。其检测原理是利用活细胞线粒体中的琥珀酸四唑盐还原酶 (succinate-tetrazolium reductase) 将四唑盐WST-1还原为水溶性formazan dye,进而通过吸光度比色分析法进行检测。此方法取代了[3H]-thymide掺入法,实现了非放射性检测。琥珀酸四唑盐还原酶存在于线粒体中,只有在活细胞中才具有活性,培养基中添加的四唑盐在琥珀酸四唑盐还原酶的作用下,还原生成formazan dye,活细胞数越多,样品中的琥珀酸四唑盐还原酶活性就越强,生成的formazan dye就越多,生成的formazan dye数量与活细胞数成线性正比关系。使用本制品检测时,无需洗涤细胞和使用放射性同位素,从微量培养开始,即可使用酶标仪在同一个微孔板上测定其光吸收值。本制品通过检测细胞活力,可以用于药物敏感性分析和药物筛选。
 
■ 保存
-20℃避光保存。
 
■ 特点
◇ 无需使用放射性同位素。
◇ 无需使用有机溶剂来溶解反应生成的formazan dye。
◇ 吸光度值与活细胞数成线性正比关系。
◇ 与MTT法相比,灵敏度更高。
◇ 可在同一个微孔板上进行不同反应时间的结果测定。
 
■ 用途
◇ 检测生长因子、cytokines、mitogens、nutrients等细胞增殖能力的影响。
◇ 分析抗癌药等具有细胞毒性和抑制细胞生长的化合物。
◇ 评估具有抑制细胞生长作用的抗体与生理介质。
 
 

页面更新:2020-12-09 15:03:16

Premix WST-1 Cell Proliferation Assay System酶试剂盒Takara


Premix WST-1 Cell Proliferation Assay System
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara MK400 Premix WST-1 Cell Proliferation Assay System 2500 Tests ¥3,405 Premix WST-1 Cell Proliferation Assay System Premix WST-1 Cell Proliferation Assay System Premix WST-1 Cell Proliferation Assay System
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■ 制品内容
Premix WST-1 25 ml
 
■ 制品说明
本制品是通过吸光度比色分析法对细胞增殖和细胞活力进行检测的试剂。其检测原理是利用活细胞线粒体中的琥珀酸四唑盐还原酶 (succinate-tetrazolium reductase) 将四唑盐WST-1还原为水溶性formazan dye,进而通过吸光度比色分析法进行检测。此方法取代了[3H]-thymide掺入法,实现了非放射性检测。琥珀酸四唑盐还原酶存在于线粒体中,只有在活细胞中才具有活性,培养基中添加的四唑盐在琥珀酸四唑盐还原酶的作用下,还原生成formazan dye,活细胞数越多,样品中的琥珀酸四唑盐还原酶活性就越强,生成的formazan dye就越多,生成的formazan dye数量与活细胞数成线性正比关系。使用本制品检测时,无需洗涤细胞和使用放射性同位素,从微量培养开始,即可使用酶标仪在同一个微孔板上测定其光吸收值。本制品通过检测细胞活力,可以用于药物敏感性分析和药物筛选。
 
■ 保存
-20℃避光保存。
 
■ 特点
◇ 无需使用放射性同位素。
◇ 无需使用有机溶剂来溶解反应生成的formazan dye。
◇ 吸光度值与活细胞数成线性正比关系。
◇ 与MTT法相比,灵敏度更高。
◇ 可在同一个微孔板上进行不同反应时间的结果测定。
 
■ 用途
◇ 检测生长因子、cytokines、mitogens、nutrients等细胞增殖能力的影响。
◇ 分析抗癌药等具有细胞毒性和抑制细胞生长的化合物。
◇ 评估具有抑制细胞生长作用的抗体与生理介质。
 
 

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Luna® Cell Ready 裂解模块 货 号 E3032SNEB酶试剂 New England Biolabs

上海金畔生物科技有限公司代理New England Biolabs(NEB)酶试剂全线产品,欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

产品资料 – DNA聚合酶与扩增技术 – qPCR & RT-qPCR

Luna® Cell Ready 裂解模块                              收藏

货 号
规 格
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#E3032S
100 rxns
5,959.00

