核酸外切酶 VIII,截短型 货 号 #M0545LNEB酶试剂 New England Biolabs

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核酸外切酶 VIII,截短型                              收藏

核酸外切酶 VIII,截短型                 货   号                  #M0545L 核酸外切酶 VIII,截短型                 货   号                  #M0545L 核酸外切酶 VIII,截短型                 货   号                  #M0545L 核酸外切酶 VIII,截短型                 货   号                  #M0545L 核酸外切酶 VIII,截短型                 货   号                  #M0545L

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#M0545L
5,000 units
3,509.00

#M0545S
1,000 units 
909.00

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特性

 降解线性双链 DNA,保留环状双链DNA

概述:

 核酸外切酶 VIII,截短型是大肠杆菌核酸外切酶 VIII 活性结构域的基因工程酶。其从 5´ →3´ 方向切除线性双链 DNA 的 5´ 末端核苷酸。该酶不降解超螺旋双链 DNA 和环状单链 DNA。

来源

 来源于 E. coli,克隆自含核酸外切酶 VIII 基因活性区域的基因工程质粒。

反应条件:

 1X NEBuffer 4 反应缓冲液。37℃ 温育。热失活:70℃ 加热 15 分钟。

质保声明:

核酸外切酶 VIII,截短型经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。

单位定义:

1 单位指在 50 μl 含超声处理的 0.15mM [3H]-标记双链 DNA 的1X NEBuffer 4 反应缓冲液体系中,37℃ 条件下,30 分钟内能催化双链 DNA产生 1 nmol 酸溶性脱氧核苷酸所需的酶量。单位活性检测条件请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。

浓度:

 10,000 units/ml

参考文献:

关于该酶性质和产品应用的参考文献,请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。
 

KLD 酶混合液 货 号 #M0554SNEB酶试剂 New England Biolabs

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KLD 酶混合液                              收藏

KLD 酶混合液             货   号                  #M0554S

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#M0554S
25 reactions
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相关产品:

NEB PCR 克隆试剂盒
#E1202S 20 次反应 . . . . . .¥3,299
NEB PCR 克隆试剂盒(不含感受态细胞)
#E1203S 20 次反应 . . . . . .¥1,919
KLD 酶混合液
#M0554S 25次反应 . . . . . .¥3,599

特性:

 KLD 酶混合液             货   号                  #M0554S

概述

 概述:Q5 定点突变试剂盒可以在 2 小时内快速对双链质粒 DNA 进行定点突变,该试剂盒使用稳定的 Q5 热启动超保真 DNA 聚合酶,结合客户自行设计的引物,在各种质粒中引入替换、缺失和插入突变。为保证效率,将产物转入试剂盒提供的高效级 NEB 5-alpha E. coli 感受态细胞,质粒长度可达 14.3 kb。

应用:

 • 在质粒 DNA 上产生替换、插入、缺失突变

Q5 定点突变试剂盒包含:

 – Q5 热启动超保真预混液(2X)

– KLD 酶混合液(10X)和反应缓冲液(2X)
– 对照引物混合液(各 10 μM)和 DNA 模板
(5 ng/μl)
– NEB 5-alpha E. coli 感受态细胞(高效级)
– pUC19 转化对照质粒(5 pg/μl)
– SOC Outgrowth 培养基

质保声明:

 Q5 定点突变试剂盒经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。

实验流程:

 KLD 酶混合液             货   号                  #M0554S

热敏核酸外切酶 I 货 号 #M0568LNEB酶试剂 New England Biolabs

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热敏核酸外切酶 I                              收藏

热敏核酸外切酶 I                货   号                  #M0568L 热敏核酸外切酶 I                货   号                  #M0568L 热敏核酸外切酶 I                货   号                  #M0568L 热敏核酸外切酶 I                货   号                  #M0568L

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#M0568L
15,000 units
3,839.00

#M0568S
3,000 units
949.00

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特性

去除 DNA 测序或 SNP 分析前 PCR 反应体系中单链引物

去除巢式 PCR 反应体系中单链引物
从双链 DNA 中去除单链 DNA
 

概述

 具有从 3’→5’方向水解单链 DNA 的外切酶活性。

反应条件

1X NEBuffer 3.1,37℃ 温育。

热失活:80℃ 加热 1 分钟。
 

单位定义

 1 单位指在 37℃ 条件下,100 μl 体系,6 分钟内催化释放 2 nmol 的酸可溶性核苷酸所需要的酶量。单位活性检测条件请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。

浓度

 20,000 units/ml

固定化 T4 DNA 连接酶 货 号 #M0569SNEB酶试剂 New England Biolabs

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固定化 T4 DNA 连接酶                              收藏

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#M0569S
1.1 mg
3,379.00

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产品特点

· 固定化 T4 DNA 连接酶(IM T4 DNA Ligase)由 T4 DNA 连接酶和磁珠组成,两者由共价键连接。

· 使用磁力可轻松去除反应中的酶
· 避免热失活步骤对下游应用的干扰
· 固定化酶可重复使用
· 开启新的工作流程和应用
 

产品说明

 T4 DNA 连接酶催化双链 DNA RNA 上相邻的 5´-磷酸基末端和 3´-羟基末端形成磷酸二酯键。该酶不仅能够催化平末端或粘性末端之间的连接,还可以修复双链 DNARNA DNA/RNA 杂交双链中的单链切刻(1)。

