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mtSOX Deep Red – Mitochondrial Superoxide Detection
mtSOX Deep Red – Mitochondrial Superoxide Detection
- 細胞染色用色素
- 細胞機能解析
- ミトコンドリア関連
ミトコンドリア スーパーオキサイド検出用蛍光色素
- ミトコンドリアスーパーオキサイドを長波長励起(Deep Red)で検出可能
- 緑色や赤色の蛍光色素と共染色が可能
- スーパーオキサイドとの選択性が高い
-
製品コードMT14 mtSOX Deep Red – Mitochondrial Superoxide Detection
| 容 量 | メーカー希望 小売価格 |
富士フイルム 和光純薬 |
|---|---|---|
| 100 nmol | ￥21,400 | 348-09851 |
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Manual English
技術情報
既存試薬との比較
活性酸素種に対する反応選択性
mtSOX Deep Redと既存品(T社)の各活性酸素種(ROS)に対する反応性を比較しました。既存品と比べてmtSOX Deep Redはスーパーオキサイド選択性が高いことが確認されました。
また、mtSOX Deep Redは既存品よりも長波長の蛍光を発するため、これまで困難であったミトコンドリア膜電位染色色素(JC-1色素MT09, TMRE, MT-1色素MT13)との共染色が可能です。
参考文献
| 文献No. | 対象サンプル | 装置 | 引用（リンク） |
|---|---|---|---|
| 1) | 細胞 （ラット腎近位尿細管細胞） |
蛍光顕微鏡 | D. Sun, S. Cui, H. Ma, P. Zhu, N. Li, X. Zhang, L. Zhang, L. Xuan, J. Li, "Salvianolate ameliorates renal tubular injury through the Keap1/Nrf2/ARE pathway in mouse kidney ischemia-reperfusion injury", 2022, J. Ethnopharmacol., doi:10.1016/j.jep.2022.115331. |
| 2) | 細胞 TIG-1 Cell (老化研究用) ヒト胎児肺由来線維芽細胞 |
蛍光顕微鏡 | Y. Fujita, M. Iketani, M. Ito, I. Ohsawa, "Temporal changes in mitochondrial function and reactive oxygen species generation during the development of replicative senescence in human fibroblasts", 2022, doi:10.1016/j.exger.2022.111866. |
| 3) | 細胞 （MIN6-M9） |
蛍光顕微鏡 | R. Inoe, T. Tsuno, Y. Togashi, T. Okuyama, A. Sato, K. Nishiyama, M. Kyohara, J. Li, S. Fukushima, T. Kin, D. Miyashita, Y. Shiba, Y. Atobe, H. Kiyonari, K. Bando, A. S. Shapiro, K. Funakoshi, R. N. Kulkarni, Y. Terauchi, and J. Shirakawa, "Uncoupling protein 2 and aldolase B impact insulin release by modulating mitochondrial function and Ca2+ release from the ER", 2022, iScience, doi:10.1016/j.isci.2022.104603. |
| 4) | 細胞 （内皮細胞） |
蛍光顕微鏡 | A. Patel, M. Simkulet, S. Maity, M. Venkatesan, A. Matzavinos, M. Madesh & B. R. Alevriadou, "The mitochondrial Ca2+ uniporter channel synergizes with fluid shear stress to induce mitochondrial Ca2+ oscillations", 2022, Sci. Rep., doi:10.1038/s41598-022-25583-7. |
| 5) | 細胞 （BV2） |
蛍光顕微鏡 | Y. Yan, R. Zheng, Y. Liu, Y. Ruan, Z. Lin, N. Xue, Y. Chen, B. Zhang, J. Pu , "Parkin regulates microglial NLRP3 and represses neurodegeneration in Parkinson's disease", Aging Cell, 2023, doi:10.1111/acel.13834. |
| 6) | 細胞 （B細胞） |
フローサイトメーター | Y. F. Yazicioglu, E. Marin, C. Sandhu, S. Galiani, I. G. A. Rza, Mohammad Ali, B. Kronsteiner, E. B. Compeer, M. Attar, S. J. Dunachie, M. L. Dustin, A. J. Clarke, "Dynamic mitochondrial transcription and translation in B cells control germinal center entry and lymphomagenesis", Nat. Immunol., 2023, doi:10.1038/s41590-023-01484-3. |
よくある質問
-
Q
使用回数の目安を教えてください。
-
A
使用回数の目安は以下をご参考ください。
・96-well plate: 1枚
・ibidi 8-well plate: 6枚
・35 mm dish: 5枚
-
Q
mtSOX Deep Redの検出原理を教えてください。
-
A
mtSOX Deep Redはスーパーオキシド選択的に酸化され発蛍光する色素です。
さらに、本色素は膜電位依存的に細胞内のミトコンドリアに局在するため、ミトコンドリアのスーパーオキシドを特異的に検出することができます。
スーパーオキシド誘導に伴いミトコンドリアの膜電位が消失する場合、反応後の色素は核小体や細胞質に分散します。
-
Q
培地以外でWorking solutionの調製は可能ですか？
-
A
可能です。培地以外でしたらHBSSやPBSをご使用いただけます。
-
Q
検出可能な検出器と適切なフィルターを教えてください。
-
A
共焦点レーザー顕微鏡、落射型蛍光顕微鏡、プレートリーダーで検出可能です。
・共焦点レーザー顕微鏡
Ex/Em: 561/640-700 nm (赤色色素と共染色しない場合)
Ex/Em: 633/640-700 nm (赤色色素と共染色する場合)・落射型蛍光顕微鏡
TxRedフィルター
Ex/Em: 540-580/590-670 nm・プレートリーダー
Ex/Em: 535–565/660–690 nm
-
Q
刺激後の染色は可能ですか？
-
A
ミトコンドリア膜電位が低下しない条件であれば可能です。
本色素は膜電位依存的にミトコンドリアに集積します。そのため刺激により膜電位が低下する場合は、刺激後の染色ではミトコンドリアに集積できず正確なスーパーオキシドの検出ができません。
上記特徴から、小社では刺激前染色を推奨しております。
-
Q
老化細胞を観察するとミトコンドリア以外の蛍光が観察されます。何を気を付ければいいですか？
-
A
以下の2点をご確認ください。
(1)観察条件
染色した細胞と未染色の細胞を準備し、自家蛍光が出来るだけ少ない条件で観察してください。(2)染色濃度
細胞によってmtSOXの至適濃度が異なります。1～10 μmol/lの範囲を目安にご検討ください。(参考)
TIG-1細胞（ヒト胎児肺由来線維芽細胞, 継代数14）を1, 10 μmol/l mtSOXにて染色し観察したところ、1 μmol/lの方がより自家蛍光の影響が少ない状態で観察できました。
＜データ提供＞
地方独立行政法人東京都健康長寿医療センター 藤田 泰典 先生
取扱条件
| 性状： | 白色～淡紫色固体 |
|---|---|
| 確認試験： | 試験適合 |
| 含量： | 試験適合 |
| 保存条件: 冷蔵 |
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