东洋纺TOYOBO荧光定量THUNDERBIRD qPCR MixQPS-201

东洋纺TOYOBO荧光定量THUNDERBIRD qPCR Mix

  • 产品型号:  QPS-201
  • 简单描述
  • 东洋纺TOYOBO荧光定量THUNDERBIRD qPCR MixTHUNDERBIRD qPCR Mix是在Taq DNA polymerase基础上开发的高效率Realtime PCR用Master Mix(2×浓度)。本产品通过采用新的增强剂等手段,对组分进行了根本性的改良,使得反应特异性和PCR效率有了飞跃式的提升,从而可得到更广的可定量扩增区域(dynamic range)。
详细介绍

东洋纺TOYOBO荧光定量THUNDERBIRD qPCR Mix

特征1 高特异性
通过对组分的*化,使得PCR的特异性更高。通过降低非特异性反应,使得SYBR®  Green ITaqMan® Assay等对低拷贝目的片段的检测灵敏度更高。

 

特征2 对各种目的片段均可均一地检测
采用了新的增强剂,对各种目的片段PCR效率的波动可控制在zui小范围内。

东洋纺TOYOBO荧光定量THUNDERBIRD qPCR MixQPS-201

特征更广的可定量扩增区域
由于产品的高特异性(特征1)、高效率(特征2),可对更宽的测定范围进行分析。
东洋纺TOYOBO荧光定量THUNDERBIRD qPCR MixQPS-201

特征4 高适用性(可用于各种仪器)
除适用于普通及高速的模块型(Block Type)仪器外,还适用于使用玻璃毛细管(Glass Capillary Type)的高速循环仪。由于另外添附了50× ROX reference dye,对于使用Passive Reference的仪器(如Applied Biosystems公司制造的仪器、Stratagene公司制造的仪器),可根据各种仪器的特征把ROX调整到zui适浓度。

特征高速热启动
本产品采用了抗Taq聚合酶抗体的热启动系统。由于通过升温能使抗体迅速失活,因此预变性时间可以设定为很短。

东洋纺TOYOBO荧光定量THUNDERBIRD qPCR Mix 现货供应*!

TOYOBO东洋纺KOD -Plus- Neo高速PCR酶KOD-401

TOYOBO东洋纺KOD -Plus- Neo高速PCR酶

  • 产品型号:  KOD-401
  • 简单描述
  • TOYOBO东洋纺KOD -Plus- Neo高速PCR酶 包装规格:200U×1支[200次用]现货*
详细介绍

TOYOBO东洋纺KOD -Plus- Neo高速PCR酶

KOD DNA polymerase具有强力的3’→5’核酸外切酶活性(校正活性),可准确地对目的片段进行扩增,作为克隆用PCR酶获得了广泛的好评。然而,高保真性PCR酶在20?30循环以后,容易出现扩增无法持续的<停滞现象>。KOD -Plus- Neo在高保真性PCR酶:KOD -Plus-系列技术的基础上,应用了本公司新开发的「延伸增强剂」,保持了KOD -Plus-系列高保真性(约为Taq的80倍)的同时,通过抑制<停滞现象>,明显提高了对微量模板DNA、长目的片段的扩增效率。

TOYOBO东洋纺KOD -Plus- Neo高速PCR酶

特征:

特征1. 可对微量模板DNA进行高保真?高效率的扩增
通过应用延伸增强剂技术,即便是微量模板DNA也可对目的基因进行高保真?高效率的扩增。同时本酶具备高保真性(约为Taq的80倍),可准确地对低拷贝数模板的目的基因进行扩增。
此外,由于使用抗体的
热启动法,因此可进行特异性良好的扩增。
TOYOBO东洋纺KOD -Plus- Neo高速PCR酶KOD-401

TOYOBO东洋纺KOD -Plus- Neo高速PCR酶KOD-401

特征2. 缩短了延伸时间<30sec./kb> (长目的片段更方便)
延伸时间从原产品的60sec./kb缩短到30sec./1kb。对长目的片段的扩增更加方便。
TOYOBO东洋纺KOD -Plus- Neo高速PCR酶KOD-401

特征3. 实现了各种引物同一循环条件
通过对反应Buffer组成的zui适化,与原来的KOD DNA polymerase相比,延伸性?扩增效率有了大幅的提升。
实现了无需探讨循环条件。20mer以上的引物(Tm值>63℃)可先尝试2步法。无需探讨非常简便。
*Tm值采用zui邻近法(Nearest Neighbor method)计算得到的值。
TOYOBO东洋纺KOD -Plus- Neo高速PCR酶KOD-401

特征4. 长目的片段的扩增
提高了延伸性,可对各种长度的目的片段进行扩增。已通过实验确认可对24kb的基因组DNA 进行扩增。

 

TOYOBO东洋纺KOD -Plus- Neo高速PCR酶KOD-401 实验例

 

实验例1. 对来自Total RNA的各种基因全长ORF的扩增
实验例2. 微量Template的扩增
实验例3. 各种长度目的片段的扩增效率?延伸性的比较

 