固定化 T4 DNA 连接酶(IM T4 DNA Ligase)是包被有 T4 DNA 连接酶的磁珠悬浮液,以 10 mg/ml 的溶液(50% 甘油)提供,每微升溶液的有效浓度为 60 粘性末端单位CEU)。反应完成后,体系中的酶可使用磁力去除,然后可重复使用。

  固定化 T4 DNA 连接酶在不同温度下的相对活性

Temperature

% Activity

16ºC

100%

25ºC

100%

37ºC

50%

 

固定化 T4 DNA 连接酶在不同 NEB 缓冲液中的活性

固定化 T4 DNA 连接酶            货   号                  #M0569S

 

图 1:固定化 T4 DNA 连接酶成功连接 Lambda DNA-HindIII 消化产物

 

固定化 T4 DNA 连接酶            货   号                  #M0569S

根据产品说明书推荐步骤,分别使用无连接酶、可溶性 T4 DNA 连接酶(NEB #M0202)、固定化 T4 DNA 连接酶(NEB #M0569)对 Lambda DNA- HindIII 消化产物(NEB #N3012)进行连接。结果显示,可溶性酶和固定化酶的连接效果一致。

 

图 2:固定化 T4 DNA 连接酶可重复使用

固定化 T4 DNA 连接酶            货   号                  #M0569S

将固定化 T4 DNA 连接酶(NEB #M0569)置于快连缓冲液中,对 Nanopore 接头进行连续夹板连接,数据显示:经过 20 次连续连接反应后,酶活仍不受影响。

 

EcoGII 甲基转移酶 货 号 #M0603SNEB酶试剂 New England Biolabs

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EcoGII 甲基转移酶                              收藏

EcoGII 甲基转移酶                  货   号                  #M0603S EcoGII 甲基转移酶                  货   号                  #M0603S EcoGII 甲基转移酶                  货   号                  #M0603S EcoGII 甲基转移酶                  货   号                  #M0603S EcoGII 甲基转移酶                  货   号                  #M0603S EcoGII 甲基转移酶                  货   号                  #M0603S

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#M0603S
200 units
939.00

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概述:

 EcoGII 甲基转移酶是非特异甲基转移酶,能对序列中任意腺嘌呤残基(N6)进行甲基化修饰。

来源:

 重组 E. coli 菌株,该载体含有从 E. coliC227-11 克隆的 EcoGII 修饰基因。

反应条件:

 1X CutSmart 缓冲液 + SAM [50 mM KAc,20 mM Tris-Ac,10 mM Mg(Ac)2,100 μg/ml BSA(pH 7.9 @ 25℃)],加入 160 μMSAM(随酶提供),37℃ 温育。

热失活:65℃ 加热 10 分钟。

单位定义:

 1 单位指在 20 μl 反应体系中,37℃ 条件下,30 分钟能保护 100 ng FAM 标记 dsDNA 不被MboI 限制性内切酶切割所需要的酶量。

浓度:

 5,000 units/ml

注意事项:

 SAM 在 37℃(pH 7.5)条件下不稳定,温育超过 4 个小时需要补充新的 SAM。甲基化反应中,SAM 以 1:200 的比例稀释到终浓度为 160μM。EcoGII 甲基转移酶对盐敏感。确保 DNA 溶液的盐浓度很低或者确保总反应体系中 DNA 溶液仅占很低的比例。

热稳定 FEN1 货 号 #M0645SNEB酶试剂 New England Biolabs

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热稳定 FEN1                              收藏

热稳定 FEN1                 货   号                  #M0645S 热稳定 FEN1                 货   号                  #M0645S 热稳定 FEN1                 货   号                  #M0645S 热稳定 FEN1                 货   号                  #M0645S 热稳定 FEN1                 货   号                  #M0645S

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#M0645S
1,600 units
909.00

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特性

  切除 DNA flap 结构

概述

 热稳定 Flap 核酸内切酶 1 (FEN1) 催化切除分叉双链 DNA 底物中的flap 结构,产生 5´ 磷酸末端。DNA 连接酶可以连接 FEN1 消化产物产生双链 DNA。在体内,FEN1 是冈崎片段加工成熟的基本元件,并参与调控碱基切除修复过程。

来源:

 纯化自含 Thermococcus 9°N FEN1 基因的 E.coli 菌株。

反应条件:

1X ThermoPol 反应缓冲液

[20 mM Tris-acetate,10 mM (NH4)2SO4,10 mM KCl,
10 mM MgSO4,0.1% Triton X-100 (pH 8.8 @ 25℃)],65℃温育。

质保声明:

热稳定 FEN1 经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请登陆

www.neb.com 或 www.neb-china.com。

单位定义:

 1 单位指在 10 μl 反应体系中,65℃ 条件下,10 分钟内切割 10 pmol 含 5´ flap 结构的寡核苷酸底物所需要的酶量。单位活性检测条件请登陆

www.neb.com 或 www.neb-china.com。

浓度:

32,000 units/ml

参考文献:

