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Amino Acid Uptake Assay Kit
Amino Acid Uptake Assay Kit
- 細胞増殖/細胞毒性測定用試薬
- 細胞機能解析
- 細胞老化
- 細胞内代謝
- 蛍光色素
- 顕微鏡
- FCM
アミノ酸取り込み検出キット
- アミノ酸取り込み能力を簡便に検出できる
- 蛍光顕微鏡、プレートリーダー、フローサイトメーターを用いて検出が可能
-
製品コードUP04 Amino Acid Uptake Assay Kit
| 容 量 | メーカー希望 小売価格 |
富士フイルム 和光純薬 |
|---|---|---|
| 20 tests | ￥17,100 | 346-09891 |
| 100 tests | ￥48,200 | 342-09893 |
<使用回数の目安> 100 testsあたり、35 mm dish 10枚、96-well plate 1枚
使用するマイクロプレートの種類によっては測定できない場合があります。
推奨のマイクロプレートの種類と、 結果への影響については FAQ をご参照ください。
| 20 tests | BPA Solution BPA Dilution Buffer Probe Solution |
35 ×l×1 35 ×l×1 15 ×l×1 |
|---|---|---|
| 100 tests | BPA Solution BPA Dilution Buffer Probe Solution |
175 ×l×1 175 ×l×1 75 ×l×1 |
- ご購入方法
- お問い合わせ
マニュアル
-
取扱説明書 日本語
-
Manual English
技術情報
この製品でできること
アミノ酸の取り込みを阻害する薬剤を抗がん剤としてスクリーニングしたり、正常細胞とがん細胞の取り込み能力を比較することができます。
参考文献
| 文献No. | 対象サンプル | 装置 | 引用（リンク） |
|---|---|---|---|
| 1 | 細胞 SCC7 Cell (マウス扁平上皮癌細胞) |
フローサイトメーター |
T. Watanabe, Y. Sanada, Y. Hattori, and M. Suzuki, "Correlation between the expression of LAT1 in cancer cells and the potential efficacy of boron neutron capture therapy", 2022, J. Radiat. Res., doi:10.1093/jrr/rrac077. |
| 2 | 細胞 CD4+ Cells |
フローサイトメーター |
W. Zhang, X. Cao, X. Zhong, H. Wu, Y. Shi, M. Feng, Y.C. Wang, D. Ann, Y. Gwack, Y.C. Yuan, W. Shang and Z. Sun , "SRC2 controls CD4+ T cell activation via stimulating c-Myc-mediated upregulation of amino acid transporter Slc7a5", 2023, PNAS, doi:10.1073/pnas.2221352120. |
よくある質問
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Q
推奨する蛍光測定用のマイクロプレートを教えてください。
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A
推奨するマイクロプレートは下記の通りです。
社名 製品名 Cat No. ibidi μPlate 96 well ibiTreat black S 15 ib89626 AGC techno glass EZVIEW Glass Bottom Culture Plate LB 96well 5866-096 Thermo Fisher 96 Well Black/Clear Bottom Plate, TC Surface, Pack of 10 165305 ※プレートの種類による結果への影響は、FAQ マイクロプレートの種類は結果に影響しますか？ をご参照ください。
-
Q
マイクロプレートの種類は結果に影響しますか？
-
A
はい。マイクロプレートの種類によっては測定できない場合があります(参考データ参照)。本キットの使用には、下記のプレートを推奨します。
社名 製品名 Cat No. ibidi μPlate 96 well ibiTreat black S 15 ib89626 AGC techno glass EZVIEW Glass Bottom Culture Plate LB 96well 5866-096 Thermo Fisher 96 Well Black/Clear Bottom Plate, TC Surface, Pack of 10 165305 ＜参考：プレート間の比較＞
Ibidi 製のプレートと他社メーカーのプレートを用い、アミノ酸トランスポーター阻害剤である、BCH(2-Aminobicyclo[2.2.1]heptane-2-carboxylic acid)存在下で、 HeLa細胞のアミノ酸取り込み能力を検出しました。この結果、推奨するIbidi製の プレートよりも、他メーカーの プレートはバックグラウンドが高く、BCHによる取り込みの阻害を確認することができませんでした。
蛍光顕微鏡観察
プレートリーダーよる検出
-
Q
BPAはどのトランスポーターを介して取り込まれるのでしょうか？
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A
BPAは、LAT1, LAT2, ATB0,+を介して取り込まれることが報告されています(Wongthai P et al., “Boronophenylalanine, a boron delivery agent for boron neutron capture therapy, is transported by ATB0,+, LAT1 and LAT2”, Cancer Sci., 2015, Mar;106(3):279-86)。また、小社では、LAT1の阻害剤BCHや、LAT1の基質であるleucineなどの競合阻害実験でBPAの取り込みが阻害されることを確認しています。
-
Q
使用実績のある細胞種を教えて下さい。
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A
付着細胞(HeLa, A549, HepG2, MCF-7, C2C12, MEF, U251), 浮遊細胞(MOLT4)
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Q
BPAは細胞内に取り込まれた後、分解・代謝されるのでしょうか？
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A
BPAは安定な構造を有しているため、実験操作内において分解されることはございません。
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Q
BPAを生細胞へ取り込ませた後、細胞を固定することは可能でしょうか？
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A
プローブが細胞内から漏出するため、染色後の細胞を固定することはできません。
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Q
蛍光シグナルの変化が観察されない場合、どうすればいいですか？
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A
2点原因が考えられるため、以下のようにすると改善される可能性があります。
①BPA uptake solutionの取り込み量が少ない可能性があります。その場合は、BPA Solutionの希釈倍率を下げてご検討ください。(5～50倍希釈)
②Working solutionが劣化している可能性があります。再度、Working solutionを調製してください。
-
Q
BPAは細胞内での局在性はありますか？
-
A
取り込まれたBPAは細胞内に均一に存在します。
-
Q
BPA uptake solution, Working solutionは保存可能でしょうか？
-
A
BPA uptake solution, Working solutionは保存できません。
-
Q
バックグラウンドが高い場合、どうすればいいですか？
-
A
細胞に取り込まれなかったBPAがウェル内に残存している可能性があります。
HBSSによる洗浄を繰り返してください。
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Q
BPAの定量はできますか？
-
A
取り込まれたBPAの定量を行う事はできません。本キットは、アミノ酸取り込み能力の増減を確認するためのキットとなります。
取扱条件
| 保存条件: 冷凍 | |
| 危険・有害 シンボルマーク |
 |
|---|---|
関連製品
この製品に関連する研究では、下記の関連製品も使われています。
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グルコース取り込み検出キットGreen
Glucose Uptake Assay Kit-Green
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グルコース測定キット
Glucose Assay Kit-WST
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乳酸測定キット
Lactate Assay Kit-WST
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α-ケトグルタル酸測定キット
α-Ketoglutarate Assay Kit-Fluorometric
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老化細胞検出キット（マイクロプレート用）
Cellular Senescence Plate Assay Kit – SPiDER-βGal