TOYOBO东洋纺KOD -Plus- Neo高速PCR酶KOD-401 简要备注

 

<几点建议>
●PCR产物的克隆
由于本酶的PCR产物已被平滑化,可用平滑末端克隆法进行克隆。
此时,如已对载体进行了脱磷酸化处理,就需要对PCR产物进行磷酸化,或使用带5’磷酸基的引物。 另外,由于本酶的PCR产物已被平滑化,不能直接进行TA克隆。可使用按以下方法开发的TA克隆试剂盒「
TArget Clone -Plus-」。
TOYOBO东洋纺KOD -Plus- Neo高速PCR酶KOD-401
*包含于TArget Clone -Plus-(Code No. TAK-201)中。
**推荐使用Ligation high Ver.2 (Code No. LGK-201)。

 

<注意>
●引物的设计
3’端有错配的引物,可能会受本酶校正。

简要备注① 关于Polymerase
应用于PCR的
DNA polymerase大致可分为2大类。一类是从嗜热菌中分离出来的被称为polⅠ型的聚合酶,以TaqTth DNA polymerase为代表。另一类是从超嗜热Archaea中分离出来的被称为α型的聚合酶,KOD、Pfu DNA polymerase属于该类。α型酶具有polⅠ型酶所没有的3’→5核酸外切酶活性。该活性被称为Proof-reading(校正)活性,与PCR的保真性有着非常深厚的渊源。KOD DNA polymerase利用该Proof-reading活性,表现出很高的保真性。但具备该活性的酶一般被认为对PCR反应效率有不好的影响。KOD -Plus- Neo通过应用新的延伸增强剂、热启动法、以及Buffer组分的改良,大大提高了PCR效率。

Memo② 什么是热启动?
在室温条件下配制PCR反应溶液时,配制过程中聚合酶会开始反应。在室温下由于引物的特异性降低,很容易产生非特异性反应等副反应。另外,KOD DNA polymerase具有很强的3’→5’核酸外切酶活性(Proof reading活性),这也是产生副反应的原因之一。热启动法是指在高温阶段,激活聚合酶活性的方法,迄今为止已有好多种方法。其中zui严格的是使用中和抗体的方法。
KOD -Plus- Neo中由于混合了两种抗Taq DNA polymerase抗体,在常温状态下可*抑制聚合酶的活性及校正活性。而该抑制作用在PCR的预变性阶段*失活,对PCR没有任何影响。

订购信息:

20U(20次用) 货号:KOD-401S

200U(200次用)  货号:KOD-401

200U*5支(1000次用) 货号:KOD-401B

大量*,*!

 

 

TOYOBO高效率逆转录酶ReverTra AceTOYOBO TRT-101

TOYOBO高效率逆转录酶ReverTra Ace

  • 产品型号:  TOYOBO TRT-101
  • 简单描述
  • TOYOBO高效率逆转录酶ReverTra Ace本酶具有比原有的deletion型M-MLV RTase RNaseH?高约4倍的比活,可进行高效率的RT-PCR反应。
详细介绍

TOYOBO高效率逆转录酶ReverTra Ace

对M-MLV RTase进行了改良 提高了延伸性?反应效率?高温反应性
ReverTra Ace是在M-MLV RTase基因的RNaseH活性区域和DNA合成区域中导入了本公司*的点突变、
改变了酶机能的高性能逆转录酶。实现了*的高温反应性、延伸性和反应效率。

TOYOBO高效率逆转录酶ReverTra AceTOYOBO TRT-101

ReverTra Ace
(MMLV Reverse Transcriptase RNaseH-)
Code No. TRTLot
No. ******
Storage Store at -20℃
Size 10,000units( 101) 50,000units( 102)
Source : Escherichia coli DH5?? (pDV68)
Concentration : 100 units/μl
Unit Definition : One unit is the amount of enzyme activity that incorporates 1 nmole of dTTP into
acid insoluble fraction in 10 minutes at 42℃ when poly(A)+ RNA and oligo (dT)20
are used as template-primer.
Assay Condition : 50 mM Tris-HCl(pH8.3)
75 mM KCl
3 mM MgCl2
10 mM DTT
240 μg/ml poly(A)+ RNA
0.1 μM oligo (dT)20
1 mM dTTP
0.3 μM [methyl-3H]dTTP
Storage Buffer : 20 mM Tris-HCl(pH7.5)
100 mM NaCl
0.1 mM EDTA
10 mM 2-mercaptoethanol
0.01 % NP-40
50 % Glycerol
5 X Buffer : Not containing dNTPs. cDNA synthesis reaction requires1mM of dNTPs.
Quality Control
1. RNase Activity : When 50 units of this enzyme were incubated with 0.5 μg of MS2 RNA for 1 hour
at 42℃, RNase activity was not observed after agarose gel electrophoresis.
Remarks Research Use Only. Not for Human Use

 