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特性

 ·仅需 15 分钟即可完成细胞裂解、RNA 释放和基因组 DNA 去除
 ·一次反应高效可裂解 10 至 10 万个细胞,适用于众多细胞系
 ·与其它 RNA 提取方法相比减少了样品损失,尤其对于低细胞起始量。
 ·兼容高通量应用,可在室温下进行细胞裂解
 ·与 Luna 通用一步法 RT-qPCR 试剂盒搭配使用时性能最佳:NEB#E3005(染料法)或 NEB#E3006(探针法) 
 ·提供完整的细胞裂解和一步法 RT-qPCR 试剂盒方案:NEB #E3030(染料法)或 NEB #E3031(探针法)

概述

   细胞培养常用于替代活体生物来分析基因表达或对治疗的反应。传统上使用柱提法或化学试剂法从处理过的细胞中提取和纯化 RNA.Luna Cell Ready 裂解模块无需进行传统的 RNA 提取步骤即可评估RNA表达水平,是一种快速、方便且灵敏的替代方案。该模块可同时进行细胞裂解、RNA 释放、基因组 DNA 去除,获得的细胞裂解物可直接使用Luna通用一步法 RT-qPCR 试剂盒进行 RT-qPCR 分析。与其它 Luna 产品一样,裂解缓冲液包含惰性蓝色示踪染料,使整个加样流程可视化。

下表列出的细胞系可使用 Luna Cell Ready 裂解模块裂解。这些细胞进行 5 log 梯度稀释(100000-10 细胞/50 µl 裂解反应),并取 1 ul 裂解产物进行 20 µl 体系的一步法 RT-qPCR 反应。每个细胞系的线性结果区域显示在最后一列。此外,经测试一些昆虫细胞系也能用上述裂解液裂解。

 

表一:经验证过的细胞系

细胞系

特性

菌种

50 ml 裂解体系中的细胞数量

A549

Adherent

H. sapiens, Lung, carcinoma

10 – 100,000

HEK293

Adherent

H. sapiens, Kidney

10 – 100,000

HeLa

Adherent

H. sapiens, Cervix, adenocarcinoma

10 – 100,000

HepG2

Adherent

H. sapiens, Liver, carcinoma

10 – 100,000

NCI-H460

Adherent

H. sapiens, Lung, carcinoma

10 – 100,000

SK-N-SH

Adherent

H. sapiens, Brain, Neuroblastoma

10 – 100,000

U2Os

Adherent

H. sapiens, Bone, osteosarcoma

10 – 10,000

Jurkat

Suspension

H. sapiens, T lymphocyte, leukemia

10 – 100,000

K-562

Suspension

H. sapiens, Lymphoblast, leukemia

10 – 1,000

 

图一:Luna Cell Ready 一步法 RT-qPCR 实验流程

 

Luna® Cell Ready 裂解模块            货   号                  E3032S

 

Luna Cell Ready 裂解模块整合了 DNase I 和 Luna Cell Ready 蛋白酶的功能,可简单高效的进行细胞裂解,仅需 15 分钟即可完成细胞裂解、RNA 释放和基因组 DNA 去除。2 µl 裂解产物(相当于 0.2–4000 个细胞中的 RNA)即可实现 20 µl 体系的 RT-qPCR 反应。

 

试剂盒组分

 

随该产品提供的试剂

 

储存(°C

浓度

Luna Cell Ready Lysis Buffer

-20

2 X

Luna Cell Ready RNA Protection Reagent

-20

25 X

Luna Cell Ready Protease

-20

25 X

Luna Cell Ready Stop Solution

-20

10 X

DNase I RNase-free

-20

10 X

 实验需要但不提供的试剂耗材

  •    磷酸盐缓冲液(PBS
  •    目标特异性引物
  •    细胞
  •    Eppendorf
  •    PCR 联管
  •    PCR
  •    移液器和枪头(为减少交叉污染,应使用带滤芯的枪头)

    储存温度

 -20℃

Human iPS Cell Generation™ All-in-One Vector酶试剂盒Takara


Human iPS Cell Generation All-in-One Vector
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 3671 Human iPS Cell Generation All-in-One Vector 10 μg ¥10,014 Human iPS Cell Generation™ All-in-One Vector Human iPS Cell Generation™ All-in-One Vector Human iPS Cell Generation™ All-in-One Vector
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□ 浓度 0.5 μg/μl
     
□ 贮存溶液  
     Tris-HCl (pH 8.0) 10 mM
     EDTA 1 mM
Limited Use Label License: [L44], [M71]
 
