Invitrogen T7 体外转录试剂盒AM1344

Invitrogen T7 体外转录试剂盒

  • 产品型号:  AM1344
  • 简单描述
  • Invitrogen T7 体外转录试剂盒内容与储存T7 酶混合物、10X 反应缓冲液 2XNTP⁄CAP 溶液、GTP 溶液、pTRI-Xef、TURBO DNase、醋酸铵终止液、氯化锂沉淀溶液和凝胶上样缓冲液 II 均储存在 –20°C 下。可在任何温度下储存无核酸酶水。
详细介绍

Invitrogen T7 体外转录试剂盒

mMESSAGE mMACHINE™ 试剂盒设计用于体外合成大量的加帽 RNA。加帽 RNA 可模拟体内发现的大多数真核 mRNA,因为其在 5' 末端有一个 7-甲基鸟苷帽结构。mMESSAGE mMACHINE™ 试剂盒反应包括超高得率转录反应中的帽类似物 [m7G(5')ppp(5')G]。帽类似物仅作为转录本的第一个或 5' 末端 G 掺入,因为其结构使得无法在 RNA 分子中的其他位点将其掺入。

mMESSAGE mMACHINE™ 试剂盒工作原理
mMESSAGE mMACHINE™ 试剂盒有简化的反应形式,其中所有 4 种核糖核苷酸和帽类似物混合于单一溶液中。该溶液的帽类似物:GTP 比值为 4:1,这适用于尽可能提高 RNA 得率和加帽转录本比例。mMESSAGE mMACHINE™ 试剂盒适用于卵母细胞显微注射用加帽 RNA 常规合成、体外翻译、转染和其他应用。在存在高核苷酸浓度的情况下,通过优化 RNA 合成的反应条件来实现高得率。此外,合成的 RNA 不会被任何可能含有 RNase 抑制剂(酶混合物的组成部分)的污染性核糖核酸酶降解。

使用 mMESSAGE mMACHINE™ 试剂盒
在 20 µL 反应中,在 2 小时孵育期间,mMESSAGE mMACHINE™ 高得率加帽 RNA 转录将生成大量的加帽 RNA。该方法获得的得率为使用常规体外转录反应的 10–50 倍。帽类似物与 GTP 的比值已经过优化,能够在得率 (15–35 µg) 与加帽转录本的比例 (80%) 之间实现良好折衷。mMESSAGE mMACHINE™ 试剂盒还包含一份 LiCl 沉淀溶液,该溶液可高效分离来自加帽 RNA 的蛋白和未掺入的核苷酸(包括游离帽类似物),提高翻译效率。mMESSAGE mMACHINE™ 试剂盒仅针对与试剂盒中包含的聚合酶配合使用进行了优化。使用不同的聚合酶可能会导致得率低。mMESSAGE mMACHINE™ 试剂盒包含 25 次转录反应所需的所有缓冲液和试剂。使用试剂盒提供的对照模板(非洲蟾蜍延伸因子 1α,pTRI Xef),每次 mMESSAGE mMACHINE™ 反应将使用 T3 或 T7 RNA 聚合酶生成约 20–30 µg 的 RNA,或使用 SP6 RNA 聚合酶生成约 15–25 µg RNA。



Invitrogen T7 体外转录试剂盒


规格

最终产品类型
合成 mRNA, mRNA
产品规格
试剂盒
样品类型
mRNA, 合成 mRNA
适用于(应用)
In Vitro Transcription, synthetic mRNA, mRNA, transfection, LNPs, GENEart, linearized DNA plasmid, delivery, PCR products
反应次数
25 次反应
产品线
Ambion™、mMESSAGE mMACHINE™
产品类型
T7 体外转录试剂盒
数量
25 次反应
促进剂
T7
运输条件
干冰
产量
20-30 µg
原始材料
PCR 产物、线性化 DNA 质粒

内容与储存

T7 酶混合物、10X 反应缓冲液 2XNTP⁄CAP 溶液、GTP 溶液、pTRI-Xef、TURBO DNase、醋酸铵终止液、氯化锂沉淀溶液和凝胶上样缓冲液 II 均储存在 –20°C 下。可在任何温度下储存无核酸酶水。