cDNA合成SMARTer试剂酶试剂盒Takara


cDNA合成SMARTer试剂
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 634925 SMARTer PCR cDNA Synthesis Kit 10 Rxns ¥9,500
¥7,600
cDNA合成SMARTer试剂 cDNA合成SMARTer试剂 cDNA合成SMARTer试剂
Clontech 634926 SMARTer PCR cDNA Synthesis Kit 20 Rxns ¥16,047
¥12,838
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Clontech 634928 SMARTer Pico PCR cDNA Synthesis Kit 10 Rxns ¥14,446 cDNA合成SMARTer试剂 cDNA合成SMARTer试剂 cDNA合成SMARTer试剂

*红字为促销价格,促销时间: 2022年9月1日-2022年10月31日

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Code No. 产品名称
634925   SMARTer® PCR cDNA Synthesis Kit
634926   SMARTer® PCR cDNA Synthesis Kit
634928   SMARTer® Pico PCR cDNA Synthesis Kit
 
SMART即RNA模板5’末端的转换机制,该技术在cDNA第一链合成的过程中,巧妙且高效地将一段已知序列加入到合成的cDNA两端,不需要adaptor连接。这段已知序列的存在对于下游应用包括扩增、RACE和文库构建等很关键。通过多种技术来利用这些已知序列的同时,一步法SMART技术的简便性和高效性保证了很高的灵敏度,并生成和扩增全长cDNA。
 
微量的RNA样本操作
整个SMART流程是在一个tube中的单酶反应。仅需对珍贵的RNA样本做很少的处理,可有效降低潜在的降解风险。这个用户友好型的流程是简单直接的,无需adaptor连接、加尾、中间过程纯化等操作。
 
全长cDNA富集
由于cDNA合成容易受到模板RNA二级结构的影响,传统方法合成的cDNA,基因5’端通常未能全部存在保留。而SMART cDNA合成过程中,由于反转录提前终止而生成的缩短了的产物,无法与SMARTer oligonucleotide结合的,在PCR过程中无法被扩增。所以,使用SMART技术结合长距离PCR合成扩增的cDNA,是被富集的全长cDNA。此外,由于5′ SMARTer序列和修饰的oligo dT引物不会添加到基因组DNA和核糖体RNA转录的cDNA上,所以SMART技术合成的cDNA是不含有这些污染因素的。
 
高灵敏度、高效率
与传统的方法如adaptor连接方法相比,SMART技术优势之一,就是其具有更高的效率。SMART技术高效率和高灵敏度的特点,使SMART技术尤其适用于起始材料有限的情况,如显微切割组织、激光捕获细胞、活组织切片样本等。低至1-2 ng的total RNA已足够生成高度代表性的cDNA库用于各种下游应用。
 
单步操作
SMARTer 第一链cDNA合成过程中,已知通用引物序列已经添加到了cDNA两端。第一链合成后,SMARTer cDNA可以直接用于下游PCR应用。
 
■ 特点
·total RNA起始量可以低至1-2 ng
·特异性富集全长cDNA
·优化的流程以保留真实的基因表达
·简单的操作,无需DNase处理或单独的adaptor连接步骤
 
产品详情请点击:cDNA合成SMARTer试剂
 
 
 

