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BcaBEST™ Labeling Kit酶试剂盒Takara

发表于2024年1月12日由whatman中国官网

BcaBEST™ Labeling Kit
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Takara	6046	BcaBEST™ Labeling Kit	40 Rxns	￥701

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■ 制品内容 (40 次量)

Random Primer (9 mer) 80 μl 10 × Buffer 100 μl dNTP Mixture 100 μl (dGTP,dATP,dTTP) (各0.2 mM)   BcaBEST™ DNA Polymerase (2 U/μl) 40 μl Control DNA (λ-Hind Ⅲ Fragment) (25 ng/μl) 10 μl

■ 制品说明

BcaBEST™ Labeling Kit是一种在DNA上标记[α-32P]、[3H] dCTP后，可在短时间内合成DNA 探针的试剂盒。本试剂盒的设计以A.P.Feinberg和B.Vogelstion 法为基础并对其进行了改良，操作十分简便，合成后的探针比活性高。目前我们经常使用的Klenow fragment 存在反应时间长、对GC 含量高的DNA 模板或具有高级结构的DNA 摄入效率低等缺点。Bacillus caldotenax 来源的BcaBEST™ DNA Polymerase是一种耐热性的、高延伸性的DNA 聚合酶。BcaBEST™ DNA Polymerase 和随机引物 (9 mer) 在50℃～ 55℃条件下反应10 分钟，即可对具有高级结构的DNA 模板进行标记。 BcaBEST™ DNA Polymerase 具有优良的延伸性，与Klenow fragment相比，可以合成更长的探针，同时因BcaBEST™ DNA Polymerase不具备exonuclease活性，反应时间长也不会导致摄入效率下降。   表1. 与Random Primer DNA Labeling Kit Ver.2比较

BcaBEST™ Labeling Kit  Random Primer DNA Labeling Kit Ver.2 反应时间 10分钟 10分钟 探针的比放射活性 ～109 dpm/μg ～109 dpm/μg 模板DNA 不受高级结构、GC含量的影响  高级结构或GC含量高时可导致摄入效率下降

注：两种试剂盒使用300 bp以下的DNA模板时，可导致摄入效率下降。

■ 利用随机引物进行DNA标记的原理

页面更新：2021-04-19 10:48:57

BcaBEST™ RNA PCR Kit Ver.1.1酶试剂盒Takara

发表于2023年12月31日由whatman中国官网

BcaBEST™ RNA PCR Kit Ver.1.1
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Takara	RR023A	BcaBEST™ RNA PCR Kit Ver.1.1	100 Rxns	￥1,200
Takara	RR023B (A × 2)	BcaBEST™ RNA PCR Kit Ver.1.1	100 Rxns × 2	￥2,300

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■ 制品内容 (Code No.: RR023A : 100次量*1)

BcaBEST Polymerase (22 U/μl) 50 μl RNase Inhibitor (40 U/μl) 25 μl Random 9 mers (50 μM) 50 μl Oligo dT Primer (50 μM) 50 μl RNase Free dH2O 1 ml Bca-Optimized Taq (5 U/μl) 25 μl 2 × Bca lst Buffer 1.25 ml × 2 支 5 × Bca 2nd Buffer 800 μl dNTP Mixture (各10 mM) 50 μl MgSO4 (25 mM) 500 μl Control F-1 Primer*2 (20 μM) 25 μl Control R-1 Primer*3 (20 μM) 25 μl Positive Control RNA (2 × 105 copies/μl) 25 μl     *1 反转录反应10 μl，PCR反应体系50 μl，可使用100次。 *2 Positive Control RNA用上游引物。 *3 Positive Control RNA用下游引物。

■ 制品说明

PCR（Polymerase Chain Reaction；聚合酶链式反应）是一种体外扩增DNA的简单而有效的方法。虽然原理上PCR法是扩增DNA，RNA不能直接被扩增，但是经过反转录酶的作用把RNA反转录成cDNA后，PCR法便可应用于RNA的解析了。目前，此方法已广泛应用于RNA的构造解析、cDNA的克隆及RNA水平上的表达解析等多种领域。 本试剂盒含有从RNA反转录到cDNA以及扩增此cDNA所必需的全部试剂，即用Bacillus caldotenax来源的BcaBEST Polymerase从RNA合成cDNA，然后在同一试管内加入应用LA PCR技术研制的Bca-Optimized Taq扩增此cDNA。此外，使用BcaBEST Polymerase进行反转录反应的最适温度是65℃，所以对具有复杂二级结构的RNA特别适合。

■ 各种引物的序列

引物名称 各引物序列 Random 9 mers   5′-NNNNNNNNN-3′ Oligo dT Primer   包含Takara特别设计的dT区域。本序列与TaKaRa RNA PCR Kit（AMV）Ver.3.0（Code No. RR019A/B）及TaKaRa RNA LA PCR Kit（AMV）Ver.1.1（Code No. RR012A）中的Oligo dT-Adaptor Primer的序列不同，没有M13 Primer M4区域。 Control F-1 Primer   5′-CTGCTCGCTTCGCTACTTGGA-3′ Control R-1 Primer   5′-CGGCACCTGTCCTACGAGTTG-3′

■ 试剂盒的原理

BcaBEST RNA PCR的原理图

■ 试剂盒特点

RNA模板   适用于所有RNA (对富含GC的mRNA及具有复杂二级结构的mRNA特别有效) 扩增片段大小    5 kb以下 反转录酶    BcaBEST Polymerase (最适温度65℃) DNA聚合酶    Bca-Optimized Taq RNase Inhibitor    必须使用 (试剂盒中含有) 合成cDNA第一条链的引物   Random 9 mers、Oligo dT-Adaptor Primer或 特异性下游PCR Primer 可供选择 操 作    在同一反应管中进行 (反转录酶在进行PCR反应前须进行高温失活)

页面更新：2019-12-23 14:28:52