LysoPrime Deep Red – High Specificity and pH Resistance

05 細胞染色用色素

LysoPrime Deep Red – High Specificity and pH Resistance

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リソソーム染色色素 Deep Red

• リソソームへの特異性が高い
• リソソームのpH変化の影響を受けにくい
• リソソームを一晩染色できる

• 製品コード
  L264　 LysoPrime Deep Red – High Specificity and pH Resistance

＜使用回数の目安＞ 1 tube あたり、35 mm dish 10 枚、μ-Slide 8 well 10 枚、96-well Plate 2 枚

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マニュアル

リソソームへの特異性が高い

既存色素とLysoPrime Deep Redのリソソーム局在性をリソソームマーカータンパク LAMP1-GFP発現HeLa細胞を用いて比較しました。 既存色素による染色ではリソソーム以外にも分散してバックグラウンドが高くなったのに対し、LysoPrime Deep Redではバックグラウンドが抑えられる結果が得られました（蛍光画像 Merged）。LysoPrime Deep Redは既存色素と比較してリソソームへの局在性が高いことが判りました。

<検出条件>
Green: Ex= 488 nm, Em= 500-570 nm
Deep Red : Ex= 633 nm, Em= 640-700 nm

Q

血清含有培地で染色できますか？

A

染色できません。LysoPrime Deep Redは血清の影響を受けるため必ずHBSSや無血清培地等の血清を含まない溶液でworking solutionを調製してください。

Q

リソソームpHに影響を与える薬剤刺激を考えています。LysoPrime Deep Redの染色は、薬剤添加の前と後どちらで行えばいいですか。

A

染色後に刺激を行ってください。LysoPrime Deep Redはリソソームに集積後にpHが変化してもリソソームに滞留し続けます。一方で、あらかじめ薬剤刺激等によりpHが中性付近に変化したリソソームにはLysoPrime Deep Redが集積できないため染色できません。そのため、染色能に影響が少ない染色後の薬剤刺激を行って下さい。

Q

リソソーム量とリソソームpHの同時解析を考えています。pHLys Redとの共染色は可能ですか？

A

可能です。ただし、LysoPrime Deep Redの染色はpHLys Red染色前に行ってください。

Q

検出可能な検出器と適切なフィルターを教えてください。

A

共焦点レーザー顕微鏡、落射型蛍光顕微鏡、プレートリーダーで検出可能です。

・共焦点レーザー顕微鏡
Ex = 633 nm, Em = 640-700 nm

・落射型蛍光顕微鏡
Cy5フィルター
Ex = 590 – 650 nm, Em = 660 – 740 nm

・プレートリーダー
Ex = 645 – 655 nm, Em = 690 – 710 nm

・フローサイトメーター
Ex = 640 nm, Em = 650-670 nm

Q

染色条件を検討する場合、LysoPrime Deep Redはどれくらいの濃度で使用すればよいですか？

A

LysoPrime Deep Redの濃度は1,000倍希釈での使用を推奨しておりますが、染色条件を最適化される場合は以下をご参考ください。

　<非特異吸着がみられる場合>

　　2,000～5,000倍希釈の間でご検討ください。

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