页面更新:2019-11-05 11:12:35

cDNA Library Construction Kit酶试剂盒Takara


cDNA Library Construction Kit
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 6136 cDNA Library Construction Kit 5 Rxns ¥9,980 cDNA Library Construction Kit cDNA Library Construction Kit cDNA Library Construction Kit
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■ 制品内容 (5 次量)
PrimeScript RTase(200 U/μl) 5 μl
RNase Inhibitor (40 U/μl) 5 μl
Oligo(dT)18 Anchor Primer (1 μg /μl)*1 10 μl
5×1st Strand Synthesis Buffer*2 20 μl
1st Strand dNTP Mixture 6 μl
E.coli RNase H/E.coli DNA Ligase Mixture 10 μl
E.coli DNA Polymerase I (20 U/μl) 10 μl
2nd Strand dNTP Mixture 23 μl
5×2nd Strand Synthesis Buffer*2 150 μl
T4 DNA Polymerase (1 U/μl) 20 μl
10×T4 DNA Ligase Buffer 20 μl
T4 DNA Ligase (350 U/μl) 20 μl
EcoR I-Sma I Adaptor (0.4 μg/μl) 18 μl
Not I Supplement 135 μl
Not I (50 U/μl) 15 μl
tRNA (10 μg/μl) 5 μl
Dr. GenTLE Precipitation Carrier (4℃保存)*3 60 μl
3 M Sodium Acetate (pH5.2) (4℃保存) 1 ml
pAP3neo Predigested Vector (100 ng/μl)*4 5 μl
RNase-free H2O 640 μl
Control RNA (1 μg/μl)*5 5 μl
T7 Promoter Primer (5 pmol/μl)*6 20 μl
T3 Promoter Primer (for pAP3neo) (5 pmol/μl)*6 20 μl
Spin Column (CHROMA SPIN-1000+DEPC-H2O Columns*7) (4℃保存) 5 支
 
*1 Oligo(dT)18 Anchor Primer中含有Not I Site及Xho I Site。如果不用Not I 而用Xho I 进行酶切时,也可以制备EcoR I-Xho I 双链cDNA片段构建cDNA文库,利用这些Site的载体 (不可去磷酸化) 也可用来构建cDNA文库。另外,本试剂盒中不含有Xho I 酶,需要时请另外购买。
*2 与PrimeScript Double Strand cDNA Synthesis Kit[Code No.: 6111A] 中所含有的组份不同。
*3 同Dr. GenTLE Precipitation Carrier (Code No.: 9094)。
*4 经EcoR I、Not I 酶切处理。
*5 本试剂盒中的Control RNA是以pSPTet3质粒 (质粒中的SP6启动子下游插入长约1.4 kb的pBR322来源的DNA片段,该DNA片段上含有抗四环素基因) 为模板,由SP6 RNA聚合酶经体外转录而得到的,Control RNA (约1.4 kb )的3’端具有30 个A碱基的Poly(A)+尾。以这种RNA为模板合成的双链cDNA插入到适当的质粒载体中后,如果插入的cDNA确实为全长,那这种质粒便可获得四环素抗性。
*6 可用于Insert Check及DNA测序。
*7 Clontech Laboratories公司产品。 (带下盖)
(注) 本制品不含对电转化法十分重要的大肠杆菌。使用本制品时,需用大肠杆菌的感受态细胞转化甲基化DNA。可采用E. coli HST08 Premium Electro-Cells (Code No.: 9028)、Clontech的Stellar Electrocompetent Cells (Clontech Code: 636756)
 
■ 制品说明
利用真核生物的各种组织或细胞中的Poly(A)+RNA合成cDNA,然后进行基因克隆,这在分子生物学实验中被广泛应用。这一技术的使用,使基因的结构解析及目的蛋白的表达等变得更为方便。
一般合成cDNA以及构建cDNA Library的方法为: ① 合成与目的Poly(A)+RNA相互补的双链cDNA;② 将双链cDNA与细菌或病毒来源的载体进行重组; ③ 将重组体导入细菌或真核细胞内进行扩增,构建cDNA Library。构建成的cDNA Library可以用于cDNA的解析,或者进一步进行体外转录或体外翻译等。
本试剂盒原理采用了Gubler-Hoffman法 (Linker Primer法),是一种可以控制克隆基因方向性的Directional Cloning法,其原理见下图,具体说明如下:
1. 利用反转录酶PrimeScript RTase和Oligo(dT)18 Anchor Primer1,3-5)合成1st Strand cDNA。1st Strand cDNA合成时使用5-methyl dCTP。
2. E.coli RNase H使mRNA-1st Strand cDNA杂合体中的RNA形成Nick,再使用E.coli DNA Ploymerase和E.coli DNA Ligase将RNA链置换成DNA链,合成2nd Strand cDNA。
3. 使用T4 DNA Polymerase将双链cDNA末端平滑化。
4. 与Adaptor连接后,使用Not I 进行酶切。
5. 使用Spin Column除去短链cDNA。
6. 与Vector pAP3neo进行连接 (Directional Cloning)。
7. 利用电刺激转化法导入大肠杆菌。
8. 确认克隆效率及插入片段大小等。
 
