ISOGEN II RNA抽提试剂

ISOGEN II RNA抽提试剂
ISOGEN II

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ISOGEN II RNA抽提试剂ISOGEN II RNA抽提试剂

ISOGEN II

从动物组织和培养细胞中高效分离纯化含有小RNA的总RNA

◆原理


      ISOGEN II是从动物组织和培养细胞中总RNA和小RNA的抽提试剂。本品是含有苯酚和胍的均相液体,根据与细胞成分的相互作用,能单一地分离RNA。

      使用旧产品(ISOGEN和ISOGEN-LS)需要添加氯仿,要进行液相分离,而本产品则无需此步骤。在样品中加入ISOGEN II溶解或是均质化之后,再添加水,因为DNA、蛋白质、多糖类等会形成不溶性沉淀,进行离心分离后可以去除。用乙醇沉淀并洗涤、溶解得到上清之后,能分离出高纯度的RNA。

 

 

◆优点特色

● 不需使用氯仿分离RNA
● 比起旧产品(ISOGEN等),小RNA的抽提效率更高
● 可以把大RNA(>200bases)和小RNA(<200bases〉分离(同时提供不分离的方案)
● DNA污染少,抽提的RNA可以直接用于RT-PCR和RT-qPCR上
● 约1 h可完成RNA的抽提

内容和保存条件


<span style="font-family: 微软雅黑, Microsoft YaHei;"><span style="font-family: 微软雅黑, 'Microsoft YaHei'; font-size: 14px;">无标题文档</span></span>

产品名称

构成

ISOGEN II

ISOGEN II

100mL

使用手册

1本

ISOGEN II(with Ethachinmate)

ISOGEN II

10mL

Ethachinmate

0.03mL

使用手册

1本

冷藏保存
请在购买日起6个月内使用
本品可在室温下运输。产品到达后,在2~10℃条件下保存即可正常使用

产品安全数据图表(MSDS)
ISOGEN II MSDS
ISOGEN II(with Ethachinmate) MSDS

使用手册
ISOGEN II 手册(第一版)
ISOGEN II(with Ethachinmate)手册(第一版)

◆案例应用


操作流程


ISOGEN II RNA抽提试剂

使用例子


Data 1 抽提得到的RNA电泳
根据ISOGEN和ISOGEN II的方案抽提RNA,进行电泳


ISOGEN II RNA抽提试剂

 M:RNA Ladder (Code No.311-06261)
Lane1:ISOGEN 抽提总 RNA(2μg)
Lane2:ISOGEN II 抽提总RNA(2μg)
Lane3:ISOGEN II 抽提高分子RNA(2μg)
Lane4:ISOGEN II 抽提小RNA(0.2μg)
1.2%Agarose S(甲醛变性)EtBr染色



ISOGEN II RNA抽提试剂

Lane1:ISOGEN 抽提总RNA(5μg)
Lane2:ISOGEN II 抽提总RNA(5μg)
Lane3:ISOGEN II 抽提高分子RNA(5μg)
Lane4:ISOGEN II 抽提小RNA(0.5μg)
12%聚丙烯酰胺(Urea变性)EtBr染色

ISOGEN II 能抽提和ISOGEN同等的总RNA
ISOGEN II 能对200base以上的高分子RNA和10~200base的小RNA进行分离



ISOGEN II RNA抽提试剂

Data 2 ISOGENISOGEN II抽提的总RNA用“3D-GeneHuman miRNA Oligo chip(东来株式会社)分析。



ISOGEN II RNA抽提试剂

ISOGEN II比ISOGEN能更完整地抽提miRNA

 

Data 3 RT-PCR
用ISOGEN和ISOGEN II从HeLa细胞中提取出RNA并定性,再用PT-PCR检测出β-Actin基因。同时进行没有经过RT反应的对照实验。

ISOGEN II RNA抽提试剂

ISOGEN II RNA抽提试剂

1:模板RNA量 500ng
2:模板RNA量 100ng
3:模板RNA量 20mg
M:Gene Ladder 100

实验证明以ISOGEN II抽提的RNA与以ISOGEN抽提的RNA相比,DNA残留更少。

Data 4 RNA提取量的参考值

分别用 “大RNA的提取”和“总RNA的提取”方案得到的RNA的提取量的参考值如下:

试剂

大RNA的提取

总RNA的提取

组织

肝脏

5~7 g RNA/mg tissue

6~8 μg RNA/mg tissue

肾脏、脾脏

3~4 g RNA/mg tissue

3~4 μg RNA/mg tissue

骨骼肌、脑、肺

0.5~1.5 g RNA/mg tissue

0.5~1.5 μg RNA/mg tissue

胎盘

1~3 g RNA/mg tissue

1~3 μg RNA/mg tissue

培养细胞

上皮细胞

5~8 g RNA/108 cells

5~10 μg RNA/106 cells

成纤维细胞

3~5 g RNA/108 cells

4~6 μg RNA/106 cells

注意事项


● 本品是实验研究用的试剂,不能作为医药品或其他目的使用。另外,如果您对试剂的基本的知识不了解。

      请不要使用。
● 因为 ISOGEN II是医药用外有害物质(苯酚制剂),所以请小心操作。
● 使用时请穿着适当的防护设备(手套、眼镜等)。
● 请不要吸入蒸汽,进行充分的通风。
● 如果接触皮肤或眼睛,请用大量的水冲洗至少15分钟,并前往医院就诊。
● 本品的操作请按照手册记载的内容进行
● 对于和手册记载内容不同的操作带来的事故,日本基因不负任何责任。



◆相关产品

产品编号

产品名称

包装

备注

315-02504

ISOGEN
ISOGEN RNA快速提取试剂

10mL

RNA抽提用试剂

医药用外有害物质

317-02503

50mL

311-02501

100mL

200mL

317-02623

ISOGEN-LS
ISOGEN-LS 液体样本RNA抽提试剂

10mL

311-02621

100mL


产品编号

产品名称

包装

备注

298-68001

Target mRNA Cloning Kit Wako
    目的mRNA克隆试剂盒

10次用

miRNA的目标mRNA克隆试剂盒

291-70201

microRNA Isolation Kit, Human/Mouse Ago1
    microRNA纯化试剂盒,人/鼠Ago1

10次用

Argonaute(Ago)根据免疫沉淀的microRNA特异纯化试剂盒

292-66701

microRNA Isolation Kit, Human Ago2
microRNA纯化试剂盒,人Ago2

10次用

292-67301

microRNA Isolation Kit, Mouse Ago2
microRNA纯化试剂盒,小鼠Ago2

10次用

297-70301

microRNA Isolation Kit, Human Ago3
microRNA纯化试剂盒,人Ago3

10次用

015-22411

Anti Ago1, Monoclonal Antibody (2A7)
Ago1单抗(2A7)

50μL

抗Argonaute(Ago)抗体

014-22023

Anti Mouse Ago2,  Monoclonal   Antibody
抗小鼠Ago2单抗

50μL

018-22021

100μL

011-22033

Anti Human Ago2,  Monoclonal   Antibody
抗人Ago2单抗

50μL

015-22031

100μL

290-66501

microRNA Cloning Kit Wako
microRNA克隆试剂盒

8次用

含热稳定ligase高效小RNA克隆试剂盒

参考文献

 

1. 

Chomczynski, P. Reagents and methods for isolation of purified RNA, US and International Patents Pending.


2. 

Chomczynski, P. and Sacchi, N:Single step method of RNA isolation by acid guanidinium thiocyanate-phenol- chloroformextraction”, Anal. Biochem., 162, 156-159(1987)


3. 

Chomczynski, P.:A reagent for the single-step simultaneous isolation of RNA, DNA and proteins from cell and tissue samples”, Biotechniques, 15, 532-537(1993)


4. 

Wilfinger, W., Mackey, K. and Chomczynski, P.:Effect of pH and ionic strength on thespectrophotometric assessment of nucleic acid purity”, Biotechniques, 22, 474-481(1997)


产品编号 产品名称 产品规格 产品等级 产品价格
311-07361 ISOGEN Ⅱ
总RNA及小RNA提取试剂 
100mL 医药用外有害物质
314-07351 ISOGEN II(with Ethachinmate) 10mL 医药用外有害物质