Easy iMatrix-511, Easy iMatrix-511silk
Q1. 产品是以什么样的状态销售的?
A1. 产品是以液态销售的。
一瓶里密封装有1.6 μg/mL浓度的100 mL细胞培养基质(层粘连蛋白511-E8片段)。
Q2. 产品的存储条件和有效期是什么?
A2. 产品的储存条件为,冷藏保存在2-15°C。(推荐4°C)
产品的有效期,请参考下表。
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产品
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保质期
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Easy iMatrix-511
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Lot.001为生产后6个月内
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Easy iMatrix-511silk
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Lot.002以后为生产后一年内
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※ 具体的有效期详见考产品外包装。
Q3. 可以冷冻保存吗?
A3. 不可以冷冻保存。
Q4. 培养hES/hiPS细胞时使用什么培养基最好?
A4. 宫崎等的论文(Nature communications, 3(1236), 1-10, 2012)、(Scientific Reports, 7, 41165, 2017)中,使用了以下的培养基。
・mTeSR1,TeSR2,TeSR-E8 (STEMCELL Technologies)
・StemPro hESC SFM (Thermo Fisher Scientific)
・StemFitAK03 (Ajinomoto)
中川等的论文(Scientific Reports, 4(3594), 1-7, 2014)中使用了以下的培养基。
・StemFit (Ajinomoto)
文献中使用的培养基都出现了良好的结果。
Q5. 请教我培养iPS细胞时最佳的使用量。
A5. 6孔板的一个孔中(9.6cm2)使用1.5 mL本产品时,iMatrix-511的浓度为0.25 μg/cm2。
Q6. 培养iPS细胞时需要Rock Inhibitor(Y-27632)吗?
A6. 在中川等的论文(Scientific Reports, 4(3594), 2014)中,介绍了只有在传代时添加Rock Inhibitor,更换培养基的时候不使用的方法。
Q7. 培养iPS细胞时可以单细胞传代吗。
A7. 可以。
※使用iMatrix-511时,ES/iPS细胞的扩增培养步骤,传代操作,请参考以下的链接。
(扩增培养步骤 )
(传代操作的视频)
也可以参考中川等的论文(Scientific Reports, 4(3594), 2014)。
Q8. 传代时使用什么细胞分离液?
A8. 请使用胰蛋白酶。
※使用iMatrix-511时,ES/iPS细胞的扩增培养步骤,传代操作,请参考以下的链接。
(扩增培养步骤)
(传代操作的视频)
也可以参考中川等的论文(Scientific Reports, 4(3594), 2014)。
Q9. 可以使用小鼠的iPS细胞吗?
A9. 由于没有小鼠iPS细胞的培养数据,所以无法回答。
Q10. 这个产品与基质胶有什么不同?
A10. 基质胶含有小鼠EHS肉瘤来源的层粘连蛋白-111。另外还含有层粘连蛋白以外的分子。
iMatrix-511是将在CHO-S细胞中表达的层粘连蛋白511-E8片段高度纯化后的重组蛋白。
iMatrix-511silk是从蚕结的茧中高纯度纯化层粘连蛋白511-E8片段的重组蛋白。
已知iPS细胞是通过细胞膜受体(特别是α6β1整联蛋白)粘附于层粘连蛋白-511。
已知α6β1整联蛋白对层粘连蛋白-511具有高粘附活性。这使得用iMatrix-511 / iMatrix-511silk可以使iPS细胞在单细胞状态下传代。
在宫崎等的论文中(Nature communications, 3(1236), 1-10, 201),5次传代后(30天后)的细胞数扩增效率约为基质胶的200倍。