 关于该酶性质和产品应用的参考文献,请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。

Anopore无机膜6809-5012现货供应,AAO膜板100nm孔径6809-5012优势代理

Anopore无机膜6809-5012现货供应,AAO膜板100nm孔径6809-5012优势代理
Anopore无机膜有三种孔径:0.02μm、0.1μm和0.2μm;和三种直径:13mm、25mm和47mm。

特性和功能

•高孔密度和均匀孔径分布使之成为一种特别精确的膜
•广泛的溶剂相容性,因而不必在实验室储备各种膜
•膜生产时不加添加剂,确保了极低的渗出物,不会污染样品
•极低的蛋白吸附,实现样品的损失的zui小化
•浸湿时呈透明状,是显微镜分析的理想产品
应用

•HPLC流动相过滤和脱气
•超纯溶剂的制备
•比重分析
•脂类积压
•电子显微镜扫描研究
•通过落射荧光显微镜分析细菌
•微米和纳米过滤
•纳米金属杆制备

Anopore无机膜6809-5012现货供应,AAO膜板100nm孔径6809-5012优势代理技术参数-Anopore无机膜

 

Anodisc 13

Anodisc 25

Anodisc 47

平均膜厚度

60µm

60µm

60µm

膜直径

13mm

21mm

43mm

膜类型

Anodisc氧化铝

氧化铝

氧化铝

支撑环材烊

聚丙烯

聚丙烯

构建方式

热合

热合

蛋白吸附

爆裂强度

65-110psi

65-110psi

65-110psi

zui高工作温度

400℃

40℃

40℃

孔率

25-50%

25-50%

25-50%

高压蒸汽灭菌

折射率

1.6

1.6

1.6

订货信息-Anopore无机膜

尺寸(mm)

孔径(µm)

目录号

亲水

蛋白

吸附力

化学

相容性

数量/包

13

Anodisc 13*

0.02

6809-7003

很低

100

13

Anodisc 13*

0.1

6809-7013

很低

100

13

Anodisc 13*

0.2

6809-7023

很低

100

25

Anodisc 25

0.02

6809-6002

很低

50

25

Anodisc 25

0.1

6809-6012

很低

50

25

Anodisc 25

0.2

6809-6022

很低

50

47

Anodisc 47

0.02

6809-5002

很低

50

47

Anodisc 47

0.1

6809-5012

很低

50

47

Anodisc 47

0.2

6089-5022

很低

50

Taq 高保真 DNA 连接酶 货 号 #M0647SNEB酶试剂 New England Biolabs

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Taq 高保真 DNA 连接酶                              收藏

Taq 高保真 DNA 连接酶               货   号                  #M0647S Taq 高保真 DNA 连接酶               货   号                  #M0647S Taq 高保真 DNA 连接酶               货   号                  #M0647S

货 号
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#M0647S
50 次反应
1,879.00

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特性

 高保真,耐热性好
 dsDNA 切刻修复
 可用连接酶链式反应(LCR)和连接酶检测反应(LDR)对等位基因进行特异性检测
 锁式探针连接
 为方便计算连接温度,请登陆 Ligasecalc.neb.com 使用 Thermostable Ligase Reaction Temperature Calculator在线工具。

概述

Taq 高保真 DNA 连接酶含热稳定 DNA 连接酶和专属试剂,具有无以伦比的保真性,能高保真且高效地连接 DNA 切刻。在优化的缓冲液体系中,该酶将与靶 DNA 互补的相邻 5´-磷酸基和 3´-羟基的切刻位点以磷酸二酯键进行连接,极大程度降低了错配率。改良的配方使得该产品可以更好的识别连接反应供体和受体,从而可以精确检测 SNPs 和其他等位基因变异。Taq 高保真 DNA 连接酶在 37–75℃ 温度范围内都有活性。

来源

 纯化自重组的 E. coli 菌株,携带有克隆自嗜热菌的连接酶基因。

反应条件

1X Taq 高保真 DNA 连接酶反应缓冲液
[20 mM Tris-HCl,150 mM KCl,10 mM MgCl2,10mM DTT,1 mM NAD 和 0.1% Triton X-100(pH 8.5 @25℃)],25℃ 温育。

质保声明

Taq 高保真 DNA 连接酶经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。

参考文献

关于该酶性质和产品应用的参考文
献,请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。

核酸消化混合液 货 号 #M0649SNEB酶试剂 New England Biolabs

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核酸消化混合液                              收藏

核酸消化混合液              货   号                  #M0649S 核酸消化混合液              货   号                  #M0649S

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#M0649S
50 reactions
1,489.00

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特性

  Convenient one-step protocol
  Digests both DNA and RNA to single nucleosides
  Low-glycerol formulation significantly reduces glycerol-induced ion suppression during MS analysis

概述

核苷消化混合液是复合酶,能一步将 DNA 或 RNA 消化成单核苷,省去了多步耗时的消化步骤,特别适用于液相色谱-质谱(LC-MS)定量分析。

反应条件

1X Nucleoside Digestion Mix Reaction Buffer.   Incubate at 37°C.

