细胞周期检测试剂盒

◆细胞周期检测试剂盒（绿色荧光）（流式）

NUCLEAR-ID^® Green cell cycle kit

　　细胞周期结果不受培养时间、温度、染料和细胞浓度影响

产品介绍

●　应用：流式细胞仪，荧光显微镜检测

●　应用说明：该试剂盒适用于正常细胞系和表现出多倍性细胞系，可进行活细胞、透性化细胞及固定细胞的DNA研究。

●　试剂盒组分：Nuclear-ID^® 绿色细胞周期检测试剂100 µL

●　试剂盒组分: 诺考达唑对照（阳性对照，G2/M阶段）, 10 µL

●　试剂盒组分: 10×检测缓冲液, 15 mL

●　技术信息/产品说明：NUCLEAR-ID^® 细胞周期分析试剂盒（绿色荧光）是CELLESTIAL^® 系列产品之一，该系列产品已经包括广泛应用于活细胞分析的荧光分子探针。CELESTIAL^® 试剂和试剂盒适用于要求严格的成像应用，如共聚焦显微镜，流式细胞仪和高内涵筛选（HCS），但是它们均需要一致性和可重复性。

ENZ-51014-1001 Kit

●　染色方法简便，添加染料后直接通过流式细胞仪分析

●　488 nm激光波长，530 nm发射波长，显示绿色荧光

●　不需要细胞透化步骤或RNA酶处理

●　具有独立的细胞周期培养时间、温度、染料和细胞浓度结果

●　从活的或固定细胞中提供DNA内容信息

●　监测由药物治疗或其他干扰引起的细胞周期动力学的变化采用大范围的细胞密度进行性能验证

　　NUCLEAR-ID^® 细胞周期检测试剂盒（绿色荧光）（流式）为采用流式细胞仪研究细胞周期诱导与抑制提供了一个简便方法。本产品适用于（1）确定给定样品处于G0 / G1，S和G2 / M期细胞的百分比，以及细胞凋亡之前定量亚G1期的百分比，（2）正常细胞系和表现出多倍性细胞系的活细胞、透性化及固定细胞的DNA研究。该试剂盒可用于约100次的流式细胞仪检测。使用Nocodazole诺考达唑处理的细胞作为对照以检测细胞周期动力学的变化。活细胞研究也可应用于细胞DNA含量的测定、细胞周期增长模式变化的检测、细胞凋亡监测，以及评估肿瘤细胞变化和抑制基因机制。

◆NUCLEAR-ID^® Red cell cycle kit (GFP-CERTIFIED^®)

细胞核检测试剂盒（红色荧光）（GFP细胞）（荧光显微镜）

　　通过各种应用进行细胞周期研究的简便试剂盒

特点

●　可检测活细胞，固定细胞和透化的细胞中DNA含量信息的完整试剂盒

●　稳定且高纯度的红色荧光染料

●　采用不同细胞密度进行性能验证

●　无需RNase处理

●　可检测药物处理或者其他因素引起的细胞周期变化

●　无需UV激发

●　无光漂白效应

●　可与其他探针与染料复用

●　制造严格、消除非特异性检测伪影

●　GFP绿色荧光蛋白及FITC荧光原位杂交均可使用

●　操作方便

EnzoGFP-CERTIFIED^® NUCLEAR-ID^® Red Cell Cycle Analysis Kit

　　为需要使用流式细胞仪研究细胞周期诱导与抑制提供方法。该试剂盒适用于：（1）确定给定样品处于G0 / G1，S和G2 / M期的细胞百分比，以及定量亚G1期的细胞百分比，以及（2）正常细胞系和表现出多倍性细胞系的活化、透化及固定的DNA研究。使用诺考达唑处理的细胞作为细胞周期动力学变化的对照。活细胞研究也可潜在应用于细胞DNA含量的测定、细胞周期增长模式变化的检测、细胞凋亡监测，以及评估肿瘤细胞变化和抑制基因机制。

Figure 1: 使用结构化照明方法，绿色荧光蛋白表达（GFP表达）线粒体和细胞核之间的空间关系的三维重建

Figure 2: Drug treatments with live cells inhibit cell cycle progression at different phases.

活细胞药物治疗抑制不同阶段的细胞周期进程。

NUCLEAR-ID^® Red DNA Stain与其他染料的比较

产品介绍

●　应用：流式细胞仪，荧光显微镜检测

●　应用说明：该试剂盒可应用于正常细胞系和表现出多倍性细胞系的活细胞、透性化细胞及固定细胞的DNA研究。

●　实验操作：快速使用向导

A.用NUCLEAR-ID^® 红色染料进行细胞染色后，使用流式细胞仪进行细胞周期DNA分析

1.　使用（或不使用）实验化合物处理细胞。试管中悬浮细胞液浓度低于5×10 5 / mL。

2.　选择介质或普通细胞培养缓冲液与NUCLEAR-ID^® 红色DNA染色溶液混合。

3.　推荐使用NUCLEAR-ID^® 红色DNA染色溶液的250倍至500倍稀释液进行活细胞周期DNA分析（最终浓度分别为40μM至20μM）。

4.　将细胞重悬于0.5mL新稀释的染色溶液中。

5.　轻轻混合后，室温或37℃下孵育15-30分钟。

6.　直接用流式细胞仪分析细胞而无需进一步处理或洗涤。

7.　488nm激发激光分析样品使用流式细胞仪PerCPCy5.5或FL3通道检测。对于633nm激发，选用适当的收集过滤器> 700nm，FL4或FL5，APC-Cy7通道。

