荧光蛋白观察用、油浸物镜适用封片剂

Super Clear Mount封片剂

Super Clear Mount（RI:1.52）是将折射率（RI）调整到与浸油（RI:1.52）以及盖玻片（RI:1.52）折射率完全一致的产品。与传统封片剂相比，Super Clear Mount提高了深层部位的分辨率，可用于更高分辨率的分析。另外，用油镜观察时，即使在深部也可以维持稳定的亮度与分辨率（尤其是z分辨率），也可用于超分辨率的应用。

 

数据来源：国立研究开发法人理化学研究所 柯孟岑老师、今井猛老师（现九州大学医学研究院）

 

◆原理/性能表

图1. Super Clear Mount原理

	Super Clear Mount
封固后的硬化性	非硬化性*、可长期保存（最长1年）
折射率	1.52
适用样品厚度	0~200 μm
防止荧光蛋白褪色	+++**
存储温度	室温

*Super Clear Mount虽为非硬化性，但与空气接触部分会硬化。因此，可以通过滴入过量的Super Clear Mount，用多余部分硬化盖玻片、样本和载玻片。

**与其他市售品比较，+++：最好。

◆特点（深层部位的高分辨率、高明亮度）

图2. 使用Super Clear Mount的深部高分辨率、高明亮度数据

（A）使用共聚焦显微镜（pinhole size，1 AU）与油浸物镜（100 ×：NA 1.40；WD 0.13 mm）进行荧光微球

（A）(diameter, 100 nm)PSF分析。

（B）lateral 以及 axial　FWHM（分辨率）数据

（A）深层部位可维持高分辨率。

（C）使用罗丹明色素的共聚焦axial scans数据

（A）深层部位可维持高分辨率。

◆防止荧光蛋白褪色的效果

在广泛的频谱范围内发挥保持信号与防褪色效果

图3. 使用Super Clear Mount的荧光蛋白防褪色效果数据

（A）荧光蛋白EGFP光褪色曲线图

（A）HEK293细胞中的荧光蛋白表达后，分别使用Super Clear Mount、PBS、其他公司商品（荧光蛋白适用）封

（A）片。

（A）持续使用水银灯照射并检测荧光亮度变化。物镜为20× dry（NA 0.4）。将照射开始时的荧光亮度设为1。

（B）各荧光蛋白荧光亮度的稳定性。

◆使用超分辨率显微镜的应用实例

使用超分辨率显微镜，实现深部超分辨率成像

图4. 使用Super Clear Mount，并用超分辨率显微镜观察

传统的封片剂会使画面失真，但使用Super Clear Mount能在深部获得高分辨率图像。

（A）使用超分辨率显微镜观察细胞膜上的丝状伪足延伸

（A）在HEK293T细胞的细胞膜上表达EGFP后，使用核染料、线粒体染料进行观察

（A）通过超分辨显微镜获取细胞膜上的丝状伪足延伸。

（B）使用超分辨率显微镜观察果蝇大脑

（A）果蝇大脑延髓神经节的神经细胞：使用荧光蛋白（GFP）标记Mi1，使用超分辨率j观察

（A）（深度约为100 μm）。

（A）实现深层部分超分辨率成像。