■ cDNA Library合成原理图
 
cDNA Library Construction Kit
 
保存
Dr. GenTLE Precipitation Carrier 4℃保存。
3 M Sodium Acetate (pH5.2) 4℃保存。
Spin Column 4℃保存。
其他组份 -20℃保存。
 
 

页面更新:2017-04-07 10:29:07

cDNA文库构建酶试剂盒Takara


cDNA文库构建
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 634933 In-Fusion SMARTer Directional cDNA Library Construction Kit 10 Rxns ¥18,158 cDNA文库构建 cDNA文库构建 cDNA文库构建
Clontech 634901 SMART cDNA Library Construction Kit Each ¥13,901 cDNA文库构建 cDNA文库构建 cDNA文库构建
Clontech 635003 pEXP-Lib Vector 20 μg ¥4,518 cDNA文库构建 cDNA文库构建 cDNA文库构建
Clontech 635002 pRetro-Lib Vector 20 μg ¥4,518 cDNA文库构建 cDNA文库构建 cDNA文库构建
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由于产品升级,从即日起,您订购的In-Fusion SMARTer Directional cDNA Library Construction Kit(634933)中的组分In-Fusion HD Cloning Kit (Code No. 639649)将陆续替换为性能更高的In-Fusion® Snap Assembly Master Mix (Code No. 638948),该组分数量保持不变,请以实际收到的产品为准。如需含HD组分的旧版说明书或产品组分列表文件,请邮件联络zhukx@takarabiomed.com.cn
 
 
Clontech提供利用SMART技术构建全长cDNA的cDNA文库构建试剂盒。
 
创建长插入片段文库
SMART cDNA Library Construction Kit用于向噬菌体TriplEx2载体上克隆全长cDNA。试剂盒结合了RNA模板5’末端转换机制,即SMART技术,用于cDNA扩增,无需adaptor连接,即可定向克隆至TriplEx2载体。试剂盒提供了两种独立的流程,可以根据您的起始材料选择其中一种。起始材料有限可以使用长距离PCR(LD-PCR)方法,起始total RNA的量可以低至50 ng。另一种流程适用于起始材料充足的情况,例如起始材料是多于1 μg的 poly A+ RNA。与传统方法构建的cDNA文库或其他方法合成的全长cDNA比较,SMART文库包含了更大比例的全长克隆。所以,SMART cDNA文库分离出的克隆包含了对应的mRNA全部5’非翻译区的序列。
 
富集全长cDNA
SMART cDNA合成技术保证了cDNA合成连续不间断,得到的cDNA很好地反映了5’端的序列。
 
精简的流程更节省时间
由于高效的cDNA合成和克隆过程,In-Fusion SMARTer Library Construction流程比其他文库构建方法的步骤更少。全过程仅需三个酶,而其他方法需要6-8个酶参与反应。SMART(er) cDNA合成流程是用户友好的且更直接的,无需连接接头或加尾步骤。处理RNA样本的步骤少,从而降低了珍贵的RNA被降解的风险。
 
向任意载体插入您的文库
试剂盒结合In-Fusion克隆方法,仅需一个30分钟的反应即可把您的SMARTer cDNA文库克隆到In-Fusion SMARTer试剂盒附带的pSMART2IF或pSMART2IFD线性载体上。更重要的是,因为In-Fusion克隆是依赖于DNA片段末端15个互补碱基的,可以使用In-Fusion试剂盒准确地将您的SMARTer cDNA转移到任意线性载体上。如果您想把文库克隆到自己的表达载体上做功能分析,只需简单地通过反向PCR来扩增您的载体,生成线性载体时使用的引物需要与SMARTer cDNA末端互补。引物必须有两个特点:引物5’端包含15个碱基,这15个碱基与连接载体的DNA片段末端的15个碱基相互补;引物3’端必须包含与目标载体特异性结合的序列。
 
产品详情请点击:cDNA文库构建
 
 