B.经NUCLEAR-ID^® 红色染料染色的活细胞用荧光/共聚焦显微镜观察细胞核变化

1.　贴壁细胞。在含有适当培养基的培养皿内的盖玻片上培养贴壁细胞。当细胞达到所需的数量时，小心地除去培养基并稀释到（〜100μl）2000倍至4000倍（在选择培养基或缓冲液中）使NUCLEAR-ID^® 红色 DNA染料能够（最终浓度分别为5.0μM至2.5μM）覆盖到单层细胞。

细胞悬浮液。室温（RT）下以400×离心5分钟获得细胞悬浮液。小心吸除上清液，并进行2000-4000倍稀释（在选择培养基或缓冲液中）使NUCLEAR-ID^® 红色 DNA染料能够（最终浓度分别为5.0μM至2.5μM）覆盖到单层细胞。

2.　样品避光保存，并在37°C孵化15-30分钟。

3.　用100μL缓冲液（如PBS）洗涤细胞。去除多余的缓冲液，将盖玻片放在载玻片上。使用广角荧光或共焦显微镜(推荐放大60倍)观察染色后的细胞。使用标准罗丹明或德克萨斯红色过滤器集成像系统。

相关产品：

NUCLEAR-ID® Red DNA stain

NUCLEAR-ID®DNA红色染料细胞渗透性DNA染色，可广泛应用于高效液相色谱（HPLC）≥93％，流式细胞仪，荧光检测

产品相关参考文献：

Growth-promoting and tumorigenic activity of c-Myc is suppressed by Hhex: V. Marfil, et al.; Oncogene 34, 3011 (2015), Abstract;

Epigenetic regulation of planarian stem cells by the SET1/MLL family of histone methyltransferases: A. Hubert, et al.; Epigenetics 8, 79 (2013), Application(s): Cell cycle analysis of stem cells from freshwater planarian by flow cytometry, Abstract; Full Text

Gene-specific factors determine mitotic expression and bookmarking via alternate regulatory elements: P. Arampatzi, et al.; Nucleic Acids Res. 41, 2202 (2013), Application(s): Fluorescence imaging of nuclear DNA of human cancer cells, Abstract; Full Text

An intact retinoblastoma protein-binding site in Merkel cell polyomavirus large T antigen is required for promoting growth of Merkel cell carcinoma cells: R. Houben, et al.; Int. J. Cancer 130, 847 (2012), Application(s): Cell cycle analysis of cancer cell lines by flow cytometry, Abstract; Full Text

Gomisin A enhances tumor necrosis factor-α-induced G1 cell cycle arrest via signal transducer and activator of transcription 1-mediated phosphorylation of retinoblastoma protein: P. Waiwut, et al.; Biol. Pharm. Bull. 35, 1997 (2012), Application(s): Cell cycle analysis of HeLa cells by flow cytometry, Abstract; Full Text

A cell-permanent dye for cell cycle analysis by flow and laser-scanning microplatecytometry: Y.J. Xiang, et al.; Nat. Methods 6, an2 (2009), Abstract;

一般参考文献：

DNA measurement and cell cycle analysis by flow cytometry: R. Nunez; Curr. Issues Mol. Biol. 3, 67 (2001), Abstract;

Methods in Cell Biology, Flow Cytometry: Z. Darzynkiewicz, H.A. Crissman and J.P. Robinson (editors and co-authors); Vol. I and II, (1994), Book,

阿尔茨海默病研究用

抗磷酸化Tau S422，单克隆抗体（AP422）

　　Tau是微管结合蛋白的一种，主要在中枢神经系的神经细胞中表达，维持微管的稳定。有报道指出，在阿尔茨海默病患者的脑中，积蓄了磷酸化Tau的神经纤维发生变化，其变化程度与痴呆症的病重程度相关。因此，为了研究阿尔茨海默病的原因以及开发其治疗药，Tau被广泛研究。Wako推出了各种Tau抗体、磷酸化Tau S422抗体就是其中之一。

◆特点

●　有丰富应用实例的单克隆抗体

※    使用了本抗体的论文

1） Hasegawa, M. et al. : FEBS Lett., 384（1）, 25 （1996）.

2） Goedert, M. et al. : FEBS Lett., 409（1）, 57 （1997）.

3） Buée-Scherrer, V. et al. : FEBS Lett., 515 （1）, 151 （2002）.

4） Delobel, P. et al. : J. Neurochem., 83 （2）, 412 （2002）.

5） Bellucci, A. et al. : Am. J. Pathol., 165 （5）, 1643 （2004）.

6） Le Corre, S. et al. : Proc. Natl. Sci. USA, 103 （25）, 9673 （2006）.

7） Schindowski, K. et al. : Am. J. Pathol., 169 （2）, 599 （2006）.

8） Audouard, E. et al. : Am. J. Pathol., 186 （10）, 2709 （2016）.

◆产品概况

◆应用实例

免疫组织染色像（阿尔茨海默病患者的脑切片）

（数据提供：东京医学综合研究所 长谷川成人医生）

◆产品列表

◆相关产品

抗磷酸化CRMP1/2（Ser522），兔

Anti Phosphorylated CRMP1/2 (Ser522),   Rabbit