贮存温度

-20°C

注意事项

1.  Dilution of the Nucleoside Digestion mix may result in a decrease of enzymatic activity and incomplete

      digestion of substrate. Therefore, we recommend using 1 µL of the Nucleoside Digestion Mix for

      digestion of samples containing < 1 µg of DNA or RNA substrate.
2.  Samples containing a large number of modifications (particularly modifications at the ribose 2´-position)

     may benefit from overnight incubation with the Nucleoside Digestion Mix in order to achieve complete

     digestion. No signal deterioration has been observed by incubating DNA or RNA samples with the

      Nucleoside Digestion Mix for up to 24 hours at 37°C. Alternatively, the ratio of Nucleoside Digestion

      Mix:nucleic acid may be increased from 1 μl/μg substrate to 5-10 μl/μg substrate to ensure complete

      digestion.
3.  Although it is not necessary to stop the reaction prior to LC-MS, the mix can be inactivated by the

     addition of EDTA (5 mM, final concentration).
4.  In order to reduce the ion suppression effects of glycerol, the Nucleoside Digestion Mix has been

     formulated to contain very little glycerol (<1%) and therefore the mix will freeze when stored at -20°C.

     The mix is stable for >2 years when stored at -20°C and can withstand 50 freeze-thaw cycles without

     significant activity loss.
5.  As carryover of certain reaction components (e.g., EDTA, detergents, etc) from upstream steps may

     result in incomplete digestion, it is highly recommended that DNA or RNA substrates be purified

     (column purification/phenol chloroform extraction) before digestion with the Nucleoside Digestion

     Mix.

TelN 端粒酶 货 号 #M0651SNEB酶试剂 New England Biolabs

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TelN 端粒酶                              收藏

TelN 端粒酶             货   号                  #M0651S

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#M0651S
250 unit
909.00

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识别位点

TelN 端粒酶             货   号                  #M0651S

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浓度

5,000 units/ml

概述

TelN 端粒酶分离自 N15 噬菌体,其在 TelN识别序列(56 bp)切割 dsDNA,并在切割位点形成共价封闭末端。

特点

分离自 N15 噬菌体
在 TelN 识别序列(56 bp)切割 dsDNA
在切割位点形成共价封闭末端
 

反应条件

 1X ThermoPol 反应缓冲液,30℃ 温育。

单位定义

 1 单位指在 50μl 1X ThermoPol 反应缓冲液体系中,30℃ 条件下,30 分钟切割 0.5μg BsaI 线性化 pMiniT-TelN 对照质粒(313 fmol TelN 识别位点)所需要的酶量。

热失活

75°C 加热5分钟。

5-羟甲基尿苷 DNA 激酶 货 号 #M0659SNEB酶试剂 New England Biolabs

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5-羟甲基尿苷 DNA 激酶                              收藏

5-羟甲基尿苷 DNA 激酶                 货   号                  #M0659S 5-羟甲基尿苷 DNA 激酶                 货   号                  #M0659S 5-羟甲基尿苷 DNA 激酶                 货   号                  #M0659S 5-羟甲基尿苷 DNA 激酶                 货   号                  #M0659S 5-羟甲基尿苷 DNA 激酶                 货   号                  #M0659S

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#M0659S
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5-羟甲基尿苷 DNA 激酶                 货   号                  #M0659S

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产品描述

 该酶是创新酶(Enzyme for Innovation, EFI)。创新酶工程由 NEB 发起,旨在为科研界提供独一无二的酶,从而为新的创新应用的发现创造条件。完整创新酶列表请登陆 www.neb.com/EnzymesforInnovation。

概述

 5-羟甲基尿苷 DNA 激酶(5-HMUDK)可将 ATP 的 γ-位磷酸基团转移到 DNA 链上的 5-羟甲基尿苷的羟甲基上

反应条件

 1X T4 DNA 连接酶反应缓冲液,37℃ 温育。

热失活:80℃ 加热 10 分钟。
 

单位定义

 1 单位指在 20 μl 反应体系中,37℃ 条件下,30 分钟能保护 1 μg 枯草芽孢杆菌噬菌体 SP8 基因组 DNA 不被 NcoI-HF 限制性内切酶切割所需要的酶量。

浓度

 20,000 units/ml

核酸酶 P1 货 号 #M0660SNEB酶试剂 New England Biolabs

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核酸酶 P1                              收藏

核酸酶 P1               货   号                  #M0660S 核酸酶 P1               货   号                  #M0660S 核酸酶 P1               货   号                  #M0660S

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#M0660S
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特性

去除 DNA 分子上单链末端以形成平末端

切割发夹环
DNA 或 RNA 碱基组成分析
蛋白纯化过程中去除核酸
 

概述

 核酸酶 P1(来源自 p.citrinum)是锌依赖的单链特异性核酸酶,能无碱基特异地水解 RNA 和单链 DNA 上的 3’→5′ 磷酸二酯键。该酶也具有 3’-磷酸单酯酶活性。

 
尽管核酸酶 P1 是单链特异性核酸酶,其在核酸酶 P1 反应缓冲液中对双链 DNA (dsDNA)也具有活性。在双链 DNA 存在的情况下,如果只想消化单链核苷酸(ssDNA 或 RNA),建议核酸酶 P1 在 1X NEBuffer 1.1 反应缓冲液条件下进行反应,以使该酶发挥最大单链核酸酶活性。
 

反应条件

 1X 核酸酶 P1 反应缓冲液,37℃ 温育。

热失活:75℃ 加热 10 分钟。
 

单位定义

 1 单位指在 1X 核酸酶 P1 反应缓冲液体系中,37℃ 条件下,每分钟消化圆酵母(Torula Yeast)总 RNA 释放 1 μg 酸可溶性核苷酸所需要的酶量。

