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NEBuffer组合(EcoRI,DpnII) 收藏
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概述
贮存温度
-20°C
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-20°C
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预混上样染料溶液用于琼脂糖和非变性聚丙稀酰胺凝胶电泳,可进行不同的示踪染色。溶液中含有 SDS,可使条带清晰,避免有些内切酶切割后结合在 DNA 上引起的条带拖尾。由于高浓度的 SDS 能干扰 SYBR 和 GelRed 核酸荧光染料显色。因此使用这两种核酸染料时,建议使用无 SDS 的紫色凝胶上样染料(NEB#B7025)。凝胶上样染料中的 EDTA,可螯合反应缓冲液中10 mM 的 Mg2+,从而使反应终止。溴酚蓝是电泳的标准示踪染料。在标准的 1% TBE 琼脂糖凝胶中,它的迁移率大约与 300 bp 的片段相同。橙黄
G 不会显示在凝胶电泳照片中,除了一些最小的片段,橙黄 G 跑在凝胶的最前面。在标准的 1% TBE 琼脂糖凝胶中,它的迁移率大约与 50 bp 的片段相同。NEB 也提供与溴酚蓝迁移率相似的紫色染料。该染料在紫外灯下无阴影。
1X 凝胶上样染料,蓝色:
2.5% Ficoll-400,11 mM EDTA,3.3 mM Tris-HCl(pH 8.0),0.017% SDS 和 0.015% 溴酚蓝。
1X 凝胶上样染料,橙色:
2.5% Ficoll-400,11 mM EDTA,3.3 mM Tris-HCl(pH 8.0),0.017% SDS 和 0.15% 橙黄 G。
1X 凝胶上样染料,紫色:
2.5% Ficoll-400,10 mM EDTA,3.3 mM Tris-HCl(pH 8.0 @ 25℃),0.08% SDS ,0.02% 染料 1 和
0.0008% 染料 2。
1X 凝胶上样染料,紫色,无 SDS:
2.5% Ficoll-400,10 mM EDTA,3.3 mM Tris-HCl(pH 8.0 @ 25℃),0.02% 染料 1 和 0.0008% 染料 2。
注意:25 μl 反应体系中添加 5 μl 凝胶上样染料,或 50 μl 反应体系中加 10 μl 凝胶上样染料。上样前混匀。室温保存。
确认材料的耐药性 >> 耐药性检索

产品特征:|
A |
B |
C |
E |
F |
W |
T(mm) |
适用管外径(inch) |
R |
产品编号 |
简称 |
|
40 |
13 |
21 |
8 |
22 |
17 |
10 |
3/8 |
3/8 |
12198 |
30-10MCT 6C |
单位:mm 接头:PTFE 螺帽:ECTFE
规格里的“R”指管螺纹的规格 W指对角边的规格。
因此,接头可固定在管的任意位置。
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预混上样染料溶液用于琼脂糖和非变性聚丙稀酰胺凝胶电泳,可进行不同的示踪染色。溶液中含有 SDS,可使条带清晰,避免有些内切酶切割后结合在 DNA 上引起的条带拖尾。由于高浓度的 SDS 能干扰 SYBR 和 GelRed 核酸荧光染料显色。因此使用这两种核酸染料时,建议使用无 SDS 的紫色凝胶上样染料(NEB#B7025)。凝胶上样染料中的 EDTA,可螯合反应缓冲液中10 mM 的 Mg2+,从而使反应终止。溴酚蓝是电泳的标准示踪染料。在标准的 1% TBE 琼脂糖凝胶中,它的迁移率大约与 300 bp 的片段相同。橙黄
G 不会显示在凝胶电泳照片中,除了一些最小的片段,橙黄 G 跑在凝胶的最前面。在标准的 1% TBE 琼脂糖凝胶中,它的迁移率大约与 50 bp 的片段相同。NEB 也提供与溴酚蓝迁移率相似的紫色染料。该染料在紫外灯下无阴影。
1X 凝胶上样染料,蓝色:
2.5% Ficoll-400,11 mM EDTA,3.3 mM Tris-HCl(pH 8.0),0.017% SDS 和 0.015% 溴酚蓝。
1X 凝胶上样染料,橙色:
2.5% Ficoll-400,11 mM EDTA,3.3 mM Tris-HCl(pH 8.0),0.017% SDS 和 0.15% 橙黄 G。
1X 凝胶上样染料,紫色:
2.5% Ficoll-400,10 mM EDTA,3.3 mM Tris-HCl(pH 8.0 @ 25℃),0.08% SDS ,0.02% 染料 1 和
0.0008% 染料 2。
1X 凝胶上样染料,紫色,无 SDS:
2.5% Ficoll-400,10 mM EDTA,3.3 mM Tris-HCl(pH 8.0 @ 25℃),0.02% 染料 1 和 0.0008% 染料 2。
注意:25 μl 反应体系中添加 5 μl 凝胶上样染料,或 50 μl 反应体系中加 10 μl 凝胶上样染料。上样前混匀。室温保存。
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在 NEB 所有非预染的 DNA Ladder 中都包含紫色凝胶上样染料(含或不含 SDS),与其它染料相比,条带更加锐利并且消除了紫外的阴影。该预混的上样缓冲液包含两种染料,染料一(粉红/红色)和染料二(蓝色)。红色染料可以在琼脂糖电泳和非变性丙烯酰胺电泳中做为指示染料。两种染料在琼脂糖凝胶电泳过程中分离,红色染料作为指示染料与溴酚蓝迁移率一致。更具体的说,该染料不会在紫外成像时留下阴影。混合液中同时含有 EDTA 用来螯合酶反应过程中的镁(最多到 10 mM),从而使反应终止。染料中同时含有聚蔗糖,相比甘油混合的染料可以得到更亮更紧实的条带。紫色的 6X 凝胶上样染料含有 SDS,条带更清晰锐利,避免由于有些内切酶切割后结合在 DNA 上引起的条带拖尾。

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预混上样染料溶液用于琼脂糖和非变性聚丙稀酰胺凝胶电泳,可进行不同的示踪染色。溶液中含有 SDS,可使条带清晰,避免有些内切酶切割后结合在 DNA 上引起的条带拖尾。由于高浓度的 SDS 能干扰 SYBR 和 GelRed 核酸荧光染料显色。因此使用这两种核酸染料时,建议使用无 SDS 的紫色凝胶上样染料(NEB#B7025)。凝胶上样染料中的 EDTA,可螯合反应缓冲液中10 mM 的 Mg2+,从而使反应终止。溴酚蓝是电泳的标准示踪染料。在标准的 1% TBE 琼脂糖凝胶中,它的迁移率大约与 300 bp 的片段相同。橙黄
G 不会显示在凝胶电泳照片中,除了一些最小的片段,橙黄 G 跑在凝胶的最前面。在标准的 1% TBE 琼脂糖凝胶中,它的迁移率大约与 50 bp 的片段相同。NEB 也提供与溴酚蓝迁移率相似的紫色染料。该染料在紫外灯下无阴影。
蓝色凝胶上样染料 1X:
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·NEB 随内切酶提供10 X 缓冲液,以确保酶发挥 100% 活性。通常所提供的缓冲液为四种标准缓冲液中的一种,缓冲液成分中含有重组白蛋白。
·NEBuffer™ 套装中每种缓冲液 1.25 ml
NEB 提供的缓冲液浓度均为 10 X,酶及其相应的缓冲液均采用同样颜色的标签标记,以确保酶发挥 100% 活性。通常随酶提供提供的缓冲液为四种标准缓冲液中的一种。也有些酶对缓冲液有特殊要求,因此随酶提供相应的独特缓冲液(并非四种标准缓冲液中的一种),缓冲液成分中含有重组白蛋白(NEB #B9200)。
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如果在使用过程中需要稀释内切酶,建议稀释后浓度不要低于 1,000 units/ml。
-20℃。
稀释液 A:
50 mM KCl,10 mM Tris-HCl,0.1 mM EDTA,1 mM dithiothreitol,200 μg/ml BSA,50% 甘油(pH 7.4 @25℃)
注意:以上稀释液不能用于稀释嗜热聚合酶。
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如果在使用过程中需要稀释内切酶,建议稀释后浓度不要低于 1,000 units/ml。
-20℃。
稀释液 B:
300 mM NaCl,10 mM Tris-HCl,0.1 mM EDTA,1 mM dithiothreitol,500 μg/ml BSA,50% 甘油(pH 7.4 @25℃)。