页面更新:2021-11-30 16:50:19

RNA to cDNA EcoDry Premix酶试剂盒Takara


RNA to cDNA EcoDry Premix
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 639549 RNA to cDNA EcoDry Premix (Double Primed) 24 Rxns ¥1,967 RNA to cDNA EcoDry Premix RNA to cDNA EcoDry Premix RNA to cDNA EcoDry Premix
Clontech 639547 RNA to cDNA EcoDry Premix (Double Primed) 48 Rxns ¥2,894 RNA to cDNA EcoDry Premix RNA to cDNA EcoDry Premix RNA to cDNA EcoDry Premix
Clontech 639548 RNA to cDNA EcoDry Premix (Double Primed) 96 Rxns ¥5,166 RNA to cDNA EcoDry Premix RNA to cDNA EcoDry Premix RNA to cDNA EcoDry Premix
Clontech 639543 RNA to cDNA EcoDry Premix (Oligo dT) 24 Rxns ¥1,967 RNA to cDNA EcoDry Premix RNA to cDNA EcoDry Premix RNA to cDNA EcoDry Premix
Clontech 639541 RNA to cDNA EcoDry Premix (Oligo dT) 48 Rxns ¥2,894 RNA to cDNA EcoDry Premix RNA to cDNA EcoDry Premix RNA to cDNA EcoDry Premix
Clontech 639542 RNA to cDNA EcoDry Premix (Oligo dT) 96 Rxns ¥5,166 RNA to cDNA EcoDry Premix RNA to cDNA EcoDry Premix RNA to cDNA EcoDry Premix
Clontech 639546 RNA to cDNA EcoDry Premix (Random Hexamers) 24 Rxns ¥1,967 RNA to cDNA EcoDry Premix RNA to cDNA EcoDry Premix RNA to cDNA EcoDry Premix
Clontech 639544 RNA to cDNA EcoDry Premix (Random Hexamers) 48 Rxns ¥2,894 RNA to cDNA EcoDry Premix RNA to cDNA EcoDry Premix RNA to cDNA EcoDry Premix
Clontech 639545 RNA to cDNA EcoDry Premix (Random Hexamers) 96 Rxns ¥5,166 RNA to cDNA EcoDry Premix RNA to cDNA EcoDry Premix RNA to cDNA EcoDry Premix
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RNA to cDNA EcoDry Premix是用于反转录PCR的方便即用型冻干品。该系列产品可轻松完成第一链cDNA合成。每个预混合管含有反转录酶和反转录PCR所需的所有其他组分。只需添加PCR级别水和模板即可。
 
产品特点
· 环保型
· 冻干型可实现室温保存和运输
· Clontech前所未有的方便性和易用性
 
产品详情请点击:RNA to cDNA EcoDry Premix
 
 

页面更新:2020-10-13 11:39:39

qPCR 用cDNA参照酶试剂盒Takara


qPCR 用cDNA参照
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 636692 qPCR Human Reference cDNA, oligo(dT)-primed 25 Rxns ¥1,284 qPCR 用cDNA参照 qPCR 用cDNA参照
Clontech 636693 qPCR Human Reference cDNA, oligo(dT)-primed 100 Rxns ¥3,588 qPCR 用cDNA参照 qPCR 用cDNA参照
Clontech 639653 qPCR Human Reference cDNA, random-primed 25 Rxns ¥1,204 qPCR 用cDNA参照 qPCR 用cDNA参照
Clontech 639654 qPCR Human Reference cDNA, random-primed 100 Rxns ¥3,588 qPCR 用cDNA参照 qPCR 用cDNA参照
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Code No. 产品名称
636692   qPCR Human Reference cDNA, Oligo(dT)-primed
636693   qPCR Human Reference cDNA, Oligo(dT)-primed
639653   qPCR Human Reference cDNA, Random-primed
639654   qPCR Human Reference cDNA, Random-primed
 
mRNA表达量差异化通常是与内参基因相比较获得。常用的检测手段为Northern分析,核糖核酸酶保护或实时定量PCR。 最常用的管家基因有β-action和GAPDH,因为它们的表达水平在不同的处理条件下保持恒定。 但是,并不存在恒定的管家基因。 更好的方法是使用qPCR Human Reference cDNA来标准化数据,qPCR Human Reference cDNA完全来源于人体组织。
 
产品特点
· 广泛的基因覆盖度
· 基因组DNA含量很少
· 来源于人类组织,非培养细胞
· 定量PCR的高性能标准品
 
 
产品详情请点击:qPCR 用cDNA参照
 
 

页面更新:2019-11-05 09:09:20