浓度

 100,000 units/ml

注意事项

核酸酶 P1 底物特异性如下:3’AMP>RNA>ssDNA>>dsDNA

2’AMP 的水解效率比 3’AMP 低 3000 倍。
 

T5 核酸外切酶 货 号 #M0663LNEB酶试剂 New England Biolabs

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T5 核酸外切酶                              收藏

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#M0663L
5,000 units
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#M0663S
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产品信息

 该产品是 T5 核酸外切酶(NEB #M0363)的替代产品。T5 核酸外切酶            货   号                  #M0663L

   ·双链 DNA 特异性核酸外切酶、单链 DNA 核酸内切酶

   ·从线性化或切刻双链 DNA 5’末端起始消化

   ·沿 5→3’方向切割线性化或切刻双链 DNA

浓度

 10,000 units/ml

T5 核酸外切酶应用

 · 从完全连接的环状双链 DNA 中,去除不完全连接产物

   · 降解碱裂解质粒提取方法中产生的变性 DNA,提高 DNA 克隆效率

   ·降解质粒样品中污染的线性化和切刻 DNA 

概述

 T5 核酸外切酶沿 5→3’方向降解 DNA1)。它既能从 5’末端起始消化,也能从线性或环状双链 DNA 的切刻或缺口处起始消化(1)。但不能降解超螺旋双链 DNA2)。T5 核酸外切酶还具有单链 DNA 核酸内切酶活性。

特性

 ·降解线性单链、双链 DNA 或切刻质粒 DNA,但对超螺旋质粒 DNA 不起作用

   ·去除碱裂解质粒提取过程中产生的变性 DNA3

   ·提高小提制备的cDNA 文库质粒的转染效率(4

 

来源

纯化自含有 T5 噬菌体 D15 基因质粒的 E.coli 菌株, D15 基因融合有 His 标签。

单位定义

 1 单位指在 CutSmart 反应缓冲液中,37℃ 条件下,每分钟引起 0.00032 A260 nm 变化所需要的酶量。单位活性检测条件请登陆 www.neb.com www.neb-china.com

反应条件

 1X NEBuffer 437 温育

质保声明

 T5 核酸外切酶经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请登陆 www.neb.com www.neb-china.com

参考文献

1.  Sayers, J.R. et al. (1991). Nucleic Acids Res. 19, 4127-4132.

   2.  Sayers, J.R. et al. (1990). J. of Biol. Chem. 265, 18311-18317.

   3.  Sayers, J.R. et al. (1996). Analytical Biochem. 241, 186-189.

   4.  Kiss-Toth, E. et al. (2001). Analytical Biochem. 288, 230-232.

Tth Argonaute 蛋白 (TtAgo) 货 号 #M0665SNEB酶试剂 New England Biolabs

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Tth Argonaute 蛋白 (TtAgo)                              收藏

Tth Argonaute 蛋白 (TtAgo)             货   号                  #M0665S

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#M0665S
50 pmol
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特性

TtAgo 来自嗜热栖热菌,是一种可编辑的核酸内切酶,在 5’ 磷酸化的单链 DNA(ssDNA) 指导下能够切割底物靶序列,在底物与向导 DNA 互补序列的磷酸二酯键处产生断裂。

·所需 5’ 磷酸化 ssDNA 长度短,仅 16 -18 nt,成本低,可用 NEB T4 PNK 进行磷酸化

·向导/靶标序列的选择不受相邻序列限制

·对 ssDNA 和大多数双链 DNA(dsDNA)底物活性较高(在 dsDNA 底物上产生切刻),对 ssRNA 底物也有一定活性

·适用于体外应用

·参考 Tth Argonaute (TtAgo) 实验的优化指南

 

概述

 TtAgo 是一种来自革兰氏阴性嗜热栖热菌(Thermus thermophiles)的原核 argonaute 蛋白,在 5′-磷酸化单链 DNA(16 – 18 nt)指导下,可发挥 DNA 介导的核酸内切酶作用。在二价 Mg2+(或Mn2+)金属离子存在时,该酶具有类 RNase H 活性(见产品使用说明 #1),并在与 DNA 向导链第 10 和 11 个碱基互补的碱基处切割底物。

 
TtAgo 工作示意图
Tth Argonaute 蛋白 (TtAgo)             货   号                  #M0665S
TtAgo 在 65-85℃ 时具有活性(见产品使用说明 #2),对 ssDNA 活性最高,其次是 dsDNA,对单链 RNA(ssRNA)底物活性最低。该酶与单链向导 DNA 协同作用时,不会切割 dsDNA ,而只是切刻与向导 DNA 链互补的底物 DNA 链。该酶对双链 RNA(dsRNA)底物无活性。切割后的 5’ 和 3’ 末端产物可进行下游连接(1)。结果表明,在某些情况下,反应中加入热稳定单链 DNA 结合蛋白(ET-SSB,NEB #M2401)和/或热稳定解旋酶有助于切割 dsDNA 底物。
 