■ 制品说明
本制品是制备Human iPS细胞诱导用逆转录病毒所使用的载体。在高效、高表达逆转录病毒载体pDON-5 DNA(Code No.: 3658)上,插入了iPS细胞诱导用基因OCT3/4SOX2KLF4LIN28NANOG,各基因以Thosea asigna virus 的2A*1序列连接在一个载体上。本载体与Retrovirus Packaging Kit Ampho(Code No.: 6161)中的pGP Vector以及pE-ampho Vector共转染至逆转录病毒制备用细胞G3T-hi(Code No.: 6163)后,可以制备iPS诱导用逆转录病毒。如此制备的重组逆转录病毒由于和RetroNectin®(Recombinant Human Fibronectin Fragment)(Code No.: T100A/B)有高亲和性,所以在向目的细胞中导入基因时,使用经RetroNectin®处理后的培养皿或平板,可以得到较高的基因导入率,有效提高iPS细胞的诱导效率。
*1 5种基因转录在同一个mRNA上,翻译时在2A序列的特定位点被分割,使5种蛋白质可以等量表达。
 
■ 保存
-20
 
■ 各载体的遗传信息
  基因名   GenBank Accession No.
  OCT4   NM_002701.4
  SOX2   NM_003106.2
  KLF4   NM_004235.3*2
  LIN28   NM_024674.4
  NANOG   NM_024865.2
*2 更新的NM_004235.4中,CDS的5’端追加了对应9个氨基酸的碱基。本制品的KLF4基因中不含N端的这9个氨基酸的序列,已经确认可以有效诱导iPS细胞。
 
■ 载体图谱
Human iPS Cell Generation™ All-in-One Vector
 
 
 
 

页面更新:2019-07-18 15:02:30

Mouse Feeder Cell Quantification Kit酶试剂盒Takara


Mouse Feeder Cell Quantification Kit
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara RR290 Mouse Feeder Cell Quantification Kit 100 Rxns Inquire Mouse Feeder Cell Quantification Kit Mouse Feeder Cell Quantification Kit Mouse Feeder Cell Quantification Kit
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■ 制品内容(25 μl × 100次量)
1. TB Green Premix Ex Taq II(Tli RNaseH Plus)(2×Conc.) 625 μl × 4
2. Mouse_Mt_primer(10 μM each) 100 μl
3. Mouse_genome_primer(10 μM each) 100 μl
4. Human_primer_Type I(CHR3)(10 μM each) 100 μl
5. Human_primer_Type II(CHR7)(10 μM each) 100 μl
6. Human_primer_Type III(CHR15)(10 μM each) 100 μl
7. dH2O 1 ml×2
8. EASY Dilution(for Real Time PCR) 1 ml×2
9. ROX Reference Dye(50×Conc.) 50 μl
10. ROX Reference Dye II(50×Conc.) 50 μl
11. Human Genomic DNA(100 ng/μl) 20 μl
 
*:用于Applied Biosystems的Real Time PCR仪,用以校正孔与孔之间的荧光信号误差。
◆ 使用ROX Reference Dye 的PCR仪
·StepOnePlus Real-Time PCR System(Thermo Fisher Scientific)
◆ 使用ROX Reference Dye II的PCR仪
·Applied Biosystems 7500 Fast Real-Time PCR System(Thermo Fisher Scientific)
◆ 不使用ROX Reference Dye或ROX Reference Dye II的PCR仪
·Thermal Cycler Dice Real Time System II/Lite (Code No. TP900/TP960/TP700/TP760: 终卖)
 
Limited Use Label License:[M82]
 
■ 制品说明
小鼠饲养细胞可用于维持包括hESC(人胚胎干细胞)及 hiPSC(人诱导多能干细胞)等干细胞的增殖及分化。但对于干细胞的某一种应用如再生医学,去除异种饲养细胞是非常关键的。为了保证干细胞质量,有必要建立残留小鼠细胞的检测体系。
本制品以从hESC及hiPSC等培养干细胞提取的基因组DNA为模板,应用Real Time PCR方法对残留的小鼠饲养细胞来源的基因组DNA进行高灵敏度检测和定量的试剂盒。
本制品使用的引物是在小鼠线粒体(mt)DNA区域设计的Real Time PCR扩增用引物,可高灵敏度地检测小鼠饲养细胞来源的基因组DNA。现已知mtDNA拷贝数依据细胞种类、细胞株及分化状态不同而不同,使用的小鼠饲养细胞批次间也可能有差异,因此在试剂盒中附带了可检测小鼠mtDNA拷贝数的引物,用于小鼠饲养细胞批次间的校正。
*:使用同一个标准曲线对多批次小鼠饲养细胞来源的基因组DNA定量时,需确认各批次间的mtDNA拷贝数无差异。当小鼠饲养细胞每个批次都制作标准曲线时,则不需要校正。
 