KOD -Plus-系列酶(TOYOBO)KOD-201KOD-201

KOD -Plus-系列酶(TOYOBO)KOD-201

  • 产品型号:  KOD-201
  • 简单描述
  • KOD -Plus-系列酶(TOYOBO)KOD-201保真性本公司同类产品No1!消除了高保真性PCR酶常见的「无法扩增」的情况。可对各种长度的目的片段保证确实有效的扩增!
详细介绍

KOD -Plus-系列酶(TOYOBO)KOD-201

特征1. 优良的保真性  

KOD -Plus-系列的酶具有强力3'→5'核酸外切酶活性(Proof-reading活性),相比KOD DNA polymerase保真性更高,约为Taq DNA polymerase80zui适用于克隆

特征2. 通过热启动提高了PCR反应效率
通过将2种抗KOD单克隆抗体预混在酶中,抑制了PCR反应前常温状态下的多聚酶活性和

3'→5'核酸外切酶活性(该活性是产生非特异性反应的主要原因)。抗体在PCR的zui初变
性步骤即发生失活,对扩增反应没有任何影响。
特征3. 延伸性?扩增效率的提高
对反应Buffer的组成进行了*化的重组,使之较以往的KOD DNA polymerase延伸性?扩
增效率均有很大的提高。

特征4. 超群的耐热性
因其耐热性比Taq DNA Polymerase更为优良,故可以将热变性步骤的温度设定值提高,对
GC-rich等容易形成高级结构的目的片段尤其适用。

特征5. 高PCR成功率【KOD -Plus- Ver.2】
对难扩增的目的片段、长目的片段的PCR成功率比KOD -plus-更高。另外,也降低了带入的
逆转录反应液对PCR反应的抑制。

KOD -Plus-系列酶(TOYOBO)KOD-201

<几点建议>

●PCR产物的克隆

由于本酶的PCR产物已被平滑化,可用平滑末端克隆法进行克隆。此时,如已对载体进行了脱磷酸化处理,就需要对PCR产物进行磷酸化,或使用带5'磷酸基的引物。 另外,由于本酶的PCR产物已被平滑化,不能直接进行TA克隆。可使用按以下方法开发的TA克隆试剂盒「TArget Clone -Plus-」。

●PCR条件的设定

酶的标准使用量为50μl反应体系1U。延伸反应在68℃条件下进行,按1kb目的片段1min.的标准。出现拖尾条带时,可降低MgSO4浓度,无法确认到扩增时,可提高MgSO4浓度。

●GC-rich模板的情况

在反应液中添加终浓度为2?5%的DMSO可得到改善。

●以RT反应液为模板的情况

过量带入RT反应液有可能会对PCR反应产生抑制作用。建议带入到PCR的RT反应液在PCR反应液的1/25以下(在1/50以下)。这样就无需考虑RT反应液中Mg2+、dNTPs的影响,只要按照基本反应条件添加本酶中添付的dNTPs和MgSO4即可。

 

品名

包装

保存温度

Code No.

价格

 KOD -Plus-

200U×1

-20℃

KOD-201

RMB  800

(200U×1)×5

-20℃

KOD-201B

 RMB  3700

KOD -Plus- Ver.2

200U×1

-20℃

KOD-211

 RMB  1000

(200U×1)×5

-20℃

KOD-211B

 RMB  4600

相关产品价格表

 

 

品名 包装 保存温度 Code No. 价格

定点突变导入试剂盒
KOD -Plus- Mutagenesis Kit

20次

-20℃

SMK-101

RMB 1500

KOD用TA克隆试剂盒
TArget Clone-Plus-

10次

-20℃

TAK-201

RMB   380

KOD -Plus-用Buffer

1ml

-20℃

KOD-2B

RMB    50 

KOD -Plus-用MgSO4

1ml

-20℃

KOD-2S

RMB    50 

KOD -Plus- Ver.2用Buffer

1ml

-20℃

KOD-3B

RMB    50 

 

详细产品资料可和选购

Toyobo KOD-PLUS高效保真PCR酶KOD-201

Toyobo KOD-PLUS高效保真PCR酶

  • 产品型号:  KOD-201
  • 简单描述
  • Toyobo KOD-PLUS高效保真PCR酶规格:200U*1支
详细介绍

Toyobo KOD-PLUS高效保真PCR酶

KOD -Plus- is based on DNA polymerase from the hyperthermophilic Archaeon
Thermococcus kodakaraensis KOD11) 2). KOD -Plus- exhibits excellent high PCR fidelity
and efficiency. The enzyme solution of KOD -Plus- contains two types of anti-KOD
DNA polymerase antibodies that inhibit polymerase and 3’??5’ exonuclease activity, thus
allowing for Hot Start PCR3). KOD -Plus- generates blunt-end PCR products, due to
3’??5’ exonuclease (proof-reading) activity.

zui大特征: 优良的保真性 

KOD -Plus-系列的酶具有强力3‘→5’核酸外切酶活性(Proof-reading活性),相比KOD DNA

polymerase,保真性更高,约为Taq DNA polymerase的80倍。zui适用于克隆。

Toyobo KOD-PLUS高效保真PCR酶KOD-201

Toyobo KOD-PLUS高效保真PCR酶详细产品信息可和选购