无向导 DNA 的 TtAgo 会通过 “剪切” 来降解 dsDNA,这被认为是 TtAgo 从入侵的或外源 DNA 中自发产生向导 DNA 的机制。(2)为防止这种非特异性活性的产生,向导 DNA 的摩尔量应超过 TtAgo 量的 5 倍。此外,向导链要与 TtAgo 一起在 ~75℃ 条件下孵育 10-30 分钟,形成核蛋白复合物后再加入底物进行反应。更多详细信息,请参阅操作步骤、说明书和使用说明。
 
TtAgo 适用于体外应用。
 
随酶提供的试剂
ThermoPol 反应缓冲液套装
 
浓度
1 µM
 
来源
TtAgo 纯化自携带革兰阴性嗜热栖热菌(Thermus thermophilus)克隆基因的大肠杆菌菌株,该克隆基因是 N 端含 6X His 标记的融合基因。
 

 

保存温度

-20°C
 
质保声明 
TtAgo 蛋白经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。
 
参考文献
1. Hunt, E. A., Evans Jr, T. C., & Tanner, N. A. (2018). Single-stranded binding proteins and helicase enhance the activity of prokaryotic argonautes in vitro. PloS One. 13 (8), e0203073.
2. Swarts, D., Szczepaniak, M., Sheng, G., Chandradoss, S., Zhu, Y., & Timmers, E. et al. (2017). Autonomous Generation and Loading of DNA Guides by Bacterial Argonaute. Molecular Cell.. 65 (6), 985-99.
 

 

切割错配核酸内切酶 I 货 号 #M0678SNEB酶试剂 New England Biolabs

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切割错配核酸内切酶 I                              收藏

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#M0678S
4,000 units
1,799.00

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产品特点

 切割错配核酸内切酶 I            货   号                  #M0678S

DNA 核酸内切酶
催化切割一些 DNA 错配(T:T,G:G 和 G:T)
在两条链上错配碱基 5端的第三个磷酸二酯键处切割,切割后产生 5 bp 粘性末端,含 3′-OH 和 5′- 磷酸
对于 T 错配切割效果最好;无法识别所有类型的 DNA 错配
 

产品描述

切割错配核酸内切酶 I 是一种依赖 Mg2+ 的 DNA 核酸内切酶,可特异切割错配碱基对(T:T、G:G 和 T:G 错配)。切割错配核酸内切酶 I 在两条链上错配碱基 5端的第三个磷酸二酯键处切割,切割后产生 5 bp 粘性末端。切割错配核酸内切酶 I 优先切割的 DNA 错配为:T:T、G:G 和 T:G,也可轻松切割 T:I、G:I 和 G:U 错配。此外,实验证明:切割错配核酸内切酶 I 在 T:C 类型的 DNA 错配中可在含 T 的链上形成切刻。该酶还能切割 DNA:RNA 杂交链上的 T:G 和 T:U 错配,但其切割效率低于 DNA:DNA 错配。

 

图 1.切割错配核酸内切酶 I 能够切割双链 DNA 上的 T:T、G:T 和 G:G 错配
切割错配核酸内切酶 I            货   号                  #M0678S

A)构建四个在同一位点包含特定突变质粒(p1-p4),使用差异磷酸化引物(正向或反向)扩增生成 8 个双链 PCR 片段,长度约 672 bp ds1-ds8)。经 Monarch PCR & DNA 纯化试剂盒(NEB #T1030)纯化后,使用 5 units Lambda 核酸外切酶,经37℃孵育 60 分钟,以特异性降解双链片段中的磷酸化链(2.2 µg),从而产生一系列单链(正链/负链),同一位点碱基为 A/T/C/G。随后使用 Monarch PCR & DNA 纯化试剂盒(NEB #T1030)对这些单链片段(ss1-ss8)进行纯化。

B)将纯化后的含有 A/T/C/G 的单链片段进行混合,可形成精准配对的 DNA(绿色 √ 框)或含单碱基错配的双链片段(黄色 × 框)。为了生含错配碱基的双链,在下述条件下,选择特定的正/反义链进行混合:在 1X NEBuffer 2.1 中重新退火,加热至 95℃,再冷却至室温。上述实验可产生 8 DNA 错配(A:AA:CA:GC:CC:TG:GG:TT:T)。(C)如下方法检测该酶切割 dsDNA 中特定错配的能力:在 200 ng 含错配的 dsDNA 中加入 80 units 切割错配核酸内切酶 I37℃孵育 30 分钟。后将产物进行琼脂糖(1.2%)凝胶电泳并用溴化乙锭染色观察。

 

图 2.切割错配核酸内切酶 I 能够切割双链 DNA 上的 T:T、G:T 和 G:G 错配 

 

切割错配核酸内切酶 I            货   号                  #M0678S

使用前端带有 FAM 荧光标记(蓝色示踪染料),末端带有 ROX 荧光标记(红色示踪染料)的双链 DNA 片段与80 units 切割错配核酸内切酶 I(+M0678)在 NEBuffer r2.1 中,37℃孵育 30 分钟,用于测定切割错配核酸内切酶 I 切割 dsDNA 中特定错配的能力。样品经毛细管电泳分析显示:酶解样品(+M0678 样品)与未经酶处理的样品(-M0678)相比,T:T、G:T 和 G:G 错配的底物峰发生偏移。此外,在 30 分钟内即可看到 T:C 错配中的含 T 链(蓝色链)出现一些轻微切割。该酶在 T:C 错配底物上的切刻活性随着时间的推移而增加(最多 18 小时,本数据未显示)。
 