■ 保 存
TB Green Premix Ex Taq II(Tli RNaseH Plus)

4℃可保存6个月。
避光保存。避免污染。
※长期保存时,请于-20℃保存。产品融解后请于4℃保存,并在6个月内用完。

其他组分

-20℃保存
 
 

页面更新:2022-06-24 13:03:04

Human iPS Cell Editing Systems酶试剂盒Takara


Human iPS Cell Editing Systems
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Cellartis Y30021 Cellartis iPSC Single-Cell Cloning DEF-CS Culture Media Kit 1 kit ¥7,860 Human iPS Cell Editing Systems Human iPS Cell Editing Systems Human iPS Cell Editing Systems
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从开始到结束:人iPS细胞基因编辑和单细胞克隆系统
Start-To-Finish hiPSC Editing and Single-Cell-Cloning Systems
人诱导多能干细胞(Human induced pluripotent stem cells,hiPSCs)是一个功能强大的研究工具和疾病模型,因为其具备增殖、自我更新、分化为多种细胞类型的能力。此外,人iPS细胞还可以再现细胞来源个体的疾病表型和基因型。将人iPS细胞结合基于CRISPR/Cas9的基因编辑技术,可以在同基因的细胞系中研究特定基因改变引起的功能影响,因为基因编辑过的人iPS细胞能提供可再生的、无遗传变异的患病细胞和健康细胞资源。
CRISPR/Cas9系统已经成为一个强大的基因编辑工具,因为其高的靶向特异性,编辑效率和易用性。该技术的强大主要源于它的简单,因为全部只需要一个Cas9核酸酶结合一个单链向导RNA(single guide RNA,sgRNA) 就可以决定靶向特异性(Jinek et al. 2012)。这种RNA编程的(RNA-programmable)方法利用了非同源末端连接(non-homologous end joining,NHEJ) DNA修复途径的易错特性,进而产生基因敲除(通过插入/删除)。这种方法也可以通过同源重组(homology-directed repair,HDR)途径被用于基因敲入。
 
CRISPR/Cas9系统的组件可以通过多种方法成功导入至靶细胞,包括基于载体的表达系统,RNA转染, 导入Cas9/sgRNA核糖核蛋白(ribonucleoprotein,RNP)复合物(Sander and Joung 2014)等。与基于载体的方法相比,直接导入Cas9/sgRNA RNPs提供了一种快速转入基因编辑实验的方法,同时脱靶效应的可能性更小(Kim et al. 2014)。
 
一旦Cas9/sgRNA RNP复合物被导入,为了分离和筛选感兴趣的基因型,单细胞必须被分离并扩增为克隆细胞系。传统上,从基因编辑的hiPS细胞建立一个克隆群是低效的、具有挑战性的和耗时的,因为hiPS 细胞是以集落生长和传代的。通常,这会导致细胞死亡和提前分化。然而,Cellartis单细胞克隆系统包含一个成分确定的培养系统(由基础培养基,包被剂,和添加剂组成),用于有效形成单细胞克隆和扩增基因编辑后的hiPSC克隆。DEF-CS culture system (Asplund et al. 2016)是一个基于单层培养的系统,规避了集落状培养带来的挑战,允许单细胞传代和促进接种的单细胞存活和后续扩增。
 
Cellartis iPSC Single-Cell Cloning DEF-CS Culture Media Kit (Code No. Y30021) 是一个完整的,在无饲养层和成分确定条件下,用于hiPSCs有效扩增和扩大生产的系统。试剂盒包含了从接种单细胞至96孔板到扩增至48孔板过程中所有必要的试剂。单细胞克隆扩增后,hiPSCs可以使用Cellartis DEF-CS 500 Culture System (Code No. Y30010)继续培养。
 
