慢病毒浓缩酶试剂盒Takara


慢病毒浓缩
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 631231 Lenti-X Concentrator 100 ml ¥2,984
¥2,387
慢病毒浓缩 慢病毒浓缩 慢病毒浓缩
Clontech 631232 Lenti-X Concentrator 500 ml ¥10,205
¥8,164
慢病毒浓缩 慢病毒浓缩 慢病毒浓缩

*红字为促销价格,促销时间: 2022年9月1日-2022年10月31日

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提高100倍病毒滴度,无需超速离心
 
· 操作简便,只需与慢病毒上清液混合后离心即可
· 无需繁琐的超速离心操作
· 浓缩倍数可高达100倍,回收率可达到90%
 
    Lenti-X浓缩试剂是一款无需超速离心,可简单、快速且高效地浓缩慢病毒上清液的试剂。其操作流程非常简单,只需要将慢病毒上清液与Lenti-X浓缩试剂相混合,孵育一段时间后,采用标准离心机进行离心,离心后去除上清,以1/10 - 1/100原体积液体重悬沉淀。通过以上操作可将病毒滴度最高提高约100倍。Lenti-X浓缩试剂可用于浓缩包含Clontech Lenti-X慢病毒系统制备的慢病毒在内的大多数慢病毒上清液,浓缩规模可按照需求扩大或者缩小。
 
■ Lenti-XTM Concentrator操作流程
慢病毒浓缩
 
■ Lenti-X Concentrator与超速离心方法比较
特征 Lenti-X Concentrator 超速离心
易于扩展
特殊仪器 不需要 需要超速离心机
所需时间 ~1 hr 4 hr至过夜
易用性 ++++
回收率 >90% >90%
 
■ 简便的慢病毒浓缩方法(操作方法请观看视频)
慢病毒浓缩
 
■ 关联资料
Lenti-X Concentrator资料: 点击图片下载 慢病毒浓缩
 
产品详情请点击:慢病毒浓缩
 
 
 

页面更新:2019-12-04 16:10:00

慢病毒整合位点识别酶试剂盒Takara


慢病毒整合位点识别
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 631263 Lenti-X Integration Site Analysis Kit Each ¥11,162 慢病毒整合位点识别 慢病毒整合位点识别 慢病毒整合位点识别
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慢病毒整合位点识别
使用Lenti-X Integration Site Analysis Kit检测重组慢病毒载体整合的确切位点。慢病毒的复制生命周期会将慢病毒RNA基因组的一个DNA拷贝整合到宿主基因组中。所选择的整合位点对转基因的表达和宿主细胞的表现型都有重要影响。Lenti-X Integration Site Analysis Kit使用基因组步移技术来识别这些整合位点,以便对其进行测序和分析。
 
基因组步移技术主要包含以下步骤:
1. 从转导后细胞克隆或细胞群提取基因组DNA,使用平末端切割限制酶进行消化。
2. 将基因组步移接头连接到基因组DNA文库的平末端。
3. 通过一轮PCR从文库中扩增出同时包含文库接头和慢病毒序列的片段。
4. 第二轮巢式PCR通常会产生一个单一的主要PCR产物,可对其进行测序以确定整合位点。多个整合位点会产生多个条带,可对每个条带进行纯化和单独测序。
 
慢病毒整合位点识别
图1. Lenti-X Integration Site Analysis Kit操作流程图。主要包括以下3大步骤:构建三个病毒整合文库,PCR扩增文库基因组DNA,分析PCR产物。凝胶结果展示了一个典型的分析结果。 Lane 1:HpaI文库;Lane 2: DraI文库;Lane 3: SspI文库;Lane 4: 无模板对照;Lane M: DNA size markers;AP:接头引物;LSP:慢病毒特异性引物。
 
 
 
产品详情请点击:慢病毒整合位点识别
 
 