NEBridge™ 连接酶预混液 货 号 #M1100SNEB酶试剂 New England Biolabs

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NEBridge 连接酶预混液                              收藏

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#M1100S
50 reactions
1,069.00

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产品特点

·试剂盒经优化设计,适用于高效准确的 Golden Gate 组装

·3X 预混液剂型,使用便捷
·搭配 NEB IIS 型限制性内切酶使用
·用于无缝克隆 — 组装后不存在残余序列
·适用于在单个反应中同时进行多片段 (2-25+) 有序组装
·也可用于单片段克隆和文库构建
·Golden Gate 免费设计软件请点击 GoldenGate.neb.com
·连接酶保真度查询工具请点击 Ligase Fidelity Tools(用于设计高保真 Golden Gate 组装)
     
     NEBridge 连接酶预混液为使用者提供更加灵活和便利的试剂,搭配 NEB IIS 型限制性内切酶,可高效和高保真的完成 Golden Gate 组装。

产品描述

 NEBridge 连接酶预混液为 3X 浓度剂型,适用于 Golden Gate 组装。该预混液专门设计用于搭配 NEB IIS 型限制性内切酶使用,经优化的反应缓冲液含有 T4 DNA 连接酶和专有的连接增强剂。用户只需选择 NEB IIS 型限制性内切酶,并添加组装的 DNA 底物即可。该产品与其操作方案可支持简单的单片段插入,也支持中等复杂(3–6 个片段)和高度复杂(7–25+ 个片段)的片段组装。

NEBridge™ 连接酶预混液            货   号                  #M1100S

图示:使用 NEBridge 连接酶预混液和传统 T4 DNA 连接酶缓冲液对 lac 基因 进行 25 片段的 Golden Gate 组装

NEBridge™ 连接酶预混液            货   号                  #M1100S

A:使用 NEBridge 连接酶预混液进行 25 个片段组装的原理图
B:使用 BbsI-HF (NEB #R3539M)、24 个插入片段和 pGGAselect 质粒建立 30 µl 反应体系。左图为使用 10 µl NEBridge 连接酶预混液的结果。右图为使用 3 µl 10X T4 DNA 连接酶缓冲液 (NEB #B0202) 和 1 µl T4 DNA 连接酶 (NEB #M0202T/M) 的结果。两个反应分别加 1 µl BbsI-HF,以及 24 个插入片段和 pGGAselect 质粒(每种 0.05 pmol)。反应在 37℃ 5 分钟和 16℃ 5 分钟下进行 60 个循环,最后 60℃ 孵育 5 分钟。每个反应取 2 µl 产物转入 50 µl T7 表达 E. coli 感受态细胞 (NEB #C2566)。取 50 µl 菌液涂 LB 平板(含 1 mg/ml 葡萄糖、1 mg/ml MgCl2、30 µg/ml 氯霉素、200 µM IPTG 和 80 µg/ml X-gal),37℃ 孵育 18 小时,4℃ 储存 4 小时,最后对菌落颜色进行观测和记录。
C:结果展示了总转化株和正确组装转化株(蓝色菌落)百分比的平均值(三个重复),以及平均值的标准偏差。使用 NEBridge 连接酶预混液时,每微克载体 DNA 产生 2.2±0.2X106 个正确组装的蓝色菌落,保真度为 94.3±1%,使用 T4 DNA 连接酶缓冲液时,每微克载体 DNA 产生 8.3±2.1X105 个正确组装的蓝色菌落,保真度为 69.8±10.7% 保真度。
 

Quick Ligation™ 快速连接试剂盒 货 号 #M2200LNEB酶试剂 New England Biolabs

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Quick Ligation 快速连接试剂盒                              收藏

Quick Ligation™ 快速连接试剂盒               货   号                  #M2200L Quick Ligation™ 快速连接试剂盒               货   号                  #M2200L Quick Ligation™ 快速连接试剂盒               货   号                  #M2200L

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#M2200L
150 次反应
4,589.00

#M2200S
30 次反应
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特别提供

快速末端平齐化™ 和快速连接试剂盒
#E0542S 20 次反应 . . . . . .¥1,809
#E0542L 100 次反应 . . . . . .¥7,199

特性

 5 分钟快速连接粘性末端或平末端
 室温下即可进行连接反应
 T/A 克隆
 dsDNA 切刻修复 

Quick Ligation™ 快速连接试剂盒               货   号                  #M2200L

概述

本试剂盒在室温(25℃)反应 5 分钟,即可完成 DNA 粘性末端或平末端的连接反应。 

快速连接试剂盒组份

– 快速 T4 DNA 连接酶(重组酶)
– 2X 快速连接反应缓冲液 

2X 快速连接反应缓冲液

132 mM Tris-HCl,20 mM MgCl2,2 mM DTT,2 mM ATP,15% 聚乙二醇(PEG 6000),pH 7.6 @ 25℃。 

质保声明

该试剂盒经过严格的质量控制检测,以确保该产品的最高纯度和效率。详情请登陆www.neb.com 或 www.neb-china.com。

注意事项

用快速连接试剂盒能使大多数连接反应在 25℃ 条件下 5 分钟甚至更短时间内达到反应终点,增加反应时间不会提高反应效率。事实上,连接 1 小时后转化效率会降低,如果 25℃ 过夜反应,转化效率会下降 75%。
电转化可以使转化效率提高几个数量级。在用快速连接反应产物做电转化前,一定要降低 PEG 浓度。推荐使用柱离心式 DNA 纯化方法,或选择电转连接酶(NEB #M0369)。 |