关联基因编辑系统:
一、电穿孔法基因编辑
通过电穿孔的方法对hiPSCs进行有效的基因编辑,Takara提供重组Cas9蛋白质和产生大量sgRNAs所有必要的试剂,用于电穿孔hiPSCs。后续与Cellartis iPSC Single-Cell Cloning DEF-CS Culture Media Kit (Code No. Y30021)一起使用,用于进行基因编辑后的单细胞克隆形成和扩增。单细胞克隆扩增后,hiPSCs可以使用Cellartis DEF-CS 500 Culture System (Code No. Y30010)继续培养。
二、Gesicle法基因编辑
Gesicles法是一种无毒的、高效的、替代电穿孔的方法,不依赖昂贵的设备或耗材。通过Gesicle法导入Cas9/sgRNA复合物进行有效的基因编辑,Takara提供所有的必要试剂用于产生细胞衍生的纳米囊泡(Gesicles),来转导Cas9和sgRNA至hiPSCs。后续可与Cellartis iPSC Single-Cell Cloning DEF-CS Culture Media Kit (Code No. Y30021)一起使用,用于进行基因编辑后的单细胞克隆形成和扩增。单细胞克隆扩增后,hiPSCs可以使用Cellartis DEF-CS 500 Culture System (Code No. Y30010)继续培养。
 
■ 产品特点
· Highly efficient gene editing in hiPSCs—use either electroporation or gesicles to deliver Cas9 protein and sgRNA with no genomic integration and reduced off-target effects
· Superior single-cell survival—edited hiPSCs exhibit high (typically ~50%) survival when seeded as single cells in a 96-well plate
· Maintenance of pluripotency after editing and during single-cell cloning—hiPSCs maintain high levels (>90%) of pluripotency markers Oct-4, TRA-1-60, and SSEA-4
· Stable karyotype from start to finish—maintain a normal and stable karyotype throughout editing, single-cell cloning, and expansion
· Flexibility to perform gene editing experiments your way—choose from complete kits that provide editing and single-cell cloning solutions using either electroporation-based or utilize the culture media kit (Code No. Y30021) to perform efficient single-cell cloning following your own editing experiments
· Continuous use of DEF-CS technology throughout gene editing/single-cell cloning experiments—use the Cellartis DEF-CS 500 Culture System (Code No. Y30010) before and during gene editing experiments, then during scale-up after single-cell cloning experiments
 
■ 产品组成
Cellartis® iPSC Single-Cell Cloning DEF-CS Culture Media Kit
(Code No. Y30021,1 kit)
· Cellartis DEF-CS 500 Basal Medium (Code No. Y30011; 500 ml)
· Cellartis iPSC Single-Cell Cloning DEF-CS COAT-1 (Code No. Y30018; 2 × 800 μl)
· Cellartis iPSC Single-Cell Cloning DEF-CS Additives
   (Code No. Y30019; 2 × 750 μl, 1 × 500 μl, 1 × 500 μl)
 
关联基因编辑产品
电穿孔法基因编辑
Guide-it™ sgRNA In Vitro Transcription Kit (632635; 1 kit)
Guide-it™ Recombinant Cas9 (Electroporation-Ready) (632641; 100 μg)
Gesicle法基因编辑
Guide-it™ CRISPR/Cas9 Gesicle Production System (632613;1 kit)
 
■ 产品应用
· CRISPR/Cas9-mediated gene editing of hiPSCs
· Single-cell cloning of hiPSCs
· Disease modeling
 
■ 参考文献
Asplund, A. et al. One Standardized Differentiation Procedure Robustly Generates Homogenous Hepatocyte Cultures Displaying Metabolic Diversity from a Large Panel of Human Pluripotent Stem Cells. Stem Cell Rev. Reports 12, 90-104 (2016).
Jinek, M. et al. A Programmable Dual-RNA-Guided DNA Endonuclease in Adaptive Bacterial Immunity. Science 337, (2012).
Kim, S., Kim, D., Cho, S. W., Kim, J. & Kim, J.-S. Highly efficient RNA-guided genome editing in human cells via delivery of purified Cas9 ribonucleoproteins. Genome Res. 24, 1012-9 (2014).
Sander, J.-D. & Joung, J.-K. CRISPR-Cas9 systems for genomic editing, regulation and targeting. Nat. Biotechnol. 32, 347-55 (2014).
 
■ 产品详情请点击:Human iPS Cell Editing Systems
 
 
 
Human iPS Cell Editing Systems
Human induced pluripotent stem cells (hiPSCs) growing in DEF-CS medium were edited with Cas9 and sgRNA specific to CD81. Pluripotency is maintained in edited human induced pluripotent stem cells (hiPSCs) that have been seeded as single cells. 12 clonal lines created from single-seeded hiPSCs exhibit high levels of Oct-4 (97-99%), TRA-1-60 (98-99%), and SSEA-4 (98-99%).
  (图片来源于Takara Bio USA, Inc.)
 
