血管内皮细胞的分化诱导用

粘连蛋白iMatrix-411

 　　利用CHO-S细胞生产的高纯度人层粘连蛋白411-E8片段产品。

●　将人层粘连蛋白411-E8片段基因导入CHO-S细胞生产的高纯度提取物。

●　把使用iMatrix-511培养的    iPS细胞在iMatrix-411中培养，可以促进其向血管内皮细胞的分化诱导。

●　可进行无饲养层培养。

◆应用实例

　　利用层粘连蛋白411-E8片段成功将hiPS细胞高效诱导为血管内皮细胞。

　　京都大学iPS细胞研究所（CiRA）斋藤润准教授组和大阪大学蛋白质研究所关口清俊教授组共同开发了以层粘连蛋白411-E8片段为基础，高效率地从iPS细胞分化诱导功能正常的血管内皮细胞的方法。该成果刊载于英国科学杂志Scientific Reports。

　　Ohta R. et al. “Laminin-guided highly efficient endothelial commitment from human pluripotent stem cells” Scientific Reports 6, Article number: 35680 (2016)

 

层粘连蛋白411-E8片段向血管内皮细胞的分化诱导

◆使用方法

1.　用PBS（-）将iMatrix-411稀释至培养需要的使用浓度。推荐涂层浓度为0.4μg/cm2.

　　※由于细胞种类和细胞株的不同、使用的培养基种类不同，添加的最适剂量会有差异，初次使用时，

　　按照0.4μg/cm2添加到培养容器中，逐渐调整至最佳使用浓度。

　　※※稀释时动作要迅速。使用试管等进行稀释时，推荐使用低蛋白吸附的实验容器。

　　使用案例）以6孔板（9.6cm2/well）为例，每孔加入7.68μL iMatrix-411和1.99mLPBS（-）

　 （1.92μg/mL，2mL/well）。包被完成后，尽快使用。

2.　使用iMatrix-411包被时，可按以下三种条件进行涂层处理：

　　①37℃ 1小时处理、②室温 3小时处理、③4℃ 过夜处理。

3.　涂层处理完成后，去掉iMatrix-411溶液，在孔板未干燥状态下，迅速接种细胞。

　　※避免涂层处理后的培养器材干燥，以免影响培养效果。

◆产品列表

产品编号	生产商编号	产品名称	提纯原料	包装
384-13061	892 041	iMatrix-411 层黏连蛋白411	CHO-S细胞培养 上清	175μg×2
380-13063	892 042			175μg×6

※本产品仅供实验研究用。

 ◆相关产品

产品编号	产品名称	包装
385-07361	iMatrix-511溶液 (0.5mg/mL PBS) 层粘连蛋白511，溶液（0.5mg/mL）	175µg×2（350µL×2)
381-07363		175µg×6（350µL×6)

 

iMatrix-411

Q1. 产品是以什么样的状态销售的？

A1. 产品是以液态销售的。

一支试管里密封装有0.5 mg/mL浓度的175 μg的细胞培养基质（层粘连蛋白411-E8片段）。

 

Q2. 产品的存储条件和有效期是什么？

A2. 产品的储存条件为，冷藏保存在2-15°C。（推荐4°C）

产品的有效期，请参考下表。

产品	保质期
iMatrix-411	生产后两年内

※    具体的有效期详见产品外包装。

 

Q3. 可以冷冻保存吗？

A3. 不可以冷冻保存。

 

Q4. 产品的纯度是多少？

A4. 纯度为95%以上。

 

Q5. hES/hiPS细胞分化培养时使用什么培养基最好？

A5. 太田等的论文（Scientific Reports, 6(35680), 1-12, 2016）中，分化诱导iPS细胞至血管内皮细胞时，使用了以下的培养基。

・Stempro34 SFM (Life Technologies)

高山等的论文（Biochemical and Biophysical Research Communications, 474(1), 91-96, 2016）中，分化诱导iPS细胞至胆管细胞时，使用了以下的培养基。

・ReproStem (REPROCELL)

 

Q6. 培养iPS细胞时，最佳的涂层浓度是多少？

A6. 最佳的涂层浓度根据细胞株的不同也会有所不同。

最初请从浓度0.4 μg/cm²开始尝试，请根据您使用的细胞株在浓度0.1~1.5 μg/ cm²之间考虑。

 

Q7. 请教我使用iMatrix-411分化iPS细胞的步骤。

A7. 太田等的论文（Scientific Reports, 6(35680), 1-12, 2016）中，有分化诱导iPS细胞至血管内皮细胞的案例，请酌情参考。

高山等的论文（Biochemical and Biophysical Research Communications, 474(1), 91-96, 2016）中，有分化诱导iPS细胞至胆管细胞的案例，请酌情参考。

 

Q8. 可以使用小鼠的iPS细胞吗？

A8. 由于没有小鼠iPS细胞的培养数据，所以无法回答。

 

Q9. 这个产品与基质胶有什么不同？

A9. 基质胶含有小鼠EHS肉瘤来源的层粘连蛋白-111。另外还含有层粘连蛋白以外的分子。

iMatrix-411是将在CHO-S细胞中表达的层粘连蛋白411-E8片段高度纯化后的重组蛋白。

已知iPS细胞是通过细胞膜受体（特别是α6β１整联蛋白）粘附于层粘连蛋白-411。

请参考太田等的论文（Scientific Reports, 6(35680), 1-12, 2016）。