Quick Ligation™ 快速连接试剂盒               货   号                  #M2200L

快速连接进程曲线:LITMUS 28i 载体经 EcoRV 切割(平齐末端)或 HindIII 切割(粘性末端)后,用小牛肠碱性磷酸酶(CIP)处理,胶回收纯化。插入片段来自 HaeIII 消化的 φX174 DNA 产物(平齐末端)或HindIII 消化的 λDNA 产物(粘性末端),插入片段和载体的比例为 3:1,使用快速连接试剂盒进行连接。连接产物转化入化学方法制备的大肠杆菌感受态细胞,在 LB-amp 平板上 37℃ 过夜培养。

超热稳定单链结合蛋白(ET SSB) 货 号 #M2401SNEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – DNA修饰酶与克隆技术 – 单链 DNA 结合蛋白

超热稳定单链结合蛋白(ET SSB)                              收藏

超热稳定单链结合蛋白(ET SSB)             货   号                  #M2401S

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#M2401S
50 μg
1,689.00

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特性

 提高 DNA 聚合酶的延伸能力
 稳定和标记 ssDNA 结构
 增加 PCR 反应的产量和特异性
 增加 RT-PCR 中,反转录的产量和延伸能力
 改善强二级结构区域的 DNA 测序 

概述

ET SSB(超热稳定性单链 DNA 结合蛋白)是从极度耐热的微生物中分离得到的单链 DNA 结合蛋白质,在 95℃ 温育 60 分钟后,依然具有全部活性。因为具有极高的热稳定性,ET SSB 可用于需要高温反应条件的实验中,如核酸扩增反应和测序反应。 

来源

重组 E. coli 菌株,含有从极度嗜热生物中克隆的 ssb 基因。由 Biohelix 公司(NEB 合作公司)研发。 

质保声明

超热稳定单链结合蛋白经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。
详情请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。 

单位定义

本品按纯蛋白含量销售。纯蛋白量在OD280 下测得(蛋白浓度为 1 mg/ml 时 A280 值为 0.774;
光程 1 cm)。 

浓度

500 μg/ml。 

分子量

16 kDa。 

使用注意

ET SSB 在所有聚合酶的缓冲液中均有活性,每 50 μl 反应体系添加 200 ng 的 ET SSB。 

参考文献

关于该酶性质和产品应用的参考文献,请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。 

无机焦磷酸酶(Yeast) 货 号 #M2403LNEB酶试剂 New England Biolabs

上海金畔生物科技有限公司代理New England Biolabs(NEB)酶试剂全线产品,欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

产品资料 – DNA修饰酶与克隆技术 – DNA 磷酸酶 & 硫酸化酶

无机焦磷酸酶(Yeast)                              收藏

无机焦磷酸酶(Yeast)               货   号                  #M2403L 无机焦磷酸酶(Yeast)               货   号                  #M2403L 无机焦磷酸酶(Yeast)               货   号                  #M2403L

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#M2403L
50 units
3,149.00

#M2403S
10 units
779.00

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特性

 反转录反应中提高 RNA 产量
 增强 DNA 复制  

概述

无机焦磷酸酶(酵母)催化无机焦磷酸盐水解生成正磷酸盐。

P207–4 + H20 → 2HP04–2 
 

来源

无机焦磷酸酶(酵母)纯化自重组 E. coli 菌株,携带有从酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)克隆的 ppa 基因和蟾分枝杆菌(Mycobacterium xenopi)GyrA 内含肽的融合基因。由 Biohelix(现为 Quidel公司的全资子公司)研发,由 New England Biolabs 生产。

质保声明

无机焦磷酸酶经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。更多信息请登陆 www.neb-china.com 或 www.neb.com。  

单位定义

1 单位指标准反应条件下每分钟催化无机焦磷酸盐生成 1 μmol 磷酸盐所需的酶量。  

浓度

100 units/ml。  

参考文献

有关该产品特性和应用的参考文献请登陆 www.neb-china.com,www.neb.com。  

防带电PFA-AS管 (10m)NPK026日本三博特sanplatec

防带电PFA-AS管 (10m)NPK026
产品编号: 26158 价格: 会员价:0元;市场价:0元 产品特点
/
产品规格

防带电PFA-AS管 (10m)NPK026

内径(mm):1

外径:1/16

彩色线:灰

长度:10m/卷

材料

确认材料的耐药性 >> 耐药性检索

        防带电PFA-AS管 (10m)NPK026防带电PFA-AS管 (10m)NPK026产品特征: ※包装是环形塑料袋装入
 用途:液相色谱仪专用试管
●特点
・优良的耐压性和耐磨性。
・高温时优良的耐酸、 碱性。
 .连接使用的温度是260℃。
 .尺寸非常的精准。
 .易于辨别的彩色线。 (只有1/16英寸)