 
 

页面更新:2022-02-11 16:10:36

Human iPS Cell Generation™ All-in-One Vector酶试剂盒Takara


Human iPS Cell Generation All-in-One Vector
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 3671 Human iPS Cell Generation All-in-One Vector 10 μg ¥10,014 Human iPS Cell Generation™ All-in-One Vector Human iPS Cell Generation™ All-in-One Vector Human iPS Cell Generation™ All-in-One Vector
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□ 浓度 0.5 μg/μl
     
□ 贮存溶液  
     Tris-HCl (pH 8.0) 10 mM
     EDTA 1 mM
Limited Use Label License: [L44]
 
■ 制品说明
本制品是制备Human iPS细胞诱导用逆转录病毒所使用的载体。在高效、高表达逆转录病毒载体pDON-5 DNA(Code No.: 3658)上,插入了iPS细胞诱导用基因OCT3/4SOX2KLF4LIN28NANOG,各基因以Thosea asigna virus 的2A*1序列连接在一个载体上。本载体与Retrovirus Packaging Kit Ampho(Code No.: 6161)中的pGP Vector以及pE-ampho Vector共转染至逆转录病毒制备用细胞G3T-hi(Code No.: 6163)后,可以制备iPS诱导用逆转录病毒。如此制备的重组逆转录病毒由于和RetroNectin®(Recombinant Human Fibronectin Fragment)(Code No.: T100A/B)有高亲和性,所以在向目的细胞中导入基因时,使用经RetroNectin®处理后的培养皿或平板,可以得到较高的基因导入率,有效提高iPS细胞的诱导效率。
*1 5种基因转录在同一个mRNA上,翻译时在2A序列的特定位点被分割,使5种蛋白质可以等量表达。
 
■ 保存
-20
 
■ 各载体的遗传信息
  基因名   GenBank Accession No.
  OCT4   NM_002701.4
  SOX2   NM_003106.2
  KLF4   NM_004235.3*2
  LIN28   NM_024674.4
  NANOG   NM_024865.2
*2 更新的NM_004235.4中,CDS的5’端追加了对应9个氨基酸的碱基。本制品的KLF4基因中不含N端的这9个氨基酸的序列,已经确认可以有效诱导iPS细胞。
 
■ 载体图谱
Human iPS Cell Generation™ All-in-One Vector
 
 
 
 
 

页面更新:2022-03-30 09:27:27

Human Cell-Free Protein Expression System酶试剂盒Takara


Human Cell-Free Protein Expression System
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 3281 Human Cell-Free Protein Expression System 10 Rxns ¥2,237 Human Cell-Free Protein Expression System Human Cell-Free Protein Expression System Human Cell-Free Protein Expression System
Takara 3290 pT7-IRES His-N DNA 20 μg ¥1,502 Human Cell-Free Protein Expression System Human Cell-Free Protein Expression System Human Cell-Free Protein Expression System
Takara 3291 pT7-IRES His-C DNA 20 μg ¥1,502 Human Cell-Free Protein Expression System Human Cell-Free Protein Expression System Human Cell-Free Protein Expression System
Takara 3292 pT7-IRES Myc-N DNA 20 μg ¥1,502 Human Cell-Free Protein Expression System Human Cell-Free Protein Expression System Human Cell-Free Protein Expression System
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■ 制品内容(Code No. 3281)
Cell Lysate*1 100 μl
Mixture-1  60 μl
Mixture-2*2 10 μl
Mixture-3*2 20 μl
T7 RNA Polymerase (200 U/μl)  10 μl
pT7-IRES Vector (0.5 μg/μl) 20 μl
Control Vector*3 (0.3 μg/μl) 5 μl
 
*1 现用现融解,使用微量移液器轻轻混合均匀并迅速使用,使用完毕立即置于-80℃保存。
注:虽然5次反复冻融基本不会造成产品性能下降,但建议小量分装保存。
*2 Mixture-2和Mixture-3中均含有蛋白质,其中Mixture-2中含有HN标签蛋白质,因此应避免剧烈搅拌或振荡。
*3 该质粒在pT7-IRES中插入了β-半乳糖苷酶基因。
 
