PNGase A 货 号 #P0707LNEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – 糖生物学与蛋白质工具 – 糖苷内切酶

PNGase A                              收藏

PNGase A              货   号                  #P0707L PNGase A              货   号                  #P0707L

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识别位点

 PNGase A              货   号                  #P0707L

PNGase A 可以从糖蛋白/糖肽链上水解 N-糖链,无论是否有木糖还是岩藻糖的存在。[x = H 或甘露糖或 N-乙酰葡糖胺]

特性

 从糖蛋白上切除 N-连接糖链

描述

PNGase A 是一种重组酰胺酶,切割糖蛋白和糖肽链上的 N-连接糖,切割的糖型有:高甘露糖、杂合和短复合寡糖,常见于植物和昆虫细胞中的 N-糖部分。
切割位点为:最内侧的 N-乙酰葡糖胺(GlcNAc)和天冬酰胺之间。
PNGase A 与PNGase F 的不同点在于,无论 N-连接糖链的核心结构上是否连接有 α(1,3)-岩藻糖,前者都能切割。

来源

PNGase A 的基因克隆自稻(Oryza sativa,rice)并在毕赤酵母(Pichia Pastoris)中表达。

反应条件

将 1 μg 重组抗生物素蛋白于 1X 糖蛋白变性缓冲液(含 0.5% SDS,40 mM DTT)中 100℃ 煮沸10 分钟使其变性,再加入 NP-40、1X GlycoBuffer 3缓冲液和 2 倍稀释的 PNGase A,37℃ 反应 1 小时。

热失活:65℃ 10 分钟。

随酶提供的试剂

10X 糖蛋白变性缓冲液

10X GlycoBuffer 3 反应缓冲液
10% NP-40

分子量

63,800 daltons。

质量保证

无糖苷外切酶污染,无糖苷内切酶F1、F2 和 F3 活性,无蛋白水解活性。

单位定义

1 单位指 10 μl 的反应体系中,37℃条件下,1 小时从 1 μg 变性的重组抗生素蛋白中(在玉米表达),除去超过 95% 的碳水化合物所需要的酶量。 

浓度

5,000 units/ml。

注意事项

PNGase A 在糖蛋白和糖肽链中都有活性。
PNGase A 不能切割长的 N-连接糖链如:胎球蛋白、纤维蛋白原、IgG、乳铁蛋白和转铁蛋白。
PNGase A 能够切割高甘露糖型的 N-连接糖,甘露糖数量从 3 个到 9 个。

参考文献

有关该产品特性和应用的相关文献请登陆 www.neb-china.com,www.neb.com。