页面更新:2020-02-20 10:27:59

慢病毒纯化酶试剂盒Takara


慢病毒纯化
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 631233 Lenti-X Maxi Purification Kit 2 Preps ¥3,287 慢病毒纯化 慢病毒纯化 慢病毒纯化
Clontech 631234 Lenti-X Maxi Purification Kit 5 Preps ¥5,474 慢病毒纯化 慢病毒纯化 慢病毒纯化
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慢病毒纯化
Lenti-X Maxi Purification Kit可从原始的培养上清液中纯化出高纯度和高产量的病毒。其基于重力流柱的实验操作,快速、简单、有效并且优于基于过滤器的纯化系统,后者会损坏易于损伤的慢病毒颗粒,从而降低产量。重力流柱会轻柔固定培养上清液中的病毒颗粒,未被结合的物质则会在洗涤步骤穿透柱子流出。
 
为什么要纯化慢病毒?
慢病毒纯化能去除可能对转导实验产生不利影响的细胞污染物。原始的培养上清液中包含残留的质粒DNA,不明感染和转导抑制剂,细胞和血清蛋白质,以及具有高度免疫原性的病毒蛋白质、核酸和病毒片段。在使用慢病毒作用于敏感靶细胞或体内应用之前,有必要通过纯化慢病毒来去除这些污染物。
 
简便的操作流程。
我们的慢病毒纯化柱是即用型预装柱,只需将10X结合缓冲液加入到上清液样品(9-45 ml)中,然后再将混合物添加至纯化柱即可。样品和缓冲液借助重力穿过树脂,就像是基于纯化柱的质粒制备。在两次洗涤纯化柱的过程中,杂质被去除掉了,纯化后的慢病毒回收在3 ml洗脱缓冲液中。
 
防止假转导。
使用纯化后的慢病毒储液还可以防止假转导,因为在感染的过程中,原始病毒上清液中高水平重组蛋白质会被转移至靶细胞中。而靶细胞假转导会掩盖慢病毒转导所预期的de novo表达。
 
更高的产量和纯度。
温和的纯化程序是维持病毒感染性和产生60-80%优良慢病毒产量的关键所在。基于阴离子交换的膜系统回收率要低得多,通常低于20%。而与基于过滤器的系统相比,Lenti-X纯化柱获得的病毒纯度更高。事实上,纯化后的Lenti-X样品中可检测到的蛋白质含量很低,而基于过滤器纯化的病毒液则含有与病毒共同纯化出来的高水平外源蛋白质。
 
■ Overview
· 与其他纯化技术相比,获得的纯度和产量更高
· 浓缩病毒至多10倍
· 简便而温和的重力流操作流程
· 专用收集架可与试剂盒 (Code No. 631245)一同购买,也可单独购买 (Code No. 631246)
· 实现更高效、更一致的慢病毒转导,收获更健康的靶细胞
· 有效去除转导抑制剂和细胞毒性污染物
 
■ 实验例
慢病毒纯化
图1 慢病毒纯化过程。基于Lenti-X重力柱的纯化方法(结合、清洗、洗脱),这种方法操作简便、有效,并且与基于针筒式过滤器的纯化方法相比能够更好地保存病毒。
 
慢病毒纯化
图2. 使用Clontech慢病毒纯化试剂盒可获得高产量和高纯度。使用我们的高滴度慢病毒包装系统制备并纯化慢病毒。Panel A. 为了确定病毒产量,通过qRT-PCR(RNA拷贝数)或流式细胞仪/荧光(IFU)测定纯化前和纯化后的慢病毒滴度,展示数据为七组实验的平均值。Panel B. 使用Lenti-X或基于过滤器的纯化系统(Vendor M和Vendor S)制备等量的纯化后慢病毒(1×105 IFU)进行SDS-PAGE和银染。与其它两种基于过滤器系统所制备的样品相比,在相同IFU的情况下Lenti-X样品含有明显更少的污染蛋白质。
 
 
 
产品详情请点击:慢病毒纯化
 
 

页面更新:2022-06-20 09:56:00

整合的慢病毒拷贝数测定酶试剂盒Takara


整合的慢病毒拷贝数测定
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 631239 Lenti-X Provirus Quantitation Kit 200 Rxns ¥6,511 整合的慢病毒拷贝数测定 整合的慢病毒拷贝数测定 整合的慢病毒拷贝数测定
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整合的慢病毒拷贝数测定 整合的慢病毒拷贝数测定 整合的慢病毒拷贝数测定 整合的慢病毒拷贝数测定 整合的慢病毒拷贝数测定 整合的慢病毒拷贝数测定 整合的慢病毒拷贝数测定
 