■ 制品说明
Human Cell-Free Protein Expression System是利用人源细胞提取物的无细胞蛋白质合成系统。本系统中的Cell Lysate包含了所有体外蛋白质合成的必需因子(核糖体、翻译起始/延伸因子和tRNA等)。只需将携带靶基因的pT7-IRES Vector、T7 RNA Polymerase、Mixture-3(氨基酸和ATP等)和Mixture-2(翻译增强因子)加入到Cell Lysate中,就可以在一个反应管中完成从RNA转录到蛋白质合成的反应,操作十分简单。本制品具有反应体系小、反应速度快、可合成无细胞蛋白质的优点。 pT7-IRES Vector转录得到的目的RNA含有IRES序列,这段序列能够增强蛋白质翻译的起始。反应液中添加了翻译增强因子,在蛋白质合成过程中,它能够活化Cell Lysate中无活性的翻译起始因子,从而维持了稳定的翻译水平。本系统不仅提高了蛋白质合成的效率,弥补了哺乳类无细胞蛋白质合成系统翻译水平低的缺陷,而且能够合成超过150 kDa的高分子量蛋白质。 本系统适用于高通量的蛋白质合成反应,只需一步即可完成。由于毒性蛋白会抑制宿主细胞生长和功能,导致很难利用活细胞表达系统来合成毒性蛋白质,所以本系统尤其适用于合成毒性蛋白质。
 
* 3290/3291/3292与3281搭配使用,可表达带有His标签或Myc标签的蛋白质。
 
■ 保存
3281:-80℃;3290、3291、3292:-20℃。
 
pT7-IRES Vector 的结构
Human Cell-Free Protein Expression System
 
 

页面更新:2019-12-26 11:58:44

NEBExpress™ Cell-free E. coli Protein Synthesis System 货 号 #E5360LNEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – 蛋白表达和纯化技术 – 表达系统 :无细胞表达

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货 号
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#E5360L
100 rxns
27,889.00

#E5360S
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Description

 NEBExpress™ Cell-free E. coli Protein Synthesis System            货   号                  #E5360L

Product Information

 NEBExpress™ Cell-free E. coli Protein Synthesis System            货   号                  #E5360L

Advantages and Features

 NEBExpress™ Cell-free E. coli Protein Synthesis System            货   号                  #E5360L

Properties & usage

 Storage Temperature

-80°C

SNAP-Cell 647-SiR 货 号 #S9102SNEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – 细胞分析 – 细胞影像学及分析

SNAP-Cell 647-SiR                              收藏

货 号
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#S9102S
30 nmol
4,219.00

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特性

 荧光标记 SNAP-、CLIP- 或 ACP-tag 融合蛋白,用于细胞成像
 标记物的荧光光谱波长范围从紫外(360 nm)至远红外(647+ nm)
 有细胞通透性和非通透性两种标记物
 
SNAP-Cell 647-SiR            货   号                  #S9102S

概述

NEB 提供大量的用于标记 SNAP-、CLIP- 和 ACP-tag 融合蛋白的荧光底物供研究者选择。SNAP-tag 底物是由染料及通过苄基键耦联到染料上的鸟嘌呤或氯嘧啶构成;CLIP-tag 底物是由染料及通过苄基耦联至染料上的胞嘧啶构成。这些底物无需酶促反应,即可自我标记相应的 tag 标签。细胞通透性底物(SNAP- 和 CLIP-Cell)不仅能标记细胞内部也能标记细胞表面,而细胞非通透性底物(SNAP- 和 CLIP-Surface)仅能特异性的标记在细胞表面表达的融合蛋白。
 
ACP-tag 的标记基团与辅酶 A(CoA)的磷酸泛酰巯基乙胺耦联,在 ACP 或 SFP 合成酶作用下,完成标记反应。标记反应仅特异地发生在细胞表面表达的融合蛋白上。使用同种底物标记 ACP-tags;用于标记的合成酶标记决定反应特异性(见 292 页)。

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CLIP-Surface 488

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SNAP-Cell 505-Star 货 号 #S9103SNEB酶试剂 New England Biolabs

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特性

  荧光标记 SNAP-tag 或 CLIP-tag 融合蛋白,用于

细胞成像
 标记物的荧光光谱波长范围从紫外(430 nm)
至远红外(647+ nm)
 有细胞通透性和非通透性两种标记物

概述

  NEB 提供大量的用于标记 SNAP-tag 和 CLIP-tag 融合蛋白的荧光底物供研究者选择。SNAP-tag 底物是由荧光染料及通过苄基键耦联到染料上的鸟嘌呤或氯嘧啶构成;CLIP-tag 底物是由荧光染料及通过苄基耦联至染料上的胞嘧啶构成。这些底物无需酶促反应,即可自我标记相应的 tag 标签。细胞通透性底物(SNAP-Cell 和 CLIP-Cell)不仅能标记细胞内部也能标记细胞表面,而细胞非通透性底物(SNAP-Surface 和 CLIP-Surface)仅能特异性的标记在细胞表面表达的融合蛋白。

