CpG 甲基转移酶 (M.SssI) 货 号 #M0226LNEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – DNA修饰酶与克隆技术 – DNA 甲基转移酶

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CpG 甲基转移酶 (M.SssI)                货   号                  #M0226L CpG 甲基转移酶 (M.SssI)                货   号                  #M0226L CpG 甲基转移酶 (M.SssI)                货   号                  #M0226L CpG 甲基转移酶 (M.SssI)                货   号                  #M0226L

货 号
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#M0226L
500 units
3,409.00

#M0226M
(高浓度5X)500 units
3,409.00

#M0226S
100 units
849.00

#M0226V
50 units
449.00

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识别位点

CpG 甲基转移酶 (M.SssI)                货   号                  #M0226L

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特性

 阻止限制性内切酶的切割
 CpG 甲基化依赖性基因表达的研究
 研究探针序列特异性与 DNA 大沟的相互作用
 改变 DNA 的物理特性
 对 DNA 统一进行 [3H] 标记
 减少限制性内切酶的酶切位点数目,提高限制性内切酶的特异性 

概述

CpG 甲基转移酶(M.SssI)能将双链二核苷酸识别序列 5´ …CG…3´ 中所有胞嘧啶残基(C5)甲基化。 

来源

分离自重组的 E. coli 菌株,该菌株克隆有桑皱褶螺原体(Spiroplasma sp.)MQ1 菌株的 CpG 甲基转移酶基因。 

反应条件

1X NEBuffer 2 + SAM
[50 mM NaCl,10 mM Tris-HCl,10 mM MgCl2,1 mM DTT(pH 7.9 @ 25℃)]。加入 160 μM S-腺苷甲硫氨酸(SAM,随酶提供),37℃ 温育。
热失活:65℃ 加热 20 分钟。 

注意

MgCl2 并不是必需的辅因子。Mg2+ 存在时,M.SssI 更倾向于分散甲基化,而不是连续甲基化,同时,会出现具有拓扑异构酶的活性。 

质保声明

CpG 甲基转移酶经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。 

单位定义

1 个酶活单位定义为在 20 μl 反应体系中,37℃ 条件下,1 小时能保护 1 μg λDNA 不被 BstUI 限制性内切酶切割所需要的酶量。

浓度

4,000 units/ml 和 20,000 units/ml(通过 λDNA检测)。 

注意事项

CpG 甲基转移酶(M.SssI)可以特异性地模拟高等真核生物基因组的修饰模式,因而可用于研究高等真核生物体内胞嘧啶甲基化的功能。与哺乳动物甲基转移酶不同,CpG 甲基转移酶对未甲基化和半甲基化的 DNA 底物的甲基化效率相同,因此该酶是更为有效的 DNA 修饰工具。
只要限制性内切酶的识别位点含有 CG 序列或此二核苷酸的重叠序列,CpG 甲基转移酶均能有效地阻止其发挥切割活性。需要注意的是,CpG 甲基转移酶使 DNA 甲基化,而 E. coli 中的 Mcr 和 Mrr 的限制作用不受甲基化影响(详见 315-317 页),故应使用 Mcr、MrrE. coli 菌株(例如,NEB #C2925)作为转化的宿主菌。 

参考文献

关于该酶性质和产品应用的参考文献,请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。 

CpG 甲基化的 Jurkat 基因组 DNA 货 号 #N4002SNEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – 表观遗传学 – 对照 DNA

CpG 甲基化的 Jurkat 基因组 DNA                              收藏

货 号
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#N4002S
15 µg
2,549.00

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特性

 PCR
 SNP分析
 Southern 杂交
 基因组 DNA 文库构建
 甲基化特异性 PCR(MSP)
 重亚硫酸盐测序
 甲基化敏感的单核苷酸引物延伸(Ms-SNuPE)
 重亚硫酸结合限制分析(COBRA)
 重亚硫酸处理和 PCR 单链构象多态性分析(Bisulfite-PCR-SSCP/BiPS)

概述

NEB 提供一系列基因组 DNA(修饰和非修饰两种形式),可用作表观遗传学研究的对照品。所有对照     DNA 均遵循标准基因组纯化程序提取,不含蛋白和 RNA。所提供的对照 DNA 浓度为 100 μg/ml。

来源

Jurkat(急性 T 细胞白血病)细胞在 RPMI 和 10% 胎牛血清中培养至 100% 覆盖率时,使用标准基因组纯化方法提取基因组 DNA,使用 CpG 甲基化酶(M.SssI)处理,酚抽提后,溶解于 10 mM Tris-HCl(pH 7.5)和 1 mM EDTA 溶液中。

A260/280

1.90

用途

CpG 二核苷酸甲基化阳性对照

参考文献

有关该产品性质和应用的参考文献请登陆 www.neb-china.com,www.neb.com。