注意:以上稀释液不能用于稀释嗜热聚合酶。
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如果在使用过程中需要稀释内切酶,建议稀释后浓度不要低于 1,000 units/ml。
-20℃。
稀释液 C:
250 mM NaCl,10 mM Tris-HCl,0.1 mM EDTA,1 mM dithiothreitol,0.15% Triton X-100,200 μg/ml BSA,50% 甘油(pH 7.4 @ 25℃)。
注意:以上稀释液不能用于稀释嗜热聚合酶。
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BSA,分子生物学级
分子生物学级别的重组白蛋白,是非牛类衍生的白蛋白,可以作为牛血清白蛋白(BSA)的替代品。与BSA一样,可以用于防止酶粘附到反应管壁上及移液枪表面。还可以用于在孵化期间稳定某些蛋白质。当需要避免牛血清白蛋白时,可以选择重组白蛋白。
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10,000 units/ml。
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NEBuffer 1.1: 25%
NEBuffer 2.1: 100*%
NEBuffer 3.1: 50%
CutSmart Buffer: 50*%
重组酶、省时酶。
EcoRI 反应缓冲液,37℃。
热失活:65℃ 20 分钟。
20,000 和 100,000 units/ml。
对哺乳动物基因组 DNA CpG甲基化敏感。
*在该缓冲液中可能出现星号活性。
确认材料的耐药性 >> 耐药性检索

产品特征:上海金畔生物科技有限公司代理New England Biolabs(NEB)酶试剂全线产品,欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

NEBuffer 1.1: 50%
NEBuffer 2.1: 100%
NEBuffer 3.1: 100%
CutSmart Buffer: 100%
CutSmart、重组酶、省时酶。
CutSmart 缓冲液,37℃。
热失活:80℃ 20 分钟。
10,000 units/ml。
对哺乳动物基因组 DNA CpG 甲基化敏感。
由于 BsrBl 的识别序列是非回文结构,当 DNA 经过 BsrBl 切割后再连接时,仅有 50% 的连接位点能够重新产生 BsrBI 位点。
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NEBuffer 1.1: 25%
NEBuffer 2.1: 100%
NEBuffer 3.1: 100%
CutSmart Buffer: 100%
重组酶、省时酶。
Cutsmart 缓冲液,37℃。
热失活:65℃ 20 分钟。
10,000 units/ml。
对哺乳动物基因组 DNA CpG 甲基化敏感。
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NEBuffer 1.1: 25%
NEBuffer 2.1: 100%
NEBuffer 3.1: 50%
CutSmart Buffer: 50%
NEBuffer 1.1: 25%
NEBuffer 2.1: 100%
NEBuffer 3.1: 50%
CutSmart Buffer: 50%
重组酶。
NEBuffer 2.1,37℃。
热失活:80℃ 20 分钟。
20,000 和 100,000 units/ml。
对 dam、dcm 和哺乳动物 CpG 甲基化均不敏感。
延时酶切条件下可能出现星号活性。
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NEBuffer 1.1: <10%
NEBuffer 2.1: 75%
NEBuffer 3.1: 25%
CutSmart Buffer: 100%
CutSmart、重组酶。
CutSmart 缓冲液,37℃。
5,000 units/ml。
对哺乳动物基因组 DNA CpG 甲基化敏感。
如下条件可能出现星号活性:延时酶切、高酶浓度或甘油浓度 > 5%。