 
Lenti-X Provirus Quantitation Kit可以让您快速确定转导细胞混合或克隆群体中存在的整合慢病毒(前病毒)的拷贝数。该试剂盒包括用于测定前病毒拷贝数的引物、基因组DNA纯化试剂盒、制备标准曲线的对照DNA,以及基于TB Green检测的qPCR试剂(可检测200次)。
 
正确确定慢病毒的有效滴度
通过量化已整合到靶细胞核DNA中的慢病毒的数量,您可以正确确定慢病毒上清液原液的真实滴度(即有效滴度)。利用这个信息,可以用正确的MOI(感染复数)去感染细胞,让您能够预测将有多少病毒基因组会整合到细胞中。您也可以使用此方法来校准其他滴定方法,那些方法可以测量包装细胞上清液中的病毒含量,但不能测定靶细胞中的功能性整合滴度。
 
一致并且可预测的慢病毒转基因表达
当使用慢病毒载体将基因导入至靶细胞时,表达水平会随着MOI的增加而增加,因为更多的慢病毒拷贝会整合到细胞核DNA中。同样,对于给定的病毒制剂,在不同目标细胞系中的有效MOI可能会因各个细胞系对慢病毒感染的敏感度不同而不同。Lenti-X Provirus Quantitation Kit可让您评估任何细胞系中的转导结果,而不受表达水平的影响,并且可确保不同细胞系间或使用不同病毒制剂间转导水平一致。
 
概述/特点
· 预测不同实验间一致的转基因表达水平
· 比较多个细胞系的转导数据
· 确保不同实验或不同细胞系之间的拷贝数一致
· 包含纯化10种基因组DNA和进行200 次TB Green qPCR反应试剂*
* 此试剂盒中包含的引物旨在扩增HIV-1基因组包装信号附近的的保守区域。这些引物与Takara Bio销售的所有慢病毒载体和常用的慢病毒载体相兼容。如果不能确定该试剂盒是否与您的载体相兼容,请将您的载体序列发送至service@takarabiomed.com.cn,我们的技术支持团队将很乐意为您确认引物的兼容性。
 
实验例
整合的慢病毒拷贝数测定
图1. 测定靶细胞中整合的慢病毒拷贝数。使用快速qPCR方法确定前病毒含量。
 
整合的慢病毒拷贝数测定
图2. 慢病毒前病毒拷贝数会影响转导细胞中转基因的表达水平。使用AcGFP1慢病毒表达载体分别以高或低MOI感染HT1080细胞。感染后72小时,对细胞进行嘌呤霉素药物选择。一周后,选择稳定转导的细胞克隆进行扩增和表达分析。使用流式细胞术确定AcGFP1的表达水平,并使用Lenti-X Provirus Quantitation Kit确定基因组DNA中的前病毒含量。该图所示数据为低拷贝数(> 3; n = 8)和高拷贝数(> 9; n = 7)实验组两组合并数据。结果表明,前病毒含量越高,表达水平也就越高。
 
整合的慢病毒拷贝数测定
图3. 等量病毒感染细胞时,不同类型细胞获得的前病毒(整合的慢病毒)拷贝数不同。 用等量的单一慢病毒原液(100 μl)感染HT1080、HeLa和HEK 293细胞。感染后72小时,使用嘌呤霉素对细胞进行药物选择。一周后,使用Lenti-X Provirus Quantitation Kit确定稳定转导细胞群的前病毒拷贝数
 
 
产品详情请点击:整合的慢病毒拷贝数测定
 
 

页面更新:2020-04-10 16:03:39

病毒采样转运套装, 病毒 新型冠状病毒 新冠 运送培养基 病毒采样转运套装 供应

  • 世泰 CITOTEST
  • 产品描述

CITOSWAB世泰病毒采样转运套装

专门设计用于含病毒样本的采集、转运和保存,如流感、禽流感和手足口等呼吸道病毒等。2-8℃可短时间保存和转运,长时间保存应于-80℃或以下条件。

· 一次性使用医用采样拭子,由可任意点折断塑料杆和人造纤维头组成。

· VTM(基础款)和VTM-N(灭活款)两种培养基供选择。

· 即用型易撕包装,方便快捷,避免使用过程中可能出现的交叉污染。

· 配套生物安全样本袋,便于放置样本和纸质文档,转运安全可靠。

使用方法:

病毒采样转运套装, 病毒 新型冠状病毒 新冠 运送培养基 病毒采样转运套装 供应

VTM病毒采样转运套装

VTM所选用的运送培养基是在Hanks液基础上,添加了BSA(牛血清白蛋白第五组分)和HEPES等病毒稳定成分,因此可以在较宽温度范围内维持病毒的活性,利于后续样本的核酸提取以及病毒分离培养

· 拭子:Φ(2.2-2.5)x150mm(拭子杆), approx. Φ5mm(拭子头)

· 运输管:Φ16×58 (5ml),Φ16×87 (10ml)

· 运送培养基:1ml/tube,3ml/ tube

· 生物安全标本袋:6“x9”

包装形式:50套/中盒,400套/箱

产品编号

产品描述

82118-0411

82118-0412

82118-0413

10ml样本运输管含3mlVTM运送培养基,1支采样拭子,1个生物标本袋

5ml样本运输管含1mlVTM运送培养基,1支采样拭子,1个生物标本袋

5ml样本运输管含3mlVTM运送培养基,1支采样拭子,1个生物标本袋

 VTM-N病毒采样转运套装

VTM-N所选用的培养基在Tris-HCl缓冲液基础上,添加了EDTA和胍盐作为蛋白质变形剂和核酸酶抑制剂,因此能够使病毒失去活性,但是不影响病毒核酸的完整性,利于后续样本的核酸提取分析,但不适用于分离培养。含胍盐,快速固定病毒RNA,防止降解

· 拭子:Φ(2.2-2.5)x150mm(拭子杆), approx. Φ5mm(拭子头)

· 运输管:Φ16×58 (5ml),Φ16×87 (10ml)

· 运送培养基:1ml/tube,3ml/ tube

· 生物安全标本袋:6“x9”

产品编号

产品描述

82118-0417

82118-0414

82118-0415

10ml样本运输管含3mlVTM-N运送培养基,1支采样拭子,1个生物标本袋

5ml样本运输管含1mlVTM-N运送培养基,1支采样拭子,1个生物标本袋

5ml样本运输管含3mlVTM-N运送培养基,1支采样拭子,1个生物标本袋

病毒采样和转运套装, VTM VTM-N 供应

  • 产品描述

VTM 培养基

VTM培养基是由添加牛血清白蛋白、明胶、抗生素等的改良Hank ‘s-HEPES缓冲液组成。以苯酚红作为pH指示剂来指示和保证培养基的质量。该培养基为等渗的平衡盐缓冲液,能够维持病毒样本的活力,同时防止样本运送至实验室过程中的细菌增殖。

VTM-N培养基

VTM-N培养基是以胍盐为基础的培养基,含有蛋白质变性剂和核酸酶抑制剂,能够裂解细胞,释放并保存核(RNA&DNA);同时能够灭活病毒,确保安全操作。VTM-N可以最大程度地保护RNA和DNA,室温可达48h,但不适用于病毒培养或快速抗原检测。

病毒采样和转运套装, VTM VTM-N 供应

生产备案编号:苏通食药监械生产备20160001号

医疗器械备案号:苏通械备20200035号

订货信息

产品编号 描述 包装

82118-0012

82118-0019

82118-0016

82118-0015

82118-0425

82118-0422

82118-0426

82118-0424

5ml 样本运输管含1ml液体VTM培养基

10ml 样本运输管含3ml液体VTM培养基

5ml 样本运输管含1ml液体 VTM-N培养基

10ml 样本运输管含3ml液体VTM-N培养基

5ml 样本运输管含1ml液体VTM培养基,和一支常规粘胶丝拭子

10ml 样本运输管含3ml液体VTM培养基,和一支常规粘胶丝拭子

5ml 样本运输管含1ml液体 VTM-N培养基,和一支常规粘胶丝拭子

10ml 样本运输管含3ml液体VTM-N培养基,和一支常规粘胶丝拭子

50支/盒,12×50支/箱

50支/盒,12×50支/箱

50支/盒,12×50支/箱

50支/盒,12×50支/箱

50套/盒,8×50套/箱

50套/盒,8×50套/箱

50套/盒,8×50套/箱

50套/盒,8×50套/箱