SNAP-Cell 505-Star            货   号                  #S9103S

SNAP-Cell Oregon Green® 货 号 #S9104SNEB酶试剂 New England Biolabs

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特性

 荧光标记 SNAP-、CLIP- 或 ACP-tag 融合蛋白,用于细胞成像
 标记物的荧光光谱波长范围从紫外(360 nm)至远红外(647+ nm)
 有细胞通透性和非通透性两种标记物
 
SNAP-Cell Oregon Green®            货   号                  #S9104S

概述

NEB 提供大量的用于标记 SNAP-、CLIP- 和 ACP-tag 融合蛋白的荧光底物供研究者选择。SNAP-tag 底物是由染料及通过苄基键耦联到染料上的鸟嘌呤或氯嘧啶构成;CLIP-tag 底物是由染料及通过苄基耦联至染料上的胞嘧啶构成。这些底物无需酶促反应,即可自我标记相应的 tag 标签。细胞通透性底物(SNAP- 和 CLIP-Cell)不仅能标记细胞内部也能标记细胞表面,而细胞非通透性底物(SNAP- 和 CLIP-Surface)仅能特异性的标记在细胞表面表达的融合蛋白。
 
ACP-tag 的标记基团与辅酶 A(CoA)的磷酸泛酰巯基乙胺耦联,在 ACP 或 SFP 合成酶作用下,完成标记反应。标记反应仅特异地发生在细胞表面表达的融合蛋白上。使用同种底物标记 ACP-tags;用于标记的合成酶标记决定反应特异性(见 292 页)。

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CLIP-Surface 488

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SNAP-Cell TMR-Star 货 号 #S9105SNEB酶试剂 New England Biolabs

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特性

 荧光标记 SNAP-、CLIP- 或 ACP-tag 融合蛋白,用于细胞成像
 标记物的荧光光谱波长范围从紫外(360 nm)至远红外(647+ nm)
 有细胞通透性和非通透性两种标记物
 
SNAP-Cell TMR-Star            货   号                  #S9105S

概述

NEB 提供大量的用于标记 SNAP-、CLIP- 和 ACP-tag 融合蛋白的荧光底物供研究者选择。SNAP-tag 底物是由染料及通过苄基键耦联到染料上的鸟嘌呤或氯嘧啶构成;CLIP-tag 底物是由染料及通过苄基耦联至染料上的胞嘧啶构成。这些底物无需酶促反应,即可自我标记相应的 tag 标签。细胞通透性底物(SNAP- 和 CLIP-Cell)不仅能标记细胞内部也能标记细胞表面,而细胞非通透性底物(SNAP- 和 CLIP-Surface)仅能特异性的标记在细胞表面表达的融合蛋白。
 
ACP-tag 的标记基团与辅酶 A(CoA)的磷酸泛酰巯基乙胺耦联,在 ACP 或 SFP 合成酶作用下,完成标记反应。标记反应仅特异地发生在细胞表面表达的融合蛋白上。使用同种底物标记 ACP-tags;用于标记的合成酶标记决定反应特异性(见 292 页)。

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 荧光标记 SNAP-、CLIP- 或 ACP-tag 融合蛋白,用于细胞成像
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概述

NEB 提供大量的用于标记 SNAP-、CLIP- 和 ACP-tag 融合蛋白的荧光底物供研究者选择。SNAP-tag 底物是由染料及通过苄基键耦联到染料上的鸟嘌呤或氯嘧啶构成;CLIP-tag 底物是由染料及通过苄基耦联至染料上的胞嘧啶构成。这些底物无需酶促反应,即可自我标记相应的 tag 标签。细胞通透性底物(SNAP- 和 CLIP-Cell)不仅能标记细胞内部也能标记细胞表面,而细胞非通透性底物(SNAP- 和 CLIP-Surface)仅能特异性的标记在细胞表面表达的融合蛋白。
 
ACP-tag 的标记基团与辅酶 A(CoA)的磷酸泛酰巯基乙胺耦联,在 ACP 或 SFP 合成酶作用下,完成标记反应。标记反应仅特异地发生在细胞表面表达的融合蛋白上。使用同种底物标记 ACP-tags;用于标记的合成酶标记决定反应特异性(见 292 页)。

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